家蚕长形卵(elp)卵壳的特异构造

用扫描电镜观察了长形卵的卵壳表面及断面构造,发现卵中央部表面构成网状卵纹的多边形小室呈长形,其长轴方向与卵的长轴方向是一致的。而其断面构造与正常卵完全相同。著者认为:这表明长形卵基因(elp)的作用影响了滤泡细胞的形状,而对其分泌机能的影响较小。同时,形成长形卵的原因,很可能就是由于滤泡细胞变长之故。另外,从卵壳构造与其生理机能来看,似乎表明:卵壳的生理机能由其断面结构所决定,而断面构造与滤泡细胞分泌机能密切相关,受其形状的影响较小。     

家蚕第二肾形卵(ki-2)致死性的研究

笔者将第二肾形卵(ki-2)突变系统与正常卵系统杂交后,经多代选择育成ki-2的改进系统,分别调查第2肾形卵各系统自交后代的致死性,以及ki-2与其他保存系统杂交后其F_2分离出产肾形卵蛾所产卵的致死性。结果,ki-2原始突变系统致死率最高,达30％以上;ki-2改进系统的致死率次之,为20％左右;而ki-2与其他保存系统杂交后分离出的ki-2的致死率较低。仅为10％左右,而且开差很大。笔者认为:(1)ki-2基因有致死作用;(2)ki-2基因致死性强弱与交配方式有关;(3)ki-2基因在不同的遗传系统中,其致死作用明显不同。     

家蚕仿缍形卵(SP)的卵壳构造

用扫描电子显微镜观察纺缍形卵(SP)的卵壳表面和断面构造。其结果为:纺缍形卵中央部等构成网状卵纹的多边形小室呈长梭状且长轴方向与卵长轴方向一致似乎分泌形成卵壳滤泡细胞与卵壳整体之间存在某种联系;卵壳断面由内、中、外三层组成。中层层状结构交错重叠出现异常。外层与中层之间在后极部有许多空洞;精孔数异常,精孔形状异常。由此认为:纺缍形卵基因是通过影响滤泡细胞的形状及分泌功能来决定纺缍形卵卵形卵壳结构的。纺缍形卵卵形卵壳结构、分泌形成卵壳的滤细胞形状、大小及分泌功能都与正常卵不同。由于精孔数目等异常直接导致了不受精卵增加。     

家蚕新白卵系的遗传学研究

本研究室保存的新白卵系在形态和遗传方式上与迄今记载的白卵基因均相异。实为一种新的白卵突变,定名为新白卵(new white—egg),基因记号wn。wn属第10连锁群,与w_2连锁,对红卵(re)和淡红眼白卵(pe)有上位作用。     

家蚕第二肾形卵的卵壳特异构造

用扫描电镜观察了第2肾形卵的卵壳表面及断面构造,发现表面精孔异常,后极部,中央部表面及侧面部的卵纹构造均有特异;后极断面特厚,r侧厚度也异常等特异构造,笔者认为:这些异常是卵泡细胞分泌机制异常所致;第2肾形卵基因的作用机制与ki肾形卵是不同的。     

家蚕第2肾形卵的遗传学研究

<正>家蚕卵形突变有:纺锤形卵(sp、23-22.9)、肾形卵(ki、6-8.6)、长形卵(elp、18-16.1)、大卵(Ge、1-14.0)、小卵(Sm、3-41.8)等.其中,肾形卵(ki)性状极为独特,其同质型雌蛾(ki/ki)产卵呈肾形,受     

