奶山羊下丘脑中催产素神经元的分布——ABC法研究

分泌催产素的神经元主要分布在室旁核(59.1％)和视上核(17.9％),此外在穹窿周核、腹内侧核、腹外侧核、交叉上核和乳头体外侧核较多(各约占2％～4％),有少量分布在弓状核、室周核、背内侧核、环核、前连合核、下丘脑前核、下丘脑外侧区,乳头体上核、乳头体内侧核(各1％左右)。阳性神经纤维仅见于室旁核、下丘脑前核、视上核、交叉上核等少数核团,在正中隆起和第三脑室室周可见到一定数量的阳性神经纤维。     

奶山羊下丘脑中催产素神经元的分布：——ABC法研究

分泌催产素的神经元主要分布在室核（５９．１％）和视上核（１７．９％），此外在穹窿周核、腹内侧核、腹外侧核、交叉上核和乳头体外侧核较多（各约占２％－４％），有少量分布在弓状核、室周核、背内侧核、环核、前连合核、下丘脑前核、下丘脑外侧区，乳头体上核／乳头体内侧核（各１％左右）。阳性神经纤维仅见于室旁核、下丘脑前核、视上核、交叉上核等少数核团，在正中隆起和第三脑室室周可见到一定数量的阳性神经纤维。     

乏情期奶山羊下丘脑催产素样神经元的分布

为了揭示不同生理期催产素(Oxytocin,OT)在下丘脑-垂体-性腺轴中的分布特点,采用链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶(Streptaridin-peroxidase,SP)法研究了OT免疫反应产物在乏情期奶山羊下丘脑中的分布。结果显示:OT样神经元存在于视上核、室旁核弓状核、室周核、穹隆周核、下丘脑前核、下丘脑后核、腹外侧核、背内侧核、下丘脑外侧区以及乳头体各核团等27个核区,分布区域呈前端尖、中部宽、后钝圆的梭形带。此外,在室旁核观察到大量的强阳性神经纤维,第三脑室附近的纤维伸向脑室内。说明OT在下丘脑广泛存在,且下丘脑OT经神经垂体、第三脑室、血管3条途径释放,经血液循环最终作用于靶细胞而发挥生理作用。     

两种免疫组化方法对催产素在下丘脑分布的测定影响

为探讨免疫组织化学染色中常用的PicTure^TM二步法与链霉素抗生物素-过氧化物酶（streptaridin—peroxidase,sP）法在中枢神经下丘脑中催产索定位的优劣,选取摩拉杂交一代水牛（试验组）与广西本地水牛（沼泽型）（对照组）的下丘脑分别进行染色,结果显示：PicTure^TM二步法试验组的平均直径（P：0．015）和阳性面积（P：0．02）均差异显著,光密度值未见显著差异。SP法光密度、平均直径和阳性面积均未见显著差异。SP法光密度值（O．9139±0．03487）明显高于二步法光密度值（0．2139±0．05642）,可能与DAB染色时间有关。就本试验而言,从背景非特异性染色、阳性面积和平均直径差异性等方面考虑,在神经内分泌神经元定位中,二步法优于SP法。     

妊娠中期奶山羊下丘脑中催产素的免疫组化定位

采用免疫组织化学技术中的链霉素抗生物素-过氧化酶(streptarid in-perox idase,SP)法,对妊娠中期奶山羊下丘脑中催产素(O xytoc in,OT)神经元的定位及分布进行了观察研究。结果表明,下丘脑中分泌OT的神经元主要分布在视上核和室旁核,在环核、视上弥散核、弓状核、室周核、穹窿周核、下丘脑前区、下丘脑外侧区、下丘脑后核和乳头体各核团等也有一定数量的阳性神经元;另外,在室旁核、视上弥散核、视上核、正中隆起和第三脑室附近有较多数量的强阳性神经纤维,在交叉上核有少量阳性神经纤维。提示OT在妊娠中期奶山羊下丘脑中分布广泛,且下丘脑OT经神经垂体,第三脑室,血管三条途径释放,经血液循环最终作用于靶细胞而发挥生理作用。     

