五种菊花近缘植物组织培养研究

以紫花野菊变种、纪伊潮菊、龙脑菊、那贺川野菊和矶菊5个菊花近缘种属植物无菌苗为试材,进行了茎段离体快繁体系和离体叶片不定芽再生体系研究.结果表明:最佳茎段增殖培养基分别为:紫花野菊变种,MS+1.0 mg·L-1 6-BA+(0.05～0.10)mg·L-1 IBA;纪伊潮菊,MS+2.0 mg·L-1 KT+0.1 mg·L-1 NAA;龙脑菊,MS+0.5 mg·L-1 KT+0.1 mg·L-1 NAA;那贺川野菊,MS+1.0 mg·L-1 KT+0.1 mg·L-1 NAA;矶菊,MS+2.0 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 NAA.紫花野菊变种、纪伊潮菊、龙脑菊、那贺川野菊试管苗适宜生根培养基是1/2MS;矶菊试管苗适宜生根培养基为1/2MS+0.2 mg·L-1 NAA.5个材料试管苗离体叶片愈伤组织诱导率均较高,但不定芽的诱导率则因基因型而异,仅那贺川野菊和矶菊能诱导出不定芽.那贺川野菊在MS+0.5 mg·L-1 KT+0.1 mg·L-1 NAA培养基上不定芽的再生率和增殖系数均最高,分别为75.0%和3.4;而矶菊在MS+1.0 mg·L-1 6-BA+0.5 mg·L-1 NAA培养基上的不定芽再生率和增殖系数最高,分别达80.0%和5.8.     

葡萄柚品种腋芽茎段离体培养研究

以5个葡萄柚品种的无菌苗带腋芽茎段为材料,研究丛生芽的诱导、增殖及生根培养等,旨在构建葡萄柚的离体快繁体系。结果表明,在6-BA浓度为0.25和0.50 mg·L-1时,腋芽萌发率可达100.00%;0.10~0.40 mg·L-1的IBA处理利于腋芽的诱导和生长。在MS+0.50 mg·L-16-BA+0.20 mg·L-1IBA条件下,火焰的萌芽率最高,为88.89%。MS+0.50 mg·L-16-BA+0.20 mg·L-1IBA培养基适宜火焰、矮化、瑞路比、里约红丛生芽的增殖。在MS+0.25 mg·L-16-BA+0.20 mg·L-1IBA培养基条件下,星路比增殖系数达到最大。1/2 MS+1.00 mg·L-1IBA生根培养基适合火焰、瑞路比、里约红、星路比生根。里约红移栽成活率最高,达81.82%;瑞路比最低,仅39.39%。     

丽格海棠‘宣言’离体再生因素的优化

丽格海棠再生分化受到多种因子的影响,通过对丽格海棠离体再生影响因素的优化试验表明:以叶片为外植体,MS+6-BA2.0mg· L-1+NAA0.2 mg·L-1最利于海棠的不定芽诱导;不定芽增殖分化的培养基为MS+ 1/2MS(Trace element)+6-BA 1.5 mg·L-1+ NAA0.1 mg·L-1+ Sucrose 30 g·L-1;生根壮苗培养基为1/2MS +IAA0.1 mg· L-1.     

新铁炮百合花器官组织培养研究

以新铁炮百合的花梗、花托、花瓣、花丝和花柱(去除柱头)为外植体,进行离体培养及快速繁殖研究。结果表明,5种花器官均能直接诱导产生不定芽,其诱导能力大小为花托花梗花丝花瓣、花柱。诱导不定芽的适宜培养基为:MS+2.0mg·L-16-BA+0.2mg·L-1NAA;不定芽增殖的适宜培养基为MS+2.0mg·L-16-BA+1.0mg·L-1KT+0.2mg·L-1NAA;生根的适宜培养基为1/2MS+0.03mg·L-1NAA;适合新铁炮百合小鳞茎种植的基质为1/4园土+1/4泥炭土+1/2锯末。     

国外引进优良绣球种的组培快繁技术

以绣球品种Snow Giant的带腋芽茎段为外植体.研究了不同浓度6-BA和NAA对绣球芽诱导增殖及生根的影响,结果表明.采用诱导培养基MS+6-BA0.5 mg·L-1+NAA 0.2mg·L-1有利于绣球芽的诱导;增殖培养基MS+6-BA2Dmg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1有利于芽的增殖;生根培养基1/2 MS+NAA 0.2 mg·L-1有利于无菌苗的生根.     

