水牛胚胎附植过程中瘦素及其受体在子宫内膜中的表达

[目的]探讨瘦素及其受体ob-Rb在水牛子宫内膜中的表达规律及其对水牛胚胎附植的影响。[方法]母水牛经孕马血清促性腺激素(PMSG)超排后与公牛交配,分别在交配后第0、5、7、9和15天各屠宰10头水牛,分别取胚胎附植部位的子宫组织,提取瘦素及其受体总RNA。利用RT-PCR方法检测不同时期瘦素mRNA及其受体表达情况。[结果]瘦素在胚胎附植过程中在水牛子宫内膜都有表达,各时期的表达水平差异不明显(P>0.05),Ob-Rb在胚胎附植过程中亦有表达,但是交配后第7、9和15天的表达水平与0和5天差异显著(P<0.05),并且在妊娠期0～7天内表达水平上升,7天达到峰值,然后下降。[结论]瘦素及其受体Ob-Rb可能不仅参与胚胎的附植,而且也可能参与附植后胚胎的生长发育。     

机械分割的小鼠桑椹胚和囊胚的发育能力

利用机械方法二等份分割小鼠的桑椹胚、早期囊胚和晚期囊胚,并在体外培养分割的半胚到晚期囊胚。将这些囊胚移植到假孕受体鼠子宫内以评价他们附植后发育的能力。在体外培养中发现,囊胚期分割的胚胎比桑椹胚期分割的胚胎有较高的成活率。通过附植前胚胎细胞数量分析得知,囊胚期半胚的细胞数量大约是对照组的一半,但内细胞团细胞与整个胚胎细胞的数量比不变。虽然从半胚发育到囊胚期的胚胎附植率仅略低于对照组,但半胚形成胎儿的能力却显著低于全胚。组织学分析表明,附植后的这种低成活率现象是由于缺乏卵柱发育造成的,而此卵柱则与半胚中的内细胞团的细胞数量减少有关。移植到第3天假孕受体鼠中的半胚,附植后的发育情况明显地比移植到第4天受体中的好。     

NO对小鼠早期胚胎发育和附植的影响

一氧化氮（NO）是一种具有生物活性的信号分子和细胞毒性因子,它广泛参与体内的生理和病理过程。近年来,国内外的研究学者做了很多关于NO在胚胎附植过程中的作用机理的研究,结果表明：NO参与妊娠和胚胎附植的过程,并对早期胚胎的发育既有促进作用,也有抑制和毒性作用。     

选择素及其在胚胎附植中的作用

选择素是已知的细胞黏附分子(CAMs)家族之一,共有3个成员组成,其主要生理功能是在炎症发生时介导白细胞与血管内皮细胞之间的起始黏附。近年来研究资料显示,选择素还在受精、肿瘤细胞转移和胚胎附植等过程中发挥着重要的作用,其中滋养层L-选择素介导胚泡滋养层与子宫之间的相互作用,在胚胎附植时发挥桥梁作用。     

Smad4在附植期绵羊子宫内膜的分布

为了检测转化生长因子β超家族蛋白共同的胞质内信号转导分子Smad4在绵羊胚胎附植期子宫内膜的分布,探索Smad4上游信号分子在绵羊胚胎附植过程的作用机制,于绵羊交配后12 dpc(12 day post coitus),16 dpc,20dpc,24 dpc,28 dpc,32 dpc解剖取材子宫组织与胚胎组织,应用免疫组织化学技术,研究了Smad4蛋白在子宫内膜的分布。结果显示,Smad4蛋白定位于子宫腺上皮和子宫腔面上皮细胞以及上皮下方的基质中。根据实验观察得出初步结论,Smad4表达于附植早期绵羊子宫内膜,子宫内膜组织有接受转化生长因子β超家族蛋白信号作用的能力,Smad4在介导胚胎附植到母体子宫内膜的过程中发挥作用。     

母畜化胎的原因分析及预防措施

在生产实践中经常发生胚胎死亡的现象,而大多是在妊娠早期特别是胚胎附植前后,尤以马、猪多见。导致母畜化胎、死胎和隐形流产的原因很多,情况十分复杂。而且其隐蔽性强、不易发现,很难控制,是养殖业很难解决的棘手问题。     

母畜化胎的防治方法

在生产实践中经常发生母畜胚胎死亡的现象,而大多是在妊娠早期,特别是在胚胎附植前后,尤以马、猪多见。导致母畜化胎、死胎和隐形流产的原因很多,情况十分复杂,而且其隐蔽性强,不易发现,很难控制,是养殖业很难解决的棘手问题。     