神经元在动物下丘脑中分布的研究进展

对近年来研究较多的神经元在动物下丘脑各个神经核中的分布情况作了介绍,指出神经元在下丘脑各个神经核均有分布,甚至有几种神经元同时分布在某些神经核中,视上核(SON)、室旁核(PVN)及弓状核(ARC)是多种神经元集中分布的主要神经核,为进一步研究下丘脑的生理功能提供了形态学资料。     

青年摩拉杂交一代水牛下丘脑催产素的免疫组化定位

为研究青年期摩拉杂交水牛催产素(oxytocin,OT)神经元的表达特点,采用免疫组织化学技术中的Pic-TureTM二步法,对青年期摩杂一代水牛催产素神经元的定位及分布进行了研究。结果表明:下丘脑分泌OT的神经元主要分布在室旁核、视上核和弓状核,在视前内侧核、视交叉上核、下丘脑前核、下丘脑后核、背内侧核、腹内侧核和乳头体核等核团也有一定数量的阳性神经元;阳性神经纤维仅见于室旁核、弓状核、乳头体核,在正中隆起第三脑室室管膜附近有较多数量的阳性神经纤维。观察结果提示:下丘脑OT经神经垂体、第三脑室、血管3条途径释放;不同种属动物下丘脑OT存在差异。     

肉用雏鸡下丘脑内生长抑素mRNA的分布

应用地高辛标记反意生长抑素ｃＲＮＡ探针原位杂交技术，研究５日龄ＡＡ肉鸡生长抑素ｍＲＮＡ阳性神经元胞体在下丘脑内的分布。结果表明：生长抑素ｍＲＮＡ阳性神经元主要分布在下丘脑外侧核吻侧部，后内侧核和后核吻侧部以及乳头体外侧核。生长抑素ｍＲＮＡ阳性神经元胞体为圆形，梭形和椭圆形，直径７－２０μｍ。胞质内均有强度不等的黑色或蓝黑色杂交反应物。生长抑素ｍＲＮＡ神经元胞体在下丘脑各我的分布数目存在明显差异，其     

鸡下丘脑组织表达序列标签的测定与分析

在构建cDNA文库的基础上，测定了83个鸡下丘脑组织表达序列标签。结果表明：50个KST可以在Genbanl（中找到同源序列，其中12个为线粒体基因，12个为功能未知EST，21个为新EST。对50个具有同源序列的EST进行了功能分类。已知EST和未知EST的蛋白阅读框预测及与蛋白质数据库同源性比较结果表明：克隆CHH0014、CHH0022、CHH0028、CHHD21均获得了同源性较高的同源产物，其中克隆CHH0022、CHH0028和CHHD21均有多个物种的不同蛋白与之同源。     

青年奶山羊下丘脑GnRH神经元的分布特点

为了探讨促性腺激素释放激素(gonadotrop in re leas ing horm one,G nRH)在青年奶山羊下丘脑的表达特点,采用灵敏度较高的免疫组化SP法研究了G nRH神经元在6~8月龄青年奶山羊下丘脑中的分布。结果表明,分泌G nRH的神经元主要分布在视上核、下丘脑前核、室旁核和弓状核,其次是视前内侧核、视前外侧核、交叉上核、下丘脑外侧区、视上弥散核、腹内侧核、腹外侧核及乳头体各核团,前连合核、终纹床核、穹窿周核、环核、视前交叉上核和背内侧核分布较少。G nRH阳性神经元的形态有圆形、三角形、卵圆形、梭形、多角形、不规则形,有些阳性神经元还具有明显的突起;圆形和三角形细胞直径为7~27μm,卵圆形和梭形细胞短轴和长轴分别为7~21和10~48μm;G nRH阳性神经纤维仅见于视前内侧核、视前外侧核、弓状核、乳头体后核、乳头体内侧核等核团,在正中隆起和第三脑室室周也可见中等数量的阳性纤维。结果提示,G nRH神经元在青年奶山羊下丘脑分布广泛。     

