美洲大蠊Na~ -K~ -ATPase作为筛选靶标的初步研究

以美洲大蠊 (Periplanata americana)雄性成虫的中枢神经系统为试材 ,对 Na -K - ATPase作为农药筛选靶标进行了初步研究 ,表明 Na - K - ATPase活力测定的最适反应条件是 :酶源蛋白浓度 8.5μg/ m L,温度 30℃ ,p H7.4 ,反应时间 15min。同时以最佳反应系统初步研究了几种拟除虫菊酯 (南开菊酯、氯氰菊酯、溴灭菊酯、氰戊菊酯、二氯苯醚菊酯、胺菊酯 )对 Na - K - ATPase离体活性的影响 ,结果显示出不同程度的抑制作用。并对其用作农药筛选靶标的可能性进行了探讨。     

辣椒碱对小菜蛾体内谷胱甘肽S-转移酶和Na+ -K+ -ATP酶活性的影响

采用常规生化方法测定了辣椒碱对小菜蛾体内谷胱甘肽S-转移酶和Na+ -K+ -ATP酶活性的影响。结果表明,经不同浓度辣椒碱处理12 h后,小菜蛾体内谷胱甘肽S-转移酶活力均显著低于空白对照,在100.56~141.53 μmol ·L-1 ·mg-1Pro ·min-1 之间;而Na+ -K+ -ATP酶活力均显著高于空白对照,在12.43~20.36 μmol ·mg-1Pro ·min-1之间。说明辣椒碱能抑制小菜蛾体内谷胱甘肽S-转移酶的活性,而对Na+ -K+ -ATP酶活性则表现为促进作用。     

典型光活化毒素α-三噻吩对棉铃虫和亚洲玉米螟Na+-K+-ATPase的抑制作用

以棉铃虫Helicoverpa armigera和亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis为试虫,建立Na+-K+-ATPase最佳反应系统,研究典型光活化毒素α-三噻吩(简称α-T)对Na+-K+-ATPase的影响。棉铃虫Na+-K+-ATPase 活力最佳测试条件为酶源蛋白浓度6 μg/mL,反应温度35~40℃,反应时间6 min;亚洲玉米螟则为酶源蛋白浓度8 μg/mL,反应温度35℃,反应时间6 min。近紫外光照(300~400 nm)对棉铃虫和亚洲玉米螟离体Na+-K+-ATPase活力基本没有影响,但对活体活力有很强的抑制作用。光照和无光照条件下,α-T对两种昆虫离体和活体Na+-K+-ATPase活力均有不同程度的抑制作用。光照组α-T对亚洲玉米螟Na+-K+-ATPase的抑制率高于无光照组,且处理浓度或剂量越高,其抑制率越大;对棉铃虫Na+-K+-ATPase抑制作用不显著。     

双氧木脂素E对东方粘虫幼虫体壁肌超微结构及Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase的影响

双氧木脂素E（haedoxane E）是从杀虫植物透骨草Phryma leptostachya L.中分离出的一种对多种农林害虫和卫生害虫具有杀虫活性的化合物。本研究以东方粘虫Mythimna separata为供试昆虫,对双氧木脂素E对其幼虫杀虫作用部位进行了初步研究。电镜观察表明,双氧木脂素E对东方粘虫幼虫体壁肌具有致毒作用,能使肌细胞发生明显病变,细胞核皱缩变形,染色质浓缩,线粒体肿胀、大面积空泡化,肌质网扩张,肌原纤维排列紊乱,胞质内出现大量多泡体。酶活力测定结果也显示,双氧木脂素E能不同程度抑制Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase活力。因此推测双氧木脂素E是一种作用于东方粘虫肌肉组织的肌肉毒剂。     

昆明山海棠杀虫活性成分雷公藤定碱和雷公藤次碱的触杀作用及对Na+ -K+ -ATP酶活性的影响

为进一步探讨杀虫植物昆明山海棠根皮中分离出的雷公藤定碱和雷公藤次碱的杀虫作用机理,采用微量点滴法处理3龄粘虫前胸背板,观察发现试虫均在2 h左右表现出中毒麻醉,8 h后完全恢复,24 h后重新表现为中毒麻醉,48 h后部分死亡。进一步的触杀毒力测定结果表明,雷公藤定碱和雷公藤次碱对3龄粘虫幼虫的24 h麻醉中量分别为8.82 μg/头和 4.58 μg/头,对3龄小菜蛾幼虫的麻醉中量分别为4.71 μg/头和3.46 μg/头。离体和活体条件下测定了雷公藤定碱和雷公藤次碱对5龄粘虫幼虫头部Na+-K+-ATP酶活性的影响,结果表明,两种药剂对粘虫幼虫神经系统Na+-K+-ATP酶活性均有一定的抑制作用,且该抑制作用具有一定的浓度依赖性,推测Na+-K+-ATP酶可能是雷公藤定碱和雷公藤次碱的一个重要作用靶标。     

