薄皮甜瓜离体再生体系的优化

通过器官发生途径诱导形成不定芽,建立薄皮甜瓜‘IVF05’植株再生体系,探讨不同外植体及不同的激素组合对不定芽再生的影响。结果表明,子叶近胚轴端外植体的不定芽再生率为90.00%,子叶节的再生率为85.00%,子叶远胚轴端外植体的再生率为31.43%,下胚轴的再生率为0,子叶近胚轴端是‘IVF05’不定芽分化的理想的外植体。不定芽诱导中最适宜的培养基为MS+ABA 0.5 mg·L-1+6-BA 1.0 mg·L-1,在此培养基上产生的愈伤较少,能正常分化的不定芽较多,不定芽的生长较快。在MS+6-BA 0.05 mg·L-1的不定芽伸长培养基上,分化的不定芽能够伸长长大。在MS+IAA 0.2 mg·L-1的生根培养基上无根苗容易生根。从外植体培养到获得完整再生植株需50⁶0 d。     

翠菊‘花束绯红’叶片的植株再生体系建立

以翠菊‘花束绯红’无菌苗为材料,研究了植物生长调节剂浓度及组合、光照条件、不同附加物对叶片及其愈伤组织再生植株的影响。结果表明:(1)在光照培养条件下,诱导翠菊叶片不定芽形成的最适培养基为MS+6-BA3.0mg·L-1+IBA1.0mg·L-1,诱导率为56.7%,平均不定芽数为3.3;(2)黑暗培养不利于叶片不定芽的分化,但促进叶片愈伤组织的形成;(3)培养基中分别添加脯氨酸、水解酪蛋白和NH4NO3等均能明显促进愈伤组织不定芽的诱导,最适培养基为MS+6-BA1.0mg·L-1+IBA0.1mg·L-1+脯氨酸300mg·L-1,诱导率为82.8%,平均不定芽数为4.5;(4)不定芽移到幼苗生根培养基(1/2MS+IBA0.1mg·L-1)上,生根率为89.1%,移栽后成活率达89.3%。     

金樱子(Rosa laevigata Michx.)叶片直接再生不定芽体系的建立

以金樱子组培苗的划伤叶片为外植体,研究了不同植物生长调节剂配比组合、暗培养时间、添加物L-脯氨酸、叶片不同部位对不定芽直接再生的影响。结果表明:当TDZ浓度为1.5 mg·L^-1、NAA浓度为0.000 5 mg·L^-1时,不定芽直接发生率最高,为9.5%;不同暗培养时间对不定芽直接诱导具有一定影响,暗培养时间为10 d时不定芽的直接发生率最高,为10.5%;添加了不同浓度的L-脯氨酸后不定芽的诱导率不增反降,所以以不添加L-脯氨酸为宜;叶片不同部位的再生率比较中,仅带叶叶柄可直接诱导出不定芽。综上所述,叶片直接再生不定芽的诱导方法是,以金樱子带叶叶柄为外植体,在直接诱导培养基上1/2MS+TDA 1.5 mg·L^-1+NAA 0.000 5 mg·L^-1+CH 100 mg·L^-1+AgNO3 10 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂7.5 g·L^-1,暗培养10 d后,转至正常光周期下培养3周左右,不定芽诱导率最高,为10.5%。所得不定芽在增殖培养基MS+NAA 0.1 mg·L^-1+6-BA 1.0 mg·L^-1生长3周后,增殖系数可达到3.5左右;将丛生芽切割成单芽后转入不含任何激素的MS培养基壮苗3周,幼苗可长高至3~5 cm;再转入MS+NAA 0.1 mg·L^-1培养基中生根,1个月后生根率达95%。     

车轮梅茎段高效再生体系的建立

 以车轮梅 (Rhaphiolepis indica L.)茎段为外植体。探讨基本培养基种类、植物生长调节剂组合、蔗糖浓度和AgNO3等因素对茎段器官发生和植株再生的影响。结果表明：MS+6-BA 2.0 mg·L^-1 +NAA 0.5 mg·L^-1 + AgNO3 1.0 mg·L^-1+蔗糖40 g·L^-1培养基最适合不定芽的分化和增殖,不定芽分化率达90%以上,平均每外植体分化不定芽数达5.38个。不定芽可在1/2MS培养基中有效伸长,适宜生根培养基为1/2MS+NAA 1.0 mg·L^-1,生根率达到100%。     

