韩国土壤中苏云金芽孢杆菌菌株的分离和鉴定

从韩国不同地区采集的６２０个土壤样品中分离出６７株苏云金芽孢杆菌,分属于１０种不同的血清型,毒力测定结果表明,在６７株分离株中,３５．８２％的菌株对鳞翅目昆虫具有生物活性,２２．３９％的菌株对双翅目昆虫有毒,３２．８４％的菌株对鳞翅目和双翅目昆虫都具有杀虫活性,８．９５％的菌株为没有杀虫活性的无毒菌株,其中对鳞翅目昆虫有毒的菌株产生典型双金字塔形伴孢晶体对双翅目昆虫有毒的菌株和无毒菌株都产生球形伴     

具有稻瘟病菌拮抗活性的枯草芽孢杆菌的分离与鉴定

采用梯度稀释分离法,从黄河稻区水稻根际土壤中分离出耐高温芽孢菌722株。通过真菌生长抑制试验,获得具有稻瘟病菌拮抗活性的菌株27株。通过形态学观察和生理生化指标鉴定,获得具有稻瘟病菌拮抗活性的枯草芽孢杆菌疑似菌株7株。挑取其中抑菌活性最强的1株进行16SrDNA鉴定,将其16SrDNA基因序列与GenBank中基因序列进行同源性比较,发现与枯草芽孢杆菌16SrDNA有99%同源性,判定此菌为枯草芽孢杆菌,命名为BS501a。     

黄瓜疫病菌拮抗细菌的分离及鉴定

[目的]筛选对黄瓜疫病有较好稳定防治能力的生防菌。[方法]采用系列稀释法和平板涂布法对黄瓜疫病菌拮抗细菌进行初步分离,进一步通过平板对峙法对其进行筛选,并通过形态学、生理生化特征、16S rDNA序列分析方法对拮抗效果较好的细菌进行了鉴定。[结果]共分离到黄瓜疫病病原菌的拮抗细菌56株,有4株细菌对黄瓜疫病病原菌显示出较强的拮抗效果,其中LY-38菌株对黄瓜疫病病原菌拮抗带宽为6.5 mm,抑菌率高达81.2%,通过鉴定可以确定该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。[结论]为黄瓜疫病的田间生物防治提供了参考。     

家畜血红蛋白降解菌分离筛选与鉴定

从多年被废弃畜禽血液浸染的土壤中，分离筛选出16株菌株．根据在酪蛋白／明胶平板上蛋白质水解圈比值大小初步确定8株菌株为被选菌株；并分别在Hb发酵培养液中发酵72h，测定蛋白酶活力、游离氨基酸含量、可溶性蛋白质含量、Hb降解率，最终确定一株菌株（编号为；Lact5．Ⅱ）为最佳菌株；经过菌落形态观察初步确定为细菌，进一步测定生理、生化反应指标，鉴定该菌株为蜡状芽孢杆菌B．cereus.     

拮抗枯草芽胞杆菌的分离鉴定及其发酵优化

为了根治植物病害,提高农业生产率,培养出对植物病原菌具有抵抗作用的防治细菌,从植物根部的土壤中分离出一株对多种病原真菌具有生长抑制作用的枯草芽孢杆菌,在一段时间之后对病原菌菌丝进行细致观察,此菌对层出镰刀菌,串珠镰刀菌,腐皮镰刀菌,尖孢镰刀菌等均具有抑制其活性的作用。经过对16SrRNA序列分析及该菌形态生理特征等各方面的分析,结果表明该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),经过前一过程的提取分析后,继而对其发酵培养基进行了进一步的优化。     

棉花立枯病拮抗细菌的分离鉴定及抑菌活性

为获取对棉花立枯病具有生防作用的细菌,从棉田土壤中筛选出1株高效抑制立枯丝核菌的拮抗细菌W1,通过形态学特征结合16S rDNA序列分析鉴定其分类地位,并采用平板对峙法分析其抑菌活性。结果表明,拮抗细菌W1经鉴定为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）,其对立枯丝核菌具有稳定的抑菌作用,发酵原液的抑菌率为82.12%,稀释5倍的无菌发酵液和菌体破碎液抑菌率分别为42.54%和46.15%。抑菌活性受培养基成分影响,BPA培养基的发酵液抑菌率最高,达98.34%,NA培养基抑菌率仅为17.12%。抑菌活性物质在80℃、中性和偏碱性条件下具有稳定性,对蛋白酶K处理不敏感。显微观察发现,菌株W1的主要拮抗机理是通过产生拮抗物质造成病原菌的菌丝消融、菌丝体断裂、扭曲和畸形。结果表明拮抗细菌W1是具有潜在应用前景的防治棉花立枯病及其他植物真菌病害的菌株资源。     

