抗小鹅瘟病毒中和性单克隆抗体研制及实验防治效果

用淋巴细胞杂交瘤技术研制出１１株抗小鹅瘟病毒（ＧＰＶ）单克隆抗体。这些单抗仅与ＧＰＶ反应，与其它细小病毒（ＣＰＶ、ＦＰＶ、ＰＰＶ）和其它禽病毒（ＮＤＶ、ＩＢＤＶ、ＤＨＶ、ＤＰＶ）均不反应。腹水单抗的ＥＬＩＳＡ效价达１０－５～１０－７，琼扩沉淀效价达１∶２０～１∶５１２，鹅胚中和效价达１∶３０～１∶１２２，鹅体中和效价为１∶５４～１∶９６。ＧＰＡ１和ＧＰＣ５２株单抗对人工感染ＧＰＶ的雏鹅具有良好防治效果。     

应用套式PCR在MDCK细胞系中发现犬细小病毒

本研究自１９９７年至１９９９年从国内部分大学实验室、卫生防疫站和动检局陆续收集１１个犬肾（ＭＤＣＫ）细胞系样品,选取犬细小病毒基因组的ＶＰ２基因上４段核苷酸序列作引物,对样品ＤＮＡ进行套式ＰＣＲ（Ｎｅｓｔｅｄ ＰＣＲ）检测;ＰＣＲ扩增产物经０．０１ｇ／ｍＬ琼脂糖凝胶电泳和克隆到ｐＧＥＭ＾－Ｔ载体并进行核苷酸序列测序鉴定后,发现我国ＭＤＣＫ细胞系中存在犬细小病毒的传代病毒株。该病毒基因组部分序列测定结果显示与犬细小病毒ＣＰＶ－Ｎ株有９１％同源性。     

HA基因侧翼重组痘苗病毒的生物学特性研究

以痘苗病毒ＨＡ基因为侧翼，在多种类型痘病毒）启动子的下游，插入ＨＩＶ－１的ｇａｇ基因及其上游序列、或ＨＩＶ－１ｇａｇ－ｅｎｖ嵌合基因、或狂犬病病毒的糖蛋白基因，从而构建了１２株重组痘苗病毒。统计发现，以ＨＡ基因为侧翼构建重组病毒的重组率约为０．１％，与ＴＫ基因为侧翼的重组率差别不大，但阳性重组率有很大差别，从２．７％到１００％。试验观察发现，ＨＡ基因为侧翼的重组病毒具有以下生物学特性：（１）感染性稍低于野生型病毒；（２）能够稳定地表达外源蛋白；（３）可引起细胞融合。根据重组病毒能引起细胞融合的特性，改进了重组病毒的筛选方法。     

土传小麦花叶病毒基因组结构和RNA2自发缺失的研究

描述了土传小麦花叶病毒（ｓｏｉｌ－ｂｏｒｎｅ ｗｈｅａｔ ｍｏｓａｉｃ ｖｉｒｕｓ,ＳＢＷＭＶ）的基因组结构,并将之与一些植物病毒作比较。发现重复摩擦接种或在高温下（２５￣３０℃）培养引起的ＳＢＷＭＶ部分ＲＮＡ２序列迅速缺失。在最初几次重复摩擦接种后,小麦病株存在野生型ＳＢＷＭＶ ＲＮＡ２和几个不同大小的外壳蛋白通读（ＣＰ－ＲＴ）基因的缺失突变体。在以后的几次重复摩擦接种后,一个缺失突变体成为占优     

猪细小病毒(PPV)SD1株NS1基因的克隆与原核表达

为研究猪细小病毒（Porcine Parvovirus，PPV）NS1基因，建立快速、准确诊断猪细小病毒的方法，减少猪细小病毒造成的损失，笔者克隆了含有NS1基因的片段，并且与已登录猪细小病毒的相应序列进行比较，成功构建了原核表达重组质粒PET 30a／NS1，并在E.coli中进行了诱导表达。     

猪细小病毒N株弱毒苗的保存温度和时间对豚鼠抗体反应的影响

用不同保存温度和时间的猪细小病毒Ｎ株弱毒苗注射豚鼠,检测ＰＰＶ－Ｎ株弱毒苗的保存期,结果为４℃至少能保存一年,－２０℃至少能保存３年。根据抗体反应的规律性,证明豚鼠可用作ＰＰＶ弱毒苗抗体检测的试验动物。     

