新城疫病毒接种后气管黏膜损伤研究

为了研究新城疫弱毒疫苗的免疫机理,用rlasota(重组lasota野毒株)免疫2日龄SPF雏鸡,接种后分别在第1,3,5,7,15,18 d取气管,进行电镜、光镜观察,利用免疫组化染色方法检测病毒在气管内的分布;结果发现rlasota接种后第1 d纤毛细胞有脱纤毛现象。接种第3 d杯状细胞破碎,黏液成分增多,黏膜下层的纤维裸露到表面;接种后第7 d,可以看到纤毛细胞纤毛上有球形粒子,杯状细胞、基细胞大量增生;接种后第18 d,纤毛细胞脱纤毛区域进一步增大。光镜观察结果发现,接种后第5 d黏膜下层水肿,淋巴细胞、粒细胞、浆细胞浸润,黏膜上皮形成空泡状,表层有数层不成熟的细胞组成;接种后第7 d,腺体腔闭塞。免疫组化染色气管固有层细胞呈阳性反应,棕色颗粒出现在胞浆中。这说明气管黏膜的损伤可能是机体重要的防御机制和免疫机制的表现。     

传染性法氏囊新城疫病毒二联疫苗株接种后气管黏膜损伤研究

为了研究传染性法氏囊病毒超强毒流行株VP2基因重组新城疫病毒（rlasota—vo2）二联疫苗株的免疫机制,用rlasota—vp2免疫2日龄SPF雏鸡,接种后分别在接种后的1,3,5,10,15,18d取气管,进行光镜、电镜观察,利用免疫组化染色方法检测病毒在气管内的分布;光镜观察发现,接种后第3d黏膜下层水肿,淋巴细胞、巨噬细胞浸润,黏膜上皮形成空泡状,表层有数层不成熟的细胞组成;接种后第10d,腺体腔闭塞。免疫组化染色（IHC）气管固有层细胞呈阳性反应,棕色颗粒出现在胞浆中。电镜观察发现接种rlasota—vp2后第3d纤毛细胞有脱纤毛现象。接种第3d杯状细胞破碎,黏液成分增多,黏膜下层的纤维裸露到表面;接种后第10d,可以看到纤毛细胞纤毛上有球形粒子,杯状细胞、基细胞大量增生;接种后第18d,纤毛细胞脱纤毛区域进一步增大。这说明气管黏膜的损伤是机体重要的防御机制和免疫机制的表现。     

鸡口服鸡痘弱毒苗免疫后的组织病理学变化

用鸡痘弱毒疫苗口服接各上月龄鸡，在接种后第１、２、４、６、８天分别采集免疫鸡上１／３处气管、食管和肺、制成病理切片和超薄切片。切片显示免疫鸡食道、气管和肺部表现为局部炎性反应。肺部变化最严重而胸胸无明显病变。电镜观察显示，其中Ｍ株的一羽鸡，免疫接种后第６天的肺切片中以散在豆病毒样颗粒。     

小鹅贝氏隐孢子虫人工感染试验

 笔者用鸭源和鹅源隐孢子虫对13只2日龄小鹅进行了人工感染试验。用鸭源隐孢子虫感染10只小鹅，每只感染1.2×10#+7个孢子化卵囊，潜隐期为3天；用鹅源隐孢子虫感染3只小鹅，每只感染8×10#+6个孢子化卵囊，潜隐期为4天。两组的排卵囊的高峰期均在接种后第7-17天，排卵囊时间长达21天。人工感染后小鹅的严重发病出现在第8-17天。主要临床症状为呼吸困难、气喘、咳嗽、张口呼吸、打喷涕、精神不振、饮、食欲锐减。人工感染后第7、10和17天各死亡一只，死亡率为23%。病理剖检可见喉头、气管水肿，渗出物增多，肺充血、发炎，气囊混浊呈云雾状外观。病理组织学观察可见喉头、气管、法氏囊、泄殖腔粘膜上皮细胞肿胀，微绒毛脱落；粘膜涂片染色和电镜观察可在上述部位的上皮细胞表层发现大量虫体。根据动物感染试验及卵囊的形态特征，确认小鹅隐孢子虫为贝氏隐孢子虫Cryptospridium baileyi。这是世界上首次报道的小鹅隐孢子虫病的病例。     

