平邑甜茶与M_7离体叶片不定芽再生的研究

以苹果砧木平邑甜茶(Malus hupehensisRehd)和M7(Malus pumila Var.ParadisiacaSchneid)的组培苗叶片为材料,研究了暗培养、接种方式和植物生长调节剂对叶片不定芽再生的影响。结果表明,适合二者叶片不定芽再生的最佳暗培养时间是14d。平邑甜茶叶片以远轴面向下接触培养基再生效果好,叶片接种方式对M7叶片不定芽再生无显著影响。适合平邑甜茶叶片不定芽再生的最佳培养基是MS+6-BA2.0mg/L+IBA0.1mg/L,再生率达93.3%。适合M7叶片不定芽再生的最佳培养基是MS+6-BA4.0mg/L+IBA0.3mg/L,再生率达96.7%。适合平邑甜茶新梢伸长的最佳培养基是MS+6-BA0.3mg/L+IBA0.03mg/L+GA30.5mg/L,适合M7新梢伸长的最佳培养基是MS+6-BA0.5 mg/L+IBA0.05mg/L+GA31.0mg/L。适合平邑甜茶生根的最佳培养基为1/2MS+IBA0.1mg/L,生根率为86.7%。适合M7生根的最佳培养基是1/2MS+IBA1.0mg/L,生根率为93.3%。     

红叶石楠离体培养与高效再生体系建立

以红叶石楠(Photinia×frasery)带芽茎段、叶片为外植体,对其启动培养、叶片愈伤诱导与分化、芽增殖、生根培养及试管苗驯化等技术进行了较为系统的研究,建立了红叶石楠离体培养的高效再生体系。结果表明,幼茎启动培养适宜培养基为MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L+GA0.5mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,诱导率达63.3%;叶片愈伤诱导适宜的培养基为MS+6-BA0.5mg/L+2,4-D1.0mg/L+NAA1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,愈伤诱导率达86.0%;愈伤分化不定芽的适宜培养基为N6+6-BA1.5mg/L+IAA0.1mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,诱导率达21.6%,增殖率为1.4倍;芽增殖培养适宜的培养基为MS+6-BA3.0mg/L+KT0.5mg/L+NAA0.3mg/L+GA0.7mg/L+蔗糖30g/L+琼脂7g/L,最高增殖率达6.1倍;生根培养方法为用25mg/LNAA溶液浸泡0.5～1.0h后接种于1/2MS培养基中,生根率达93.4%以上;试管苗驯化的适宜混合基质为泥炭∶珍珠岩=3∶1,成活率可达96.7%。     

霞晖6号桃离体快繁及叶片愈伤诱导技术

以霞晖6号春季嫩梢为外植体材料,通过消毒获得无菌苗,比较不同基本培养基及激素种类浓度对桃增殖、生根的影响,并筛选叶片愈伤诱导条件。结果表明:最适增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L+2.0%蔗糖+5.0 g/L琼脂粉,其平均增殖倍数可达5.2棵/月;适宜生根培养基为MS(大量元素减半)+IAA 2.0 mg/L+2.0%蔗糖+5.0g/L琼脂粉,直接光照培养生根;叶片愈伤诱导最佳培养基为MS+TDZ 5.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L+2.0%蔗糖+5.0 g/L琼脂粉,其诱导率可达100%;加入PVP具有较好的抗氧化作用。     

霞晖6号桃离体快繁及叶片愈伤诱导技术

以霞晖6号春季嫩梢为外植体材料,通过消毒获得无菌苗,比较不同基本培养基及激素种类浓度对桃增殖、生根的影响,并筛选叶片愈伤诱导条件。结果表明:最适增殖培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+IBA 0.5 mg/L+2.0%蔗糖+5.0 g/L琼脂粉,其平均增殖倍数可达5.2棵/月;适宜生根培养基为MS(大量元素减半)+IAA 2.0 mg/L+2.0%蔗糖+5.0g/L琼脂粉,直接光照培养生根;叶片愈伤诱导最佳培养基为MS+TDZ 5.0 mg/L+IBA 0.2 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L+2.0%蔗糖+5.0 g/L琼脂粉,其诱导率可达100%;加入PVP具有较好的抗氧化作用。     

