水稻矮缩病毒的检测和介体传毒能力初步分析

快速从水稻叶片和单头介体昆虫中检测水稻矮缩病毒的斑点分子杂交。与10%SDS-PAGE检测方法相比,不仅敏感、快速、简单,可以检测田间批量样品,用于病害流行研究和测报,而且可以用于介体叶蝉传毒能力的分析。研究表明:用本地黑尾叶蝉分别接种RDV本地分离物和云南分离物,斑点杂交显示介体带毒率相似,分别为84%、75%,但生物学接种结果差异相当大,分别为28.1%、3.8%,另外斑点杂交显示云南病区的黑尾叶蝉带毒率为88%,说明介体叶蝉的传毒能力具有地域性,介体叶蝉带毒率与传毒能力也存在一定差异。     

我国主要玉米病毒病的鉴定及分类研究进展

玉米是重要的粮食作物，和人们的生活息息相关，但病害种类复杂，其中病毒病害存在极大威胁，可能会导致玉米产量损失惨重，当前病毒病的有效防治手段主要是利用高抗性品种，但该技术耗时费力，且依赖性高；在田间及时发现病毒病，尽早处理田间病株，是控制病毒病发生的有效手段，因此准确地识别玉米病毒病害，尽早进行检测鉴定并做出相关防治措施，可以最大程度降低损失。本文归纳了我国玉米上的主要病毒病害，主要包括引发国内玉米粗缩病、玉米矮花叶病、玉米红叶病、玉米鼠耳病以及玉米褪绿斑驳病的病原，归纳国内侵染玉米并造成危害的主要病毒，如水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)、玉米矮花叶病毒(MDMV)、大麦黄矮病毒(BYDV)、黄瓜花叶病毒(CMV)等病毒，简述这些病毒的传播介体及主要传播途径，从源头上为预防玉米病毒病提供参考；同时整理相关病毒的基本信息，如病毒分类、病毒粒子特性、病毒基因组结构、病毒侵染植物后引发的症状等；旨在加深人们对生产上常见的玉米病毒病的认识和理解，以期为准确快速识别玉米病毒病提供参考，为田间防控提供理论支持。     

香料烟粉虱传双生病毒的分子检测

发生在保山香料烟生产区粉虱传双生病毒病,已严重影响到了香料烟的品质和产量。本研究利用PCR技术快速检测香料烟植株及田间其它植物如胜红蓟、赛葵及菜豆等、以及病毒介体的带毒情况。对部分样品的PCR检测及序列分析表明,感染香料烟双生病毒有中国番茄黄曲叶病毒、番茄黄曲叶病毒、云南烟草曲茎病毒、烟草曲茎病毒以及云南烟草曲叶病毒等,且一些样品存在复合侵染现象。本研究为掌握病害发生流行的基本规律,监控病害在香料烟上的发生流行提供了依据。     

水稻黑条矮缩病毒的RT-PCR检测

水稻黑条矮缩病毒(rice black-streaked dwarf virus, RBSDV)病是一种以灰飞虱为主要介体进行传播的病毒病,主要侵染禾谷类作物和禾本科杂草[1 , 2 ].病株症状为浓绿矮缩,叶片僵直,不抽穗或穗小,叶背的叶脉和茎杆上有短条瘤状突起,该突起在发病初期呈腊白色,后变为黑褐色.发病田块一般减产10%～40%,重病田甚至颗粒无收[3 ～ 5].该病曾于20世纪60年代中期在我国华东诸省市不少地区广泛发生,此后20年发病面积逐年下降,但90年代以来,该病又迅速回升流行[6 ～ 8].该病毒属呼肠孤病毒科(Reoviruses)斐济病毒属(Fijivirus),有10条双链RNA[9].由于该病毒只能由特定的昆虫(以灰飞虱为主)带毒传播,在该病毒的科学研究和生产预测预报中,测定介体昆虫灰飞虱带毒率和水稻植株被感染率显得十分必要.本文根据该病毒的已知序列合成特异引物,建立了植株以及昆虫体内该病毒的RT-PCR检测法.     

