甘肃野生草地早熟禾种质资源无融合生殖鉴定分析

以甘肃省8个地区的野生草地早熟禾和商用品种‘午夜2号’为试验材料,通过纸上萌发法统计多胚苗率,利用石蜡切片技术统计无融合生殖率,并探究两者之间的相关性。结果表明:参试草地早熟禾材料的多胚苗率为0～15.29%,其中最高的是陇南,最低的是甘南,二者差异显著;无融合生殖率最高的是陇南,可达到71.04%,最低的是甘南,仅为11.2%,其他种质的无融合生殖率差距比较小,为32%～58%;相关性分析表明,多胚苗率与无融合生殖率存在显著相关性(R~2=0.96),该研究结果可为草地早熟禾无融合生殖材料筛选、种植栽培及其遗传育种提供一定的技术参考。     

8个野生早熟禾种子萌发期耐盐性研究

用不同浓度的NaC1和Na2 SO4这2种单盐溶液处理8个野生早熟禾(PoaL.)种子,通过种子萌发特性的变化,研究其萌发时的耐盐能力,以期为耐盐早熟禾种质材料的筛选提供依据.结果表明:50 mmol·L-1 NaC1促进波伐早熟禾(P.poophagorum)种子的萌发和草地早熟禾(兴隆山)(P.pratensis)、草地早熟禾(天祝)、硬质早熟禾(P.sphondylodes)胚芽的生长;25 mmol.L-1 Na2SO4促进草地早熟禾(兴隆山)、草地早熟禾(天祝)、小药早熟禾(Poa micrandra)、硬质早熟禾、波伐早熟禾、草地早熟禾(甘南)种子的萌发,及小药早熟禾胚芽的生长.2种盐胁迫均抑制胚根的生长,且对胚根生长的影响大于胚芽;NaC1对种子萌发的影响大于Na2 SO4.6个指标中,胚根长的平均耐盐临界值和耐盐极限值最小,作为8个野生早熟禾种子萌发期耐盐临界值和耐盐极限值比较可靠.种子萌发期耐盐性强弱依次为:小药早熟禾＞波伐早熟禾＞硬质早熟禾＞草地早熟禾(兴隆山＞草地早熟禾(肃南)＞草地早熟禾(天祝)＞草地早熟禾(甘南)＞草地早熟禾(渭源).     

野生驯化草地早熟禾材料的抗旱生理研究

在无控制依靠自然降水的条件下,比较了10份野生驯化早熟禾属材料与对照品种青海扁茎早熟禾在兰州干旱与半干旱区的生理生化特性。经隶属函数综合分析得出,早熟禾材料抗旱能力大小顺序为:西和﹥安定﹥清水﹥康乐﹥天祝﹥肃南﹥夏河﹥青海扁茎﹥秦州﹥渭源﹥兴隆山。     

多花黑麦草×苇状羊茅属间杂交后代生长特性及品质的研究

试验对黑麦草×苇状羊茅属间杂交后进行比较试验，结果表明，偏羊茅型的杂交后代Ｆ２－４Ｓ－８，偏黑麦草型的杂交后Ｆ２－２－１株高，干物质产量，粗蛋白产量均高于亲本苇状羊茅（Ｋｅｎｔｕｃｋｙ３１，简称Ｋｙ３１）中性洗涤纤维及酸性涤纤维含量均低于苇状羊茅（Ｋｙ３１）。     