毛皮动物肠炎病问答

1毛皮动物肠炎有哪些类型？临床怎样鉴别？ 答：毛皮动物肠炎基本有两种类型，一类是病毒性的，主要由细小病毒感染引起，水貂、貉及猫细小病毒同源性高，而狐和犬细小病毒同源性高，因此，用水貂的细小病毒（MEV）和猫传染性肠炎病毒（也称猫泛白细胞减少症病毒，FPV）制做的疫苗对水貂、貉的保护率高，而对狐保护率相对低些。     

猪细小病毒对猪外周血淋巴细胞分泌猪白细胞介素18转录时相影响的探讨

猪细小病毒体外感染外周血淋巴细胞（PBMC）后引起细胞免疫反应尚不清楚,为了更好的了解猪细小病毒（PPV）感染PBMC后引起猪白细胞介素18的反应,探讨宿主-病毒之间的作用关系,运用荧光定量PCR技术,测定和分析了PPV感染PBMC后引起的病毒DNA含量的变化和猪IL-18的分泌水平。结果猪IL-18的表达量在3,6,12,24 h增加,1,48,72 h下调。可见,猪细小病毒感染可引起PBMC分泌猪白细胞介素18的增加。     

水稻东格鲁病研究进展

水稻东格鲁病是由水稻东格鲁杆状病毒（ＲＴＢＶ）和水稻东格鲁球状病毒（ＲＴＳＶ）复合感染引起的。ＲＴＢＶ是一种杆状外型的植物副反转录病毒；而ＲＴＳＶ则是一种单链ＲＮＡ病毒，ＲＴＳＶ对ＲＴＢＶ的传播起帮助作用，本文综述了水稻东格鲁病毒的生物学和分子生物学特征的研究进展。     

兔病毒性出血症研究进展及其在国际上的评价

兔病毒性出血症是中国首先报道的一种毁灭性传染病。此病在各种病名下遍及欧洲大部分地区，但均无病原特征的描述。兔出血症病毒（ＲＨＤＶ）是一种新发现的病毒，直径３２～３４ｎｍ，二十面体对称，无囊膜，存在于感染细胞的核和胞浆内。它对酸（ｐＨ３）、热（６０℃）、乙醚（２０％）和ＭｇＣｌ２（１ｍｏｌ／Ｌ）有坚强的抵抗力。在ＣｓＣｌ中的浮密度为１．３６～１．３８ｇ／ｃｍ２；在蔗糖梯度中的沉降系数为１６２Ｓ。它能凝集人红细胞，滴度可达１０×２１８以上。在细胞培养中很难适应。核酸为线状单股ＤＮＡ，末端有发夹结构。用体外合成的双股ＤＮＡ，取其酶切片段插入ＢＳ质粒后，转化ＤＨ大肠杆菌。从重组质粒提取的２个片段（ｐＹＣ－２和ｐＹＣ－９）以同位素或光敏生物素标记后，能与ＲＨＤＶ和一部分细小病毒杂交。在诊断中最有效的血清学试验为ＨＡ－ＨＩ和ＥＬＩＳＡ。灭活疫苗效果确实，已为所有发病各国所证实。根据以上特征，ＲＨＤＶ被认为是一种细小病毒样病毒，但欧洲学者持不同看法。     

用聚合酶链反应和酶联免疫吸附试验检测无包埋体对虾病毒

聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测证明,某虾场发病的中国对虾（Ｐｅｎａｅｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）感染无包埋体对虾病毒（ＮＯＳＶ）,或称中国对虾类杆状病毒（ＰＣＢＬＶ）;野生脊尾白虾（Ｅｓｏｐａｌａｅｍｏｎ ｃａｒａｉｎｉｃａｕｄａ）也感染ＮＯＳＶ,并可能经卵垂直传播;南美白对虾（Ｐｅｎａｅｕｓ ｖａｎｎａｍｅｉ）亦可感染该病毒而发病。经ＰＣＲ扩增纯化的皮下及造血组织坏死症杆病毒（ＨＨＮＢＶ）与ＮＯＳＶ的     