家蚕淡红卵突变体(rep-1)的发现及卵色相关基因MFS的结构分析

在家蚕品种C1(H)中发现了一种新的卵色突变体。该突变体卵色为淡红色,成虫复眼为红色,遗传分析表明该突变性状由1个隐性基因控制,可能与红卵突变基因re互为等位基因,命名为淡红卵突变体(pale red egg,re~p-1)。红卵突变体(re)被认为是MFS(major facilitator superfamily)基因的序列发生了改变,故对re~p-1突变体MFS基因的结构及表达进行分析。与C1(H)卵色正常型品系的MFS基因比较,re~p-1突变体的MFS基因在第6外显子中的一段长59 bp片段被长14 bp的片段所替换,但编码蛋白质的跨膜结构未发生根本改变,而re突变体中MFS基因的结构变化对表达产物的功能有显著影响。此外,利用qRT-PCR检测MFS基因在C1(H)的卵色正常型品系、re~p-1突变体和re突变体3个家蚕品系5龄幼虫各个组织中均有表达,但表达水平存在差异:相较于C1(H)卵色正常型品系和re~p-1突变体,re突变体所有组织中MFS基因的表达量普遍偏低;相较于C1(H)卵色正常型品系,re~p-1突变体的后部丝腺和精巢中MFS基因具有较高的表达量,在其他组织中的表达量无明显差异。上述结果将有助于对re~p-1突变基因定位分析和卵色突变形成机制的研究。     

大片形吸虫丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶2A的原核表达及不同时期表达水平分析

【目的】克隆大片形吸虫丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶2A(Ser/Thr protein phosphatases 2A,PP2A)基因并构建原核表达载体,获得原核表达蛋白,为探究PP2A基因功能及其在大片形吸虫的发育中的作用奠定基础。【方法】提取大片形吸虫成虫虫体组织总RNA,应用RT-PCR方法扩增PP2A基因的完整编码区序列,并以双酶切的方式连接pET-28a(+)载体;经酶切、测序鉴定后获得阳性质粒pET-28a-PP2A,将pET-28a-PP2A重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞进行IPTG诱导表达,并对重组蛋白的诱导条件进行优化;通过SDS-PAGE及Western blotting检测大片形吸虫PP2A基因的表达效果;应用实时荧光定量PCR检测PP2A基因在大片形吸虫虫卵、囊蚴、6周龄童虫和成虫阶段中的表达情况。【结果】克隆的大片形吸虫PP2A基因编码区序列长1 161 bp,编码386个氨基酸,分子式为C₁₉₈₀H₃₁₀₅N₅₃₅O₅₆₆S₂₄,分子质...     

家蚕第2白卵近等基因系差异表达基因的筛选

为了解与家蚕第2白卵(w-2)性状形成相关的差异表达基因信息,以家蚕正常型黑卵及其第2白卵近等基因系的转色期蚕卵为材料,构建抑制消减杂交(SSH)文库,筛选差异表达基因。对SSH文库中部分克隆的测序分析表明,该文库对差异表达基因的富集性较好。随机挑选SSH文库中的300个克隆制作家蚕cDNA芯片,对家蚕正常型黑卵及第2白卵近等基因系转色期蚕卵进行检测,获得11个差异表达基因。对这11个差异表达基因进行实时荧光定量RT-PCR验证分析,其结果与芯片数据分析结果趋势一致,在正常型黑卵与第2白卵近等基因系之间,这些基因的表达差异为0.1倍至数千倍。     