温度对8个野生早熟禾材料萌发特性的影响

以8个野生早熟禾（Poa）种质种子为萌发试验材料,设6个恒温和2个变温处理,探讨其萌发的适宜温度范围,为野生早熟禾引种驯化和开发利用提供依据。结果显示,10~35 ℃恒温范围内,随温度升高,野生早熟禾材料种子的萌发速度、发芽率、发芽势、发芽指数、胚芽长、胚根长、苗鲜质量均表现出先增大后降低的趋势。8个温度处理下,野生早熟禾种子在20~30 ℃恒温萌发速度最快,初始萌发时间4～5 d,10 ℃恒温萌发速度最慢,初始萌发时间11～14 d,比最快萌发速度延迟6～10 d。以发芽率、发芽势和发芽指数3个萌发指标为主要依据,并参考胚芽和胚根长、苗鲜质量,认为波伐早熟禾（P.poophagorum）、草地早熟禾(甘南)（P.pratensis）和小药早熟禾（P.micrandra）种子最适宜萌发温度为20 ℃恒温;草地早熟禾(兴隆山)、草地早熟禾(肃南)、草地早熟禾(渭源)、草地早熟禾(天祝)和硬质早熟禾（P.sphondylodes）种子最适宜萌发温度为25 ℃恒温。对大多材料种子而言,较高的恒温（25 ℃）有利于胚芽生长,较低的恒温（20 ℃）或变温有利于胚根生长,5 ℃/20 ℃和10 ℃/25 ℃两个变温条件下的各项指标低于对应高温20和25 ℃恒温处理。     

甘肃野生草地早熟禾内源激素含量的变化与无融合生殖率的关系研究

为探究甘肃野生草地早熟禾无融合生殖率与内源激素之间的关系,以8个不同无融合生殖率的甘肃野生草地早熟禾种质为试验材料,采集不同发育时期的新鲜小穗样品,测定玉米素(ZT)、吲哚-3-乙酸(IAA)、玉米素核苷(ZR)、赤霉素(GA_3)和脱落酸(ABA)的含量,并分析了内源激素含量与无融合生殖发生的关系。结果表明:ZT和ZR在小穗发育初期呈现出下降趋势,在抽穗后2 d最低,之后ZT逐渐上升而ZR在开花期达到峰值后又开始下降,GA_3和IAA均表现出先增加后下降的趋势,但GA_3在抽穗后2 d达到峰值,IAA则是在开花期含量最高;研究发现,在小穗发育初期,无融合生殖率较低的材料(甘南、清水、肃南和兰州)ABA激素水平无显著变化,相反无融合生殖率较高的材料(陇西、秦州、定西和陇南)的ABA含量均呈现出逐渐下降的趋势,所有材料开花期至乳熟期均出现猛增,之后又急剧下降。相关性分析结果表明:无融合生殖率与ZT、ZR、ABA、(ZT+ZR)/IAA和(ZT+ZR)/ABA呈显著正相关,与GA_3、IAA/ABA和GA_3/ABA呈显著负相关,与IAA无显著相关性。因此,高ZT、ZR和低ABA含量、高(ZT+ZR)/IAA和(ZT+ZR)/ABA比值更可能促进胚珠向无融合生殖途径发育,高GA_3含量可能促进胚珠向有性生殖途径发育。     

甘肃野生草地早熟禾内源激素含量的变化与无融合生殖率的关系研究

为探究甘肃野生草地早熟禾无融合生殖率与内源激素之间的关系,以8个不同无融合生殖率的甘肃野生草地早熟禾种质为试验材料,采集不同发育时期的新鲜小穗样品,测定玉米素(ZT)、吲哚-3-乙酸(IAA)、玉米素核苷(ZR)、赤霉素(GA₃)和脱落酸(ABA)的含量,并分析了内源激素含量与无融合生殖发生的关系。结果表明:ZT和ZR在小穗发育初期呈现出下降趋势,在抽穗后2 d最低,之后ZT逐渐上升而ZR在开花期达到峰值后又开始下降,GA₃和IAA均表现出先增加后下降的趋势,但GA₃在抽穗后2 d达到峰值,IAA则是在开花期含量最高;研究发现,在小穗发育初期,无融合生殖率较低的材料(甘南、清水、肃南和兰州)ABA激素水平无显著变化,相反无融合生殖率较高的材料(陇西、秦州、定西和陇南)的ABA含量均呈现出逐渐下降的趋势,所有材料开花期至乳熟期均出现猛增,之后又急剧下降。相关性分析结果表明:无融合生殖率与ZT、ZR、ABA、(ZT+ZR)/IAA和(ZT+ZR)/ABA呈显著正相关,与GA₃、IAA/ABA和GA₃/ABA呈显著负相关,与IAA无显著相关性。因此,高ZT、ZR和低ABA含量、高(ZT+ZR)/IAA和(ZT+ZR)/ABA比值更可能促进胚珠向无融合生殖途径发育,高GA₃含量可能促进胚珠向有性生殖途径发育。     