马传染性贫血病病毒L株前病毒全基因组核苷酸序列分析

 本实验所用的马传染性贫血病毒（ＥＩＡＶ）Ｌ株（ＥＩＡＶ－Ｌ）是我国研制成功的ＥＩＡＶ弱毒疫苗的原始强毒株。以ＥＩＡＶ－Ｌ感染马外周血液白细胞中ＤＮＡ为模板，利用ＰＣＲ技术，分４个片段扩增ＥＩＡＶ－Ｌ前病毒ＤＮＡ，并分别克隆到载体质粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ ＳＫ中，得到 ４个重组质粒ｐ２．８、ｐ２．４、ｐ３．１和 ｐ１．２，经酶切鉴定后测序。对测序结果分析、拼接，得到 ＥＩＡＶ－Ｌ前病毒基因组全序列。ＥＩＡＶ－Ｌ前病毒基因组全长 ８２３５ｂｐ，其中 Ｇ＋Ｃ含量为 ３８％。通过使用计算机软件ＤＮＡＳＩＳ分析，ＥＩＡＶ－Ｌ与马传贫驴强毒和马传贫驴白细胞疫苗毒序列同源性分别为９８．４％和９６．９％。同源性如此接近反映了它们之间的亲缘关系，另外 ＥＩＡＶ－Ｌ与驴强毒的同源性高于其与驴白细胞弱毒疫苗株的同源性，这符合驴白细胞弱毒疫苗株的衍生过程。基因组两端是长为３１６ｂｐ的ＬＴＲ，其中Ｕ３为１９７ｂｐ，Ｒ为８０ＢＰ，Ｕ５为３９ｂｐ。前病毒基因组有 ３个较大的开放阅读框架（ＯＲＦ），分别编码 ｇａｇ、ｐｏｌ和 ｅｎｖ基因。ｇａｇ基因位于 ７１３～１９１２位碱基之间，全长１２００ｂｐ；ｐｏｌ基因位于 １７０８～５１０９位碱基之间，全长     

北美鹅掌楸的一种新病毒病

北美鹅掌楸是一种观赏性很强的树种，１９８７年科研人员在卡罗来纳州的Ａｓｈｅ是一株较大的北美鹅掌楸上首次发现一种病毒病。利用嫁接接种、汁液接种等方法对研究，通过Ｊｏｅｌｌｏｏｓ转换电子显微镜（６０ＫＶ）观察病毒样本，进行血清学试验，证实这是一种不同于杨花叶病毒病的新病病毒病，Ａｓｈｅ县已发生小范围传播，应引起民重视，防止矮化大量发生。     

IVEM对生物制剂的研究

英国牛津病毒和环境微生物研究所（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＶｉｒｏｌｏｇｙ＆ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ,ＩＶＥＭ）,主要从事病毒和环境微生物分子水平的研究,其主要研究领域包括生物自然资源、生物多样性、环境污染、环境危险评估和气候变...     

从白车根草（Trifolium repens）上分离的一株苜蓿花叶病毒

从杭州药物试验场表现黄斑、花叶和皱缩症状的药用植物白车根草（Ｔｒｉｆｏｌｉｕｍｒｅｐｅｎｓ）上获得的一个病毒分离物ＳＨｙ，经汁液磨擦接种在豇豆、赤豆、菜豆、鸡冠花、番杏、黄瓜上引起局部侵染，在大豆、假酸桨、洋酸桨、苋色藜、昆诺藜、灰藜、千日红上引起系统花叶或黄斑，在心叶烟、普通烟、黄花烟上引起系统黄斑和坏死，ＳＨｙ在寄主反应上与其它作者所报道苜蓿花叶病毒的特征基本相符且类似于Ｋｒｅｉｔｌｏｗ等所描述的黄色块斑株系。通过免疫电镜检查证实ＳＨｙ具备苜蓿花叶病毒的粒子特征并与已知苜蓿花叶病毒有血清学反应，ＳＨｒ能经桃蚜以非持久性方式传播。根据以上结果，病毒分离物ＳＨｙ被确认为苜蓿花叶病毒（ＡｌｆａｌｆａＭｏｓａｉｃＶｉｒｕｓ，ＡＭＶ），最后还就ＡＭＶ在我国作物上侵染与为害的情况进行了分析讨论。     

