几种果实不同组织总RNA提取及质量分析

以菊水梨为试验材料,通过2种改良CTAB法对果实不同成熟阶段提取的总RNA质量和产量的变化的影响,研究果实不同成熟阶段果皮和果肉总RNA提取的质量和产量,并针对梨果实不同成熟阶段采用不同的改良CTAB法,以较低的成本从果实中提取完整性好、质量高的总RNA。同时提取近成熟的红富士葡萄、富士苹果和丰香草莓3种果实总RNA。总RNA的质量和产量分析结果表明,方法Ⅰ和Ⅱ分别适用于成熟度较低和较高梨果实总RNA的提取,方法Ⅰ也适用于其它3种近成熟果实总RNA提取。并通过RT-PCR验证,所提取的总RNA可以满足基因克隆和表达等分子生物学实验的要求。     

辣椒组织总RNA提取方法研究

从RNA的完整性、纯度和产量等方面比较了3种RNA提取试剂对辣椒不同组织部位RNA的提取效果。结果表明,RNAplant能从成熟组织中获得较高质量和产量的RNA,用该方法提取的辣椒老化组织RNA经RT-PCR能成功进行内参检测。     

葡萄总RNA提取方法的研究

针对葡萄组织中多酚、多糖类物质含量较高的特点,比较了改进SDS/酚法、异硫氰酸胍法和市售总RNA提取试剂盒等不同的提取方法,3种改进方法均能从葡萄幼嫩叶片中提取到总RNA。其中改进的SDS/酚法能有效抑制酚类物质和多糖对总RNA提取的影响,能够从成熟的叶片和完熟果实的果皮中获得质量高、完整性好的总RNA,28SrRNA亮度约为18SrRNA的2倍,A260/A280介于1.8～2.0之间,A260/A230大于2.0,且总RNA产率高,其中幼叶总RNA产率为261.20μg/g,成熟叶产率为191.40μg/g,完熟果皮产率为31.50μg/g,完全适于进行DDRT-PCR、Northernbolt和cDNA文库构建等研究。且该方法具有快速、简单、有效的特点。     

适合转录组测序的苹果果实RNA提取方法的筛选

为了筛选适用于转录组测序的苹果果实RNA提取方法,试验以苹果叶片、野生苹果未成熟和成熟果实、栽培种苹果成熟果实为材料,采用7种方法对4种材料进行RNA提取,并通过凝胶电泳、Agilent 2100 RNA芯片对提取的总RNA进行质量检测。结果表明,采用的7种方法中有2种方法可以成功提取4种材料的RNA,证实改良CTAB法是适合转录组测序的苹果果实RNA提取方法。     

李果实果肉组织RNA提取方法的比较分析

以中国李品种‘槜李’的果肉组织为试材,比较了Trizol法、RNA提取试剂盒和改良的CTAB法提取RNA的效果,筛选出适合李果实果肉组织总RNA的提取方法。结果表明:Trizol法和RNA提取试剂盒均不能得到完整的RNA;改良的CTAB法能有效去除多糖,28S条带的荧光亮度是18S条带的1.5~2.0倍,D260/D280值都在1.8~2.1,样品的平均得率为770.96~1 029.04ng/μL,RT-PCR结果扩增出了特异性条带,说明改良CTAB法从李果实果肉组织中提取的RNA质量高、完整性好、产率高,完全可以用于后续的分子生物学试验。     

大蒜不同组织总RNA提取与质量分析

以大蒜幼叶、蒜薹和鳞茎为试验材料,采用3种方法提取大蒜总RNA.通过1.2%非变性甲醛凝胶电泳和紫外分光光度计检测提取RNA质量.结果表明:3种方法能够从3个不同的组织中提取完整性较高的总RNA,但从蒜薹和鳞茎中提取的总RNA的纯度不高,可能是因为这2种组织中含有大量多糖或其它代谢产物.从叶片中提取的总RNA质量较好,产率较高,提取大蒜叶片总RNA的效果最好.     

