海藻糖对猪精液冷冻保存效果的影响

在传统的Tris-柠檬酸-葡萄糖稀释液基础上，分别添加25％、50％、75％、100％的海藻糖，研究不同浓度海藻糖对猪精液冷冻后精子质量的影响。结果表明，海藻糖相对于对照TCG稀释液能够显著改善和提高猪精液的冷冻效果，其最佳添加浓度为25％，冷冻-解冻后猪精子活力、活率、线粒体活性、质膜完整性以及顶体完整率均显著提高（P〈0．05），分别达到41．38％、46．34％、44．56％、43．51％和64．09％。海藻糖可以明显抑制精子获能，获能处理前精子获能率仅为3．68％，而获能处理后达到41．82％，有利于促进精子获能。精液稀释液中甘油的适宜添加浓度为2％，海藻糖只有与甘油共同作用，才能在冷冻-解冻过程更加有效地保护精子。猪精子活力、活率、线粒体活性、质膜完整率、顶体完整率等之间存在极显著的正相关关系（P〈0．01），而与获能处理前精子的获能率存在显著的负相关关系（P〈0．05）。     

海藻糖对牛精液冷冻保存效果的影响

<正>牛精液冷冻保存技术在国内外作为一项成熟的技术推动了牛人工授精技术的广泛应用,特别是近年来我国畜牧业的快速发展和国家良种补贴计划项目的实施和推广,牛细管冻精的应用日趋广泛;但牛冷冻精液解冻后的活力与鲜精相比有很大差异,因此研究开发更有效的牛精液冷冻保护系统很有必要。关于海藻糖能保护精子的研究国外已有报道:B.T.Storey等[1]、A.M.Dalimata等[2]、H.Woelders等[3]分     

海藻糖和维生素C对猪精液冷冻保存效果的影响

试验比较了在冷冻稀释液中添加不同浓度海藻糖(0.025,0.05,0.1 mol/L)以及添加10 mg/L维生素C对猪精液冷冻保存效果的影响.结果:(1)添加0.025 mol/L海藻糖组的精子冻后活率与复苏率分别跟对照组相比无显著差异(P>0.05),但添加浓度为0.05,0.1 mol/L的海藻糖组的精子活率和复苏率显著低于对照组(P<0.05).(2)在猪精液冷冻保存稀释液中,添加维生素C组的精子冻后活率和复苏率极显著高于对照组(P<0.01).表明在猪精液冷冻液中,添加0.025,0.05,0.1 mol/L 3种不同浓度的海藻糖对猪精液没有起到保护作用,其中后两者对之有降低的作用;而添加10 mg/L维生素C可取得较好的冷冻保存效果.     

海带多糖和枸杞多糖对山羊精液冷冻保存效果的影响

在羊精液冷冻稀释液中分别添加不同浓度的海带多糖(0、0.5、1.0、2.0、4.0mg/mL)、枸杞多糖(0、2.0、4.0、6.0、8.0mg/mL)以及联合添加海带多糖与枸杞多糖(1.0+0、0+4.0、0.5+2.0、0.5+4.0、1.0+2.0、1.0+4.0mg/mL),比较解冻后精液品质(精子活率、顶体完整率、质膜完整率、线粒体活性等),以研究海带多糖、枸杞多糖以及海带多糖和枸杞多糖联合应用对羊精液的冷冻保存效果。结果表明:在山羊精液冷冻稀释液中添加一定浓度的海带多糖和枸杞多糖,均能提高山羊精液冻融后的品质,其中二者添加的最适浓度分别为1.0mg/mL、4.0mg/mL;联合添加海带多糖和枸杞多糖能够提高山羊精子活率、质膜完整率、顶体完整率,其中较佳浓度组合为(1.0+2.0)mg/mL组合与(0.5+4.0)mg/mL组合。     

山羊卵母细胞冷冻保存及其对发育效果的影响

在程序冷冻条件下,冷冻保护剂种类对山羊卵母细胞发育效果有显著影响。对于山羊GV期卵母细胞,解冻后的形态正常率,PROH(83 1%)和DMSO(81 7%)均高于甘油(70 7%)(P<0 05);而体外成熟率则是PROH(20 3%)高于DMSO(14 2%)和甘油(9 8%),DMSO又高于甘油(P<0 05)。对于山羊IVM卵母细胞,解冻后的形态正常率,PROH(84 5%)和DMSO(86 4%)均高于甘油(74 2%)(P<0 05);而受精率则是PROH(23 2%)高于DMSO(17 5%)和甘油(13 1%),DMSO又高于甘油(P<0 05)。冷冻方法和卵母细胞发育阶段对冷冻效果有显著影响。从冷冻方法看,程序冷冻和OPS玻璃化冷冻,GV期卵母细胞的成熟率分别为19 7%、27 6%,受精率为3 3%、8 6%;培养9h卵母细胞的成熟率分别为20 6%、30 9%,受精率为4 4%、10 3%;IVM卵母细胞的受精率分别为20 9%、29 4%,2 细胞率为4 4%、8 8%,均是OPS玻璃化高于程序冷冻,差异显著(P<0 05);从卵母细胞发育阶段看,不论是程序冷冻还是OPS玻璃化冷冻,GV期和培养9h卵母细胞的成熟率、受精率差异均不显著(P>0 05),但受精率均显著低于IVM卵母细胞(P<0 05)。     

