运动对高脂血症大鼠骨骼肌过氧化体增殖物激活型受体γ辅激活因子1表达的影响

目的通过研究高脂血症大鼠运动后骨骼肌过氧化体增殖物激活型受体γ辅激活因子1的变化，探讨过氧化体增殖物激活型受体γ辅激活因子1在运动改善大鼠能量代谢中的作用。方法将26只大鼠分为3组，正常对照组9只，高脂膳食组（高脂组）9只，高脂膳食＋60min运动组（运动组）8只。测定各组骨骼肌过氧化体增殖物激活型受体γ辅激活因子1基因和蛋白表达的变化。结果高脂组甘油三酯、总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇较对照组显著升高（P〈0．05）；运动组甘油三酯、总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇较高脂组显著降低（P〈0．05），高密度脂蛋白胆固醇较高脂组显著升高（P〈0．05）。与对照组比较，运动组大鼠骨骼肌过氧化体增殖物激活型受体γ辅激活因子1mRNA表达显著增高（P〈0．01）；与高脂组大鼠比较，运动组大鼠骨骼肌过氧化体增殖物激活型受体γ辅激活因子1mRNA表达显著增高（P〈0．05）。运动组骨骼肌过氧化体增殖物激活型受体γ辅激活因子1蛋白表达较对照组增加了2．14倍（P〈0．05），较高脂组增加了2．02倍（P〈0．05）。结论运动能够通过过氧化体增殖物激活型受体γ辅激活因子1改善骨骼肌的能量代谢，从而改善机体的脂质代谢，防止糖代谢异常和动脉粥样硬化的发生。     

过氧化体增殖物激活型受体γ对脂质代谢及动脉粥样硬化的影响

过氧化体增殖物激活型受体γ是核受体超家族中的一员,它通过调控靶基因的转录,改善胰岛素抵抗以及脂代谢紊乱,同时对调节内皮功能和抑制血管壁炎症起重要作用。许多体内外研究表明过氧化体增殖物激活型受体γ激动剂特别是临床上用于治疗2型糖尿病的胰岛素增敏剂噻唑烷二酮在改善脂质代谢紊乱、抑制慢性血管壁炎症、减少斑块形成以及维持斑块稳定性等方面显示了潜在的抗动脉粥样硬化作用,为动脉粥样硬化的治疗提供了新的方向。     

罗格列酮对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞血管紧张素Ⅱ受体表达的影响

目的探讨罗格列酮对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞血管紧张素Ⅱ受体表达的影响及抗动脉粥样硬化可能的分子机制。方法体外培养SD大鼠血管平滑肌细胞，应用半定量逆转录聚合酶链反应和免疫组织化学技术，测定罗格列酮对血管紧张素Ⅱ诱导大鼠血管平滑肌细胞血管紧张素Ⅱ1型受体和2型受体mRNA和蛋白表达的剂量、时间依赖的影响。结果基础状态下，血管平滑肌细胞血管紧张素Ⅱ1型受体和2型受体均有少量的表达。血管紧张素Ⅱ显著上调血管紧张素Ⅱ1型受体（P〈0.01）和下调2型受体的表达（P〈0．05）。浓度依赖实验表明，不同浓度罗格列酮（20、30和50μmol／L）干预12h均显著下调血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA和蛋白的表达（P〈0．01），上调2型受体mRNA和蛋白的表达（P〈0．01和0．05）。时间依赖实验表明，30μmol／L的罗格列酮干预后，6h即出现明显的干预效应，24h时下调血管紧张素Ⅱ1型受体和上调2型受体mRNA和蛋白的作用最大，与血管紧张素Ⅱ组比差异有显著性（P〈0．01）。结论罗格列酮可呈浓度依赖和时间依赖性地下调血管紧张素Ⅱ诱导的大鼠血管平滑肌细胞血管紧张素Ⅱ1型受体mRNA和蛋白的表达，上调血管紧张素Ⅱ2型受体mRNA和蛋白的表达，这可能是过氧化体增殖物激活型受体7激动剂罗格列酮发挥抗炎、抗动脉粥样硬化作用的重要机制。     