沿黄稻区介体灰飞虱有效接种虫量与水稻病毒病发生关系研究

水稻黑条矮缩病(Rice black-streaked dwarf disease,RBSDD)和条纹叶枯病(Rice stripe disease,RSD)是河南沿黄稻区重要的病毒病,均由介体昆虫灰飞虱传毒所致。为明确介体灰飞虱与不同水稻品种病毒病发生之间的关系,于2014—2018年连续5 a在开封市杜良镇调查灰飞虱高峰期虫量和带毒率,并对生产上常用水稻品种的发病情况进行统计和分析。结果表明,2014年、2016年灰飞虱携带水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)的有效接种虫量最多(194.84万、171.11万头/hm~2),2017年和2015年次之,2018年最少。2014—2018年水稻黑条矮缩病发生较为普遍,且2014年和2016年发生较严重,其中淮稻5号的发病率分别为50.6%和70.8%,均表现为高感;镇稻88发病率分别为30.6%和29.3%,表现为感病和中感。2015年、2017年RBSDD发病较轻,2018年发病最轻。而水稻条纹叶枯病则一直保持零星发生趋势。水稻黑条矮缩病的发病率除了在不同品种上表现出差异外,同一品种不同年份的发病率也有较大差异。研究结果表明,由介体灰飞虱高峰期虫量和带毒率决定的有效接种虫量是影响水稻病毒病发生的重要因素。     

小麦丛矮病毒（WRSV）的血清学检测法

小麦丛矮病自六十年代以来先后在山东、陕西、河北、北京、江苏等省(市)麦区流行为害,致使损失甚重。浙江省于1979年在临安县上溪公社的夏麦田首见发病,病株率一般约5％,严重的可达76.1％,次年秋麦亦见发病。该病的发生或流行,与毒源寄主和介体昆虫的数量及带毒情况关系极为密切。为预测病情,决策防治,中国科学院上海生物化学研究所等曾用血凝法、酶联免疫吸附分析法检测该病的带毒寄主和介体昆虫。本试验应用反向间接炭凝法快速检测小麦丛矮病的寄主种类和介体昆虫带毒率,提供了一种较为简易、经济、适于目前农业科研应用水平的血清学检测法。     

水稻条纹叶枯病的发生与防治

水稻条纹叶枯病 (Ricestripedisease)是水稻病毒病的一种。 1995年以来 ,该病在沿黄稻区发生逐年加重 ,现成为影响水稻生产的最主要的病害。以原阳县太平镇为例 ,2 0 0 2年发病田块率在 6 0 %以上 ,病田病穴率大都超过2 0 %,有的地块甚至达到 5 0 %左右。笔者根据该病传播途径及发病规律 ,并依据各地防治实践 ,提出了条纹叶枯病的综合防治措施。1　传播途径及发病规律该病由病毒RSV引起 ,仅靠介体昆虫传播 ,其他途径不能传病。介体昆虫主要为灰飞虱 (Taodelphaxstriatel lus=Delphacodesstriatellus)。灰飞虱一旦获毒可终身带毒并经卵传…     

福建水稻东格鲁病发生和防治研究

本文报道1979～1982年福建水稻东格鲁病发生、传播、流行和防治的研究结果。田间调查和人工接种表明:此病主要发生于我省晚季稻田;病田产量一般损失3～7成,甚至完全绝收;病害可由黑尾叶蝉、二点黑尾叶蝉和电光叶蝉传播,但以二点黑尾叶蝉的传病力最强。介体昆虫的传病能力,与其饲毒和接种取食时间长短及温度高低有关,而与昆虫产地关系不大。病害流行主要与下列因素有关:(1)6～7月份的介体昆虫数量及其带毒虫比率;(2)晚季水稻播种、插秧时间的迟早;(3)感病品种的栽植面积。采用压缩感病品种,改种、扩种抗病品种;调整播种插秧时间,避过最感病的苗期和返青分蘖期的介体昆虫迁飞高峰,以及关键时间铲除田间杂草,扑灭介体昆虫等几项综合防治措施,可在大面积范围内有效控制病害的流行。     

2010年湖北省水稻南方黑条矮缩病的流行调查与研究

通过田间考察、白背飞虱监测、室内分子鉴定等方法调查研究2010年湖北省水稻南方黑条矮缩病的流行概况,掌握了湖北省水稻南方黑条矮缩病毒病发生的面积、发生程度、水稻品种感病性、介体昆虫种群动态等情况。研究结果显示,水稻南方黑条矮缩病在湖北省长江沿线的荆州、孝感、咸宁、黄石、鄂州、黄冈等地的水稻种植区普遍发生,水稻品种普遍感病,该病毒病已随介体昆虫白背飞虱从南方水稻种植区传播至处于长江流域的中部水稻种植区,并有进一步向长江以北扩散的趋势。     