东北百里香组培再生体系的建立

 以中国特有地被植物东北百里香为试材,研究了植物生长调节剂组合对腋芽萌发和茎段、叶片外植体愈伤诱导和不定芽分化的影响。结果表明：百里香茎段腋芽可直接诱导萌发,在MS + 6-BA 0.5 mg · L-1 + NAA 0.1 mg · L-1培养基上萌发率最高,达74%,在MS + 6-BA 0.5 mg · L-1 + NAA 0.1 mg · L-1的培养基上增殖倍数为36.43。由茎段萌发的组培苗在1/2MS + IBA 0.5 mg · L-1的培养基中20 d后生根率100%,移栽成活率76.7%。继代培养中叶片外植体可以诱导出愈伤组织,但是不能进一步分化成苗。茎段愈伤诱导的最适培养基为MS + 6-BA 0.5 mg · L-1 + 2,4-D 1.0 mg · L-1,再分化培养基为MS + 6-BA（0.1 ~ 1.0）mg · L-1 + GA3（0.1 ~ 0.5）mg · L-1,分化率为33.3%。     

走马胎离体培养及植株再生

以走马胎幼嫩叶片为外植体,研究不同培养基对走马胎叶片愈伤组织诱导、不定芽分化、增殖及生根培养的影响。结果表明:叶片在MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 1.0mg·L~(-1)培养基上诱导产生的愈伤组织最适合用于进行分化和增殖;愈伤组织分化不定芽的最适培养基为MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1),分化率高达88.9%;壮苗培养基为MS+6-BA0.5mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+10%椰子水(CW);最适的生根培养基为MS+NAA0.1mg·L~(-1)+IBA 1.0mg·L~(-1),生根率达100%,根系发达,植株生长健壮。经生根培养及练苗,走马胎的假植成活率达85%。     

欧李离体叶片再生体系的建立

【目的】以欧李试管苗叶片为外植体进行不定芽再生研究,以期为核果类果树的品种改良、基因遗传转化和功能验证等生物技术育种奠定一定的基础,【方法】使用不同的基本培养基和激素组合促进其不定芽再生并建立再生体系。【结果】结果表明,欧李幼芽增殖对基本培养基类型较敏感,改良MS培养基优于MS、F14和WPM。在MS(改良)+NAA 0.1 mg.L-1+BA 0.2 mg.L-1培养基上,增殖系数为5.6,增殖效果较好。离体叶片不定芽再生的最适植物生长调节剂组合为MS(改良)+TDZ 4.0 mg.L-1+IBA 0.2 mg.L-1,再生率达到63.1%,平均每外植体再生芽数为4.9。暗培养10 d可以提高不定芽再生率。再生不定芽1/2 MS(改良)+IBA3.0 mg.L-1培养基上生根率最高,生根率达93.3%。【结论】在改良MS培养基上TDZ与IBA组合诱导不定芽再生的效果最好。     

大岩桐高频再生体系建立的两种途径

采用大岩桐(Sinningia speciosa) 的叶片、叶柄和根外植体, 经过两种途径建立大岩桐的高效离体再生体系。第1种途径是: 外植体先形成愈伤组织, 愈伤组织分化出不定芽, 再生成不定根, 进而形成再生苗; 第2种途径是: 外植体先形成少量愈伤组织和根, 再产生不定芽, 进而形成再生苗。第1种途径所采用的培养基MS +BA 2.0 mg·L - 1 +NAA 0.2 mg·L - 1 +蔗糖30 g·L - 1 , 芽诱导率达到99.04% , 根诱导率达到98.81% , 每块外植体分化的不定芽数达5.53个; 第2种途径中以MS +NAA 1.0 mg·L - 1 +蔗糖30 g·L - 1为最佳培养基, 芽诱导率达到90.38% , 根诱导率达到100% , 每块外植体分化的不定芽数达2.44个。在3种外植体中以叶片的再生频率最高。经过连续的组织培养, 在大岩桐的再生苗中得到了一些表型变异植株, 包括叶片形态的改变, 植株叶序的改变以及花的改变。其中以叶序和花的改变最有价值,可以为叶序调控机理和成花及花变异机理研究提供良好材料。     