火龙果的棱片离体培养

以火龙果带刺座的幼嫩棱片切块为外植体,进行离体培养技术研究.结果表明,诱导培养基用MS+6-BA 5.0 mg*L-1 +NAA 0.05 mg*L-1,不定芽诱导率75%;增殖培养基用MS+6-BA 5.00～8.00 mg*L-1 +NAA 0.05～0.10mg*L-1,继代周期45 d,平均繁殖系数为4.5;生根培养基选用1/2MS+NAA 0.10～0.40 mg*L-1 +6- BA 0～0.3 mg*L-1,生根率96%;试管苗的移栽成活率86%以上.     

火焰南天竹组培快繁体系的探讨

以观赏灌木火焰南天竹幼嫩茎尖为研究对象,研究不同灭菌时间对成活率及污染率的影响,以及不同培养基和激素浓度对不定芽诱导、增殖和生根的影响。试验表明,在无菌环境下,用70%酒精消毒5 s,再用10%NaClO灭菌12 min的灭菌效果最佳;最佳诱导培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+IBA 0.1 mg·L^-1+AC 1.0 g·L^-1,最高诱导率为87%;最佳增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+IAA 0.1 mg·L^-1L +AC 1.0 g·L^-1,增殖系数最高可达5.29;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg·L^-1 +AC 4.0 mg·L^-1,生根率最高可达98%。将火焰南天竹组培苗移入泥炭土∶蛭石∶珍珠岩为8∶1∶1的混合基质中成活率较高,最高可达94%,且组培苗长势良好。     

柳杉优良无性系组培快繁体系研究

  目的  柳杉Cryptomeria fortunei外植体丛芽分化能力强而芽伸长不足。为探索分段培养过程中的柳杉不定芽诱导与增殖、伸长培养及生根诱导的最佳培养基,建立柳杉分段培养的高效组培快繁体系。  方法  以20年生柳杉优良无性系的当年生带芽茎段为外植体,采用正交试验设计分段培养的组培体系。柳杉外植体分段培养再生体系主要包括丛生芽诱导、伸长、生根及移栽等步骤。  结果  ①在3种基本培养基(MS、DCR和WPM)中分别添加不同质量浓度6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)、吲哚丁酸(IBA)及水解酪蛋白(CH),3个柳杉无性系均能诱导出不定芽,但诱导率存在显著差异,以WPM+1.00 mg·L?1 6-BA+0.10 mg·L?1 IBA中不定芽诱导率(100%)和增殖系数(9.13)最高。②高质量浓度激素培养基与低质量浓度激素培养基交替分段培养方式对柳杉无性系进行继代增殖培养,效果良好,有效枝条增长率可达到456.87%。③柳杉无性系离体生根的最适宜培养基为DCR+0.10 mg·L?1 IBA,且3个无性系生根率最高可达100%。④生根的无菌苗移栽至V(泥炭)∶V(蛭石)=1∶1的混合基质,经过15~20 d炼苗,成活率高达96.70%,繁殖潜能达3 865株·母株?1·a?1。  结论  柳杉分段培养的组培模式极大提高了柳杉组培再生效率,有助于柳杉优良品种的工业化育苗。图1表5参23     