影响猪精子冷冻保存效果的研究进展

随着我国居民生活水平的提高,猪肉已经成为我国乃至世界上需求量最广泛的肉类.为了满足人类的需求,就必须专注于用更少的种猪生产更多品质优异的猪肉.目前精液保存方法主要有常温、低温和冷冻保存,常温保存精液技术操作简单,但精液保存时间超过48 h就会品质下降,而冷冻保存精液与常温保存精液相比,具有保存时间长、便于远距离运输和成...     

谷胱甘肽对杜洛克猪精子冷冻保存效果的影响

为了探讨冷冻保存Ⅰ液中添加不同浓度谷胱甘肽(GSH)对杜洛克公猪精子冷冻保存效果的影响,试验将冷冻-解冻处理的精液分为6组,分别为对照组(冷冻保存Ⅰ液)和试验组(分别在冷冻保存Ⅰ液中添加1.0,1.5,2.0,2.5,3.0 mmol/L的GSH),在液氮中保存,然后检测精子活力、运动参数、质膜完整率、顶体完整率、线粒体活性,活性氧(ROS)水平,丙二醛(MDA)和ATP含量,以及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,以此来评价解冻后的精液品质。结果表明：与对照组相比,除GSH添加浓度为3.0 mmol/L时精子活力降低外,其他添加浓度精子活力均提高,其中添加浓度为2.5 mmol/L时提高最显著(P<0.05)。与对照组相比,GSH添加浓度为2.5 mmol/L时猪精子在解冻后各项运动参数均显著提高(P<0.05),添加浓度为2.0,3.0 mmol/L时对猪精子部分运动参数也有一定提高,而添加浓度为1.0 mmol/L时各项运动参数降低。与对照组相比,添加不同浓度GSH时精子质膜完整率、顶体完整率、线粒体活性均提高,其中...     

维生素C对山羊精液冷冻保存效果的影响

在山羊精液冷冻稀释液中添加不同质量浓度的维生素C(VC),分别为0、0.5、1.0、1.5和2.0mg/mL,冻融后,比较不同VC浓度下精子活率、顶体完整率和存活时间,旨在研究山羊精液冷冻保存效果最好时的VC浓度。结果表明:在山羊精液冷冻稀释液中添加一定质量浓度的VC时,能提高精液的品质。当VC质量浓度在0.5~1.0mg/mL时,随着浓度的增加,解冻后的精液品质呈上升趋势;当VC质量浓度大于1.0mg/mL时,随着浓度的增加,解冻后的精液品质呈下降趋势;VC质量浓度为1.0mg/mL时,精液冷冻保存效果最好。     

不同浓度海藻糖对奶山羊睾丸组织冷冻保存效果的影响

为了研究含有不同浓度海藻糖的冷冻保护液对关中奶山羊睾丸组织冷冻保存的效果,将关中奶山羊的睾丸组织切碎后,冷冻保存在含有不同浓度海藻糖的冷冻保护液中,保存1个月后解冻,分别检测冷冻保存前后睾丸组织总细胞活力、总抗氧化酶(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性以及谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量。结果:各试验组总细胞活力、T-AOC、SOD、CAT活性以及GSH含量均高于对照组,各试验组MDA含量低于对照组。另外,经含有15%海藻糖的冷冻保护液保存后,总细胞活力显著高于其他试验组(P0.05),T-AOC、SOD、CAT活性和GSH含量均显著高于其他试验组(P0.05),MDA含量显著低于其他试验组(P0.05)。研究结果表明,在冷冻保护液中添加海藻糖能够通过保护组织中抗氧化酶活性,提高奶山羊睾丸组织冷冻保存的效果;添加海藻糖的最佳浓度为15%。     