9个野生早熟禾对低温胁迫的生理响应及苗期抗寒性评价

以甘肃省境内采集的9个野生早熟禾（Poa）为试验材料,设5,0,-5,-10℃共4个温度处理,探讨其对低温胁迫的生理响应和抗寒性,为抗寒早熟禾种质材料筛选和新品种选育提供依据。结果表明：随着温度下降,各材料的叶片相对膜透性逐渐增大,游离脯氨酸（Pro）、可溶性糖（SS）、可溶性蛋白（SP）、丙二醛（MDA）含量逐渐增加,超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化物酶（POD）活性逐渐增强。运用隶属函数法综合评价9个材料苗期抗寒性发现,一年生早熟禾（P. annua）抗寒性最强,小药早熟禾（P. micrandra）、草地早熟禾（天祝）（P. pratensis）和草地早熟禾（甘南）抗寒性中等;硬质早熟禾（P. sphondylodes）、波伐早熟禾（P. poophagorum）、草地早熟禾（肃南）、草地早熟禾 （渭源）、草地早熟禾（兴隆山）抗寒性弱。相关性分析表明,SP含量与抗寒综合评价值极显著正相关（P<0.01）,POD活性与抗寒综合评价值显著正相关 （P<0.05）,Pro含量、SS含量、SOD活性、海拔与抗寒综合评价值成正相关,相对膜透性、MDA含量和年均温与抗寒综合评价值成负相关。     

家蚕sch基因的导入对杂交后代孵化蚕性别的控制

以家蚕ｓｃｈ基因为选择性标志基因，将温敏性特性导入蚕品种７８２内，育成７８２Ｓ赤系，７８２Ｓ黑系。并以７８２Ｓ赤系Ｆ４、７８２Ｓ黑系Ｆ４和（黑蚁雌×ｓｃｈ雄）Ｆ１为材料，分设３０℃ＲＨ　６０％恒温催青和催青前期常规条件己４胚子期４２℃处理２ｄ这两种处理。结果表明，杂交后代带有ｓｃｈ基因的雌性和ｓｃｈ基因的雄性纯合体，胚胎期均表现对高温干燥的敏感性，而不带ｓｃｈ基因的个体则不表现敏感性。说明ｓｃｈ基因与高温干燥敏感性存在着密切关系，可以用ｓｃｈ为标志基因将温敏性性状导入其他实用品种，达到控制孵化蚕的性别的目的。     

家蚕微孢子原虫(Nosema bombycis)在Antheraea eucalypti细胞中的增殖

家蚕微孢子原虫（ Ｎｏｓｅ ｍ ａ ｂｏ ｍ ｂｙｃｉｓ） 经 Ｋ Ｏ Ｈ 处理后,接种于 Ａｎｔｈｅｒａｅａ ｅｕｃａｌｙｐｔｉ 细胞系,调查其生活史。 Ｋ Ｏ Ｈ 处理的孢子发芽率约为４４３ ％ 、 Ａｎｔｈｅｒａｅａ ｅｕｃａｌｙｐｔｉ 细胞的初期感染率约为３０ ％ ,接种３６ｈ 后,裂殖子数量急速增加,７２ｈ 达到最高峰。接种４８ｈ 后可观察到短极丝孢子发芽后形成的空孢壳和二次感染体。感染 Ｎｏｓｅｍ ａ ｂｏ ｍｂｙｃｉｓ ４８ｈ 前的家蚕血淋巴对 Ｂｍ Ｎ 细胞无感染性,而感染７２ｈ 的血淋巴则表现出感染能力。     

Effect of oestrous synchrony between embryo donors and recipients,embryo quality and state on the pregnancy rate in beef cattle