金地鼠颊囊癌前病变的研究──致癌作用时间与癌变潜力的关系

用致癌剂０．５％甲基苯蒽丙酮溶液每周３次涂于金黄地鼠颊囊粘膜上，于用药第５周出现上皮单纯性增生。随用药时间的延长，病变继续发展，至用药第９周，病变表现为类似人类口腔粘膜白斑异常增生的组织学改变。分别于用药第５、７、９周后停止用药，观察至 ２１周。结果５周组未发生癌变， ７周组 ３０％（ ３／１０）癌变，９周组１００％（１０／１０）癌变。实验证实甲基苯葱诱发的金黄地鼠癌前病变模型的癌变潜力与用药时间长短密切相关。用药９周后，所有病变成为具有稳定癌变潜力的癌前病变。     

鸡新城疫,支气管炎,法氏囊病三联弱毒按种雏对城疫答效果观察

通过对种毒接种量、比例及接毒时间的调整，促使鸡新城疫（ＮＤ），支气管炎（ＩＢ），法氏囊病（ＩＢＤ）三株弱毒在同一鸡胚细胞上增殖并研制成鸡新城疫，支气管炎、法氏囊病三联细胞弱毒。经１６批次五万余只不同品种雏鸡的接种试验及对抽检雏ＮＤ血摄制抗体（ＨＩ）检测和ＮＤ标准强毒攻击结果表明：首次接种后１０天的雏鸡ＮＤ血凝抑制抗体达６Ｌｏｇ２以上，与单苗组试验组比较无明显差异。且首次接后３３天和二次种后３０天，     

珍珠鸡和雉鸡贝氏隐孢子虫实验感染研究

 采用鸭源贝氏隐孢子虫卵囊经口感染珍珠鸡和雉鸡，感染后的4～30天和4～25天，分别在珍珠鸡和雉鸡的粪便中检出卵囊。贝氏隐孢子虫在珍珠鸡和雉鸡的喉头、气管、支气管、法氏囊和泄殖腔的粘膜上皮发育。珍珠鸡感染后出现明显的呼吸道症状，剖检可见眶下窦肿大、气管和法氏囊水肿、表面有大量粘液、肺暗红、气囊增厚呈云雾状外观。组织学检查可见气管和法氏囊上皮细胞增生、肿胀和脱落以及炎性细胞浸润。感染后33天，珍珠鸡体重明显低于未感染对照组。与珍珠鸡相比，雉鸡感染后只出现轻微呼吸道症状，大体及组织病变均较轻，且体重与对照组无显著差异。实验表明，珍珠鸡和雉鸡是贝氏隐孢子虫的新宿主。     

四株鸡毒霉形体菌株对SPF鸡胚的致病作用

将ＭＧ不同菌株的培养物，经卵黄囊接种ＳＰＦ鸡胚，结果各菌株均能使鸡胚发生死亡，总死亡率在接种后３￣１３ｄ内达８２％，死胚经病变检查，菌检和分离物的血清学鉴定，证实系感染ＭＧ所致，测定了ＭＧＩｃ１菌株的不同接种量对鸡胚死亡的影响，发现它们之间没有密切关系。在ＳＰＦ源鸡体上致病力低下的二株ＭＧ菌株的鸡胚致死率为６０％￣９０％，反映出同一菌株对鸡体和鸡胚的致病力有差异。从部分死胚的卵黄、卵黄囊、绒毛尿囊     

MDV感染鸡羽毛根病毒抗原和DNA的动态检测

１０羽１４日龄鸡分别以马立克氏病毒（ＭＤＶ）ＢＪ－１株接毒，采集羽毛根作为ＭＤＶ琼扩抗原和ＭＤＶＤＮＡｄｏｔ－ｂｌｏｔ杂交的动态检测样品。接毒后第１０ｄ至第８周的检测结果显示，鸡羽毛根ＭＤＶ琼扩抗原及ＭＤＶＤＮＡ可分别在接毒后第１４ｄ（３７．５％，３／８）和第１２ｄ（３３．３％，３／９）检出；接毒后第１７ｄ至第５周，鸡羽毛根ＭＤＶ琼扩抗原的阳性检出率均大于８０％；第６，７和８周时，则分别降至６６．７％（４／６），５０％（３／６）和４０％（２／５）。而ＭＤＶＤＮＡ的检测，除１只鸡直到第４周才呈阳性外，其余在接毒后第１４ｄ至第８周中均保持１００％的阳性检出率。     