虾青素和平衡时间对猪精子冷冻保存效果的影响

试验旨在研究虾青素和平衡不同时间对猪精子冷冻保存效果的影响。试验分为6组,空白对照组（冷冻保存I液）和试验组（冷冻保存I液中添加0.5 mmol/L虾青素,降温平衡时间分别为2、4、6、8、12 h）。结果表明：与空白对照组相比,平衡6 h的猪精子在解冻后各项运动参数均显著提高;平衡4、6、8 h组的精子活力、质膜完整性、顶体完整性、线粒体膜电位、DNA完整率显著提高,活性氧含量显著降低;平衡2、4、6 h组的超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶3种抗氧化酶活性显著提高,ATP含量显著提高;平衡6 h组的丙二醛水平降低4.74%(P<0.05)。综上,冷冻保存I液中添加0.5 mmol/L虾青素对猪精子冷冻保存具有一定的改善作用,其中以平衡6 h的效果最佳,能够显著提高猪精子冷冻保存效果。     

海藻糖对民猪精液冷冻保存的影响

为研究海藻糖在民猪精液冷冻中的作用,获得最佳民猪精液冷冻液成分,本试验在BTS、Modena和Zorlesco 3种稀释液基础上添加0.15 mol/L海藻糖,及在Zorlesco稀释液中分别添加0 mol/L、0.1 mol/L、0.15 mol/L和0.2 mol/L的海藻糖,研究海藻糖在不同稀释液中及其不同浓度对冷冻的民猪精子活率、质膜完整率、顶体完整率和线粒体膜电位的影响。结果表明,在Zorlesco稀释液中添加0.15 mol/L海藻糖可明显提高民猪冷冻精子的质量,使精子活率、质膜完整性、顶体完整率和线粒体活性分别达到(44.0±2.4)%、(58.2±2.4)%、(53.2±2.1)%和(51.3±2.3)%,为各组最佳(P<0.05)。将0.15 mol/L海藻糖分别添加在BTS、Modena和Zorlesco3种稀释液中发现,其中在Zorlesco稀释液添加海藻糖效果优于其他两组(P<0.05)。但海藻糖对冷冻前精子的保护作用不明显(P>0.05)。因此,在Zorlesco稀释液中添加1.5 mol/L的海藻糖能够明显提高民猪精子冷冻后质量,是民猪冷冻保存的适宜保护液。     

抗氧化剂对马精子低温及冷冻保存效果的影响

试验旨在研究不同抗氧化剂对马精子低温保存及冷冻效果的影响。选取6匹英纯血种公马作为试验动物,以INRA82液作为基础稀释液（对照组）,分别添加谷氨酰胺（0.015 g/mL）、甘氨酸（0.019 g/mL）、半胱氨酸（0.024 g/mL）、甲硫氨酸（0.015 g/mL）、牛磺酸（0.063 g/mL）、维生素C（0.4 mg/mL）、维生素E（0.5 mg/mL）、褪黑素（0.001 mg/mL）制备成含有不同抗氧化剂的低温保存和冷冻保存稀释液,将浓缩处理后的马精子分别置于上述稀释液中保存或冷冻,检测低温保存48 h后精子运动参数,评价抗氧化剂对精子低温保存的影响;检测精子冻融后运动参数、精子质膜完整性、线粒体膜电势及顶体完整性,评价抗氧化剂对精子冷冻效果的影响。结果表明,精子低温保存48 h后,添加牛磺酸组活精子比例和前向运动精子比例显著高于对照组（P<0.05）,添加维生素C组前向运动精子比例显著高于对照组（P<0.05）。冷冻解冻后结果表明,添加不同抗氧化剂没有改善精子冻融后活精子比例和前向运动精子比例,但添加甲硫氨酸显著延长了精子体外存活能力（P<0.05）;添加不同抗氧化剂精子质膜完整性与对照组间无显著差异（P>0.05）,但甲硫氨酸和甘氨酸组有高于对照组的趋势;添加维生素E和甲硫氨酸组精子线粒体膜电势显著高于对照组（P<0.05）,不同抗氧化剂组精子顶体完整性与对照组间均无显著差异（P>0.05）。结果提示,低温保存时添加牛磺酸和维生素C可以提高精液低温保存效果;冷冻时添加甲硫氨酸能提高精子质膜完整性和线粒体膜电势,且能够延长精子冻融后的存活时间。     

稀释液中添加PCS对冷冻保存过程中山羊精子质量的影响

笔者以绒山羊为试验动物,在卵黄稀释液中添加胆固醇硫酸脂(PCS),研究了在冷冻过程中PCS对精子质量的影响.添加PCS共设计了0.15,0.10,0.50 g/100 mL的添加量,总体分析以0.10 g/100 mL添加量为最佳,EY试验组显著好于EY对照组.其中,EY组解冻后精子活率、膜完整率、顶体完整率分别是34.94%、39.17%、75.24%;EY对照组分别是28.74%、30.70%、64.70%.     

