嗜群血蜱和长角血蜱ITS-2、COI和COⅡ基因序列变异与亲缘关系分析

本研究旨在阐明长角血蜱与嗜群血蜱间的亲缘关系.采用聚合酶链式反应(PCR)技术从长角血蜱和嗜群血蜱基因组DNA中扩增得到核糖体第二内部转录间隔区基因(ITS-2)片段、线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ基因(COI)片段和线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅱ基因(COⅡ)片段,并进行测序,进而分析其基因变异与系统发育.结果表明,长角血蜱和嗜群血蜱的ITS-2、COⅠ和COⅡ基因片段的大小存在差异,长角血蜱3种基因分别为361、479和647 bp,嗜群血蜱基因分别为354、474和661 bp.长角血蜱与嗜群血蜱间ITS-2、COⅠ和COⅡ基因的相似性分别为84.2%、89.0%和88.4%.以3种基因构建的NJ进化树中,长角血蜱和嗜群血蜱均聚类.因此,认为长角血蜱和嗜群血蜱间ITS-2、COⅠ和COⅡ基因间变异较小,它们是血蜱属中亲缘关系较近的2个有效种,支持传统形态学的分类地位.     

家兔抗长角血蜱免疫模型的建立及对长角血蜱成蜱生长发育的影响

每隔2周用长角血蜱成蜱定量感染家兔,成功构建了具有不同抵抗力的家兔免疫模型。ELISA检测结果表明,家兔血清中的抗体效价从初次叮咬后第3周开始呈阳性,随着叮咬次数的增加抗体水平逐渐上升,第11周时达到高峰。具有一定抵抗力的家兔对长角血蜱成蜱的吸血和生长发育影响显著,其抗体水平与长角血蜱成蜱在兔体的吸血周期、死亡率成正相关,与雌蜱的饱血脱落率、饱血体重成负相关。结果进一步证明,蜱的唾液腺是其主要的免疫器官之一。家兔抗体水平的持续期足以使长角血蜱完成一个世代,可以满足试验需求,是抗蜱免疫研究理想的阳性对照模型。同时,血清中特异性抗体的效价也可以作为判断动物对长角血蜱抵抗力强弱的重要指标之一。     

长角血蜱不同龄期虫体抗原分析

用琼脂双向扩散法、酶联免疫吸附技术和蛋白质免疫印迹技术，用长角血蜱三个龄期的虫体蛋白检测其幼虫、若虫和成虫未吸血全蜱匀浆液分别免疫兔后的血清效价。结果表明不同生活阶段的虫体之间存在免疫交叉反应。实验结果表明不仅长角血蜱三个龄期虫体之间存在共同抗原，而且与微小牛蜱幼虫和越南血蜱幼虫之间也存在共同抗原。     

长角血蜱的免疫研究进展

以长角血蜱疫苗候选抗原为例，从长角血蜱蛋白水解酶、蜱生殖和发育相关分子及RNA干扰技术、IgG结合蛋白技术几方面概述了近年来国内外有关蜱疫苗的研究现状，并展望了蜱疫苗的发展趋势。     

湖南省需步县南山牧场长角血蜱的发育史观察

经观察，长角血蜱雌虫１月份和８月份在兔体饱血时间为６－９ｄ，８月份和９月份在牛体饱血期为４－７ｄ，饱血雌虫产卵前期为７－１０ｄ，产卵期为１７－２７ｄ，产卵数３１２－１２６８粒，卵孵化期为１６－２１ｄ。幼虫８月份在兔体饱血期为５－７ｄ，９月份为３－４ｄ，８月份在牛体饱血期为３－５ｄ，９月份为２－２．５ｄ。饱血幼虫蜕化期８月份为１６－１９ｄ，９月份为１０－１７ｄ。