火焰南天竹的组织培养

南天竹属小檗科南天竹属,为常绿直立灌木,株高1～2米.原产于我国中部和南部.与普通南天竹林比,植株矮化,枝叶茂密,着叶260～296张.深秋入冬后,翠叶逐渐变成红色,至隆冬初春似火焰迎风,煞是壮观.     

火焰南天竹组培快繁体系的探讨

以观赏灌木火焰南天竹幼嫩茎尖为研究对象,研究不同灭菌时间对成活率及污染率的影响,以及不同培养基和激素浓度对不定芽诱导、增殖和生根的影响。试验表明,在无菌环境下,用70%酒精消毒5 s,再用10%NaClO灭菌12 min的灭菌效果最佳;最佳诱导培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+IBA 0.1 mg·L^-1+AC 1.0 g·L^-1,最高诱导率为87%;最佳增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg·L^-1+NAA 0.1 mg·L^-1+IAA 0.1 mg·L^-1L +AC 1.0 g·L^-1,增殖系数最高可达5.29;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.5 mg·L^-1 +AC 4.0 mg·L^-1,生根率最高可达98%。将火焰南天竹组培苗移入泥炭土∶蛭石∶珍珠岩为8∶1∶1的混合基质中成活率较高,最高可达94%,且组培苗长势良好。     

彩叶树种火焰南天竹的离体快繁研究

以火焰南天竹的幼嫩茎段作为外植体,进行组织培养快速繁殖研究。结果表明:芽诱导培养基以MS+1.5 mg/L6-BA+0.5 mg/L NAA、附加蔗糖60 g/L较为适宜;MS+1.0 mg/L6-BA+0.1 mg/L NAA、pH值5.8为较理想的增殖培养基,芽诱导率达到95%,且苗长势良好;NAA浓度、培养基的无机盐和活性炭用量等因素对火焰南天竹根的诱导存在一定影响,以1/2MS+0.3 mg/L NAA、附加活性炭4 g/L促进生根最有利,诱导率达到84%。     

火焰南天竹组织培养体系建立与优化

火焰南天竹(Nandina domestica‘Fire power’.)属于小檗科(Berberidaceae)南天竹属(Nandina)的常绿小灌木,在园林应用中具有十分重要的观赏价值。常规育苗方法扦插繁殖,繁殖率低,火焰南天竹组培中繁殖率及生根仍是一大难题。研究了不同激素对火焰南天竹不定芽诱导、增殖、生根的影响。结果表明:最佳诱导培养基为MS+0.3 mg/L 6-BA+30 g/L蔗糖,诱导率为93%;增殖培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+30 g/L蔗糖,增殖系数为3.5;生根培养基为1/2MS+0.3 mg/L IBA+20 g/L蔗糖,诱导率达97%。火焰南天竹种苗经有效成分含量为50%的多菌灵稀释1 000倍,浸泡1 h后移栽,移栽成活率高,长势良好。所建立的火焰南天竹快繁体系增殖速度快,短期内可获得大量植株,为工厂化生产提供技术支持,满足市场需求。     

紫薇茎段离体培养体系的优化

以矮首领紫薇当年生半木质化带腋芽茎段、硬枝茎段以及叶片为外植体,从消毒时间、启动培养基、增殖培养基和生根培养基选择等方面进行离体培养体系的优化。结果表明,茎段为较好的外植体。最佳消毒时间:带腋芽茎段用0.1%升汞处理8 min,诱导率为66.67%;带水培芽茎段用0.1%升汞处理4 min,诱导率为65.55%;叶片用0.1%升汞处理4 min,诱导率为55.56%。带腋芽茎段最佳启动培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.10 mg/L,诱导率为83.33%。腋芽和水培芽的最佳增殖培养基均为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.30 mg/L。腋芽增殖系数为2.42,芽长为3.2 cm;水培芽增殖系数为3.21,芽长为2.1 cm。腋芽最佳生根基本培养基为1/2MS,最佳生根培养基为1/2MS+IBA 0.5 mg/L,生根率为96.67%;水培芽最佳生根培养基为1/2MS+IBA0.5 mg/L+活性炭(AC)0.1 g/L,生根率为81.25%。     