改良热硼酸法高效提取苹果果实RNA

苹果果实、尤其是成熟期的果实中多糖和其他次生物质含量高,难以提取RNA。对此,在原热硼酸法的基础上进行了改进,通过添加提取辅助剂并根据辅助剂特性调整提取步骤,高效、稳定地从苹果果实、尤其是后期果实中提取到了高质量的RNA。所得RNA的A260/A230大于2.0,A260/A280为1.8-2.1,并且RNA产量高,其中前期果实RNA产率在13.40μg/g以上,后期果实RNA产率在7.02μg/g以上,完全可以满足RT-PCR、cDNA-AFLP等分子生物学实验的要求。     

果实最佳采收期如何确定

在果树的栽培管理中,采收是影响果品质量、产量、耐贮性、抗病性和经济收入的最后一环。生产上,正确判断果品的最佳采收期十分重要,必须多方面综合考虑,才能收到高产、优质和高效益的良好效果。下面以苹果为例,介绍具体的确定方法。1看果皮颜色绝大多数的苹果品种从幼果到成熟的发育过程中,果皮的颜色都要发生有规律的变化,即果皮底色由深绿逐渐变为浅绿或黄色。有些着色品种往往上色较早,但果皮底色仍是绿色,只有果皮底色由绿变黄时才是果实成熟的表现;非着色品种,如金帅等,一般宜等到底色稍黄时采摘。2看果柄果实真正成熟时,果柄基部与果…     

荔枝果皮多酚提取条件优化及其在果实成熟期间的变化

为优化荔枝果皮多酚提取条件并确定其在果实成熟过程中的变化规律,以淮枝品种荔枝果实为试材,通过正交试验法确定果皮多酚化合物优化的提取工艺,同时利用高效液相色谱（HPLC）法分析荔枝果皮中主要多酚的化学组成及果实成熟前后其含量的变化。结果发现,在本试验条件下,固液比3∶10、提取剂甲醇/丙酮（1/1,v/v）、提取剂浓度6...     

一种适合于富含多糖和酚类物质的香蕉果实RNA提取方法

酚类化合物和多糖是影响香蕉组织RNA提取的几个主要干扰因素。研究通过在裂解液中加入聚乙烯吡咯烷酮去除多酚类化合物和利用水饱和乙醚去除多糖,改进了香蕉果实RNA的提取方法。该方法具有快速、简单等特点。     

枇杷果实总RNA的提取及八氢番茄红素合成酶基因(PSY)片段的克隆

【目的】为从枇杷果实中提取高质量的RNA,【方法】以枇杷果实为材料,对6种总RNA提取方法进行分析和比较。【结果】结果表明,在裂解前先用70%丙酮和80%乙醇分别对枇杷果皮和果肉进行预处理,再结合CTAB-LiCl法,得到的总RNA质量较好,OD260/OD280在1.8～2.2,OD260/OD230超过2.0,得率分别为幼果果皮56.78μg.g-1,幼果果肉40.62μg.g-1,成熟果果皮40.86μg.g-1,成熟果果肉9.24μg.g-1;并根据其他植物的八氢番茄红素合成酶基因(PSY)保守区设计引物,用以上方法提取的RNA为模板进行RT-PCR,得到453 bp的基因片段,其推导的氨基酸序列与其他植物的同源性高达95%,推测该片段为PSY基因。【结论】先用70%丙酮和80%乙醇分别对枇杷果皮和果肉进行预处理,再结合CTAB-LiCl法,得到的RNA质量好,可用于后续的分子生物学研究。     

梨组织RNA提取方法研究

借鉴荔枝果实总RNA提取方法,针对梨本身的特点利用改良 Bugos法分别对叶片、花瓣、果肉中总RNA进行提取研究.结果表明:改良Bugos法对梨不同组织中RNA的提取效果较好,花瓣中RNA的相对含量最高,叶片次之,果肉最少.     