白玉龙火龙果不同外植体的离体培养

【目的】研究白玉龙火龙果子叶、下胚轴及子叶节的不定芽诱导及茎段增殖技术,为白玉龙火龙果的品种改良及快繁育苗提供技术支持。【方法】以白玉龙火龙果种子培育的无菌苗为材料,采用正交试验设计分析不同培养基、不同植物生长调节剂与浓度及其组合对白玉龙火龙果子叶、下胚轴及子叶节不定芽诱导及茎段增殖与生根的影响。【结果】白玉龙火龙果子叶、下胚轴及子叶节均能直接诱导不定芽发生。其中,16个正交处理均能诱导子叶节不定芽发生,其最优诱导培养基为WPM+0.50 mg/L TDZ+0.50 mg/L CPPU+0.05 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA,诱导率为87.1%~100.0%;子叶仅1个处理未能诱导出不定芽,最高诱导率为36.0%,其最优诱导培养基为1/2MS+0.50 mg/L TDZ+0.05mg/L CPPU+2.00 mg/L 6-BA+0 mg/L NAA;下胚轴仅5个处理能诱导出不定芽,最高诱导率仅3.0%,其最优诱导培养基为1/2MS+0.05 mg/L TDZ+2.00 mg/L CPPU+1.00 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA。茎段去顶处理有利于腋芽的诱导萌发,去顶处理的最大增殖系数为4.2,不去顶处理的最大增殖系数为3.1,其最优增殖培养基为WPM+0.50 mg/L 6-BA+0.05 mg/L IBA。NAA处理能促进茎段生根,适宜的生根培养基为1/2MS+0.1~0.5 mg/L NAA,生根率达100.0%。【结论】不同基本培养基、植物生长调节剂与浓度及其组合均能诱导白玉龙火龙果子叶、下胚轴和子叶节不定芽发生及茎段芽增殖和不定根产生。其中,不定芽诱导以子叶节最易诱导发生,其次为子叶,下胚轴较难;茎段芽增殖和不定根诱导均较容易。     

野生湖北百合不定芽诱导及再生植株的建立

为加强野生湖北百合资源保存与利用,选用黔东南州野生湖北百合为材料,选用鳞茎及茎段为外植体,探讨不同浓度激素配比对其不定芽诱导、增殖及生根的影响。结果表明:诱导不定芽的最佳培养基为MS+1.0mg·L-1 6-BA+0.5mg·L-1 NAA,但茎段诱导不定芽高于鳞片,出芽率分别为66.67%和59.63%,单块外植体出芽个数分别为2和1,且茎段污染率比鳞片的污染率低。茎段诱导最佳增殖培养基为MS+0.1mg·L-16-BA+1.0mg·L-1 NAA,增殖率为83.33%,平均增殖系数为2.11,其生长状况良好,为最佳增殖培养基。茎段诱导最佳生根培养基为1/2MS+0.3mg·L-1 NAA,诱导生根率高达93.33%,平均生根数为3.18。     

Experiment on Tissue Culture Technique of Saposhnikovia divaricata （Turcz.） Schischk

The study aimed to optimize the induction and differentiation medium by exploreing different tissue culture of Saposhnikovia divaricata （Turcz.） Schischk. In tissue culture with the root, stem segments, young leaf, cotyledonary node and axillary bud of Saposhnikovia divaricata （Turcz.） Schischk as explants, a lot of plantleles were obtained and the corresponding plant regeneration-system was established. The results showed that when use MS＋1.0 mg·L^-1 6-BA＋0.2 mg·L^-1 NAA as callus induction medium, the cotyledonary node had the highest bourgeon rate, and its callus was better than any others; MS＋2 mg·L^-1 6-BA＋0.4 mg·L^-1 NAA was the best adventitious buds induction medium, and the best adventitious buds induced condition was 3% sucrose as carbon source, illumination for 12-14 h·d^-1 and pH 5.8, The best rootage medium was 1/2 MS＋0.5 mg·L^-1 NAA.     

“鄂选1号”山桐子组培繁育体系构建

  目的  山桐子作为新近开发的木本油料树种,具有广阔的发展前景。“鄂选1号”山桐子作为新近认定的山桐子新品种,具有丰产稳产、适应性强等特点,备受行业关注。高质量“鄂选1号”山桐子良种苗木的需求日益增加,因此亟需构建高效的山桐子良种繁育体系,旨在满足“鄂选1号”山桐子在行业中的广泛运用。  方法  （1）以高产优质山桐子良种“鄂选1号”为研究对象,以其新生芽为外植体试验材料,以MS培养基为基础培养基,在对其外植体消毒方法、不定芽诱导培养基激素组合、不定芽增殖培养基激素组合、组培苗生根培养基激素组合优化研究的基础上,利用组织培养技术构建山桐子组培繁育体系。（2）系统地分析了“鄂选1号”外植体的消毒方法及植物激素在其丛芽诱导、增殖及生根过程中的作用。  结果  （1）75%乙醇处理30 s,联合0.1% HgCl₂处理8 min是“鄂选1号”山桐子良种外植体最佳消毒方法。（2）不定芽的诱导过程中,（1/2MS + 0.03 mg/L TDZ + 1.5 mg/L 6-BA + 0.05 mg/L NAA）培养基组合适合“鄂选1号”山桐子良种不定芽的诱导。（3）（1/2MS + 0.2 mg/L TDZ + 2.0 mg/L 6-BA + 0.05 mg/L NAA）培养基组合适合“鄂选1号”山桐子良种组培不定芽增殖培养。（4）（1/2MS + 0.3 mg/L NAA + 0.5 mg/L IAA）培养基组合适合山桐子良种组培苗生根诱导,在此条件组培苗生根率达到98%。  结论  本研究构建了“鄂选1号”山桐子的快速繁育体系,为“鄂选1号”山桐子的推广应用奠定了基础。      