催产素在广西本地水牛下丘脑-垂体-卵巢轴的免疫组化定位

[目的]研究催产素（OT）在广西本地水牛下丘脑、垂体及卵巢的分布,进而了解OT在下丘脑、垂体及卵巢三者之间分泌释放途径。[方法]采用免疫组织化学SuperPicTureTM二步法检测5头广西本地水牛的下丘脑、垂体和卵巢中催产素（OT）的分布情况。[结果]下丘脑中分泌OT的神经元主要分布在弓状核、视上核及室旁核,在腹内侧核、腹外侧核、交叉上核、背内侧核、乳头体、下丘脑前核等核团也有一定数量的阳性神经元;在腺垂体发现OT免疫反应阳性产物,自垂体柄和正中隆起的一侧可见平行排列的OT阳性神经纤维断续地延伸至神经部;卵巢中只在生殖上皮、卵泡颗粒细胞和黄体细胞发现有大量OT免疫阳性产物。[结论]首次发现OT存在于广西本地水牛下丘脑-垂体-卵巢轴的各个环节,并且下丘脑中各主要核团均有OT免疫阳性神经元的分布,尤其以弓状核、视上核、室旁核分布最多,为进一步研究OT的合成和作用机制提供形态学依据,并对广西本地水牛的繁殖育种及泌乳起到一定的参考指导作用。     

2种神经肽在奶山羊下丘脑中的共存

为了探讨下丘脑中促性腺激素释放激素(GnRH)和催产素(OT)在同一细胞有无共存的现象,实验采用免疫组化链霉素抗生物素-过氧化物酶法对GnRH与OT免疫反应物在妊娠周期奶山羊下丘脑的分布进行双重酶标记研究。结果显示,在室旁核、视上核、视前交叉上核、弓状核、下丘脑外侧区、乳头体内侧核、乳头体后核等18个核团(区)有GnRH-OT双标记免疫反应阳性细胞。阳性细胞的形状有圆形、卵圆形、多角形;有的阳性细胞突起明显。根据细胞中阳性物质的多少和核团中阳性细胞数量,可分为强阳性、中等阳性、弱阳性核团。GnRH与OT在上述核团的某些细胞的共存现象为GnRH与OT在功能上的相互调节提供了形态学依据。     

催产素受体在山羊结状神经节的分布

为研究山羊结状神经节（Nodose ganglion,NG）的神经细胞内是否具备接受催产素（Oxytocin,OT）调节的条件。选取成年山羊结状神经节,采用免疫组化 SP 法检测催产素受体（Oxytocin receptor,OTR）在结状神经节内各种结构上的分布特点,用Image-pro plus 6.0分析结状神经节神经细胞和非神经细胞结构的催产素受体表达差异性。结果表明,结状神经节内OTR免疫阳性产物分布广泛,神经细胞、过路神经纤维、血管内皮细胞、支持细胞和雪旺细胞均有不同程度的着色。神经细胞胞核和支持细胞着色最深,为棕褐色,OTR分布强阳性。大部分神经细胞胞质着色为黄褐色,OTR分布中等阳性,这部分神经细胞胞质约占神经细胞总数的78%。血管内皮细胞、细胞膜,以及一小部分神经细胞胞质着色较浅,为淡黄色,OTR分布弱阳性。神经细胞胞核的核仁呈圆形,着色极浅或不着色,OTR分布阴性。图像分析表明神经细胞胞体的相对表达量与其他非神经结构差异极显著。OTR免疫阳性产物在山羊NG中广泛表达,且主要分布在NG内脏感觉神经细胞内,提示催产素有可能作用于NG内脏感觉神经细胞,从而通过内脏反射弧传入神经纤维影响内脏器官活动,而NG可能成为OT对内脏器官进行内分泌调节和通过自主神经对内脏器官进行神经调节两者相互协调作用的节点。     