家蚕杏黄色卵遗传学及几种卵色生化学的研究

1.本实验使用的杏黄(aplicat-yellow色卵,系前所未见的新系统。基因命名为apy。 2.杏黄卵基因apg系母性遗传与普通遗传的混合型。F_1的卵色似母,为母性遗传,但在F_2同蛾内分离正常黑色卵与杏黄色卵成3∶1之比。又为普通遗传。所以它是混合型的母性遗传。 3.杏黄卵apy系雌交杂红色卵系雄,F_1卵色以母,为杏黄色。其反交为正常型黑色卵,但双方F_2,均分离黑∶红∶杏黄成9∶3∶4之比。现普通遗传的分离比。故杏黄卵基因apy在红色卵基因re之上位。 4.杏黄色卵产卵变色前,卵内含有大量的犬尿氨酸,变色后经休眠期,直到第二年春蚕卵出库后,卵内仍含有大尿氨酸。 5.各种卵色的色素种类经葡聚糖凝胶柱层析后,以正常型黑色卵的带数最多,共有5条。由柱下端向上,分别是:赭、桔、紫,淡黄;其余的突型变均为三层。由层析柱的下端向上,分别是:杏黄卵有赤者、橘、黄;红色卵有:赭、橘、红;锈色卵有:赭、橘、粉红;橙色卵有:赭、桔、紫。其中,赭、桔色带,是所有供试卵色中共通的。如图3所示(Fig.3)。 6.卯色素经层析结果:正常卵、杏黄色卵、红色卵、锈色卵、橙色卵五种卵色,最底层均为赭色带,但其带的厚度不同,体积亦异。惟吸收光谱曲线相似(如图2;Fig.2) 7.自层析柱的底层向上的第二层,为橘色带,其带的厚度亦异,以杏黄卵及锈色卵最厚,约为正常的两倍,红色卵次之,但仍较正常为厚。扫描记录曲线,五者图形一致,可知均为相同物质组成(图2)。 8.自底层向上的第三层带依突变型而异,杏黄卵为黄色带;红色卵为红色带;锈色卵为粉红色带;可可(橙)色卵为紫色带。 9.这样的结果,说明正常标准型卵色基因,决不是一个基因所能代表的,实际至少应包括+~(oc)、+~(or)、+~(pi)、+~(pu)、+~(ly)等5个基因组成的基因族而成。 10.同理,杏黄色卵的基因应该为:+~(oq)、+~(o■)、a~(py)等3个基因组成的基因族。红色卵的基因应该为:+(oc).+~(or).re三个基因组成的基因族。锈色卵的基因应该为:+~(oc).+~(or).su三个基因组成的基因族。可可色卵的基因应该为:+~(oc).+~(or).pu三个基因组成的基因族。 11.杏黄色卵,在卵色素形成过程中,浆液膜内缺乏把大尿氨的转化成3一羟犬尿氨酸的酸酶。     

家蚕新母性白卵的遗传分析

家蚕基因资源库中归类于茧色单元的保存系03-130,其卵色为白色,蛾复眼亦为白色.杂交试验结果表明,03-130白色卵表现为混合型母性遗传(Ⅲ型),即F1表现雌亲卵色性状,F2蛾区内发生分离,而不是延迟到F3代才发生蛾区间的分离(母性遗传Ⅰ、Ⅱ型);但基因座与母性遗传Ⅰ型卵色突变-第1白卵(w-l)相同,即10-12.7.称之新母性白卵,基因符号:w-1n.     

五龙鹅PRL基因的SNP检测及其与产蛋性状的相关分析

试验采用PCR-SSCP方法检测五龙鹅催乳素基因(PRL)内含子2上的SNP位点,并分析其与产蛋性状的相关性.研究表明,五龙鹅PRL基因由于内含子2的第38和39位点上GA碱基的插入/缺失产生3种基因型CC、CD、DD;CC型、CD型、DD型的开产日龄、开产蛋重、平均蛋重之间差异不显著(P＞0.05),CD型、DD型的产蛋数要显著高于CC型(P＜0.05).研究表明,该突变位点对五龙鹅的产蛋量起着重要作用,可以为五龙鹅产蛋性状的分子标记辅助选择提供一定的依据.     

IBDV-VP2基因高变区同义密码子在蛋鸡和乌鸡中的偏嗜性

以RT-PCR方法对河南省洛阳地区2000-2002年分别从IBD发病蛋鸡和乌鸡鸡群中分离到的5株和4株IB-DV进行了VP2高变区基因的扩增、克隆和测序。核苷酸和氨基酸序列分析发现，9株IBDV中有4处氨基酸发生了变化，即320位的Gln／His。349位的Val／Ile．375住的Pro／Ser和381位的Lys／Arg。这些氨基酸的变化，不符合变异株的特征。核苷酸序列变化主要表现在同义密码子的置换。分别将分离于蛋鸡和乌鸡的各3个毒株交叉感染乌鸡和蛋鸡鸡胚，盲传7代后取尿囊腔绒毛膜分离病毒进行VP2基因的序列分析。结果表明，IBDV VP2基因高变区某些氨基酸同义密码子在蛋鸡和乌鸡细胞中的选择上有偏嗜性。主要表现在第1亲水区220位的Tyr（TAC／TAT）；224、360、393住的Gly（GGA／GGG）；260及420位的Thr（ACC／ACT。ACA／ACT）；271住的Val（GTA／GTG）；279位的Asp（GAc／GAT）；305位的Ile（ATC／ATA）及328位的Ser（TCA／TCG）。病毒在不同品种宿主中对同义密码子使用的偏嗜性，可能是导致蛋鸡和乌鸡对IBDV易感性不同的一个重要原因，也可能是病毒变异及新毒株产生的一条重要途径。     