瘦素对鸡原代前体脂肪细胞增殖分化的影响

【目的】探究不同浓度瘦素对鸡原代前体脂肪细胞增殖分化的影响。【方法】以12日龄科宝肉鸡腹部脂肪为材料进行原代前体脂肪细胞培养,细胞铺板24 h后,试验组细胞以添加了0、50、200、800 ng/m L瘦素的培养基进行培养,每隔24 h换一次液,至72 h。采用CCK8法绘制对照组和瘦素处理组细胞的生长曲线,油红O提取比色法测定脂肪含量变化,Real-time PCR方法检测前体脂肪细胞分化过程中关键基因PPARγ和SREBP1c的表达。【结果】CCK8法与油红O提取比色法表明,0~800 ng/m L瘦素对鸡前体脂肪细胞的增殖分化无显著影响(P0.05),Real-time PCR结果表明不同浓度的瘦素处理对前体脂肪细胞内脂肪分化关键基因PPARγ和SREBP1c的表达无显著影响(P0.05)。【结论】本试验证明0~800 ng/m L瘦素对鸡前脂肪细胞的增殖和分化无影响。     

栀子苷的降糖作用和对PPARγ受体的激活

葡萄糖消耗试验表明,栀子苷能显著促进前脂肪细胞对葡萄糖的吸收。小鼠荷糖试验和四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖试验证实,栀子苷具有剂量依赖性降低小鼠餐后血糖及糖尿病高血糖的作用。通过基于PPARγ受体信号通路的报告基因诱导表达试验,发现栀子苷在体内外的降糖功效,可能与过氧化物酶增殖体激活受体γ的激活有关。     

丹栀逍遥散对多囊卵巢大鼠高雄激素血症雄激素、瘦素及其受体表达的影响

目的 观察丹栀逍遥散对多囊卵巢综合征伴高雄激素血症大鼠雄激素、瘦素及其受体的影响。方法 利用脱氢表雄酮诱导建立多囊卵巢大鼠高雄激素血症模型,随机设立丹栀逍遥组、达英组、模型组、空白对照组,予以相应药物干预。实验结束后观察卵巢形态学变化;酶联免疫法测定血清雄激素水平;ELISA法检测血清瘦素;免疫组化测定卵巢瘦素受体的表达。结果 与模型组相比,丹栀逍遥散可显著降低大鼠血清瘦素、睾酮、游离睾酮水平值,减少卵巢瘦素受体阳性表达,差异均有统计学意义（P<0.01）。结论 丹栀逍遥散可降低多囊卵巢高雄激素血症大鼠血清瘦素、雄激素水平值,减少卵巢瘦素受体阳性表达,进而降低瘦素生物利用度及雄激素活性,从而改善多囊卵巢综合征高雄激素血症和排卵障碍。     

阿托伐他汀对THP-1巨噬细胞脂质蓄积及CD36表达的影响

目的观察阿托伐他汀对氧化型低密度脂蛋白诱导的THP-1巨噬细胞脂质蓄积及CD36表达的影响。方法用50mg/L氧化型低密度脂蛋白与不同浓度的阿托伐他汀(0、0.312、1.25和5μmol/L)共同孵育THP-1巨噬细胞24h,以空白组作对照,用液体闪烁计数法检测细胞[3H]胆固醇流入情况,油红O染色观察细胞内脂质蓄积情况,高效液相色谱分析法检测细胞内总胆固醇水平,逆转录聚合酶链反应与免疫印迹分析法分别检测THP-1巨噬细胞CD36mRNA和蛋白的表达。结果阿托伐他汀使THP-1巨噬细胞胆固醇流入减少,对照组胆固醇流入为35.90%±2.36%,0、0.312、1.25和5μmol/L阿托伐他汀组胆固醇流入分别为47.10%±3.18%、41.20%±2.88%、35.10%±2.35%和28.30%±1.98%;阿托伐他汀能抑制THP-1巨噬细胞对氧化型低密度脂蛋白的摄取,油红O染色可见氧化型低密度脂蛋白 阿托伐他汀组细胞内脂滴较氧化型低密度脂蛋白组明显减少,且脂滴颗粒体积变小;高效液相色谱分析发现,对照组细胞总胆固醇含量为78.24±11.35mg/g,0、0.312、1.25和5μmol/L阿托伐他汀组细胞总胆固醇含量分别为123.13±15.92mg/g、115.36±13.18mg/g、107.52±12.05mg/g和98.03±10.24mg/g。阿托伐他汀使氧化型低密度脂蛋白诱导的THP-1巨噬细胞CD36mRNA和蛋白的表达下调。结论阿托伐他汀引起氧化型低密度脂蛋白诱导的THP-1巨噬细胞CD36表达下调,并使脂质蓄积减少。     