鸭梨叶片不定芽再生体系的建立

为建立鸭梨(Pyrus bretschneideri Rehd.cv.Yali)叶片不定芽再生体系,采用正交试验设计研究了不同培养基、植物激素和植物生长调节剂的种类及其浓度、蔗糖含量对鸭梨叶片不定芽再生的影响。结果表明,基本培养基是影响叶片不定芽的诱导、继代和生根的关键因素,分别以NN69、MS和1/2MS为宜;IBA是影响叶片不定芽增殖的重要因素;最适诱导培养基为NN69+BA3.0mg·L-1+IAA0.5mg·L-1,再生频率和再生芽数分别为80.00%和1.77;最适增殖培养基为MS+BA1.0mg·L-1+IBA0.5mg·L-1,增殖系数可达2.23;最适继代培养基为MS+BA1.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1,平均苗高4.98cm;最适生根培养基为1/2MS+蔗糖30g·L-1+IBA0.5mg·L-1,生根率和平均根数分别为50.00%和2.04。该再生体系可为鸭梨遗传转化提供有效的受体系统。     

松潘乌头嫩茎高效再生体系的建立

以松潘乌头（Aconitum sungpanense）嫩茎切段为外植体进行不定芽诱导和植株再生试验。松潘乌头初生嫩茎长至5 ~ 10 cm时将其切下作为外植体诱导不定芽,MS + 6-BA 4.0 mg • L-1 + NAA 1.0 mg • L-1是较适合的分化培养基,分化率达94.8 %,平均芽数4.2;不定芽增殖以MS + 6-BA 3.0 mg • L-1 + IBA 0.3 mg • L-1效果较好,在此增殖培养基中加入青霉素G钾5 mg • L-1,GA3 0.3 mg • L-1,蔗糖为50 g • L-1,琼脂7 g • L-1,对玻璃化苗的控制效果较好,增殖倍数可达7.26,苗高达4 cm左右;生根培养基以1/2MS + IAA 0.3 mg • L-1较为理想,平均生根数为10条左右,生根率为96%以上;瓶苗移栽于森林土和草碳（1∶1）混合基质中生长良好,成活率达90%以上。     

青花菜DH系带柄子叶高频再生体系的建立

以青花菜DH系3-6、3-7和3-9带柄子叶为外植体,研究其高频离体再生体系,比较了不同基因型、不同质量浓度植物生长调节剂、不同时期苗龄外植体及不同浓度AgNO3添加剂对不定芽再生频率的影响。结果筛选出3-6和3-7两个基因型：8 d苗龄外植体不定芽的再生频率分别为96.9%和97.8%（培养基：MS+0.02 mg·L-1 NAA+1.0 mg·L-1 6-BA+4 mg·L-1 AgNO3 +10 g·L-1琼脂+30 g·L-1蔗糖）,平均外植体的再生芽数分别为15、14个,生根培养诱导生根率均为100%（培养基：1/2MS+0.05 mg·L-1 NAA + 7 g·L-1琼脂+30 g·L-1蔗糖）,驯化移栽成活率均达100%。     

北美红杉组培快繁体系的建立与优化

以北美红杉1年生带芽茎段为外植体,通过基本培养基筛选和不同植物生长调节剂水平对比试验得到北美红杉组织培养的不定芽诱导、增殖、生根等生长阶段的优化配比培养基,以期建立北美红杉高效的快繁体系。结果表明:确定最佳消毒方法为75%乙醇消毒30 s,无菌水冲洗2次,再用0.1%氯化汞消毒处理10 min,无菌水冲洗4次;最佳不定芽诱导培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.10 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1,不定芽诱导效果最好,诱导芽率高达2 153.3%,且芽生长健壮;最佳不定芽增殖培养基配方为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.10 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1,增殖系数高达15.8;最佳生根培养基配方为1/2MS+KT 1.5 mg·L^-1+IBA 1.0 mg·L^-1+蔗糖30 g·L^-1+琼脂6 g·L^-1,其生根率达90.0%,根多且粗长,植株高大健壮;最佳移栽基质为V_炉渣∶V_原土∶V_腐殖土=1∶1∶1,植株成活率达91.7%。     