9株芽孢杆菌的初步分离鉴定与拮抗性试验

通过对采集样品中细菌的分离与纯化,获得9株芽孢杆菌,经纯化培养后观察其个体和群体形态特征,并进行了12项生理生化特征鉴定。结果表明,B10为地衣芽孢杆菌,B13为巨大芽孢杆菌,B12、B14为短小芽孢杆菌,B15为苏芸金芽孢杆菌,B16为蕈状芽孢杆菌,B11,B17,B18为蜡样芽孢杆菌。通过对8株植物病原菌和3株动物病原菌的拮抗试验,初步确定B13,B16,B17,B18的抗菌谱较广,其中B10,B15对棉花枯萎菌,B13,B17对辣椒疫霉菌,B11对西瓜枯萎菌,B10,B17,B18对3株动物病原菌有较好的拮抗能力。     

苏云金芽孢杆菌的分离及快速鉴定

从土壤样品中分离出57株疑似苏云金芽孢杆菌的菌株，采用地高辛标记CryIAb基因5’端的726bp EcoR I片段灰探针，进行菌株质粒DNA斑点杂交，筛选出25株阳性菌株。其生理生化特征与伯杰氏细菌鉴定手册第八版的描述相符，确认为苏云金芽孢杆菌菌株。     

仔猪黄白痢致病性大肠杆菌的分离鉴定

本文报道某猪场注射大肠杆菌多价菌苗母猪所产仔猪均发生仔猪黄白痢病。从患病后未经治疗及死亡仔猪肠内容物中分离鉴定出４株引起仔猪黄白痢极少见的致病性大肠杆菌血清型,其中３株为Ｏ７８血清型,１株为Ｏ１５血清型。所分离出的４株菌在生化反应上存在菌株差异性,对不同药物的敏感性差异不显著,致病力均很强。     

仔猪黄白痢致病性大肠杆菌的分离鉴定

本文报道某猪场注射大肠杆菌多价菌苗母猪所产仔猪均发生仔猪黄白痢病,从患病后未经治疗及死亡仔猪肠内容物中分离鉴定出４株引起仔猪黄白痢极少见的致病性大肠杆菌血清型,其中３株为Ｏ７８血清型,１株为Ｏ１５血清型。所分离出的４株菌在生化反应上存在菌株差异性,对不同药物的敏感性差异不显著,致病力均很强。     

养殖水体氨氮降解菌的分离和初步鉴定

为研究微生物降解和转化水体中的氨氮,进行了养殖水体氨氯降解菌的分离和初步鉴定试验.结果表明,以(NH4)2SO4为唯一氮源的选择性培养基,通过平板稀释分离,从养殖池塘中筛选出对氨氮具有高降解活力的菌株X1.当氨氮初始浓度为50mg/L时,未活化的和活化的X1菌在48h和24h内的氨氮降解率分别为98.4%和97.7%.经形态鉴定以及生理生化试验,初步确定X1菌为巨大芽孢杆菌(Bacil-lus megaterium).     

仔猪黄痢大肠杆菌的分离鉴定

湖北省红安县某猪场新生仔猪发生一种以剧烈腹泻、排出黄色粪便并迅速脱水死亡为主要症状的疾病,经病原分离、革兰氏染色、PCR鉴定、生化试验和血清型鉴定,确定新生仔猪病是由大肠杆菌感染引起。经血清型鉴定,该分离菌株属于纤毛抗原987P型,该菌株对头孢曲松、头孢噻肟较敏感。     

大丽轮枝菌拮抗细菌的分离筛选及Bv1-9菌株鉴定

对植物黄萎病病原菌大丽轮枝菌拮抗细菌进行了分离筛选及Bv1-9拮抗菌株鉴定.结果表明,从土壤中分离到891株细菌,初筛出具有拮抗活性的菌株83株,经过复筛选出一株具有较高拮抗活性的菌株Bv1-9,并对其进行了形态鉴定、生理生化特征鉴定和16S rDNA全序列分析,最终此菌株鉴定为花域芽孢杆菌,16S rDNA序列相似度达99.49%.     

小麦赤霉病菌拮抗菌的分离及鉴定

小麦赤霉病是由禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)引发的真菌性病害,严重威胁我国小麦的安全生产和粮食安全。生物防治是一种绿色高效且相对安全的防治措施,契合农业可持续发展的要求,近年来逐渐受到重视。研究旨在从小麦内生菌中筛选出小麦赤霉病拮抗菌,为植物生防提供理论依据。试验采用平板对峙法从小麦根、茎、叶、穗中筛选对小麦赤霉菌具有高效拮抗作用的内生菌株。共得到7株小麦赤霉菌拮抗菌,其中从小麦叶部分离到的WY-3表现最强的拮抗能力,抑菌圈直径达到26.3 mm。通过生理生化特征以及16S rDNA序列分析,初步鉴定WY-3为暹罗芽孢杆菌(Bacillus siamensis)。WY-3对火龙果炭疽病菌(Colletotrichumgloeosporioides)、棉花立枯病菌(Rhizoctonia solani)、白绢病菌(Sclerotium rolfsii)、梨黑斑病菌(Alternariakikuchiana)也表现较好的拮抗活性。WY-3可被酪素、淀粉以及明胶所水解液化,表明其可降解。WY-3对氯霉素和氨苄西林钠均表现极强的耐药性。研究结果表明WY-3对小麦赤霉菌拮抗效果好且对环境友好,是开展生物防治的理想菌株。     

