克氏原螯虾酚氧化酶部分生化特性的研究

以克氏原螯虾(Procambarus clarkii)酚氧化酶(PO)为材料,采用L-DOPA为反应底物,分光光度计测定不同温度和pH条件下PO活力,研究克氏原螯虾PO的特性,为其免疫学研究及优化PO准确测定方法提供依据。结果显示PO活力最高时的温度为35℃,低于和高于35℃活力逐渐下降,45℃以上活力迅速下降;0℃仍具有最高活力的24%。在pH4.0～9.5内PO均具有活力,鳃组织最佳pH5.5,血清最佳pH6.5。因此测定克氏原螯虾PO活力的最佳参数为温度35℃,pH5.5(鳃)或6.5(血清)。以上结果说明冰浴终止反应法测定克氏原螯虾PO活力会影响结果的准确性,要慎用。     

注射白斑综合征病毒对克氏原螯虾酚氧化酶活力的影响

将白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)、大肠杆菌(Escherichia coli)(DH5α)用注射法接种克氏原螯虾(Procambarus clarkii),在0~72 h之间定时检测克氏原螯虾血细胞和肝胰脏中酚氧化酶(Phenoloxidase,PO)活力变化。结果显示:(1)0.1 mg/m L和1 mg/m L胰蛋白酶处理样品后,样品间差异不显著。(2)加胰蛋白酶处理与未加胰蛋白酶相比,供试克氏原螯虾PO活力均升高。(3)未加胰蛋白酶与加胰蛋白酶表现出相似的特征,WSSV和Ah注射组与对照组相比均表现为,12~48 h PO活力显著高于对照组,并且在48 h达到最大值,72 h时基本恢复正常;注射DH5α组与对照组相比没有显著性变化。可见感染WSSV后,克氏原螯虾体内酚氧化酶活力发生了变化,由此推测,PO参与了螯虾体内抵御病毒的免疫反应。     

温度对克氏原螯虾生理特征的影响

以克氏原螯虾为研究对象,探讨低温对其部分生理指标的影响。通过设定不同温度(4、12和25℃),测定克氏原螯虾在96h内的心率和耗氧率情况,得出温度是影响其心率和耗氧率的一个影响因素,且在4~25℃范围内,心率和耗氧率随着温度的降低而减小,个体死亡率也随之变小。测定了不同体重的雌雄克氏原螯虾的心率,得出克氏原螯虾的性别与心率有关,且克氏原螯虾雌虾的心率明显大于雄虾,而体重和克氏原螯虾的心率无直接关系。     

重金属等若干污染因子对克氏原螯虾的影响

１９９１－１９９３年，对上海地区部分河沟中克氏原螯虾体内总汞、铜、铅、锌、镉等重金属及挥发性酚的残毒量进行检测的结果，各种毒物含量的平均值都低于国家有关卫生标准，但所有这些毒物的检出率均为１００％，其中总汞的含量为０．０１０８－０．１０１４ｍｇ／ｋｇ，超樯率０；铜为１．９８８５－１１．７３９ｍｇ／ｋｇ，超樯率１６．６７５；铅为０．１８０－１．０５２ｍｇ／ｋｇ，超标率８．３３％；锌为２．９８１－９．     

盐度对克氏原螯虾孵化率的影响

研究了不同盐度对克氏原螯虾受精卵孵化的影响.水温25 ℃条件下,盐度0～8时克氏原螯虾的受精卵均可孵出幼体.但以盐度0～4时孵化率较高,每个亲体平均孵出的幼体数量较多,高出此盐度范围时孵化率明显降低,且随着盐度升高,孵化时间延长.试验表明,0～4的盐度为克氏原螯虾孵化的适宜盐度,孵化率较高,孵化时间较短.     