从单头灰飞虱中检测水稻黑条矮缩病毒简单快速的方法

报道了2种从介体灰飞虱中检测水稻黑条矮缩病毒的分子生物学方法。其中直接捕获RT－PCR经简单的样品处理后可以从单头虫粗提液的10^-3中检测到病毒,并具有快速、简单优点;单头灰飞虱样品汁液点膜或虫体直接积压在膜上杂交检测具有简单、经济和快速的特点,可以检测田间批量样品,用于病害流行研究的测报。研究中60％－70％杂交检测阳性的介体生物学接种结果为阴性,反映了介体灰飞虱带毒率与传毒能力的差异。     

一种利用水提物快速检测水稻矮缩病毒的方法

由水稻矮缩病毒（Rice Dwarf Virus,RDV）侵染所致的水稻普通矮缩病是我国水稻上主要的病毒病之一,广泛分布于我国水稻种植区。研究了一种快速简捷的检测水稻和传播介体中RDV的方法,整个检测过程仅需20min。利用无菌水（100μl）研磨RDV侵染后的水稻病叶（10mg）和带毒传播介体黑尾叶蝉（Nephotettix cincticeps）（10mg）,取上清液进行1%琼脂糖凝胶电泳检测,可稳定地检测到5条特异性电泳条带,大小在1000～5000bp,而在健康水稻叶片和无毒叶蝉水提物中检测不到任何电泳条带的存在。该方法可方便快速地检测到水稻和叶蝉中RDV的存在,避免了常规血清学检测和分子检测（RT-PCR和Western-blot）等方法的昂贵试剂和繁琐的操作步骤。     

陕西烟草蚜传病毒病防治技术研究

在烟草炼苗期采用杀蚜剂、病毒抑制剂、纱网罩烟苗 ,田间生长期采用杀蚜剂、病毒抑制剂和不同移栽期防治烟草蚜传病毒病。结果表明 ,杀蚜剂防治烟草蚜传病毒病效果较差 ,病毒抑制剂效果一般为 6 0 %左右 ;随移栽期推迟 ,烟草蚜传病毒病发病显著减轻。炼苗期烟草苗床是传毒介体有翅蚜着落的靶子中心 ,是烟田蚜传病毒病的主要初侵染源 ,为防治烟草蚜传病毒病的关键时期。用纱网罩烟苗能阻止传毒介体与烟草接触交叉传染 ,结合适时喷施病毒抑制剂 ,能有效防治烟草蚜传病毒病发生 ,同时能有效保护环境和介体天敌     

灰飞虱从离体病叶快速获得水稻条纹病毒的方法

<正>水稻条纹病毒(Rice stripe virus,RSV)引起的条纹叶枯病是水稻的重要病害之一,目前已广泛分布于中国17个省(市),给水稻生产带来巨大的经济损失[1-2]。RSV隶属纤细病毒属(Tenuivirus),在田间存在着广泛的寄主,不仅能侵染水稻,还能侵染大麦、小麦、看麦娘等80多种禾本科作物和杂草[3]。大多数植物病毒依靠昆虫作为介体进行传播,进而造成某种病害的大面积流行,所以要控制植物病毒病,必须     

70%噻虫嗪种子处理可分散粉剂防治玉米粗缩病田间试验研究

玉米粗缩病是严重危害玉米的一种暴发流行性病毒病,由水稻黑条矮缩病毒（Riceblack-streaked dwarf fijivirus,RBSDV）引起。该病害由昆虫介体灰飞虱传播,在套播地、果园改造地以及果园边、沟边的地块发病较重。本试验旨在明确70%噻虫嗪种子处理可分散粉剂对玉米粗缩病的传毒介体—灰飞虱的防治效果,     