色素万寿菊雄性不育植株的快速繁殖

以色素万寿菊为试验材料,采用母本资源不育株叶片、带腋芽茎段和侧芽为外植体,对不同的培养基配方条件下的生长情况进行统计,研究了灭菌处理、生长调节剂组合、AgNO3对丛生芽诱导的影响,以期快速获得遗传稳定的万寿菊雄性不育植株,为杂交育种提供基础研究材料。结果表明:以带腋芽的茎段为最佳外植体,1 g·L^-1 HgCl2灭菌10~12 min的灭菌效果最好,B1-3较易诱导丛生芽,其最佳的诱导培养基为MS+1.0 mg·L^-16-BA+0.5 mg·L^-1 NAA+30 g·L^-1蔗糖+7 g·L^-1琼脂,诱导率高达93%,2.0 mg·L^-1 AgNO3有利于丛生芽增殖,使B1-3丛生芽增殖率达151.6%,丛生芽生根培养后移栽成活率达95%以上。发现万寿菊离体培养过程中,外植体不同,其丛生芽诱导率不同,最佳外植体为带腋芽茎段。不同的灭菌剂的灭菌效果不同,1 g·L^-1 HgCl2灭菌效果最好;丛生芽诱导时6-BA与NAA不同浓度组合优于6-BA与IAA组合;低浓度AgNO3能够促进丛生芽诱导,高浓度反而会降低。     

基于气生根的雷公藤植株的快速繁殖技术

以雷公藤幼嫩茎段为外植体材料,研究雷公藤无菌体系的建立,植物生长调节剂以及培养方式对诱导腋芽萌发和茎段快速生根的影响,以期获得雷公藤植株的快速繁殖技术。结果表明:雷公藤外植体的最佳消毒方式是75%酒精30 s+0.1%升汞10 min;腋芽萌发的最佳培养基为MS+1.5 mg·L-1 6-BA+0.2 mg·L-1 NAA,最佳培养条件为温度(23±1)℃,湿度70%±5%,光/暗培养12 h/12 h,腋芽的萌发率为98.3%;生根的最佳培养基为1/2 MS+0.2 mg·L-1 NAA+0.1 mg·L-1 IAA+0.03%活性炭,最佳培养条件为叶片支撑的带芽茎段空气悬浮培养,温度为(23±1)℃,湿度为70%±5%,光/暗培养12 h/12 h,不定根的萌发率达到91.5%。该空气生根的雷公藤体外培养体系方法简单,月增殖系数可达到3.8,可同时快速实现雷公藤植株的增殖培养和生根培养。     

一品红的组织培养研究

以一品红腋芽、顶芽、茎段、嫩叶为初次诱导外植体,对一品红的组织培养途径进行研究,建立了一品红植株再生体系.结果表明:组织培养的取材部位为腋芽、顶芽和茎段.诱导愈伤组织外植体为茎段,培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L+蔗糖30 g/L.诱导丛生芽的外植体为腋芽、顶芽和愈伤组织,培养基配方为腋芽、顶芽:MS+6-BA 0.6mg/L+NAA0.1 mg/L+蔗糖30 g/L;愈伤组织:MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖30 g/L.丛生芽继代增殖的培养基配方为MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L+蔗糖30 g/L.生根培养基配方1/2MS+NAA 1.0 mg/L+蔗糖30 g/L.     

大丽花‘费罗加’组织培养和块根诱导

以大丽花品种‘费罗加’为试材,茎段作为外植体,探讨了不同基本培养基、激素组合、蔗糖浓度、光照时间等对诱导愈伤组织、不定芽、不定根和块根的影响,以期缩短块根生产周期。结果表明:初代培养在MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂6 g·L-1上愈伤组织诱导率为54.9%,褐化率为44.8%,污染率为26.6%,成活率达69.6%。继代增殖培养最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.01 mg·L-1+蔗糖30 g·L-1+琼脂6 g·L-1,增殖系数为7.8,愈伤组织诱导率22.9%。生根最佳培养基为WPM+NAA 1.0 mg·L-1+6-BA 0.1 mg·L-1+蔗糖60 g·L-1+琼脂6 g·L-1+炭粉2 g·L-1,最适宜光照时间为6 h,生根率为98.5%,根系密集健壮。块根诱导最适材料为带根瓶苗,出现初步形态的块根,形成块根率达56.8%。