白首乌的组织培养条件的优化

以白首乌茎段、叶片、茎尖和带腋芽茎段为外植体,进行离体培养植株再生研究,结果表明：适合初代诱导的培养基为：MS+6-BA 1.0 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1,诱导率可达100%;最佳外植体是带腋芽茎段;芽苗增殖的最佳培养基为：MS+KT 1.5 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1,增殖系数为5.6;生根培养基为：1/2 MS+NAA 0.5 mg·L-1,生根率为93.3%。     

香港四照花外植体的抗褐化处理与诱导培养

以香港四照花Dendrobenthamia hongkongensis嫩叶、茎段和带芽茎段为外植体,研究外植体类型、消毒时间、基本培养基、预处理方法、抗褐化剂种类及质量浓度对香港四照花褐化的影响以及6-苄基腺膘呤（6-BA）、萘乙酸（NAA）和2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）对3种外植体诱导培养的影响。结果表明:香港四照花外植体的最佳消毒时间为1.0 g·L-1氯化汞消毒5 min;最适基本培养基为木本植物用培养基（woody plant medium,WPM）;用1.0 g·L-1聚乙烯吡咯烷酮（PVP）浸泡3.0 h,3种外植体褐化率明显下降;1.0 g·L-1柠檬酸（CA）是嫩叶的最佳抗褐化剂,褐化率为27.4%;2.0 g·L-1 PVP为茎段和带芽茎段的最佳抗褐化剂,其褐化率分别为13.3%和16.7%;嫩芽的最佳愈伤组织诱导培养基为WPM+1.0 mg·L-16-BA+0.2 mg·L-1NAA+0.1 mg·L-12,4-D;茎段和带芽茎段最佳诱导培养基均为WPM+2.0 mg·L-16-BA+0.5 mg·L-1 2,4-D。     

羊角槭愈伤组织诱导、增殖与分化

以羊角槭Acer yangjuechi幼嫩茎段和叶片为外植体,研究基本培养基和植物生长调节剂6-苄氨基腺嘌呤（6-BA）,萘乙酸（NAA）,激动素（KT）和N-苯基-N'-1,2,3-噻二唑-5-脲（TDZ）对愈伤组织诱导、增殖与分化的影响。试验通过植物组织培养技术诱导外植体产生愈伤组织,并对愈伤组织进行增殖与分化。结果表明:最适宜愈伤组织诱导的外植体为茎段,基本培养基和适当的植物生长调节剂配比均能促进愈伤组织的诱导增殖与分化;诱导效果最好的基本培养基为木本植物培养基（WPM培养基）。在诱导中,6-BA的效果显著高于NAA和KT。羊角槭愈伤组织诱导最佳培养基为WPM+0.3 mg·L-1 NAA+0.5 mg·L-1 KT+0.5 mg·L-1 6-BA,诱导率达62.9%;愈伤组织增殖最佳培养基为WPM+1.0 mg·L-1 6-BA+0.1 mg·L-1 NAA,增殖倍数达2.4倍。TDZ对分化有重要作用,WPM+1.0 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1 NAA+1.5 mg·L-1 TDZ能促进愈伤组织产生最多不定芽芽点。     