双酚A对鲫雌激素受体表达和雌二醇水平的影响

运用定量PCR技术和免疫荧光法研究了内分泌干扰物双酚A（BPA）对雌鲫的雌激素效应。以不同浓度的BPA[质量分数分别为1mg／kg,50mg／kg,100mg／kg（注射剂量／鱼体重）]对雌鲫进行腹腔注射,然后分别于24h和48h检测肝脏中的仅型雌激素受体（ERct）mRNA表达以及血清雌二醇（E2）水平。结果表明1mg／kg和50mg／kgBPA处理组ERamRNA水平与对照组相比在48h内均没有明显变化;100mg／kgBPA处理组ERamRNA水平在注射后24h显著上调（P〈0．05）,48h时仍维持较高水平。1mg／kgBPA处理组E2水平在24h显著下降（P〈0．05）,48h回升至正常水平;50mg／kg和100mg／kgBPA处理组E2水平在24h显著增加（P〈0．01）,48h时仍维持较高水平。结果表明,BPA具有雌激素样效应,高浓度的BPA能够诱导雌鲫肝脏ERαmRNA表达和血清E2水平的上升。     

双酚A对鲫雌激素受体表达和雌二醇水平的影响

运用定量PCR技术和免疫荧光法研究了内分泌干扰物双酚A（BPA）对雌鲫的雌激素效应。以不同浓度的BPA[质量分数分别为1mg／kg,50mg／kg,100mg／kg（注射剂量／鱼体重）]对雌鲫进行腹腔注射,然后分别于24h和48h检测肝脏中的仅型雌激素受体（ERct）mRNA表达以及血清雌二醇（E2）水平。结果表明1mg／kg和50mg／kgBPA处理组ERamRNA水平与对照组相比在48h内均没有明显变化;100mg／kgBPA处理组ERamRNA水平在注射后24h显著上调（P〈0．05）,48h时仍维持较高水平。1mg／kgBPA处理组E2水平在24h显著下降（P〈0．05）,48h回升至正常水平;50mg／kg和100mg／kgBPA处理组E2水平在24h显著增加（P〈0．01）,48h时仍维持较高水平。结果表明,BPA具有雌激素样效应,高浓度的BPA能够诱导雌鲫肝脏ERαmRNA表达和血清E2水平的上升。     

7周不同强度耐力运动对大鼠骨骼肌线粒体相关信号PGC- 1α、UCP3和COXⅣ表达的影响*

目的：探讨不同强度长期耐力运动对反映骨骼肌线粒体生成和氧化功能的相关分子信号和生物酶的影响。实验方法：42 只雄性 SD 大鼠分为安静组(C,n=6)、中等强度运动组(M,n=18)和大强度运动组(H,n=18)。运动负荷为中等强度组 28 m/min,60 min/天、大强度组 38 m/min,60 min/天,每周运动5天,休息2 天,共7周。运动组动物分别在运动后即刻、6 h和24 h取材。荧光定量PCR检测PGC-1α 、NRF1、COXIV、CS基因表达,Western blot测定线粒体UCP3蛋白表达。实验结果：（1）7周中等强度耐力运动后即刻、6h、24h,骨骼肌PGC- 1α mRNA表达分别为安静组的362%（P＜0.05）、657%（P＜0.05）、116%,线粒体UCP3蛋白表达分别为安静组的111%、149%（P＜0.05）、121%,COXⅣ mRNA表达分别为安静组的223%（P＜0.01）、410%（P＜0.01）、124%,NRF1和CS mRNA表达分别是安静组的1071%、429%、199%（三者均P＜0.01）和839%、210%、203%（三者均P＜0.01）;（2）大强度耐力运动后即刻、6h、24h,骨骼肌PGC- 1α mRNA表达分别为安静组的274% （P＜0.01）、130%（P＜0.05）和68%（P＜0.05）,线粒体UCP3蛋白表达分别为安静组的87%、33%（P＜0.01）和81%,COXⅣ mRNA表达分别为安静组的29%（P＜0.01）、60% （P＜0.05）和55%（P＜0.05）,NRF1和CS mRNA表达分别是安静组的235%（P＜0.01）、362%（P＜0.01）、85%和289%（P＜0.01）、162%（P＜0.05）、108%。结论：（1）7周中等强度耐力运动增加骨骼肌线粒体生物合成;（2）7周大强度耐力运动使骨骼肌PGC-1α、COXⅣmRNA和UCP3蛋白表达出现下降,其中尤以COXⅣ和UCP3下降明显,这可能是骨骼肌线粒体生成受损的信号。     