鸡大肠杆菌病病原的分离鉴定

通过病原菌分离、涂片镜检、生理生化反应、血清型鉴定、动物试验、药敏试验等方法对某一家疑似大肠杆菌污染的鸡场进行了大肠杆菌的分离鉴定,结果表明:呋喃妥因、羟苄青霉素可以迅速抑制某鸡场大肠杆菌;该场菌株对呋喃妥因、卡那霉素、氨苄青霉素敏感性好,而对红霉素、四环素、庆大霉素不敏感产生耐药性,又由于大肠杆菌血清型很多又极易产生变异,各地菌株又不尽相同,相互间的免疫原性有很大差异。因此,防治该病使用该场菌株制备自家菌苗及结合药敏试验确定有疗效的抗生素预防鸡的大肠杆菌病是较为经济有效的方法。     

南京地区肉鸽大肠杆菌分离与鉴定

为了分析南京地区肉鸽场乳鸽死亡的原因,对7份死亡乳鸽病料进行细菌分离培养,获得了7株细菌。对这7株菌株进行了分离培养、染色镜检、生化特性鉴定、血清型鉴定以及药敏试验,结果表明：1）7株细菌均为大肠杆菌;2）7株细菌对14种药物中头孢呋辛、头孢曲松、头孢噻肟、多粘菌素B敏感,对氨苄西林、链霉素、丁胺卡那耐药率分别高达85.7%、71.4%和85.7%。此外,从这7株细菌中随机选取1株细菌进行16SrDNA基因片段测序,发现该细菌407bp核苷片段与GenBank中已知8株大肠杆菌对应核苷酸片段同源性均高达99%以上。     

香蕉枯萎病拮抗菌GKT04产生的脂肽类抗生素的分离和鉴定

[目的]对香蕉枯萎病拮抗菌GKT04发酵上清液中的脂肽类抗生素进行分离,分析其抑菌活性相关成分,为揭示菌株GKT04的抑菌机理及应用该菌株防控香蕉枯萎病提供理论依据.[方法]以解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amy-loliquefaciens)GKT04、香蕉枯萎病菌4号生理小种(Fusarium oxysporum f.sp.cubense race 4,FOC4)和桂蕉1号为试验材料,利用特异性引物对菌株GKT04中ituA、ituB、ituC、ituD、fenA、fenB、sfp、srfA、bmyA、bmyB和bmyC脂肽类抗生素合成相关基因进行检测;利用盐酸沉淀、甲醇抽提等步骤得到菌株GKT04发酵上清液中的脂肽类抗生素,利用高效液相色谱(HPLC)对脂肽类抗生素进行分离,对收集的洗脱峰组分进行体外抑制致病菌FOC4效果试验,对抑菌活性较强的组分进行基质协助激光解吸附离子化—飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析.[结果]菌株GKT04脂肽类抗生素粗提物对香蕉枯萎病致病菌FOC4的抑菌圈直径为24 mm,盆栽防控效果与对照相比病情指数降低了78.31%;PCR扩增显示菌株GKT04含有ituA、ituC、ituD、fenA、fenB、srfA、bmyA和bmyB基因,而ituB、sfp和bmyC未扩增出;菌株GKT04脂肽类抗生素粗提物经HPLC分离后共收集到4个组分P1、P2、P3和P4,其中组分P1和组分P3对致病菌FOC4的抑菌效果较好,抑菌圈直径分别为18和15 mm;经MALDI-TOF-MS质谱分析,组分P1和组分P3分别为脂肽类抗生素fengycins和bacillomycin D.[结论]解淀粉芽孢杆菌GKT04产生fengycins和bacillomycin D两类脂肽类抗生素.     

羔羊大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验

为探究引起羔羊腹泻死亡的病原菌,通过药敏试验选择抗菌药物进行治疗。采集规模化养殖场中引起羔羊腹泻死亡的粪便、肛拭子及内脏等病料组织10份,采用细菌分离培养、形态学观察及生化鉴定试验对大肠杆菌进行分离鉴定,并使用K-B药敏纸片对分离的菌株进行药敏试验。结果表明：共分离得到4株大肠杆菌,分离的4株大肠杆菌均对恩诺沙星、环丙沙星、林可霉素等6种药物敏感,对其他药物产生不同的耐药性。研究结果为羔羊大肠杆菌病防控及临床指导用药提供理论参考。     

一株AA肉仔鸡大肠杆菌的分离和鉴定

从发病AA肉仔鸡体内分离到一株病原细菌，经微生物学鉴定表明为078血清型的鸡大肠杆菌。