不同授粉方式下‘度尾蜜柚’亲和性及其生物学效应

 通过3种授粉处理, 对‘度尾蜜柚’自交不亲和性及产生的若干生物学效应进行了观察。结果表明: 在正常自交的情况下, ‘度尾蜜柚’存在不亲和性, 大部分果实无籽, 随着果实的成熟, 果形指数逐步降低, 中心柱空心, 果顶皮层厚度逐渐变薄, 裂瓣大量产生, 同时一部分果实顶部裂开, 霉菌侵染果肉, 失去食用价值; 蕾期自交能在一定程度上克服不亲和性, 产生少量的种子, 能有效防止果实横向和纵向不均衡生长, 促进果实中心柱较好地保持实心状态, 果顶皮层增厚, 从而显著降低了裂果和裂瓣; 用‘琯溪蜜柚’花粉异交授粉, 果实种子数显著增多, 果形指数变化较小, 中心柱实心, 少有裂果和裂瓣发生, 但食用品质受到影响。     

柚新品种——处红柚的选育

处红柚[Citrus maxima(Burm)Merr.cv.Chuhong]系从实生柚中选育出的柚新品种,经多子代遗传性状观察鉴定,证明其遗传性状稳定。果实卵形、端正,果形指数0.96,平均单果质量750g,果实外观漂亮,皮薄易剥。果肉深红色,多汁,少子或无子,可食率高,风味独特,酸甜可口。9月下旬成熟,抗逆性强,早熟、丰产、稳产。     

Fruit Quality and Flavor Compounds Before and After Commercial Harvest of the Late-Ripening ‘Fairtime’ Peach Cultivar

ABSTRACT

In this work quality of tree ripe and commercial ripe ‘Fairtime’ peach fruit was evaluated during fruit maturation and storage. Quality parameters and volatile fraction were monitored at intervals of 7-15 days from pit hardening until 10 days after commercial harvest and after 7, 17 and 24 days of refrigeration. In fruit on the tree, weight increased quadratically, diameter and peel color increased linearly, whereas flesh firmness decreased linearly. Soluble solids (SS) reached maximum levels at commercial harvest, whereas acidity started declining after commercial harvest. In the peel, esters and alcohols showed opposite trends. In the flesh, alcohols decreased quadratically and disappeared in tree ripe fruit. In refrigerated fruit, there were no significant weight changes, flesh firmness decreased linearly, SS reached a minimum around the 10th day, and acidity decreased quadratically. A three day harvest delay followed by two weeks of refrigeration may represent a chance to further extend marketing of optimum flavor ‘Fairtime’ peaches into late fall.     

Biochemical and physiological changes during chlorophyll degradation in lime (Citrus aurantifolia Swingle cv. ‘Paan’)

Summary

Lime (Citrus aurantifolia Swingle cv. ‘Paan’) native to South East Asia, has a distinct flavour and quality characteristics. Maintenance of the green colour in the peel of lime is a desirable quality attribute during storage. Post-harvest chlorophyll degradation in lime was studied in fruit stored at room temperature (30°C) at a relative humidity (RH) of 70 – 85%. Within 7 d of storage, the total chlorophyll content decreased to 53.9% of its initial level. The highest chlorophyllase activity (1.68 units mg^–1 protein) was observed after 4 d of storage and declined thereafter. Peroxidase activity differed from chlorophyllase activity and increased significantly to 6.25 units mg^–1 protein after 9 d of storage, (i.e., at the late maturity stage). Respiration rate and 1-aminocyclopropene-1-carboxylic acid (ACC) oxidase activity did not significantly affect the chlorophyll degradation process in lime.The total nitrogen content of lime peel was inversely correlated with its chlorophyll content. A higher soluble protein content was observed in yellow peel than in mature green peel. A colour index chart was developed for maturity stages 1–4 in lime based on peel colour changes from mature green to full-yellow, and its correlation with chlorophyll content and fruit quality attributes.     

温州蜜柑粗皮大果形成过程的解剖学研究

【目的】为了明确温州蜜柑粗皮大果形成的原因和关键时期,【方法】试验以‘国庆一号’温州蜜柑为材料,比较果实发育过程中,粗皮大果与薄皮果果蒂处果皮的显微结构差异。【结果】结果表明,花后21 d粗皮大果中果皮细胞开始排列疏松,花后28 d其外果皮出现凹凸不平现象,这些均与薄皮果存在明显差异;花后7～21 d果皮细胞层数快速增长,导致果皮增厚,粗皮大果与薄皮果表现显著差异;果实成熟前,薄皮果果皮逐渐变薄,粗皮大果的果皮却不断增厚,成熟时其果皮厚度达到薄皮果的3.8倍。【结论】花后7～28 d是粗皮大果果皮增厚的关键时期。