稀有鮈鲫雄激素受体基因的克隆和内分泌干扰物对其表达的影响

采用RT-PCR和RACE法分离了稀有鮈鲫(Gobiocypris rarus)精巢雄激素受体基因(AR)的cDNA,其核苷酸序列3 130 bp,编码844个氨基酸。它的氨基酸序列与鲤科鱼类AR的同源性较高。AR基因在稀有鮈鲫的性腺、肝、脑、肠和肌肉等组织中均有表达,在雄性个体中精巢和肝脏的表达量最高,其他组织较低,而在雌性个体除肌肉中表达量较低外,其他组织均为中等水平的表达。0.01和0.1 nmol/L的乙炔基雌二醇暴露3 d后,能够分别非显著和显著地提高稀有鮈鲫幼鱼AR的mRNA表达,而1 nmol/L的乙炔基雌二醇则对其表达有下调的趋势,0.1~10 nmol/L的双酚A对其表达均有显著下调,0.01μmol/L壬基酚对其表达有显著下调,而0.1和1μmol/L壬基酚对其表达均有下调的趋势,因此不同种类内分泌干扰物及其不同暴露浓度对稀有鮈鲫AR的mRNA表达有不同影响。     

半胱胺对羊毛生长及皮肤中GH受体、IGF-1和IGF-1型受体基因表达的影响

罗米丽×中国美利奴 (新疆军垦型) 杂交一代断奶母羔 214只, 随机分成两组, 在日粮中分别添加 3 5 (试验组) 和 0g·kg-1 (对照组) 生长调节剂CT2000 (半胱胺盐酸盐), 实验期为 120d。于试验前和试验结束时称重, 采毛和皮肤样品, 测定母羔生长速度, 羊毛长度、细度、强度、弯曲度和羊毛油汗颜色, 并用反转录多聚酶链式反应 (RT PCR) 方法, 定量分析绵羊皮肤中生长激素受体 (GHR)、胰岛素样生长因子 1 (IGF 1) 和胰岛素样生长因子 1型受体(IGF 1R)mRNA的相对丰度。实验结果显示, 与对照组相比较, 试验组平均日增重提高 12 77% (P<0 01), 羊毛平均日增长提高 24 01% (P<0 01), 羊毛纤维直径平均日增长提高 217 31% (P<0 01), 羊毛纤维强度没有显著的差异(P>0 05), 羊毛油汗颜色和羊毛弯曲度的正常百分率显著提高 (P<0 05); 皮肤中GHRmRNA表达量增加 110 57%(P<0 01), IGF 1、IGF 1RmRNA表达量无明显变化。结果表明, 半胱胺 (CT2000 ) 能够显著提高羔羊生长性能, 促进羊毛生长, 其机制可能与提高皮肤中GHR水平有关。     