克氏原螯虾胚胎发育的形态学变化

采用实验室内小规模实验的方法，在水温（26±1）℃的条件下，对克氏原螯虾（Procambarus clarke）胚胎发育过程中的形态学变化和发育时间进行了系统地研究。实验结果表明，克氏原螯虾的胚胎发育过程可以分为9个主要阶段：受精卵、卵裂期、囊胚期、原肠期、前无节幼体期、后无节幼体期、复眼色素期、预备孵化期和孵化期；胚胎发育早期卵径无显著变化，保持在2mm水平，仅在预备孵化期卵径开始显著增大；发育过程中胚胎的颜色逐渐加深，表现为橄榄绿色一灰绿色-灰褐色-棕褐色-红褐色-暗红色的变化趋势；水温26℃的条件下，整个胚胎发育过程需15d左右；刚孵化出的幼体在形态结构上与成体相类似。     

克氏原螯虾养殖技术(一)

第一讲克氏原螯虾生物学习性 克氏原螯虾[Procambarus clarkii(Girard)]是一种淡水虾,英文名red swamp crayfish或red swamp crawfish,俗称小龙虾、淡水龙虾等.在动物分类学上隶属甲壳纲,十足目,螯虾科,原螯虾属.原产于墨西哥北部和美国南部,随着人类和其它因素的影响,在美国逐渐扩散到至少15个州,现在在非洲、亚洲、欧洲以及南美洲已是常见动物了.克氏原螯虾1918年移植到日本的本洲,大约在30年代末期由日本引入我国南京附近,开始在南京市及其郊县繁衍;由于其适应性广,繁殖力强,无论江河、湖泊、池塘及水田均能生活,甚至一些鱼类难以存活的水体也能生活,经过长时间的扩展,种群和数量也有很大的增加.     

温度对克氏原螯虾幼虾发育和存活的影响

低温条件下克氏原螯虾幼体生长缓慢,但成活率较高。在一定范围内,高温可明显促进幼体的生长,但在31℃时死亡率很高。对于约1月龄的克氏原螯虾幼体,考虑到其生长速度和成活率2个方面的因素,25℃左右可能比较适合其生长发育。克氏原螯虾幼体不适合30℃以上的高温和5℃以下的低温,因此在我国中部和北方地区,克氏原螯虾幼体的越冬应当采取一定的保温措施。     

盐度对克氏原螯虾幼虾生长的影响

研究了不同盐度对克氏原螯虾幼虾生长的影响.试验于水族箱内进行,试验幼虾的初始体质量(1.82±0.21)g,体长(3.13±0.30)cm.在25 ℃条件下,试验设置0、2、4、6、8、10、12、14计8个盐度梯度,试验结果表明,盐度为0～14时,克氏原螯虾的幼体均能存活与生长.盐度为0～6,成活率较高,生长较快,饵料系数较低,各项指标与对照组差异不显著(P>0.05).当盐度超过此范围时,随着盐度增加,幼虾的成活率下降,生长变慢,饵料系数增大,与对照组差异显著(P<0.05).     

克氏原螯虾掘洞行为研究

克氏原螯虾(Procam barus clarkii)掘洞时间多在夜间,可持续掘洞6~8 h,一夜挖掘深度成虾可达40 cm,幼虾可达25 cm。成虾的洞穴深度大部分在50~80 cm之间,少部分可以达到80~150 cm;幼虾洞穴的深度在10~25 cm之间;体长1.2 cm的稚虾已经具备掘洞的能力,洞穴深度在10~20 cm之间。洞穴分为简单洞穴和复杂洞穴两种:85%的洞穴是简单的,即只有一条穴道,位于水面上、下10 cm之间;15%较复杂,即有2条以上的穴道,位于水面以上20 cm处。洞穴的密度为2.8~5.6个/m2。每个洞穴中一般有1~2只虾,但冬季也常发现一个洞中有3~5只虾。克氏原螯虾在繁殖季节掘洞强度增大,在寒冷的冬季,掘洞强度微弱。     

枯草芽孢杆菌对克氏原螯虾免疫机能的影响

在饲料中分别添加0、1×109、3×109和5×109cfu/kg枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),测定投喂相应饲料后第1、4、7、14、21、28天以及停止投喂枯草芽孢杆菌后的第7、14天克氏原螯虾(Procam barus clarkii)的血淋巴吞噬活性、血清溶菌活力、抗菌活力以及酚氧化酶活力。结果显示:实验组(含枯草芽孢杆菌的饲料组)的吞噬活性于投喂枯草芽孢杆菌后第7天开始显著高于对照组(P<0.05);实验组的溶菌活力、抗菌活力明显高于对照组(P<0.05),并在停药后仍维持较高水平(P<0.05);此外,酚氧化酶活力也有所增加。本研究表明,枯草芽孢杆菌对克氏原螯虾的免疫机能有促进作用。     