冷冻保存对公猪精子功能的影响

试验旨在探究公猪精液冷冻保存对其精子功能的影响。取长白猪的鲜精和优质冻精,用精子分析仪检测精子的运动能力,台盼蓝染色检测精子活率,体外受精（IVF）试验检测卵裂率与囊胚率,采用不同功能检测试剂盒检测冻精和鲜精的顶体完整率、线粒体膜通道孔（MPTP）活性、线粒体膜电位（MMP）、线粒体活性、线粒体氧化应激活性氧（ROS）以及精子DNA完整性,实时荧光定量PCR检测弱精子症相关蛋白基因SMCP、TEKT3、DNAH1、TCTE3的表达。结果表明,与猪鲜精相比,猪冻精的活率及活力均显著降低（P<0.05）,冻精的顶体完整率也明显下降（P<0.05）;冻精的卵裂率和囊胚率显著低于鲜精（P<0.05）;精子线粒体功能分析结果显示,冻精的MPTP相对荧光单位值（RFU）、线粒体膜电位荧光比率以及线粒体活性光密度（OD）值均显著低于鲜精（P<0.05）;精子线粒体ROS检测发现,冻精的RFU值显著高于鲜精（P<0.05）;精子DNA完整性检测结果显示,冻精拖尾率显著高于鲜精（P<0.05）;而弱精子症相关蛋白基因的表达与鲜精相比,差异不显著（P>0.05）。综上所述,冷冻导致猪精子活率、活力、线粒体功能、DNA完整性下降,最终使得冷冻精液精子的受精能力降低。     

LDL对绵羊精子冷冻保存效果的研究

绵羊冷冻精液的受精率低于自然交配,其原因之一可能是在冷冻过程中精子质膜损伤严重造成的.该研究以内蒙古细毛羊为试验动物.在稀释液中以低密度脂蛋白(LDL)代替卵黄.分析了冷冻过程中对精子活率、顶体完整率和质膜完整率的影响.筛选出了最优的LDL稀释液配方,以提高绵羊精液质量,减少精子的损伤,为提高绵羊精子冷冻保存后的受精率提供理论依据.     

冷冻保存对野牦牛精子酶活性的影响

研究冷冻保存（-196℃）对野牦牛精子顶体酶等酶活性的影响。应用Giemsa染色法、BAPNA底物法、改良明胶底膜法和磷酸苯二钠法分别测定不同保存年份的精子顶体完整率、顶体酶、透明质酸酶和酸性磷酸酶活性；采用酶动力学分光光度法，分别以丙酮酸钠和α-已酮酸钠为底物测定乳酸脱氢酶及其同工酶CA活性，并计算C4的相对活性。结果表明，在冷冻保存条件下，野牦牛精子有关酶活性下降；并随保存时间的延长，下降幅度增加；对保存5年以上的精液需抽样测定功能和品质后再用于生产。     

精清浓度对马精子低温及冷冻保存效果的影响

本研究旨在比较不同精清浓度对马精子低温保存效果的影响。选取4匹4~12岁英纯血种公马,收集精液用含有不同浓度精清的稀释液进行精液低温保存或冷冻,检测保存和解冻后精液质量,评价精清浓度对马精子低温和冷冻保存效果的影响。结果表明:30%和40%浓度精清组低温保存后精液TM、PM、RAP及VAP值均显著低于0%、10%和20%精清浓度组(P0.05),10%精清浓度组低温保存24 h后TM值显著高于0%和20%精清浓度组,但保存至96 h后精液TM显著低于0%精清浓度组。不同浓度精清对精液冷冻效果的研究结果表明,含0%浓度精清组冻融后精液质量最优,随着精清浓度的增加冻融后活力及质膜完整性逐级递减。综上数据认为,进行马精液低温或冷冻保存时不添加精清可获得最理想的保存结果。     

冷冻保存对绵羊精子乳酸脱氢酶活性的影响

为了研究冷冻保存对绵羊精液乳酸脱氢酶(LDH)活性的影响,提高绵羊精液的品质,试验采用酶动力学分光光度法对冷冻保存前后绵羊精液、精清和精子中LDH的活性分别进行研究。结果表明:冷冻保存后绵羊精液LDH活性[(18.40±7.85)U/m L]和精子LDH活性[(5.91±2.16)U/m L]与冷冻前[(24.89±8.21)U/m L、(10.80±4.95)U/m L]相比均极显著降低(P0.01),而精浆中LDH活性则极显著升高(P0.01),冷冻保存对绵羊精液及精子中LDH的活性造成严重损伤。冷冻前后精子活率与LDH活性均呈极显著正相关(P0.01),LDH的活性可以在一定程度上预测精子活率,可以作为绵羊精液品质评价的新指标。