三苞唇柱苣苔离体培养体系的建立

以三苞唇柱苣苔(Chirita tribracteata W.T.Wang)的幼嫩叶片为外植体,开展外植体消毒灭菌、叶片愈伤组织的诱导及分化、继代增殖培养、生根培养以及植株玻璃化的研究。结果表明:叶片的灭菌方法可采用乙醇浸泡10 s结合升汞浸泡12~16 s;叶片的最佳愈伤组织诱导、分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L;继代增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.1~0.5 mg/L或者MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1~0.5 mg/L;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.1~0.3 mg/L,生根率为100.00%;培养基中不添加6-BA或添加低浓度的6-BA或者添加适量活性炭均可减轻植株的玻璃化。     

金边北海道黄杨再生体系的建立及其快繁初探

[目的]探索金边北海道黄杨再生体系建立的方法和条件。[方法]以MS为基本培养基,配置不同种类和不同浓度激素的培养基,对金边北海道黄杨幼嫩叶片和腋芽进行不定芽诱导培养、增殖培养和生根培养。[结果]MS可作为金边北海道黄杨再生体系的基本培养基。6-BA配合NAA有利于叶片、腋芽愈伤组织和不定芽的诱导,以MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L培养基效果最佳,腋芽诱导率高达66.67%。较高浓度的6-BA配合较低浓度的NAA有利于丛生芽的增殖,以MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.2 mg/L培养基增殖效果较理想,增殖率高达328.57%。MS+IAA0.5 mg/L+蔗糖3%或1/4MS+IAA0.5 mg/L+蔗糖2%可获得最佳生根效果。[结论]该体系的建立为金边北海道黄杨种苗快速繁殖提供参考依据。     

蒙菊(Chrysanthemum mongolicum)再生体系的建立

以蒙菊的叶片为试验材料,对蒙菊(Chrysanthemum mongolicum)再生体系建立技术进行了初步探索。结果表明,蒙菊叶片愈伤诱导培养以MS+6-BA 2.0 mg/L+2,4-D 0.3 mg/L为最适培养基,出愈率87.50%;愈伤组织分化培养以MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L为最适培养基,分化率为67.50%;生根培养以1/2MS+NAA0.3 mg/L+蔗糖15 g/L为最适培养基,生根率为92.50%,平均根数5.33条,移栽成活率77.50%。     

苜蓿胚性愈伤组织诱导及植株再生研究

以苜蓿5～7 d苗龄无菌苗的子叶和下胚轴为外植体,研究培养基中不同激素和浓度配比对苜蓿愈伤组织诱导和分化的影响。结果表明,MS+2,4-D 2.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L愈伤组织诱导率达100%,且愈伤组织状态良好,增殖速度快。MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.05 mg/L为苜蓿胚性愈伤组织诱导的适宜培养基,诱导率为37.8%。胚性愈伤组织分化成苗培养基为MS+6-BA0.2 mg/L+NAA 0.01 mg/L,生根培养基为1/2MS+NAA 0.02 mg/L+蔗糖10.0 g/L。     

一品红品种柠檬雪叶片愈伤组织的诱导及再生技术

以具有黄绿色苞片的一品红品种柠檬雪的叶片为外植体,配以不同浓度的NAA和6-BA组合,对其愈伤组织的诱导及再生进行探讨.研究结果表明,生长素为柠檬雪愈伤组织诱导的主要影响因子,细胞分裂素对愈伤组织生长有促进作用;柠檬雪叶片最适合的愈伤组织诱导培养基为MS+NAA 1.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,分化培养基为MS+NAA 0.2 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,增殖培养基为MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,生根培养基为1/2 MS+NAA 0.5 mg/L.     