This study aimed to evaluate the effect of oestrous synchrony between donors and recipients and the embryo quality on the pregnancy rate in beef cow recipients. The experiment was performed over two years at an embryo transfer (ET ) centre in Southern Brazil. Ninety Aberdeen Angus cows were subjected to superovulation (SOV ) protocols, resulting in the recovery of 1,048 transferable embryos. Eleven groups were formed with intervals of 6 hr, from ?30 to +30 hr, with respect to recipient versus donor oestrous detection. Evaluation of embryo quality was according to the IETS guidelines. The overall pregnancy rate was 52%. Effects related to donor and recipient oestrous synchronization on pregnancy rate were observed (p  =  .01), ranging from 36% to 50%. The embryo quality rate affected the pregnancy rate, where Grade I resulted in 57% and Grade III in 43% of pregnancy (p  <  .001). The embryonic state (frozen or fresh) showed no (p  >  .05) effect on pregnancy rate: 53% for fresh embryos and 44% for frozen embryos. The odds ratio for explanatory variables causing pregnancy indicated that Grade III embryos had 31% less chance of conception compared to Grade I. Thus, oestrous synchrony between donor and recipient, considering ±30 hr apart, can affect the pregnancy rate along with embryo quality.     

非手术法移植牛体外转基因胚研究初报

本文介绍了牛体外胚移植及转基因胚移植的意义;详细阐述了利用非手术法移植牛体外转基因胚胎的技术过程,并对相关问题进行了探讨;移植的结果和经验为进一步研究转基因胚胎移植提供了重要的实践依据和借鉴作用。     

小鼠胚胎计数方法的研究及应用

胚胎细胞计数是评定胚胎活力,检验胚胎体外操作方案和培养效果的常用方法。实验以昆明小鼠体内发育胚胎和体外聚合囊胚为实验材料,对几种细胞的计数方法及应用进行了详细的研究。结果表明:（1）低渗压片法的实验效果最佳。（2）根据形态学观察,结合细胞计数,可以把小鼠8-细胞以后胚胎划分为:8-细胞晚期[细胞数目为（11.9±0.65）个];同一时间收集的桑椹胚和早期囊胚细胞数目相似;不同时间收集的囊胚细胞有明显差异。（3）细胞计数分析表明:8-细胞聚合胚发育形成聚合囊胚时,其细胞数目未发生调整。     

哺乳动物胚胎冷冻技术的研究进展

胚胎冷冻保存已广泛用于胚胎移植、动物克隆以及动物资源保护.此技术的应用需保证胚胎在冷冻-解冻后具有较高的成活率.自从1972年小鼠胚胎冷冻保存获得成功以来,许多学者在简化冷冻程序,缩短冷冻时间,方面进行了深入的研究.本文就胚胎冷冻的原理、保护剂、冷冻方法以及解冻方法等方面进行了综述.     

生产条件下安哥拉山羊胚胎徒手分割研究

生产条件下,徒手二分割安哥拉山羊桑椹胚和囊胚,并将裸半胚手术移植于受体羊子宫角。１９９３年用０．５％链霉蛋白酶处理胚胎１～６ｍｉｎ软化透明带后,在玻璃培养皿中的含１２．５％蔗糖和５％新生犊牛血清（ＮＣＳ）的ＰＢＳ液内分割,将３３枚半胚移植到２１只受体,有２只受体妊娠。１９９４年用０．２５％链霉蛋白酶处理胚胎０．５～１ｍｉｎ软化透明带后或不经处理而直接在磨砂玻璃皿中的含２０％血清的ＰＢＳ液内分割,移植受体３４只,有１０只受体产羔（２９．４％）,共产羔１１只,其中１对为同卵双生,半胚成羔率为２０．０％（１１／５５）。１９９５年,囊胚不经处理直接在磨砂玻璃皿中的含２０％ＮＣＳ的ＰＢＳ液内分割,半胚成对移植于受体羊黄体侧子宫角,产羔受体率为５０．０％（１３／２６）,共产羔１６只,其中３对为同卵双生,半胚成羔率为３０．８％（１６／５２）,胚胎成羔率为６１．５％（１６／２６）。     

