转导外源总DNA创造农作物新种质

本文以高粱和向日葵为例介绍转导含目的性状种质总ＤＮＡ创造农作物新资源的方法。１９８８年以高粱ＩＣＳ－１２Ｂ为受体,以高粱具矮秆及早熟性状的ＩＳ７５１８Ｃ和具抗蚜性的ＢＴＡＭ４２８总ＤＮＡ为供体进行转导处理,Ｆ５得到含有不同目的性状的稳定系２３个。１９９２年以大豆辽豆１０号为外源ＤＮＡ供体,转导处理高粱１１５等３个恢复系,从Ｆ２始选择籽粒蛋白质和赖氨酸含量均高于对照（未转导的受体）的个体组成下一代,２个恢复系Ｆ４的蛋白质和赖氨酸平均含量都比对照增加,１１５分别增长７．８２％和３．６１％,０－３０分别增长２０．２７％和８．３４％。１９９２年以菊芋为供体,将其总ＤＮＡ导入向日葵保持系７７１８Ｂ中,Ｆ２和Ｆ３的接种鉴定结果显示Ｄｊ２５３和Ｄｊ２７３两个系对霜霉病（ＰＬ２）表现出完全免疫。     

外源DNA导入技术在棉花抗病育种上的应用

利用外源DNA导入生物技术，并结合病圃连续定向培育，获得的棉花新品系95-562、95-481，经大面积重病地试验示范，不仅表现有良好的抗（耐）棉花枯萎病性，尚兼有丰产、优质性。进而验证了该技术用于棉花抗病育种的可行性。     

花粉管通道法导入外源DNA创造燕麦新种质

采用花粉管途径将不同倍性燕麦以及花生、大豆、小麦等不同作物外源DNA导入裸燕麦早熟品种品二号、中晚熟品种冀张莜四号和晚熟品种冀张莜五号，获得了较为广泛的变异，经过逐代选择鉴定，育成了一批裸燕麦新种质。本研究以GUS报告基因为外源目的基因用同样方法导入燕麦，从其导入一代(GT)中检测出了表达GUS活性的阳性植株。     

利用外源DNA导入技术创新甜高粱种质

利用花粉管通道导入技术,将不能进行常规有性杂交的生育期长、茎秆多汁、含糖量高的热带高粱总ＤＮＡ导入到黑龙江省当地高粱品种中,７．９％的导入后代的茎秆含糖量有所提高。通过对部分导入后代的过氧化物酶及酯酶同工酶分析结果表明,外源ＤＮＡ片段已整合到受体基因中,并得到表达。此项技术可作为甜高粱常规育种的一个辅助手段,丰富黑龙江省甜高粱品种资源     

外源DNA导入技术在马铃薯种质改良中的应用

利用马铃薯自花授粉后形成的花粉管通道,将外源ＤＮＡ直接导入马铃薯,结果显示：在自花授粉后６－４８ｈ,采用滴注法是外源ＤＮＡ导入马铃薯的最佳时斯和方法。将含有高蛋白血缘的花生品种ＤＮＡ导入马铃薯品种中,可使其蛋白质含量提高１．１％。     

导入外源总DNA获得大豆早熟新品系

本文报道了在大豆自花授粉后，利用其形成的花粉管通道，将提取的含有早熟血缘供体大豆绥农８号的总ＤＮＡ，直接导入受体大豆黑农２６号中。在后代Ｄ２代中获得３个早熟株系，熟期比受体提早１５天，并迅速稳定。经异地鉴定，Ｄ９０－１０７２品系产量比对照品种提高１９．１％，于１９９３年进入省区试。经过对该组合的受体，供体及转化后代进行ＲＡＰＤ分析，证明供体ＤＮＡ片段进入受体引起后代基因组的变异。     

农杆菌介导外源基因在棉花中的表达

用 5～ 6d的棉花无菌苗下胚轴切段与农杆菌共培养 ,菌株质粒中 Gus基因为标记基因 ,NPT 基因为选择基因。在含 0 .1 mg· L- 12 ,4- D和 0 .1 mg· L- 1KT的 MS培养基上共培 48h,转移到添加头孢霉素 50 0 mg· L- 1、卡那霉素 50 mg· L- 1MS培养基中诱导和筛选抗性愈伤组织 ,70～ 80 d时 ,进行 Gus检测 ,选择 Gus阳性愈伤组织 ,经体细胞分化生成转基因再生植株     

水稻外源DNA导入系的创建及主要性状分析

通过花粉管通道法将稗草总体DNA和玉米总体DNA导入水稻受体R122中,获得的D1代变异频率分别高达1．487％和3．81％。对稳定的3个玉米DNA导入系和4个稗草DNA导入系研究表明,与受体R122相比,导入系在株型、株高、生育期、分蘖力、着粒密度、粒形、稃尖颜色、稻瘟病抗性、稻米品质、恢复力和耐储藏性等生物学性状方面发生了广泛的变异。同时讨论了外源DNA导入水稻的变异频率和在水稻育种中的应用前景。     

外源DNA导入高粱及其后代的RAPD分子验证

研究发现高梁自花授粉后，利用其形成的花粉管通道，将热带高梁的DNA导入寒带高梁后，导入后代在许多方面表现出了明显变异，同时对导入后代进行了随机扩增多态性DNA（简称RAPD）分子验证，表明供体DNA片段已进入受体。从而说是了利用花粉管通道进行外源DNA直接导入高梁，进行种质创新和品质改良是可行的。     