鸡传染性贫血病病理形态学变化

对一日龄雏鸡感染ＣＩＡＶ后器官组织的病理形态和超微结构变化进行了动态观察．结果显示，感染后７，１４，２１ｄ．骨髓明显黄化．造血组织面积减少，各系造血前体细胞数量均减少．透射电镜观察，ＣＩＡＶ感染后７，１４ｄ．骨髓原始红细胞和前体细胞胞浆线粒体等细胞器肿胀、空泡化；胞核和胞浆内均可见髓样小体．胸腺皮质细胞间解离、淋巴细胞核染色质边集、断裂，呈现细胞程序性死亡；肝细胞线粒体肿胀、空泡化和髓样小体多见，核染色质致密或断裂、溶解．研究结果表明，骨髓、胸腺和肝脏等器官均呈现明显损伤变化，并是ＣＩＡＶ侵害的重要靶器官．     

同种异体气管移植的病理学研究

目的：探讨同种异体气管移植的临床效果及吻合口病理学变化。方法异体羊新鲜心包经过0.625％戊二醛处理后，包绕6 cm Sigma不锈钢丝网支架，制成人工气管。切除实验用羊颈段气管5 cm，人工气管与实验羊断端气管头尾端吻合。手术后60、120、180 d行支气管镜检查、X线片检查，定期处死实验羊行人工气管病理学检查，观察人工气管、吻合口愈合、血运及肉芽组织情况。结果人工气管可以诱导受体羊气管周围组织生成气管样组织，填充缺损区。60 d，移植区上皮组织不明显；120 d，移植区覆盖有部分纤毛柱状上皮，气管各层次比较完整；180 d，黏膜层有纤毛柱状上皮覆盖，黏膜下层、外膜等小血管丰富，移植区气管各层次完整。结论人工气管可以诱导受体羊气管周围组织生成完整的气管样组织，气管各层次比较完整，实验动物有望长期存活。     

鸡口服鸡痘弱毒疫苗免疫后的组织病理学变化

用鸡痘弱毒疫苗口服接种１月龄鸡，在接种后第１、２、４、６、８天分别采集免疫鸡上１／３处气管、食道和肺，制成病理切片和超薄切片。切片显示免疫鸡食道、气管和肺都表现为局部炎性反应。肺部变化最严重，而胸腺无明显病变。电镜观察显示，其中Ｍ株的一羽鸡，免疫接种后第６天的嵎吻衅泄鄄斓缴⒃诘亩徊《狙帕！     

鸡新城疫、支气管炎、法氏囊病三联弱毒接种雏对新城疫应答效果观察

通过对种毒接种量、比例及接毒时间的调整，促使鸡新城疫（ＮＤ）、支气管炎（ＩＢ）、法氏囊病（ＩＢＤ）三株弱毒在同一鸡胚细胞上增殖并研制成鸡新城疫、支气管炎、法氏囊病三联细胞弱毒，经１６批次五万余只不同品种雏鸡的接种试验及对抽检雏ＮＤ血凝抑制抗体（ＨＩ）检测和ＮＤ标准强毒攻击结果表明：首次接种后１０天的雏鸡ＮＤ血凝抑制抗体达６Ｌｏｇ２以上，与单苗组和混合苗试验组比较无明显差异。且首次接种后３３天和二次接种后３０天，能抵抗ＮＤ标准强毒攻击获１００％保护。     

鸡气管上皮细胞分离培养及传支病毒在其培养特性研究

 【目的】探索鸡气管上皮细胞（chicken trachea epithelium,CTE）分离培养技术,并研究传染性支气管炎病毒（infectious bronchitis virus,IBV）在CTE中培养特性。【方法】利用气管灌注冷消化法分离培养CTE,对CTE特异性8/18角蛋白作免疫组化鉴定上皮细胞。培养的CTE分别接种IBV M41株和T株,分别在接种后第12～96小时观察接毒细胞形态学变化,应用电镜技术观察CTE细胞病变和病毒粒子结构,利用RT-PCR技术检测CTE中病毒核酸并对CTE中IBV的血凝性和鸡胚致病性进行检测。【结果】利用灌注冷消化法可以获得形态完整并带有纤毛的CTE,细胞活性高,经过3步纯化后的CTE均一性高、生长快。两株IBV感染的CTE分别在接毒72和84 h后产生明显的细胞病变效应（cytopathic effect,CPE）,血凝性和致鸡胚病变检测结果呈阳性。【结论】本研究成功分离培养了CTE,可以为CTE相关研究提供技术支持,并为IBV基础研究和应用奠定基础。     