半胱胺对羊毛生长及皮肤中GH受体、IGF-1和IGF-1型受体基因表达的影响

罗米丽&#215;中国美利奴(新疆军垦型)杂交一代断奶母羔214只,随机分成两组,在日粮中分别添加3.5(试验组)和0 g&#183;kg-1(对照组)生长调节剂CT2000(半胱胺盐酸盐),实验期为120 d.于试验前和试验结束时称重,采毛和皮肤样品,测定母羔生长速度,羊毛长度、细度、强度、弯曲度和羊毛油汗颜色,并用反转录多聚酶链式反应(RT-PCR)方法,定量分析绵羊皮肤中生长激素受体(GHR)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)和胰岛素样生长因子1型受体(IGF-1R) mRNA的相对丰度.实验结果显示,与对照组相比较,试验组平均日增重提高12.77%(P&lt;0.01),羊毛平均日增长提高24.01%(P&lt;0.01),羊毛纤维直径平均日增长提高217.31%(P&lt;0.01),羊毛纤维强度没有显著的差异(P&gt;0.05),羊毛油汗颜色和羊毛弯曲度的正常百分率显著提高(P&lt;0.05);皮肤中GHR mRNA表达量增加110.57%(P&lt;0.01),IGF-1、IGF-1R mRNA表达量无明显变化.结果表明,半胱胺(CT2000)能够显著提高羔羊生长性能,促进羊毛生长,其机制可能与提高皮肤中GHR水平有关.     

丙氨酰-谷氨酰胺和γ-氨基丁酸对建鲤生长、饲料利用及体成分的影响

【目的】探讨丙氨酰-谷氨酰胺(Ala-Gln)和γ-氨基丁酸(GABA)对建鲤Cyprinus carpio var.jian生长、饲料利用及肌肉营养成分的影响。【方法】在建鲤配合饲料中添加不同比例Ala-Gln和GABA,配成7种等氮(质量分数为32%粗蛋白质)、等能(17.0 MJ·kg-1)饲料,以添加Ala-Gln和GABA对建鲤生长最适添加量(6.0 g·kg-1AlaGln、90 mg·kg-1GABA)的添加组添加比例为100%,在此基础上等比例缩减和增加,Ala-Gln和GABA的添加梯度分别为0(0 g·kg-1Ala-Gln、0 mg·kg-1GABA)、20%(1.2 g·kg-1Ala-Gln、18 mg·kg-1GABA)、40%(2.4 g·kg-1Ala-Gln、36 mg·kg-1GABA)、60%(3.6 g·kg-1Ala-Gln、54 mg·kg-1GABA)、80%(4.8 g·kg-1Ala-Gln、72mg·kg-1GABA)、100%(6.0 g·kg-1Ala-Gln、90 mg·kg-1GABA)、120%(7.2 g·kg-1Ala-Gln、108 mg·kg-1GABA),共7组。饲喂初始体质量为45.59 g建鲤8周。【结果】与对照组相比,饲料中添加Ala-Gln和GABA的添加组,建鲤平均增质量率和特定生长率均显著提高(P0.05);其中60%添加组(3.6 g·kg-1Ala-Gln、54 mg·kg-1GABA)的饲料效率、蛋白质效率及肌肉中粗蛋白质含量均显著高于不添加的对照组(P0.05),其他各组之间差异不显著(P0.05)。【结论】饲料中添加Ala-Gln和GABA在一定程度上促进了建鲤幼鱼生长、饲料利用和肌肉蛋白质的合成,其中以3.6 g·kg-1Ala-Gln、54 mg·kg-1GABA组的效果最佳。     

中药成分复方对兔外周血淋巴细胞增殖、IFN-γ和IL-10的mRNA表达以及兔出血症疫苗免疫效果的影响

【目的】研究两个中药成分复方（cCHMIs）的免疫增强作用和机理。【方法】选择黄芪多糖、淫羊藿多糖、蜂胶黄酮和人参皂苷4种中药成分组成两个复方,用MTT法和荧光定量RT-PCR法测定它们对兔外周血淋巴细胞增殖和IFN-γ、IL-10 mRNA的表达影响;并将两个复方作为佐剂,配合兔出血症疫苗免疫幼兔,以铝胶苗和无佐剂苗为对照,分别于免疫后7、14、21、35、49 d用MTT法和血凝抑制法测定外周血淋巴细胞增殖和血清抗体的动态变化,于免疫后63 d测定免疫器官指数和攻毒保护率。【结果】两个复方在体外均可以显著促进淋巴细胞增殖,提高淋巴细胞IFN-γ、IL-10 mRNA的表达;作为佐剂,两个复方可以显著提高免疫兔的血清抗体效价,促进体内淋巴细胞增殖,显著促进圆小囊、肠淋巴结等免疫器官的发育,有较高的攻毒保护效果。【结论】两个复方中药成分具有较强的免疫增强作用,可被开发成新型的免疫增强剂。