外源基因对棉花光合生产和分配的影响

对转双价基因(Cry1Ac CpTI)、转单价基因(Cry1Ac)抗虫棉以及常规棉3种基因型棉花光合产物生产和积累分配规律研究表明,3种基因型棉花光合速率峰值均出现在蕾期和花期,但峰值差异不显著。转基因棉花(单价和双价)花前光合产物积累量降低是生物学产量降低的主要原因;花后光合产物输出率提高是转基因棉花维持产量的主要因素。转基因棉花大量花后光合产物束缚在铃壳中导致转基因棉花铃重较低。在转基因棉花育种中,应加强花前光合产物积累量和花后光合产物棉铃有效利用率的选择。     

棉花细胞工程及新种质创造

针对我国棉花育种资源缺乏问题,从细胞工程角度开展了棉花资源创新工作,本文从多个方面介绍了华中农业大学在棉花细胞工程方面的研究工作,包括国际上首次从野生棉获得再生植株,获得栽培棉种和野生棉种之间的体细胞杂种植株,对杂种进行了广泛的验证和评价。     

外源DNA导入小麦及其后代抗性与品质变化的初步研究

本文报道了在小麦自交授粉后,利用其形成的花粉管通道,钭外源ＤＮＡ直接导入小麦及其后代抗性与品质变化的研究结果。结果表明：外源ＤＮＡ片段直接导入受体小麦,部分片段可以被受体小麦细胞ＤＮＡ整合并表达。还表明,利用花粉管通道途径实现外源ＤＮＡ直接导入小麦,提高小麦抗性和品质,进行小麦种质创新和品质改良是可行的。     

应用浸种法导入外源DNA转化烤烟遗传性状变异初探(Ⅱ)

对应用浸种处理获得的变异后代 ,进行了叶绿素、糖、蛋白质、维生素C及株高、叶面积、生育期等的测定。试验表明 :该方法对株高、叶面积、生育期等性状的影响较为显著 ,对叶绿素、糖、蛋白质及维生素C等的改变不明显     

外源C_4作物DNA导入小麦的研究

利用小麦自交后的花粉管通道,将C_4作物玉米或高粱的DNA导入小麦的种胚细胞,结果受体后代发生了广泛的变异,而且受体不同,所发生的变异不同。甘麦8号受体后代植株变矮,结实率低,分蘖多至5个,少至完全不分蘖;8347—2-4和8013—3品系后代中出现不育株;6873—20—3品系受体后代的籽粒由红色转变为白色而且稳定遗传;蓝粒麦受体后     

导入外源DNA小麦蛋白质变异性的研究

ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析外源蜿豆花ＤＮＡ直接导入小麦体的种子蛋白质,结果表明：变异系小麦种子蛋白质组分出出现广泛变化,小偃６号和超大穗小麦分别增加４７ＫＤ,７１ＫＤ和９０ＫＤ,８５ＫＤ蛋白质新组分,蛋白质含量也相应增加约２２％和３１％,“中国春”小麦却出现了９２ＫＤ,８２ＫＤ蛋白质组分消失现象,其蛋白质含量也稍有降低,这此变异现象在后代中亦然表达,因此基因直接转移技术是优质分子育种和品质改良的新途径。     

外源DNA导入小麦后代变异株系的酯酶同工酶分析

将抗白粉病的大麦ＤＮＡ导入感病的小麦品种后，获得了抗白粉病变异后代，对其中抗性稳定的５个株系子粒酯酶同工酶进行了分析，结果，在变异株系的ＥＳＴ酶谱中，检测到供体大麦所具有的酶带（即转基因酶带）和新的杂种酶带，从而证实了大麦基因（或ＤＮＡ片段）导入到受体中，并被受体细胞基因组整合与表达。     

外源DNA导入水稻后代变异性的SSR分析

采用花粉管通道法,将高粱DNA导入水稻,获得了34个稳定的变异品系,从60对SSR引物中筛选出17对,对供体高粱、受体水稻及其外源DNA导入后代稳定材料进行了SSR分析,结果表明,高粱DNA导入水稻可以引起广泛的变异,在分子水平上产生了遗传多样性,聚类分析可将其分为五类,各类有其特有的遗传变异性。接受外源DNA三个片断,两个片断及一个片断的株系分别被聚成一类,与其他类的遗传差异分别为0.467,0.389及0.347,变异程度依次递减;未接受外源DNA两个片断的株系被聚成另一类。因此,接受外源DNA片断的多寡是水稻后代稳定品系变异程度的基础,也是它们分类的标准。     

大豆黑农33DNA导入水稻恢复系R73的研究

用大豆黑农３３做供体，水稻恢复系Ｒ７３做受体，化粉管通道法进行外源ＤＮＡ导入。共处理颖花１５１朵，当代结实粒５２粒，Ｄ１代成苗２１株，获４株变异株，变异转化率７．７％。变异后代在抽期其株高，穗长、穗型、千粒重、每产粒娄航籽粒白质含量等性状均产生明显变异，经过儿代选择，Ｄ４代有２个株系的米质优于受体恢７３，其闰透明度高，垩白率低，具有很大的选择前途。