新梨七号茎段组织培养再生植株的研究

从植物生长调节物质的不同配比、不同部位诱导不定芽以及炼苗移栽等几个方面对新梨七号离体茎段再生进行研究,获得茎段产生愈伤组织及不定芽再生的适宜培养基,分析以上因素对新梨七号再生体系建立的影响。结果表明,新梨七号的茎段最适宜愈伤诱导培养基为MS+2,4-D 1.0mg/L+6-BA 0.5mg/L,愈伤组织诱导率为100%;茎段诱导不定芽的最佳培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L,诱导率为95%,增殖倍数为7.29;最适宜不定芽生根培养基为1/2MS+IBA 2.5mg/L+蔗糖15g/L,生根率为90%;封口炼苗时间14d为最好,移栽时间7月最佳。     

‘Siberia’百合再生体系的建立

以东方百合‘Siberia’离体鳞片为外植体,研究不同激素质量浓度对芽的诱导、增殖、小鳞茎形成、叶片和叶柄再生及生根的影响。结果显示:最适不定芽诱导培养基为MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.5mg/L,分化率85%;最适增殖培养基为MS+6-BA 0.7mg/L+NAA 0.2mg/L,芽增值系数为3.83;不定芽形成鳞茎的适宜培养基为:MS+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.5mg/L+7%蔗糖,增值系数2.47。鳞片叶片的最适再生培养基为MS+6-BA 0.5mg/L+2,4-D 1.0mg/L,分化率为92.5%;叶柄的最佳再生培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L,分化率为83.3%;暗培养对鳞片叶片及叶柄的再生无显著性的差异,分化率均在80%以上;最适生根培养基为1/2MS+NAA 0.2mg/L,生根率100%。     

桂糖46号组培快繁技术研究

以甘蔗新品种桂糖46号的幼嫩叶片作为外植体,采用不同2,4-D浓度对幼嫩叶片的切片进行愈伤诱导;以不同6-BA浓度对甘蔗愈伤进行分化诱导和增殖培养;以不同NAA浓度诱导甘蔗组培苗生根。结果表明:适宜甘蔗幼嫩叶片愈伤诱导的培养基以改良MS+2,4-D 1.5mg/L为宜,诱导分化培养以改良MS+6-BA 2.0mg/L为宜,增殖培养以改良MS+6-BA 1.0mg/L为宜,适宜的生根培养基为改良MS+NAA 6.0mg/L。     

葡萄风信子基因转化受体系统的建立

以葡萄风信子(Muscari botryoides Mill)品种"紫葡萄"(Cantat)的鳞茎和叶片为外植体,通过植物组织培养再生系统的建立和抗生素敏感性试验,建立了稳定的葡萄风信子基因转化受体系统。结果表明,葡萄风信子的鳞茎和叶片均可被诱导形成大量的愈伤组织;叶片诱导愈伤组织的最适培养基为MS+0.6 mg/L 2,4-D+0.1mg/L 6-BA,其诱导频率可达100%;鳞茎诱导愈伤组织的最适培养基为MS+3.0 mg/L 2,4-D+0.3 mg/L 6-BA,其诱导频率达91.2%;愈伤组织分化不定芽的最适培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,生根最适培养基为1/2 MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1%AC;筛选卡那霉素的临界质量浓度为60 mg/L,羧苄青霉素的适宜质量浓度为300 mg/L。     

高山红景天叶片愈伤组织诱导与植株再生

以高山红景天叶片作为外植体,研究了影响愈伤组织诱导、芽增殖、生根的主要因素。结果表明:高山红景天叶片切块诱导愈伤组织的最佳培养基为MS 6-BA 2mg/L NAA0.5mg/L,诱导率达88.33%;高山红景天叶片切块经诱导可产生3种色泽的愈伤组织,其中只有绿色愈伤组织诱芽容易,绿色愈伤组织在附加1mg/L6-BA 0.1mg/LNAA的MS培养基中有利于芽的分化和增殖,培养7周左右,平均每个外植体分化形成的再生小植株数达到21.33个;增殖苗转入1/2MS培养基中生根率高达100%。     