典型光活化毒素α-三噻吩对棉铃虫和亚洲玉米螟Na~+-K~+-ATPase的抑制作用

以棉铃虫 H elicoverpa armigera和亚洲玉米螟 Ostrinia furnacalis为试虫 ,建立 Na+- K+-ATPase最佳反应系统 ,研究典型光活化毒素 α-三噻吩 (简称 α- T)对 Na+- K+- ATPase的影响。棉铃虫 Na+- K+- ATPase活力最佳测试条件为酶源蛋白浓度 6μg/ m L ,反应温度 35～ 4 0℃ ,反应时间6min;亚洲玉米螟则为酶源蛋白浓度 8μg/ m L,反应温度 35℃ ,反应时间 6min。近紫外光照 (30 0～4 0 0 nm )对棉铃虫和亚洲玉米螟离体 Na+- K+- ATPase活力基本没有影响 ,但对活体活力有很强的抑制作用。光照和无光照条件下 ,α- T对两种昆虫离体和活体 Na+- K+- ATPase活力均有不同程度的抑制作用。光照组 α- T对亚洲玉米螟 Na+- K+- ATPase的抑制率高于无光照组 ,且处理浓度或剂量越高 ,其抑制率越大 ;对棉铃虫 Na+- K+- ATPase抑制作用不显著     

美洲大蠊和东亚飞蝗的耐缺氧力及其比较

研究并比较了美洲大蠊和东亚飞蝗在接近真空和充满CO2的环境下的耐缺氧力。结果表明：美洲大蠊和东亚飞蝗在0.06pa的真空泵中都能存活,在2～10min后其生理活动会不断减弱,直到假死或静止不动,但不会死亡,90～120min后两者的生理活动逐渐恢复,但都比正常状态下弱,生理活动都呈现反抛物线的规律,且在同一时间东亚飞蝗比美洲大蠊的生理活动要弱;美洲大蠊在充满CO2的密闭瓶中存活的时间比东亚飞蝗要长,将不同程度缺氧处理后的试虫置于空气中后,美洲大蠊恢复正常生理活动的能力和恢复后的活动强度明显比东亚飞蝗强。说明美洲大蠊和东亚飞蝗都有较强的耐缺氧力,但美洲大蠊的耐缺氧力更强。     

松油烯-4-醇对淡色库蚊的熏蒸毒力及对其Na+ ,K+ -ATP酶的抑制作用

为进一步探讨杀虫植物砂地柏Sabina vulgaris Ant.精油中主要杀虫活性成分—松油烯-4-醇(terpinen-4-ol)对卫生害虫的生物活性,测定了该物质对淡色库蚊Culex pipiens Pallens及其Na+,K+-ATP酶活性的影响。结果表明:松油烯-4-醇对淡色库蚊具有较强的熏蒸作用,其LC50值为6.79 mg/L, 在LC80剂量下其击倒中时(KT50)为6.92 min;淡色库蚊Na+,K+-ATP酶活性测定的最佳反应条件为pH值7.42、温度35.5℃、底物浓度0.7 mmol/L;离体和活体情况下,松油烯-4-醇均可显著抑制淡色库蚊Na+,K+-ATP酶的活性,其I50值为32.02 μg/mL。Na+,K+-ATP酶可能是松油烯-4-醇对淡色库蚊的杀虫作用靶标。     

Na+对两株土壤微生物溶硅溶磷的影响

考察了Na+对Rs-2和Rs-4两株土壤微生物溶硅溶磷的影响.结果表明:Na+可促进Rs-2、Rs-4菌株溶硅能力的增加.在1.5％ NaCl条件下,Rs-4菌的最大溶硅量为106.92μg/mL;在3％NaCl条件下,Rs-2菌株的最大溶硅量为148.9 μg/mL.而且Na+能够促进Rs-4菌株溶磷能力的增加,在3％NaCl条件下,Rs-4菌株的最大溶磷量为115.68 μg/mL,但Na+降低了Rs-2菌株的溶磷能力.Rs-2菌株溶硅量随时间的变化符合Logistic曲线类型,回归分析表明溶硅量与时间呈正相关且回归关系显著.Rs-4菌株溶磷量随时间的变化符合二项式类型,回归关系极显著且模型有很高的可信度.     

