草菇菌丝体mRNA在低温下变化的研究

应用ＲＮＡ分离，纯化及反转录技术，对低温处理草菇菌丝体的ｃＤＮＡ进行分析，发现草菇菌丝在低温协迫的最初２ｈ，内存在基因表达的变化。     

红星苹果花柱S-核酸酶的分离与纯化

采用多种蛋白分离纯化技术，结合生物鉴定方法，成功地从红星苹果（Malus domestica Borkh．）花柱中纯化出了一类与自交不亲和性识别反应相关的花柱蛋白。通过聚丙烯酰胺凝胶和等电聚焦电泳分析，确定该蛋白分子量为26和28kD，等电点为10．2和10．4，为碱性蛋白；核糖核酸酶活性染色和N-末端序列分析结果显示具有核酸酶活性，且与其它蔷薇科植物花柱S-核酸酶N-末端氨基酸序列同源性较高。     

烟草中功能未知的病程相关蛋白具有钙离子结合活性：II电泳和…

利用双向电泳、ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳分子量测定、钙结合蛋白染色等钙结合蛋白的检测技术揭示，烟草中功能未知的病程相关蛋白（ＰＲｓ）具有钙离子结合活性，其电泳迁移率、分子量测定等特性受到钙离子的显著影响；含量最高的未知功能蛋白ＰＲｂ１，ＰＲｂ２在低钙和高钙条件下均表现钙结合活性，而ＰＲｂ７和ＰＲｂ８（两和几丁质酶）仅在低钙状态下表现一定的钙结合能力；并发现在抗病毒诱导率（８８－Ｄ）作用下，细胞间隙     

猪笼草消化液中蛋白酶的活性初探

为了进。步分析猪笼草瓶状体内消化液中蛋白质的性质，本研究在不同的温度和pH条件下测定消化液中蛋白酶的活性，并且比较了3种不同沉淀方法对消化液蛋白进行的浓缩，通过SDS-聚丙烯酰胺电泳对消化液蛋白作了初步分离。结果表明，猪笼草消化液中蛋白酶的最适酶活温度为50℃，且稳定性最高；当pH为5时，该蛋白酶活性出现峰值，采用氯仿-正丁醇法（5：1）沉淀浓缩猪笼草消化液蛋白样品效果最佳。聚丙烯酰胺电泳结果表明，消化液至少包括三种蛋白组分，分子量分别为24.3kD、35．1kD和61．4kD，且35．1kD条带具有抗胰蛋白酶消化活性。本研究为综合开发利用猪笼草野生资源提供理论依据。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳的一种辅助辨型方法

聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）是实验室常用的基本鉴定方法之一。但由于做胶方式以及各实验室仪器设备良莠不齐，经过一系列纷繁复杂的操作，电泳结果未必尽如人意。其中凝胶带型的判断就是一个较为困惑的问题，一般的聚丙烯酰胺胶跑出的条带总体上都有弧度，越是靠近凝胶两侧越是严重。在本实验中，我们设计了一种较为简单易行的方案，即将难以区分的条带样品做成混合样marker来辅助辨型，通过调整电压和凝胶浓度来达到区分条带的目的。我们用该方案可以将相差0～3bp大小的条带区分开来。     

16份石榴RAPD扩增产物的两种电泳方法检测及其序列特征

本实验以16个石榴品种为实验材料,筛选出10个重复性及多态性均较好的引物进行RAPD分析。分别采用琼脂糖凝胶以及聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳检测方法对PCR扩增结果进行检测并对其结果进行比较,结果显示,两种电泳方式均能得到较为清晰的扩增条带,且两种电泳方式获得的条带总数及多态性条带数均有所不同,琼脂糖凝胶电泳方法共检测出76条带,其中有43条为多态性谱带,多态性比率为56.4%;而在PAGE电泳方法共检测出123条谱带,多态性谱带数为87条,多态性比率为70.95%。PAGE电泳方法检测出的条带数约为琼脂糖凝胶电泳方法检测出条带数的1.5倍。基于两种电泳方法所得RAPD标记的多态性位点,利用NYSYS软件计算遗传相似系数,并构建遗传关系聚类图,分析结果显示,石榴遗传多样性丰富,两种电泳方法所得聚类结果大致相同,可以利用RAPD分子标记及两种电泳检测方法对不同数量的石榴进行分子水平的品种鉴定和遗传多样性的分析。同时通过对来自几个引物随机挑选的17个片段进行克隆,测序结果显示17个片段都是对应引物的RAPD扩增产物,其中有3条是编码蛋白的基因片段,表明了RAPD不仅扩增基因组上的非编码蛋白序列,同时也可以扩增编...     

用含有凝胶的基质进行等电点聚焦电泳分离和检测蛋白酶

介绍用等电点聚焦电泳分离并检测蛋白酶的一种精确方法。向含有明胶铁聚丙烯酰胺凝胶中加入０．３％辛基－Ｄ－吡喃葡糖苷或８Ｍ尿素，同时向样品溶液中加入细胞色素Ｃ和ＰＩ标记蛋白，这样可避免电泳过程中蛋白酶与基质的互作。在木瓜蛋白酶，胰凝乳蛋白酶和蛋白酶Ｋ等常用蛋白酶的估计等电点进行检测，检测极限可达微微克至毫微克。     

小麦易位系麦醇溶蛋白的电泳分析

本文利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术分析了3个小麦易位系及其亲本的麦醇溶蛋白组分,进一步明确了它们的亲缘关系和遗传组成。     

尼罗罗非鱼、莫桑比克罗非鱼和福寿鱼中某些组织乳酸脱氢酶及其同工酶的研究

本文用紫外分光光度法、薄层聚丙烯酰胺等电聚焦法及薄层浓度梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定尼罗罗非鱼、莫桑比克罗非鱼、福寿鱼的心、肌、肝三种组织中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase简称LDH)的总活力及其同工酶的等电点和分子量。结果表明:三种鱼的三种组织乳酸脱氢酶总活力顺序为心>肌>肝;在同一组织中其活力顺序为福寿鱼>尼罗罗非鱼>莫桑比克罗非鱼。其同工酶等电点(PI)为:心PI5.85～7.5,肌PI5.95～8.2,肝P15.6～8.55。三种组织酶谱带分子量在232000～680000之间。此法可为鱼类选育种、分类和定种提供生化参数。     

人工合成抗菌肽D2A21基因的克隆和表达

为了获得高效表达的抗菌肽D2A21,本研究根据抗菌肽D2A21的氨基酸序列及大肠杆菌偏爱的密码子,设计并人工合成D2A21基因,并将该合成基因克隆至pProEXHTb载体中,构建成含有含6个组氨酸标签的重组质粒。重组质粒转化至大肠杆菌中,经摇瓶发酵,IPTG诱导后,发酵液用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。结果表明,成功合成D2A21基因,并构建了抗菌肽D2A21表达载体。通过镍柱亲和层析纯化,聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,抗菌肽D2A21能够在大肠杆菌中稳定表达。本研究将为大规模表达纯化D2A21及其进一步的研究和利用提供一定基础。