家蚕实用品种夏芳卵色变异的遗传特性及淘汰方法

蚕品种夏芳的卵色为黑褐带绿色,卵壳为淡黄色。在应用中出现了卵色不纯,区间和区内卵色驳杂。区间差异,其代表型变异卵色为棕褐色,蛾区内较一致;区内有差异者主要表现为正常型与果绿色的深浅对比,其中多数是后产下卵的内环少部分卵粒颜色浅,也有随机分布者。经采用后代鉴定法和杂交试验研究,结果：①同蛾区内卵色的深、浅对比差异在后代没有明显的遗传趋向,并非单一的卵色遗传因素引起;②代表型变异卵色--棕褐色由隐性基因控制,表现母性遗传,并区别于家蚕的其它母性遗传卵色,可能为一新的家蚕母性遗传卵色基因。此外,滞育性较弱容易产生生种,也是导致夏芳在整体上卵色驳杂表现的一个因素。提出淘汰变异卵、纯化品种性状的方案为：①直接在母种中选除具有变异卵的蛾区;②对表型为标准性状的母种蛾区,在蛾区半保留条件下,用同蛾区交配法进行后代鉴定,或测交法结合次代鉴定进行区别,以基因型为 / 的半蛾保种或繁育原种,淘汰基因型为 /b及b/b的蛾区。同时,注意综合选择,加强催青温度控制和饲养规范等技术措施。     

家蚕突变新小卵(sm-n)的特异性状及其遗传

家蚕卵形突变sm-n(new small egg)为家蚕小卵突变的新类型,与前人研究报道的几种家蚕小卵突变sm、sm-2、sm-3、emi等明显不同,其主要特征为：同一母蛾产卵分离出正常型卵和小卵两种,其中小卵大小不一,为不受精卵,而正常型卵孵化与生长均正常。解剖母蛾观察卵巢管,大小卵粒在每根卵巢管里随机排列,个体间出现小卵的比例有较大差异(分布在20%～90%之间),但总体上小卵比正常卵多,且在越往卵巢管的后端小卵的比例越大,小卵的排列不规则;交配产卵后,初步统计发现小卵百分率越大,则遗腹卵有越多的倾向。同时在解剖过程中发现此小卵系统和无卵突变系统(sm~n)的母蛾卵巢管有增多现象,每个卵巢发生4～6条,每蛾共8～12条卵巢管。用正常系统C108与新小卵杂交,进行遗传分析,结果：新小卵为隐性遗传基因支配,遵循伪母性遗传模式。     

汶上芦花鸡催乳素基因外显子2的遗传变异及其与繁殖性状的相关性分析

本研究以汶上芦花鸡为研究对象,利用PCR-SSCP技术对催乳素（prolactin,PRL）基因外显子2进行SNP检测和测序分析,并对该基因与汶上芦花鸡繁殖性状的相关性进行了分析。结果表明,PRL基因外显子2存在1个多态性位点,该位点由于在3838 bp发生C→T的碱基突变,产生了AA、AB和BB 3种基因型,并导致氨基酸发生改变,由亮氨酸变为苯丙氨酸。BB基因型和等位基因B的频率最高;3种基因型（AA、AB和BB）在开产日龄、开产蛋重、开产体重、300日龄体重、300日龄蛋重的繁殖性状指标上均未达到差异显著性水平（P>0.05）。表明PRL基因外显子2多态性与汶上芦花鸡繁殖性状无明显相关性。     