细菌糖蛋白对螯虾免疫因子的影响

实验检测了气味黄杆菌的胞外糖蛋白对克氏原螯虾（Ｐｒｏｃａｍｂａｒｕｓ ｃｌａｒｋｉｉ）的几咱非特异性免疫因子－凝集素、酚氧化酶、溶菌、抗菌和超氧化物歧化酶等活力的影响。注射１０ｍｇ糖蛋白后,实验组敖蛳主血清的免疫因子活力均高于对照组,凝集素活力在第１～４天最高;酚氧化酶在第１～５天维持较高活力,最大活力在第２天,溶菌、抗菌活力在第１～６天维持较高水平,分别在第３天、第２天达到最大。与对照组相比,实     

环境因子对克氏原螯虾养殖的影响

克氏原螯虾(Procambarus clarkii),俗称龙虾,味道鲜美、营养丰富,深受广大消费者的欢迎,市场的需求量较大,养殖规模也越来越大.水体是克氏原螯虾生存的环境,其摄食、生长、繁殖以及胚胎发育等受水体中环境因子的影响.笔者就养殖中所涉及到的环境因子对克氏原螯虾的影响,结合资料做简要的分析,为广大养殖户加强水质管理提供参考依据.     

盐度与体重对克氏原螯虾代谢的影响

在水温为20.0±0.5℃条件下,研究了不同盐度(0、3.0、6.0、9.0、12.0)和不同体重(平均体重为7~8 g、19~20 g两种规格)对克氏原螯虾的耗氧率、CO2排出率以及NH3-N排泄率的影响。结果表明,低盐度条件下(0~6.0),两种规格克氏原螯虾的耗氧率、CO2排出率和NH3-N排泄率均随着盐度的升高而显著上升(P<0.05),盐度为6的条件下代谢水平达最高值,此后随着盐度的升高耗氧率、CO2排出率和NH3-N排泄率显著下降(P<0.05);相同盐度下,小规格(平均体重为7~8 g)克氏原螯虾的耗氧率、CO2和NH3-N排泄率显著高于大规格虾(平均体重为19~20 g)。相同规格的克氏原螯虾在不同盐度条件下呼吸商、氧氮比均无显著差异(P>0.05),但是大规格的克氏原螯虾呼吸商和氧氮比显著大于小规格的虾(P<0.05),前者的代谢率极显著低于后者(P<0.01)。     

克氏原螯虾对盐度适应性试验

对克氏原螯虾仔虾采用6个不同的盐度进行了盐度突变试验,2个试验组的初始盐度为2,探讨克氏原螯虾仔虾对盐度适应性。盐度突变试验结果显示,克氏螯虾仔虾对盐度为10以下具有较强的适应性。渐变试验显示,克氏螯虾仔虾的存活率与盐度调整周期有关,3d为1次的调整周期优于2d调整周期。因此,在低盐度水平开展克氏螯虾盐度驯养是可行的。     

蛋白质水平及能量蛋白比对克氏原螯虾生长与蛋白酶活力的影响

用3种不同蛋白质水平及能量蛋白比(E/P)水平饲料投喂克氏原螯虾,分析比较不同饲料对克氏原螯虾生长及蛋白酶活力的影响.试验结果表明,当饲料蛋白质水平为31.86%、E/P为35.85 kJ/g时,克氏原螯虾生长最快.随着饲料蛋白质含的上升, 克氏原螯虾肠蛋白酶活力无显著变化(P＞0.05),肝胰脏、胃蛋白酶活力显著增强(P＜0.05);饲料E/P水平未引起胃、肠、肝胰脏蛋白酶活力的显著变化(P＞0.05),当饲料蛋白质水平为31.47%、E/P为40.42 kJ/g时,克氏原螯虾蛋白酶活力最高.