热应激对小鼠卵母细胞和附植前胚胎及其生长内环境氧化损伤的影响

 【目的】研究热应激对机体（肝脏）以及生殖系统氧化、卵母细胞和附植前胚胎氧化及发育能力的影响,探讨热应激影响卵母细胞及附植前胚胎发育能力的机制。【方法】分别用总谷胱甘肽和微量丙二醛测定试剂盒检测热应激后小鼠卵母细胞、附植前胚胎和组织器官内总谷胱甘肽（total Glutathione,TGSH）、丙二醛（MDA）的含量,并且观察后续胚胎的发育情况。【结果】母体经35℃处理6和12 h后,其体内的卵母细胞（6 h）和发育至1～3 d的胚胎（桑椹胚前期,12h）的后续胚胎发育率显著降低,胚胎中TGSH含量下降（P＜0.01）、MDA含量升高（P＜0.01）,卵母细胞中二者的含量未有变化;发育至第4天、第5天的胚胎（桑椹胚和囊胚）中TGSH和MDA的含量及胚胎发育率均未有变化（P＞0.05）;发育至第1～5天的体外培养的胚胎分别经39℃处理12 h后,胚胎中TGSH和MDA及其发育率均未有变化（P＞0.05）;随着热应激温度升高和时间的延长,肝脏和输卵管中TGSH显著降低、MDA显著升高;当温度达到41℃时,卵巢和子宫中TGSH显著降低、MDA显著升高。【结论】桑椹胚以前的胚胎遭受母体热应激后,发育能力降低,这与热应激所诱导的氧化损伤密切相关,但是母体热应激后卵母细胞后续胚胎的发育能力降低与氧化损伤无关。体外培养的胚胎经39℃处理12 h后,对附植前胚胎氧化损伤和孵出率均无影响。     

αV,β3整合素在绵羊体外受精胚胎的表达模式研究

[目的]探讨胚胎附植调控因子αV,β3整合素在绵羊早期体外胚胎的表达情况,为早期胚胎发育及附植调控机理提供理论依据.[方法]采用RT-PCR和间接免疫荧光染色技术,检测绵羊体外受精个发育阶段胚胎中αV及β3整合素mRNA的表达模式及蛋白表达定位情况.[结果]在绵羊2-细胞至桑椹胚体外胚胎中未能检测到整合素αV及β3 mRNA的表达,但可以检测到囊胚期胚胎有微量整合素αV及β3 mRNA的表达.并且在绵羊第7d扩张囊胚和第8d孵化囊胚上均可检测到整合素αVβ3蛋白的表达,且蛋白表达主要分布在胚胎滋养层细胞周围,孵化囊胚蛋白表达量略高于扩张囊胚.[结论]αV,β3整合素在绵羊早期胚胎发育及附植过程中具有重要调控作用.     

TLR4基因在绵羊不同生理状态下子宫内膜组织中的mRNA表达

为了研究Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)在绵羊胚胎附植期和发情周期子宫内膜中mRNA的表达模式。采用半定量RT-PCR和实时荧光定量RT-PCR分别检测妊娠21 d母羊全身组织和妊娠9、13、17、21、25 d的母羊子宫内膜组织TLR4基因的表达以及绵羊卵泡期与黄体期母羊子宫内膜组织TLR4基因的表达。结果表明,TLR4基因在肝脏、脾脏、卵巢、输卵管、子宫、小肠、膀胱、肌肉及松果体等组织出现表达,其中在输卵管、卵巢、子宫、膀胱、脾脏及松果体中表达量较高,在肝脏、小肠、肌肉中表达较弱,而在心脏、垂体、脂肪等组织中不表达。从妊娠9 d开始,绵羊胚胎TLR4基因表达量呈逐渐下降趋势;至胚胎附植点17 d,TLR4基因表达量最低,之后又呈现上升趋势,到25 d达到峰值。不管是在细毛羊还是在湖羊子宫内膜组织中检测,TLR4基因黄体期的表达水平均显著高于卵泡期(P 0. 05)。说明TLR4的mRNA表达具有组织特异性,在胚胎附植期绵羊子宫内膜中呈现先低后高的趋势,以及其在绵羊发情周期中表达出现黄体期显著高于卵泡期现象,也初步说明了TLR4可能在胚胎附植早期和发情周期中均发挥一定作用。     

胚胎着床期间母-胎对话研究进展

哺乳动物胚胎着床时,母体和胚胎之间进行精密的分子对话和信号交换,以使两者达到协调。母体和胚胎来源的类固醇激素、生长因子、细胞因子、整合素等在胚胎着床及母体妊娠识别过程中发挥着重要的作用,使母体-胎儿间形成一个紧密联系的对话体系。综述了胚胎着床过程中母-胎对话的研究进展。     