毕赤酵母Mut+和Muts重组子表达美洲商陆抗病毒蛋白基因的比较

 将N末端信号肽和C末端毒性区域缺失突变的美洲商陆抗病毒蛋白(pokeweed antiviral protein,PAP)基因表达载体pPIC9KP酶切线性化后,通过电击转化整合到巴氏毕赤酵母(Pichia pastoris) GS115菌株细胞中,PCR筛选出表型为利用甲醇快速型(Mut⁺)的重组子。在相同培养条件下比较Mut⁺重组子和利用甲醇缓慢型(Mut^s)重组子在表达缺失突变型PAP方面的异同。结果表明,诱导培养48 h后,Mut⁺重组子表达产物在SDS-PAGE胶上可见清晰目的带,而Mut^s重组子培养72 h才能见到微弱的目的带。抗病毒活性实验表明Mut⁺重组子和Mut^s重组子的表达产物均对TMV病毒侵染有明显的抑制作用,它们的抗病毒活性没有显著的差异。     

杂交甜高粱的钠离子累积特性研究

以甜高粱'BJ0603'(杂交品种)和'623B'(常规对照)为供试作物,在盆栽和田间条件下分别设置轻度(0.9 g·kg-1NaCl)、中度(2.9 g·kg-1NaCl)和重度盐胁迫(4.9 g·kg-1和6.9 g·kg-1 NaCl)处理,分析甜高粱的Na+累积特性.结果表明,随盐胁迫水平由0.9 g·kg-1...     

施氮量对盐角草生长及钠离子累积的影响

为了研究施氮对盐角草生长及其钠离子累积的影响,本研究通过5个氮肥水平大田小区试验分析了不同施氮量对盐角草生长和钠离子累积的影响.结果表明:施氮能够显著增加盐角草茎秆、籽粒和同化枝的产量;在0 ～ 600 kg/hm2范围内,盐角草的生物量及籽粒产量随着施氮量增加而呈现直线增长的趋势.施氮对盐角草茎秆、籽粒和同化枝中的Na+含量无显著影响,但盐角草同化枝中的Na+含量显著高于茎秆和籽粒.施氮能够促进盐角草各部分对Na+的累积,600 kg/hm2的施氮量条件下,盐角草的Na+累积量平均达到了9668 kg/hm2,较不施氮的2045 kg/hm2增加了370％.因此,本研究表明,施氮能够促进盐角草对盐渍土的改良效果.     

Ca2+对Cd2+胁迫下板蓝根种子萌发及幼苗抗氧化酶活性的影响

研究了Cd²⁺（10 mg·L^-1、30 mg·L^-1）胁迫下不同浓度Ca²⁺（0、80、160、320 mg·L^-1）对板蓝根种子萌发、幼苗抗氧化酶系统及蛋白质含量的影响。结果表明：低浓度Ca²⁺（80、160 mg·L^-1）可缓解Cd²⁺毒害,显著提高板蓝根种子的发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数,促进蛋白质含量的增加,提高SOD、POD、CAT活性,且160　mg·L^-1 Ca²⁺缓解效果最好,缓解能力随Cd²⁺浓度的升高有所下降;高浓度Ca²⁺（320 mg·L^-1）与Cd²⁺作用,反而抑制了板蓝根种子的萌发,幼苗的POD、SOD、CAT活性及蛋白质含量下降。低浓度Ca²⁺可以显著提高板蓝根的抗性,对Cd²⁺毒害起缓解作用,高浓度的Ca²⁺与Cd²⁺对板蓝根种子起协同毒害作用。     

Inhibition of Na-K-ATPase in different tissues of freshwater fish Channa punctatus (Bloch) exposed to monocrotophos

Freshwater fish, Channa punctatus, commonly known as the snakehead fish, was exposed to two sublethal concentrations (0.96 and 1.86 mg/L) (selected on the basis of 1/20 and 1/10 of 96 h LC₅₀ value) of monocrotophos for two exposure periods (15 and 60 days). Effects of monocrotophos on Na⁺, K⁺-ATPase in liver, kidney, muscle, intestine, brain, heart and gills were determined. Results indicate that Na⁺, K⁺-ATPase activity in tissues decreased as concentration of monocrotophos and exposure period increased. Monocrotophos induced significant inhibitory effects on the Na⁺, K⁺-ATPase activity of C. punctatus, ranging from gills (70%) > Kidney (63%) > brain (57%) > intestine (52%) > liver (50%) > muscle (47%) > heart (44%) inhibition at a sublethal concentration of 0.96 mg/L. Significant inhibition was detected in Na⁺, K⁺-ATPase activity, ranging from gills (90%) > heart (78%) > kidney (78%) > muscle (74%) > intestine (71%) > brain (67%) > liver (63%) at sublethal concentration of 1.86 mg/L. After subacute exposure (15 days) only gills and brain showed significant inhibition after higher concentration (1.86 mg/L). However, it is evident that exposure duration is more important than dose in the inhibition of the activity of enzyme. At lower concentration initial stimulation of the activity of Na⁺, K⁺-ATPase activity was also noticed. It is suggested that the inhibition of the ATPase by monocrotophos blocked the active transport system of the gill epithelial as well as chloride cells, glomerular and epithelial cells of the tubules and thus altered the osmoregulatory mechanism of the fish. In fact, the impairment of the activity of enzymes which carry out key physiological roles could cause alterations of the physiology of the whole organism.