耐寒彩叶树种火焰南天竹的快繁技术研究

对新引进的优良灌木火焰南天竹进行组织培养快速繁殖研究。结果表明：增殖培养基以M3 6-BA1．0mg／L IBA0．1mg/L较为适宜，平均繁殖系数达4倍以上；激素种类、培养基的无机盐和蔗糖浓度等因素对火焰南天竹根的诱导有明显影响，发根率最高达64．2％，克服了火焰南天竹扦插不易生根的问题；经对试管苗移栽、管理各环节进行初步探索，可使移栽成活率达70％左右。     

绒毛皂荚离体茎段培养及再生植株的细胞组织学研究

报道了绒毛皂荚离体茎段培养中几种不同的成苗途径，并对其组织分化和器官发生进行了细胞组织学研究，结果表明：以ＭＳ为基本培养基附加一定浓度的细胞分裂素（６ＢＡ）和生长素（ＩＢＡ）在短期内即可诱导带节茎段形成丛状苗，丛苗主要来源于腋芽萌发和腋芽基部分化．愈伤组织在加有生长素的ＭＳ培养基中很容易从茎段切口产生．转移至ＭＳ附加６ＢＡ和ＮＡＡ培养基中能分化不定芽．芽原基起源于愈伤组织近表面的分生细胞团．生长到１．５ｃｍ以上的试管苗可诱导生根，生根培养基中须加入一定浓度的ＩＢＡ．     

黄冠梨茎尖离体培养再生体系建立初探

为建立黄冠梨离体培养高效再生体系,以茎尖为外植体,设计不同消毒处理,外植体离体培养30d后,获得初代培养无菌苗,再通过正交试验设计对增殖和生根适宜培养基进行筛选。结果表明,茎尖消毒以75%酒精处理10s、再用0.1%HgCl2浸泡4min的消毒效果最佳,适宜增殖培养基为AS+6-BA0.8mg/L+NAA0.1mg/L,适宜生根培养基为1/2MS+IBA1.0mg/L。     

杨树叶片离体再生系统的构建

以杨树叶片为外植体,MS为基本培养基,使用不同激素不同浓度配比,建立了杨树叶片离体培养植株再生体系。结果表明：叶片的最佳诱导培养基为：MS＋2,4-D 1.0 mg/L＋6-BA 1.0 mg/L;不定芽培养基为：MS＋NAA1.0 mg/L＋6-BA0.5 mg/L。NAA与BA对愈伤组织诱导有调控作用,NAA/BA比值增大有利于不定芽的诱导,但不能超过4∶1;BA与2,4-D关系比较复杂,当2,4-D和6-BA的浓度均为1.0mg/L时,愈伤组织诱导效果最好。     

光温对火焰南天竹叶色的影响

[目的]研究不同光照强度和温度对火焰南天竹（Nandina domestica‘Firepower＇）叶色的影响,为其在武汉市园林绿化中应用提供科学依据.[方法]选择武汉市园林科学研究所内的晒花场（全光照射）和树荫下及郊区金银湖公园3个温度和光照强度不同的地点进行试验.采用了简便快速的紫外-分光光度计方法提取和测定火焰南天竹叶片中花青素含量.[结果]同一季节不同温度条件下以及不同季节中火焰南天竹叶色和花青素含量对比结果表明,低温对火焰南天竹花青素的形成有促进作用;同一试验地点火焰南天竹不同部位叶片以及不同生长条件下叶色及花青素含量对比结果表明,光照强度对叶色有较强的影响.[结论]低温和较强的光照都对火焰南天竹叶色有明显的影响.因此,在园林绿化应用中应注重栽植地点的选择,使火焰南天竹展现出更好的观赏性.     

日本菟丝子茎段的离体培养

就不同消毒方法和不同培养基对日本菟丝子(Cuscuta japonica)茎段消毒与组培效果的影响进行了研究.结果表明,于100 mLφ(乙醇)=75%中浸泡20 s后用无菌水冲洗2次,500 mLω(HgCl2)=1%中加入0.2 mL吐温-80浸泡4 min后再用无菌水冲洗4次,对日本菟丝子茎段消毒的效果最佳;MS+NAA 1.0 mg/L+活性炭(Activated carbon,AC)0.1 mg/L或1/2 MS+NAA 1.0 mg/L+AC 0.1 mg/L是其茎段最佳培养基.利用该培养基组培获得的菟丝子藤蔓出现类似吸器的突起,在培养瓶内能开出正常的花朵,但未观察到有根的生成,也没有出现自然状态下的自身缠绕现象.     