一种利用水提物快速检测水稻矮缩病毒的方法（英文）

由水稻矮缩病毒（Rice Dwarf Virus,RDV）侵染所致的水稻普通矮缩病是我国水稻上主要的病毒病之一,广泛分布于我国水稻种植区。研究了一种快速简捷的检测水稻和传播介体中RDV的方法,整个检测过程仅需20 min。利用无菌水（100μl）研磨RDV侵染后的水稻病叶（10 mg）和带毒传播介体黑尾叶蝉（Nephotettixcincticeps）（10 mg）,取上清液进行1%的琼脂糖凝胶电泳检测,可稳定地检测到5条特异性电泳条带,大小在1 000 ～5 000 bp,而在健康水稻叶片和无毒叶蝉水提物中检测不到任何电泳条带的存在。为了进一步验证结果的可靠性,再利用RT-PCR对上述样品进行检测,结果表明,在其水提物存在电泳条带的RDV病叶和带毒N. cincticps中均检测到RDVS8片段中1 375 bp的核酸片段,而在阴性对照中均未检测到RDV的存在。该方法可方便快速地检测到水稻和叶蝉中RDV的存在,避免了常规血清学检测和分子检测（RT-PCR和Western-blot）等方法的昂贵试剂和繁琐的操作步骤。     

枣树花叶病毒病的分子检测

[目的]建立枣树花叶病毒病的分子检测方法,追踪检测与分析枣树花叶病毒病田间侵染动态,研究病害防治的关键时间节点,为新疆枣树种植区枣树花叶病毒病的流行监测和早期防治,以及枣树花叶病毒病的高效防治奠定基础.[方法]在前期准确获取病毒全基因组序列的基础上,以病毒基因组序列RNA5为靶标设计序列特异性引物,通过RT-PCR技术...     

耿马甘蔗白叶病植原体昆虫介体调查与检测

为探明云南蔗区甘蔗白叶病植原体的昆虫介体及优势种群,丰富甘蔗植原体病害相关理论和技术基础,制定适用于甘蔗白叶病的综合防控措施,2019年采用寻集法和扫网法对甘蔗白叶病发病最为严重的云南省临沧市耿马蔗区进行甘蔗白叶病植原体昆虫介体调查和巢式PCR检测分析。调查检测结果显示,采集到的大青叶蝉(Tettigoniella viridis)和条纹平冠沫蝉(Clovia conifer)2种昆虫介体均被检测为阳性,是甘蔗白叶病植原体的自然携带者,说明2种叶蝉可能为甘蔗白叶病植原体潜在昆虫介体;大青叶蝉若虫呈强阳性,初步确定为优势种群。鉴于目前云南蔗区甘蔗白叶病植原体传播方式主要是带毒蔗种和叶蝉类昆虫介体,建议建立甘蔗无病健康种苗繁育基地,及时杀灭蔗园中叶蝉类昆虫介体,从源头上控制甘蔗白叶病的扩散蔓延,降低田间自然传播速度。     

水稻黄叶病和矮缩病流行预测研究

水稻黄叶病的发生流行,在年际间有明显的间歇性。研究表明,此病在闽西北晚季水稻上流行的主导因素是冬春的温度,关键因素是6月下旬至7月下旬的介体昆虫数量;重要影响因素是晚稻的品种和插秧期,并据此提出了可于发病前90—100天对当地水稻黄叶病进行预测的经验式。水稻矮缩病在年际间的流行间歇,没有黄叶病明显。一般晚稻的流行程度,与早稻孕穗期的植株发病率和6月中下旬的田间黑尾叶蝉带毒率均有显著相关。据此,在数理统计的基础上,提出了可于发病前40—50天进行预测的方程式。所求结果只要结合晚稻品种抗病性类型和插秧期迟早及介体的虫量与关键传毒期加以分析,便能相当确切地估测晚稻矮缩病的发生趋势。     

双重RT-PCR法同时快速检测南方水稻黑条矮缩病毒和水稻黑条矮缩病毒

南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV)和水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)在病害症状、传播介体及寄主等方面非常相似,田间很难对其进行诊断及鉴定.根据SRBSDV与RBSDV外壳蛋白(CP)基因核苷酸序列差异设计特异性引物,建立一种快速、准确的双重PT-PCR鉴别方法,为SRBSDV和RBSDV的流行监测提供技术支持.     

番茄TY病毒病绿色防控关键技术

<正>番茄TY病毒病是近年来在我国暴发流行的一种由烟粉虱为传毒媒介的毁灭性病毒病,即番茄黄化曲叶病毒病或番茄黄化卷叶病毒病。发生原因主要由带毒B型烟粉虱为害传播和带毒种苗远距离人为传播引起。本文介绍了此病害发病症状、危害及防治关键技术。