1株新分离拮抗酵母菌株对芒果炭疽病生防效果及其分类鉴定

从海南芒果园取样分离到1个新拮抗酵母菌株(LZ5),通过离体和活体抑菌实验,发现其对芒果采后炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides Penz.and Sacc)有明显的抑菌效果。活体接种实验结果表明,1×108cfu·m L-1的酵母菌对刺伤接种的芒果采后炭疽病具有显著的生防效果,接种第4天和第6天对照组的病斑直径分别为5.80,26.3 mm,而处理组仅分别为0.33,17.6 mm,接种第4天对照组的发病率已达100%,而处理组仅为20%。此外,该菌株可以在芒果伤口处快速繁殖,在接种24 h后酵母细胞数为初始值的62.6倍,随后基本保持稳定。经鉴定该拮抗酵母菌属于季也蒙毕赤酵母(Meyerozyma guilliermondii)。     

左旋咪唑对鸡传染性法氏囊病疫苗接种鸡的免疫调节作用的研究

本研究采用７０只无母本的１４日龄雏鸡，随机分为试验组和对照组。两组雏鸡均口服接种ＩＢＤ疫苗１只份。从疫苗接种的当日开始，在组雏鸡的饲料内按每天每公斤体重１５ｍｇ计算，拌入盐酸左旋咪唑，连服三日；对照组不服左旋咪唑。于接苗后的１０、２０、３０、４０和５０天，从两组雏鸡中随机各取３０只由翅静脉采血，析出血清，供测定血清抗体用。同时，从各组鸡血样中随机各取１０份，作成血涂片，供检查Ｔ淋巴细胞用。试验结果     

鸡传染性囊病活疫苗安全和效力试验

使用ＳＰＦ雏鸡进行３批鸡传染性囊病中毒力ＢＪ８３６活疫苗的安全和效力试验。１０倍剂量接种７日龄ＳＰＦ雏鸡，在２１天观察期中接种鸡均无任何传染性囊病的特征性症状出现，健康存活，剖杀观察无异常，接种组平均囊／体比与对照组之间均无显著 差异，平均囊指数达０．９０以上，疫苗通过安检。     

稻瘟病菌不同毒力小种间诱导侵染的研究

研究了水稻品种“秀水０４”的稻瘟病菌亲和菌株中Ａ４９和非亲和菌株中Ｅ３以及“秀水４８”的亲和菌株中Ｅ３和非亲和菌株Ｇ１在互作中产生的诱导侵染作用。混合接种的诱导侵染作用随亲和菌株菌量的增加而增强；先接强小种后接弱小种或先接弱小种再接强小种均能产生诱导侵染作用，作用强弱随接种间隔时间长短而不同；少量的亲和菌株即有诱导侵染作用，但当非亲和菌株大量存在时有减轻发病的作用。提出，这种诱导侵染作用可能是水稻     

吉林省大豆细菌性斑点病菌（Pseudomonas syringae pv.glycine…

自１９８９年至１９９２年的四年间，在吉林省的长春，公主岭，吉林，白城，通化等地区的各大豆品种上分离到大豆细菌性斑点病菌的菌株１４６个，接种在７个国际鉴别寄主上，即Ａｃｍｅ，Ｃｈｉｐｐｅｗａ，Ｆｌａｍｎｅａｕ，Ｈａｒｏｓｏｙ，Ｌｉｎｄａｒｉｎ，Ｍｅｒｉｔ，Ｎｏｒｃｈｉｅｆ，观察其抗感反应。将测定结果与国际上已鉴定的９个生理小种在这７个鉴别寄主上的反应相对照，发现有９８个菌株属４号生理小种，占总菌株数     

用ELISA检测传染性囊病病毒诱导的细胞凋亡

用５株传染性囊病病毒（ＩＢＤＶ）分别感染鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）,于感染后不同时间收集接毒组与对照组的细胞进行检测,试验结果显示,接毒组与对照组细胞的ＤＮＡ在琼脂糖凝胶电泳谱上均呈现梯状条带,用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测各组细胞中降解ＤＮＡ量,发现感染ＩＢＤＶ７ｈ后,接毒组细胞降解ＤＮＡ量比对照组明显增加,且各接毒组间降解ＤＮＡ量有一定的差异,试验结果表明：各株ＩＢＤＶ均诱导ＣＥＦ发生细胞