普通小麦植株再生系统的优化研究

为得到高效稳定的植株再生体系，以我国普栽的3个小麦品种幼胚为材料，进行了组培条件的比较优化研究。结果表明，对于植株的再生分化效率，有效浓度的2，4-D作为诱导激素，效果显著高于有效浓度的Piclorm，所有处理平均可获得54％的植株分化频率。诱导培养基中(MSS3AA／2)中添加0．5mgL^-1的2，4-D，分化培养基中(R)含0．01mgL^-1的2，4-D配加3mgL^-1的KT为优化的激素条件，植株平均再生频率可达83．3％。器官分化频率的相关性分析表明：除了绿点的分化频率和每团愈伤组织苗的分化数彼此独立外，苗分化频率、绿点分化频率和每团愈伤组织苗分化数之间都存在不同显著水平的相关性。     

Vertebrate regeneration system: culture in vitro

With standard tissue-culture techniques and media, various components of the lizard tail regenerate have been maintained in culture for 8 months. Differentiation of two cell types, melanophores and striated muscle, has been obtained. Myoblast proliferation and fusion can be selectively controlled by altering the culture medium.     

箭杆杨组织培养再生体系的建立

【目的】探讨常温下适宜箭杆杨试管苗腋芽增殖、生根的最佳培养条件。【方法】以MS培养为基本培养基,附加不同浓度的吲哚丁酸(IBA)、萘乙酸(NAA)以及6-氨苄基腺嘌呤(6-BA)组成试验培养基,对箭杆杨组织进行培养,观察其生根情况和愈伤组织诱导情况。【结果】箭杆杨脱分化最佳培养基为:MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1mg/L IBA,该条件下的愈伤组织诱导率为90%;不定芽分化诱导培养基为:1/2MS+0.1 mg/L IBA+0.5 mg/L6-BA,该条件下的诱导分化率为67.1%;芽增殖培养基为:MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1mg/L IBA,该条件下的增殖数为5.8;最佳生根培养基为:1/2MS+1.0 mg/L IBA,该条件下的生根率为81.3%。【结论】建立了箭杆杨组织培养再生体系,为其种质资源的试管保存奠定了基础。     

扭果花旗杆组织培养与再生体系的建立

【目的】以扭果花旗杆(Dontostemon elegans)根和下胚轴为外植体,建立扭果花旗杆组织培养体系,为后续遗传转化体系的建立提供技术基础。【方法】以MS培养基为基础培养基,利用萘乙酸(NAA)探究根和下胚轴直接诱导不定芽情况,利用2,4 二氯苯氧乙酸(2,4-D)、6-苄氨基嘌呤(6-BA)、NAA、苯基噻二唑基脲(TDZ)、吲哚丁酸(IBA)进行愈伤组织诱导及分化和不定芽生根试验,统计愈伤组织诱导及分化和不定芽生根情况,确定扭果花旗杆组培体系最佳培养基类型。【结果】（1）由根和下胚轴直接诱导不定芽的最适培养基分别为MS+0.3 mg/L NAA和MS+0.6 mg/L NAA,直接诱导不定芽的最佳外植体为根。（2）扭果花旗杆根和下胚轴都能诱导愈伤组织,其中根系诱导愈伤组织速度最快且状态最佳,其次为下胚轴。根系愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,诱导率可达100.00%;下胚轴愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+0.3 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L 6-BA+1.5 mg/L NAA,诱导率可达100.00%。（3）根系和下胚轴的最佳愈伤组织分化培养基均为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA,分化率分别为100.00%和86.66%。（4）最佳生根培养基为MS+0.5 mg/L IBA,生根率可达50%以上。（5）将组培苗移至土壤后,在光照培养室培养15 d,其存活率可达83.33%。【结论】建立的扭果花旗杆组培体系可获得与实生苗形态一致的组培苗,为扭果花旗杆遗传转化体系的建立奠定了技术基础。     