胚胎分割技术在牛育种中的研究进展

胚胎分割技术是动物克隆技术之一,是胚胎生物工程技术的重要组成部分。牛胚胎分割技术是在牛胚胎移植技术的基础上发展起来的,其研究已经较为完善。牛胚胎分割的成功,是增加胚胎数目和生产同卵双胎或多胎、获得更多牛犊、扩大优良畜种繁殖后代的有效方法。笔者对胚胎分割技术在牛育种方面的应用进行了介绍。     

白血病抑制因子及其在胚胎发育和胚泡着床中的生理功能

综述了LIF基因和蛋白质结构、LIF受体信号转导、LIF在子宫内膜中基因表达,探讨了LIF在胚胎发育和胚泡着床中的生理功能。     

季节对山羊胚胎移植中卵巢及胚胎发育的影响

[目的]探究季节对山羊胚胎移植的影响。[方法]以波尔山羊与槐山羊、豫西白山羊的杂交后代为试验材料做胚胎移植试验,研究相同的处理方案、季节对卵巢及胚胎发育的影响。[结果]卵巢发育以繁殖季节为好,全部为良等级以上,其中好等级占66.7%,非繁殖季节没有好等级,只有良、一般等级;繁殖季节超排的卵泡基本都已排卵,达到84.2%以上,非繁殖季节超排的卵泡数量虽不少,但是排卵形成黄体的少,仅有33.3%;繁殖季节里冲出的胚胎发育到了桑椹胚至早期囊胚阶段,非繁殖季节冲出的胚胎发育到了8~16细胞期。[结论]山羊胚胎移植存在季节性因素的影响,相同的处理方案下,繁殖季节与非繁殖季节超排后卵巢发育存在差异,胚胎发育程度也存在差异。     

选择素及其配体在哺乳动物胚胎着床过程中的作用

选择素是一种非免疫来源的多价糖类结合蛋白,为细胞粘附分子(celladhesionmolecules,cAMs)超家族的一员,选择素家族有3个结构类似的成员:E-选择素、L-选择素、P-选择素,它们在炎症发生时可介导白细胞与血管内皮细胞之间、白细胞与白细胞及白细胞与血小板之间的粘附。近年来研究发现,选择素及其配体还在精卵识别、滋养层细胞和子宫内膜的相互识别、滋养层细胞侵入、胎盘形成等过程中发挥重要作用。在此,主要对E-选择素、L-选择素及它们的配体在哺乳动物胚胎着床过程中发挥的作用及其表达调节作一综述。     

胚泡植入的分子机理

胚泡植入是在各级因子组成的复杂网络系统调节下,胚泡与子宫内膜相互识别、定位、轴附和侵入,从而使胚泡成功地植入。目前的研究表明,许多活性分子参与胚胎植入的调节过程,而对细胞因子和生长因子及其受体的相互作用及整合素受体与其配体相互作用所引起信号转导的研究,将对揭示子宫内膜变化和胚泡植入的分子机理具有重要意义。     

干扰素对附植前后哺乳动物妊娠识别与维持的作用

哺乳动物胚泡附植过程中能产生一种特异的妊娠相关蛋白——干扰素,它对妊娠的识别与维持十分重要。综述了绵羊、牛、猪、红鹿早期胚胎发育期间所产生的干扰素及其作用。     

胚胎败育与内源激素变化的关系研究进展

总结了近年来内源激素的变化对胚胎发育影响的研究,揭示胚胎败育与内源激素的关系,为深入研究打下基础。     

山羊胚胎移植研究进展

概述了山羊胚胎移植的研究进展,包括同期发情、超数排卵、胚胎分割、体外受精、核移植、胚胎移植、胚胎冷冻及其存在的问题和展望。     

向日葵幼胚培养技术及其在育种中的应用

向日葵生产中面临着严重的病虫害问题，选育抗病品种是向日葵育种工作的主要目标之一。某些向日葵野生种中含有对向日葵栽培种主要病虫害的抗性基因，目前，通过种间杂交等手段可以将向日葵野生种中的抗性基因导入栽培种中，获得抗病材料，选育出抗病新品种，但种间杂交属于远缘杂交，不易获得成功，因此将幼胚培养技术同常规育种程序相结合，借助幼胚培养技术可以克服远缘杂交中胚败育，缩短育种周期，迅速选育出抗病向日葵新品种。本文将从种间杂交设计、培养基准备、幼胚离体培养的无菌操作、幼苗移栽及后期温室管理几个方面对幼胚培养技术在向日葵育种工作中的应用作简要介绍.