Achievements and future perspectives of embryo transfer technology in pigs

Commercial embryo transfer (ET) has unprecedented productive and economic implications for the pig sector. However, pig ET has been considered utopian for decades mainly because of the requirements of surgical techniques for embryo collection and embryo deposition into recipients, alongside challenges to preserve embryos. This situation has drastically changed in the last decade since the current technology allows non‐surgical ET and short‐ and long‐term embryo preservation. Here, we provide a brief review of the improvements in porcine ET achieved by our laboratory in the past 20 years. This review includes several aspects of non‐surgical ET technology and different issues affecting ET programmes and embryo preservation systems. The future perspectives of ET technology are also considered. We will refer only to embryos produced in vivo since they are the only type of embryos with possible short‐term use in pig production.     

澳洲波尔山羊胚胎3种冷冻方法对其胚胎移植效果的影响

在25℃室温下,采用细管法(一步法、二步法)和OPS法,以不同浓度的EFS、EDFS为玻璃化冷冻液,对澳洲波尔山羊致密桑椹胚和囊胚进行玻璃化冷冻保存。同时利用1.5mol/LEG为抗冻保护剂对胚胎进行常规法冷冻保存。分别将上述3种方法冷冻解冻后的胚胎移植于同期发情后6~7d的云南黑山羊受体。结果表明,细管法胚胎玻璃化冷冻保存效果均以EFS40组为佳,解冻后胚胎移植产羔率分别为40.54%(15/37;一步法)和51.35%(19/37;二步法)。与新鲜胚胎移植产羔率(52.50%,21/40)和常规法冷冻保存的胚胎移植产羔率(45.16%,14/31)相比无显著性差异(P>0.05)。另外,用EDFS30玻璃化溶液,OPS法冷冻解冻后的胚胎移植产羔率高达51.43%(18/35),为整个玻璃化冷冻试验的最佳值。玻璃化冷冻方法简便、迅速,无论是细管法还是OPS法均获得了比较理想的胚胎移植效果。     

哺乳动物胚胎冷冻技术的研究进展

胚胎冷冻保存已广泛用于胚胎移植、动物克隆以及动物资源保护。此技术的应用需保证胚胎在冷冻—解冻后具有较高的成活率。自从1972年小鼠胚胎冷冻保存获得成功以来,许多学者在简化冷冻程序、缩短冷冻时间等方面进行了深入的研究。文章就胚胎冷冻的原理、保护剂、冷冻方法以及解冻方法等方面进行了综述。     

影响绵羊冻胚移植妊娠率的因素分析

本研究对胚胎质量、胚胎移植数量、胚胎发育阶段、冷冻方法、移植方法及饲养管理水平等因素对移植产羔率的影响进行研究,以提高绵羊胚胎移植效率。结果表明:采用1.5mol/L乙二醇做冷冻保护剂对胚胎进行常规冷冻,冻前A级胚胎冷冻/解冻后可用胚率、存活率、降级率均高于B级,差异极显著(P<0.01)。移植1枚冷冻解冻后A级、B级或2枚(A+B)胚胎的受体移植产羔率分别为44.48%、46.84%和44.81%。经χ2检验分析,三者之间无显著差异(P>0.05)。移植双胚的受体双羔率为22(%53/241),以胚胎为单位计算,产羔率仅为33.40%。A级囊胚和桑椹胚的产羔率之间无显著差异(P>0.05)。1.5 mol/L乙二醇常规冷冻保存的体内胚胎移植产羔率高于EFS40玻璃化冷冻保存,但经统计学分析,二者无显著差异(P>0.05)。子宫手术移植和腹腔内窥镜法子宫移植之间产羔率不具统计学差异(P>0.05)。在牧场条件下大规模移植的平均产羔率为43.95%,范围在20%￣70%之间,受体饲养管理水平对绵羊移植产羔率有较大影响。