丰香草莓叶片的植株再生研究

[目的]为采用叶片组织培养技术进行大规模生产草莓种苗提供依据。[方法]以丰香草莓叶片为外植体,用4种不同的培养基诱导其愈伤组织,并对愈伤组织进行扩繁,筛选最佳的诱导培养基。[结果]MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基最快产生愈伤组织,愈伤组织诱导率、生根率、不定芽诱导率均最高,分别为69.4%、10%、11.67%,且愈伤组织体积较大,生根总数最多,不定芽生长茂盛,叶片多而大,最终获得具根系可移植室外的完整植株543株,增殖扩繁倍数达50,增殖效果极好。MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1mg/L培养基的愈伤组织诱导率为63.8%,且愈伤组织体积最大。[结论]草莓叶片诱导愈伤组织、不定芽并最终获得大量再生植株的最佳培养基是:MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L。     

番茄叶片再生系统建立的研究

比较了不同基本培养基、不同激素及其不同浓度组合对4个番茄栽培品种叶片诱导愈伤组织、不定芽分化及其生根的效果.结果表明:MS+6-BA 3.0mg/L+IAA0.2mg/L+蔗糖30 mg/L(pH=5.8)对愈伤组织诱导及诱导愈伤组织分化不定芽的效果最佳;MS+IAA 0.1mg/L+蔗糖20mg/L培养基对生根最好。     

拂子茅组培再生体系的建立

为建立拂子茅植株再生体系,以茎尖为外植体,对拂子茅花叶灭菌方式以及愈伤组织诱导和植株再生培养条件进行分析与筛选。结果表明:用75%乙醇灭菌30 s,再用0.1%升汞灭菌12 min,灭菌效果最佳,去污染率达到90%;在MS+6-BA 0.2 mg/L+2,4-D 4 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L的培养基上进行愈伤组织诱导,诱导率达33.4%;用MS+6-BA 2mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂7 g/L培养基诱导不定芽再生,诱导率最高、可达76.9%;用MS基本培养基诱导不定芽生根,生根率达到100%。     

菘蓝组培再生体系的建立

以菘蓝(Isatis indigotica)无菌苗的叶片和叶柄为外植体,分别接种到添加不同生长调节剂浓度的MS培养基上,研究不同生长调节剂配比对菘蓝愈伤组织诱导与分化的影响,建立菘蓝组培再生体系。结果表明,叶片是菘蓝愈伤组织形成的最佳外植体,菘蓝愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L,愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L。以1/2MS培养基添加0.1 mg/L NAA可使再生植株的生根率达到92.3%。     

黑莓叶片组织培养及植株再生的初步研究

以美国黑树莓叶片作为外植体,以MS为基本培养基,添加不同浓度的6-BA、NAA或IAA进行愈伤组织诱导及植株再生试验.结果表明:树莓叶片外植体在培养基MS+6-BA 2.0～ 4.0 mg/L+NAA(IAA)0.01～0.5 mg/L都能不同程度地形成愈伤组织 ,但以MS+6-BA 4.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L和MS+6-BA 4.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L愈伤组织的诱导率最高,诱导率可达100%;所试验的各种不定芽分化培养基,都能不同程度地诱导愈伤组织分化出不定芽,在添加6-BA 2.0 mg/L和NAA 0.01 mg/L的MS培养基上,愈伤组织分化不定芽的比例最高,达49.7%的;所产生的不定芽在1/2 MS+NAA 0.1 mg/L的培养基上的生根率可达89.3%.     

番茄组织培养与试管苗繁育

[目的]建立番茄的高效再生体系,为下一步进行番茄叶绿体遗传转化研究奠定基础。[方法]通过培养经无菌处理的番茄种子获得无菌苗,切取无菌苗的叶片置于附加有激素组合为3.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA的MS培养基中诱导愈伤组织产生,再利用愈伤组织,比较不同浓度激素组合对番茄愈伤组织分化不定芽与不定芽生根的影响。[结果]MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA+30 mg/L蔗糖培养基对诱导愈伤组织分化不定芽的效果最佳;1/2MS+1.0 mg/L IAA培养基对生根最好。[结论]适宜激素浓度的选择是番茄高效再生体系建立的关键。