烟草感染马铃薯Y病毒脉坏死株系后PPO活性及其同工酶变化的研究

感染马铃薯Ｙ病毒脉坏死株系（ＰＶＹ＾Ｎ）后,敏感烟草体内的多酚氧化酶（ＰＰＯ）活性升高,而抗性烟草的ＰＰＯ活性降低,但其活性值均高于敏感烟草健康植株;敏感烟草从接种ＰＶＹ＾Ｎ后第８ｄ起出现２条新的ＰＰＯ同工酶谱带,而且随着病害程度的加重其强度增加,抗性烟草则没有新的ＰＰＯ同工酶谱带出现,在未接种的情况下,抗性烟草体内的ＰＰＯ活性明显高于敏感烟草,其ＰＰＯ同工酶谱带数比敏感烟草多１条。     

乙肝病毒感染者血清s,e抗原抗体系统与HBV—DNA的相关性

乙肝病毒感染者血清ｓ、ｅ抗原抗体系统与ＨＢＶ－ＤＮＡ的相关性黄静，龙尧，张武英（广东医学院附属医院感染内科，湛江５２４００１）以往临床上乙肝病毒（ＨＢＶ）感染者病毒标记物的检测主要利用反向血凝法（ＲＰＨＡ）和酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测血清ＨＢｓ...     

应用昆虫杆状病毒载体在昆虫细胞中表达乙肝表面抗原

人乙型肝炎病毒（ａｄｒ亚型）表面抗原Ｓ基因克隆到ＰｕＡＣ－５苜蓿尺蠖核型多角体病毒转移载体上，所构建的重组转移载体质粒与野生型ＡｃＮＰＶＤＮＡ共转染Ｓｆ－２１细胞，经空斑法筛选和纯化，得到了含ＨＢＶＳ基因的重组病毒ＡｃＮＰＶＳ．用放射免疫法测定了ＡｃＮＰＶＳ感染的Ｓｆ－２１细胞及其培养液中的ＨＢｓＡｇ，总表达量为１．２２μｇ／１０＾６细胞。     

引起二月兰花叶病的芜菁花叶病毒研究

在表现花叶、植株矮化、茎叶坏死和畸形的十字花科观赏植物二月兰（Ｏｒｙｃｈｏｐｈｒａｇｍｕｓｖｉｏ－ｌａｃｅｕｓ）上分离到一种线状病毒,其病毒粒子分布范围为７８０～８００ｎｍ．通过寄主反应测定、病毒提纯和形态观察、血清学反应测定,确定该病毒为芜菁花叶病毒（ＴｕＭＶ）．病毒分离物ＡＨ１回接二月兰无病毒苗,引起黄斑、系统花叶、系统坏死和畸形,在供试十字花科植物上均产生系统侵染,并在洋酸桨等茄科供试寄主上引起系统症状．ＡＨ１与来自十字花科甘蓝型油菜上的一个ＴｕＭＶ有紧密的血清学关系,但在寄主反应上与之有一定差异．对自然发病的二月兰植株和接种ＡＨ１分离物的系统寄主用ＴｕＭＶ抗血清进行免疫电镜观察,均检测到线状病毒粒子,用ＣＭＶ抗血清、ＴＭＶ抗血清进行检测,均没有发现相关病毒．作者认为：ＴｕＭＶ即是引起二月兰花叶病的病原．这是ＴｕＭＶ侵染该属植物的首次报道．     

转基因水稻对水稻齿叶矮缩病毒（RRSV）抗生评价

采用人工繁殖带毒褐飞虱（Ｎｅｌａｐａｒｖａｔａ Ｌｕｇｅｎｓ）攻妆种，结合症状观察和ＲＴ－ＰＣＲ检测方法，对５７个含有水稻齿叶矮缩病毒（ＲＲＳＶ）Ｓ７，Ｓ９和Ｓ１０基因片段的转基因水稻对水稻齿叶矮缩病毒的抗生进行评价。总体而言，大多数转基因稻发病率比受体品的发病率要低。从中初步得到对ＲＲＳＶ具有较强抗生的水稻转基因第３１５和３１６，其发病率分别为１５．８％和１３．３％，具有中等抗生的水稻转基因系１