椪柑成年态节间茎段再生体系的建立

为了建立椪柑成年态离体高效再生体系,比较了7种消毒方法的灭菌效果和4种培养基配方,结果表明:改良消毒法能有效降低成年态桠柑节间茎段的污染率(约12.2%)和死亡率(约27.2%),增加外植体的萌芽率(约12.8%)和成功率(约30.6%);MS BA 1 mg/L NAA 0.5 mg/L最适合椪柑成年态节间茎段生长,萌芽率达12%;另外,1 cm左右的成年态接穗茎尖嫁接的成活率仅约10%,选用5 mm以下的茎尖可明显提高嫁接成活率,使用1 mm左右茎尖进行微芽嫁接成活率最高,这可能与柑橘接穗越大携带的内生菌越多有关.     

墨西哥菊叶薯蓣茎段再生繁殖技术

【目的】建立高效稳定的菊叶薯蓣组织培养快繁体系,以保持品种的遗传稳定性。【方法】分别以室内和田间培育的墨西哥菊叶薯蓣藤茎茎段为外植体起始材料,比较依次用0.55%次氯酸钠、体积分数70%酒精和1.0g/L HgCl2消毒不同时间对外植体的消毒效果,并通过不同植物生长调节剂及其浓度组合筛选适合菊叶薯蓣组培快繁的茎段不顶芽诱导培养基、继代培养基和生根培养基。【结果】以室内培养的墨西哥菊叶薯蓣藤茎为起始材料,依次用0.55%次氯酸钠消毒5 min,体积分数70%酒精消毒1 min,1.0 g/L HgCl2消毒8 min,最后用无菌水清洗3次,获得材料的污染率可控制在5%;筛选出茎段不定芽诱导培养基为MS+3.0 mg/L BA+0.2 mg/L NAA,不定芽诱导数可达4.3个,诱导率达95%,且不定芽质量较好;将分化的不定芽转至MS+1.0 mg/L BA+0.2 mg/L IBA继代培养基,单茎芽增殖率可达到3.5;茎芽在1/2 MS+1.0 mg/L IBA生根培养基上可以诱导出良好的根系。【结论】按上述方法培育的菊叶薯蓣生根试管苗炼苗后,移栽至珍珠岩+粗沙+田园土按体积比2∶1∶1配置的介质中,移栽成活率可以达到85%以上,表明所建立的墨西哥菊叶薯蓣组培快繁体系是可行的。     

菜用大豆高效离体再生体系的优化

为筛选较易再生的菜用大豆品种,为遗传转化建立良好的再生体系,以‘春丰早’、‘浙农6号’、‘浙农8号’、‘沪宁95-1’、‘辽鲜1号’和‘台湾75’为材料,研究外植体类型、激素配比、接种时间、接种方式以及基因型对再生频率的影响。结果表明：不同外植体类型中,子叶—子叶柄的再生频率最高;B5培养基+10 mg·L-1 TDZ+005 mg·L-1 NAA+50 mg·L-1 AgNO3为最佳培养基;种子发芽10 d为最佳接种时间;子叶—子叶柄垂直接种时再生频率较高;不同品种中,‘浙农8号’再生频率最高,达8089%;最佳生根培养基为1/2 B5+05 mg·L-1 NAA。     

马铃薯茎段愈伤组织培养体系的优化

以克新12号、克新13号、东农303和早大白4种马铃薯试管苗茎段为材料,研究各品种的组织培养体系。结果发现,克新13号和克新12号的最适愈伤组织诱导培养基为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2 mg/L 6-BA+1 mg/L 2,4-D;东农303为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D;早大白为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D。用上述最适诱导培养基培养,各品种的愈伤诱导率分别为100%,100%,100%和90%。克新13号愈伤组织分化的最佳培养基为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+4.0mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+1.0 mg/L GA3;克新12号和早大白为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L GA3;东农303为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/LNAA+1.5 mg/L GA3。用上述最适诱导培养基培养,各品种的分化率分别为80%,90%,100%,76.7%。