刺楸组培快繁及试管苗保存培养基的筛选

    以刺楸嫩叶柄为外植体,应用均匀设计法筛选最适合的培养基.结果表明,刺楸组织培养的不同阶段需要不同的培养基.最适的愈伤组织诱导培养基为C2D+6-BA(6-苄氨基腺嘌呤) 0.50 mg·L-1+NAA(萘乙酸)1.00 mg·L-1;愈伤组织增殖培养基为C2D+6-BA 0.50 mg·L-1+NAA 0.50～1.00 mg·L-1;愈伤组织诱导再分化培养基为C2D+6-BA 2.50 mg·L-1+KT(激动素) 4.50 mg·L-1+NAA 0.10 mg·L-1;生根培养基为1/2 MS + IBA(吲哚丁酸) 0.10 mg·L-1+IAA(吲哚乙酸) 0.10 mg·L-1;试管苗保存培养基为1/5 MS+ABA(脱落酸) 2.50 mg·L-1.常温条件下,利用低营养促成休眠的方法在试管内保存刺楸种质可达44个月.     

文冠果成熟胚离体培养及细胞学研究

以文冠果成熟胚为外植体,进行了初代培养、继代培养和生根培养研究,结果表明:初代培养诱导文冠果成熟胚形成不定芽的适宜培养基是MS+2.0mg.L-16-BA+0.1mg.L-1NAA+30g.L-1蔗糖+6g.L-1琼脂,分化率可达94.7%;继代高生长的适宜培养基是MS+0.5mg.L-16-BA+0.5mg.L-1NAA+30g.L-1蔗糖+6g.L-1琼脂,培养50d后,苗高大于0.5cm芽数量平均达11.67株;生根培养的适宜培养基是WPM+1.0mg.L-1IBA+30g.L-1蔗糖+6g.L-1琼脂,生根率为70.30%,平均根数为3.57条。并通过石蜡切片技术,观察愈伤组织诱导、愈伤组织分化不定芽以及不定芽发育过程。     

太阳扇愈伤组织培养及植株再生体系建立

以太阳扇(Scaevola aemula)嫩叶、老叶、茎段、茎节为材料进行外植体筛选;以太阳扇嫩叶为外植体,研究愈伤组织诱导、不定芽分化及增殖、生根培养的适宜条件.结果表明:嫩叶为太阳扇愈伤组织诱导最佳外植体;MS+6-BA 0.50mg/L+2,4-D 0.20mg/L为愈伤组织诱导最佳培养基;MS+6-BA 0.50mg/L+NAA 0.10mg/L为芽分化最佳培养基,分化率可达96.5%;1/2MS+NAA 0.01mg/L为芽增殖最佳培养基,增殖系数最高可达3.33;糖浓度、NAA均影响太阳扇无菌苗生根,1/2MS+NAA 0.02mg/L+蔗糖30g/L为生根培养最适培养基;g腐殖质∶g珍珠岩∶g细土=2∶1∶1为组培苗移栽最佳基质,移栽成活率达75%.     

鳄梨组织培养繁殖体系优化研究

为满足市场需求,以鳄梨饱满茎段为外植体采用组织培养方法进行优质种苗繁育,对于该种的产业发展和应有具有重要意义。试验筛选了无菌株体系建立、诱导潜伏芽萌发、丛生芽继代增殖和生根培养较适培养基配方。结果表明：诱导鳄梨无菌株系建立较适培养基为WPM＋1.0 mg?L－16￣BA＋0.3 mg?L－1NAA＋0.5 mg?L－1ZT＋2％蔗糖＋0.2％活性炭＋0.65％琼脂;诱导潜伏芽萌发较适培养基为WPM＋2.0mg?L－16￣BA＋0.5mg?L－1NAA＋1.0 mg?L－1ZT＋2％蔗糖＋0.2％活性炭＋0.65％琼脂,诱导出芽率达到54％;丛生芽继代增殖培养较适培养基为WPM＋3.0 mg?L－16￣BA＋0.3 mg?L－1NAA＋1.0 mg?L－1ZT＋2％蔗糖＋0.2％活性炭＋0.65％琼脂,增殖率达到3.70;幼苗生根较适培养基为1/2WPM＋0.5 mg?L－1 IBA＋0.5 mg?L－1 NAA＋2％蔗糖＋0.2％活性炭＋0.65％琼脂,生根率达到90％。炼苗移栽60 d后成活率为96％。该试验获得的培养基配方,可培养出完整植株,短期内获得大量优质种苗。