欣华鸡DRD2基因多态性及其与蛋用性状的关联分析

试验旨在研究多巴胺受体D2(dopamine receptor D2,DRD2)基因多态性及其与欣华鸡蛋用性状的相关性,寻找可用于欣华鸡蛋用性状选育的分子遗传标记。应用Primer Premier 5.0软件设计4对引物,利用PCR-RFLP技术对欣华E系鸡群的473个个体进行基因型鉴定,使用SPSS 19.0软件将欣华鸡的蛋用性状与DRD2基因多态性进行关联分析。群体多态性分析结果表明,存在4个SNPs位点:A-16105G(SNP1)、G-12510T(SNP2)、G+3360A(SNP3)和T+5042C(SNP4),其中SNP1和SNP2位点符合哈代-温伯格平衡(P>0.05),且杂合度较低,但SNP3和SNP4位点显著偏离哈代-温伯格平衡(P<0.05)。关联分析表明,DRD2基因4个SNPs位点与欣华E系鸡群体蛋用性状存在关联,其中与产蛋性状关联结果:SNP1与开产日龄显著关联(P<0.05),SNP2与33周龄产蛋数、300日龄产蛋总数极显著关联(P<0.01),SNP3与开产体重(P<0.05)、300日龄产蛋总数(P<0.01)、平均连产(P<0.01)和最长连产(P<0.05)关联,SNP4与开产日龄极显著关联(P<0.01);与蛋品质关联结果:SNP1与蛋形指数(P<0.01)、蛋黄颜色(P<0.01)和哈氏单位(P<0.05)关联,SNP2与蛋黄重显著关联(P<0.05),SNP3与蛋壳强度极显著关联(P<0.01),SNP4与蛋黄重、蛋清重和哈氏单位显著关联(P<0.05)。单倍型分析发现,DRD2基因4个SNPs位点的不同单倍型组合与欣华鸡的最长连产长度呈极显著相关(P<0.01),与哈氏单位呈显著相关(P<0.05)。组织表达谱分析发现,DRD2基因主要在欣华E系鸡垂体中表达,在58周龄鸡胸肌中有较高表达,在36周龄鸡脑中有少量表达。结果表明,DRD2基因可作为候选基因辅助用于欣华E系鸡群体蛋用性状的遗传改良。     

家蚕橙色卵(ci)基因的连锁检索与定位研究

用家蚕各连锁群的标志基因系统与本研究室发现的橙色卵系统杂交,对橙色卵基因（ ｃｉ） 进行连锁检索分析,结果发现 ｃｉ 基因与第２０ 连锁群标志基因霜降油蚕（ ｏｈ２０ ０ ．０） 连锁,由此确定家蚕橙色卵基因ｃｉ 属于第２０ 连锁群;与 ｂ ４ 杂交结果确定 ｃｉ 的座位为：２０ － ２１９ 。     

黑羽鹌鹑ESRβ基因外显子多态性及其与产蛋性状的相关性分析

试验旨在研究鹌鹑雌激素受体β亚基（ESRβ）基因外显子多态性及其与产蛋性能的关联性,为鹌鹑产蛋性能候选基因的确立及分子标记辅助选育提供理论依据。选取健康蛋用黑羽鹌鹑为研究对象,开产后进行生产性能的持续统计（60 d）,采用PCR-SSCP法对鹌鹑ESRβ基因多态性进行检测,并运用SPSS 13.0统计软件进行ESRβ基因多态性与生产性能的相关性分析。PCR-SSCP检测结果发现,ESRβ基因外显子1、3、4、5、6、7和8均存在单核苷酸多态性。相关性分析结果表明,在开产蛋质量上,外显子3 CD基因型与CC和DD基因型有显著性差异（P<0.05）;在开产日龄上,外显子5 DD基因型与CD和CC基因型有显著性差异（P<0.05）;在平均蛋质量上,外显子7 CD基因型与CC和DD基因型有显著性差异（P<0.05）。表明ESRβ基因与蛋用黑羽鹌鹑产蛋性状有一定关联性。     

促卵泡激素受体基因第2内含子多态性对如皋黄鸡繁殖性状的遗传效应分析

试验以260只如皋黄鸡为素材,采用飞行质谱技术对位于促卵泡素受体(follicle stimulate hormone receptor,FSHR)基因第2内含子的3个SNPs位点进行检测,并对其与繁殖性状的相关性进行了分析。结果表明,C+29329A突变对开产日龄、开产蛋重及40周龄蛋重有显著影响(P<0.05);而C+30582G只与40周龄总产蛋数呈显著相关(P<0.05);G+51411A则对开产日龄、开产体重及40周龄总产蛋数有显著影响(P<0.05)。研究结果显示,FSHR基因有望成为选育高产蛋鸡的分子标记,辅助选育、开发中国地方鸡品种资源。