冷应激引起鸡下丘脑基因表达谱差异分析

为研究冷应激发生机制以及冷应激过程中下丘脑神经内分泌系统基因表达变化,选取28日龄淮南麻黄鸡为研究对象,采用全基因组表达谱芯片技术分析冷应激24 h后下丘脑组织差异表达基因.通过比较淮南麻黄鸡冷应激24 h前后下丘脑组织基因表达谱,表达倍数＞3倍的基因共877个,其中下调基因334个,主要涉及HAAO、CHRNA9及STAM2等信号转导接头分子基因的低表达;上调基因543个,主要为CCK、NPY及其受体基因、CAMK2A、SST及TRH等基因.对差异表达基因参与的生物学过程分析可见,在冷应激24 h过程中,鸡下丘脑首先启动神经受体-配体相互作用,刺激鸡体产生采食欲望,随后启动脂质代谢途径以供应机体能量需求.在此过程中,Jak-STAT、Ca离子信号通路等一系列生物反应途径发生响应,以调节机体对寒冷应激的反应.差异表达基因的生物学通路分析为阐明鸡冷应激机理提供重要信息,差异表达基因分析有助于抗冷应激分子育种候选基因筛选.     

能量条件对鸭下丘脑5-羟色胺样神经元的影响

 选用来自同一父母代的1日龄健康樱桃谷鸭60羽，饲喂1周后，随机分为2组：高能组和低能组，分别饲喂高能和低能日粮。饲喂4周后，处理动物：灌流固定，取全脑后固定4 h，入8%蔗糖溶液中4℃保存。制作石蜡切片，采用免疫组化链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物法( Streptavidin -biotin-peroxidase complex method，SABC)进行染色，并用图像分析系统作半定量分析。结果显示：高能组室旁核（17.73±1.41个/19.46×103μm2）及腹内侧核（15.80±1.71个/ 19.46×103μm2）有大量的阳性胞体；低能组外侧区（11.25±1.53个/19.46×103μm2）也有大量的阳性胞体，而室旁核没有。上述研究结果表明，下丘脑5-羟色胺样神经元参与摄食和能量代谢的调节。     

用原位杂交法研究猪下丘脑内瘦素长形受体mRNA的分布定位

用体外转录方法合成了瘦素（leptin）长形受体（Ob-Rb)反应和正义RNA探针，用原位杂交法研究了5冰头2－3月龄母猪下丘脑内瘦素长形受体mRNA的分布定位，结果表明，猪瘦素长形受体mRNA分布于下丘脑的的弓状核、腹内侧核，背内侧核，室旁核，室周核和下丘脑外侧区。     

鸡颈皮神经的感觉神经元和交感节后神经元—HRP法研究

此项研究用了体重1.0～2.5kg的成年母鸡18只,以追寻鸡颈皮神经的感觉神经元和交感节后神经元。将C_6～C_(11)皮神经断端浸渍于20％HRP溶液中2～3天以引入酶。取相应的颈交感干神经节和脊神经节及其前后相邻的神经节,制成厚50μm的连续冰冻切片。TMB反应,明视野光镜观察。标记的交感节后神经元胞体出现于与酶引入皮神经相连的交感干神经节。少数出现于相邻的后一个交感神经节。标记的脊神经感觉神经元胞体只出现于与酶引入皮神经相连的脊神经节。     

鸡颈交感干的节前神经元——HRP追踪法研究

用体重1.0～2.5kg的成年母鸡25只,追寻其颈交感干节前纤维的胞体。将颈交感千节间索断端浸泡于30％HRP溶液中以引入酶。存活2～4天后,取颈、胸部脊髓,制成厚50μm的冰冻切片。TMB反应,明视野观察。标记的交感节前神经元胞体出现于颈15至胸3脊髓节段,主要位于Terni氏柱内。