猪瘟兔化弱毒组织培养疫苗的研究——用羔羊肾和羔羊睾丸细胞培养物繁殖弱毒和制备疫苗

用仔猪肾细胞培养物制备的猪瘟兔化弱毒(简称弱毒)疫苗,对猪具有良好的免疫原性,在国内已大量生产和使用。但是,用仔猪肾细胞培养物培养时,弱毒的毒价不够稳定,另外,使用仔猪肾细胞培养制备疫苗,仔猪有感染潜在致病力的各种致病微生物的可能,特别是对仔猪来源控制不严时有混入     

猪瘟兔化弱毒苗生产

犊牛睾丸细胞培养冻干苗对猪瘟的预防起到了极其重要的作用,我国目前普遍使用这种疫苗,但许多地区发生不同程度的猪瘟疫苗免疫失败.提高猪瘟疫苗质量是避免免疫失败的有效方法之一.     

用微量细胞培养ELISA测定HCLV TCID_(50)

应用猪瘟兔化弱毒制备的猪瘟兔化疫苗常因为剂量不足而引起免疫失败。究其原因主要是因为兔检(RID)合格的猪瘟兔化苗批间差异较大,质量不稳定。为此建立微量细胞培养ELISA用以测定HCLV TCID50,并获得成功,可以替代RID测毒。     

GPE~-猪瘟弱毒疫苗

在19世纪末期,明确了感染猪瘟而耐过的猪不再感染猪瘟,并能获得极为坚强的抵抗力。从此,世界各国对于应用疫苗预防猪瘟进行了大量的研究,并研制出各种疫苗。日本迄今为止,也曾采用过各种疫苗(表1)。日本从1951年开始研究猪瘟弱毒疫苗,在所研究的弱毒疫苗当中,有通过猪以外的动物驯化培育出来的和通过细胞培养驯化得到的两     

猪瘟免疫失败的原因分析

正猪瘟免疫接种经常开展,导致猪瘟免疫接种的失败原因很多,免疫剂量低、免疫操作不规范、猪瘟疫苗使用过程中的监管,提高防疫人员的素质水平,也直接决定着防疫工作的成功与否。一定要做好猪瘟的免疫工作,并科学分析免疫失败的原因,找出相应的解决措施,提高免疫的成功几率。1猪瘟免疫失败原因分析1.1疫苗过程目前,组织弱毒疫苗与细胞培养弱毒疫苗是使用最为广泛的猪瘟疫苗,且各自具备不同的防     

猪瘟疫苗及其合理使用

1猪瘟疫苗的制作与分类猪瘟疫苗系用猪瘟兔化弱毒株接种易感细胞,主要是家兔、乳兔和牛睾丸等细胞培养,收获感染家兔的脾脏及淋巴结或乳兔的肌肉及牛睾丸等实质脏     

猪瘟免疫程序参考

猪瘟是危害养猪业最严重的传染病 ,免疫接种是最主要的防制措施。目前我国按农业部规定普遍使用的是“猪瘟细胞培养弱毒冻干活疫苗”(用世界著名的中国猪瘟兔化弱毒株—Ｃ株 ,接种牛睾丸细胞培养 ,收获细胞培养物 ,加稳定剂 ,经冷冻真空干燥制成 )免疫预防 ,但各地常出现免疫失     

猪常用疫苗基本特性及使用方法

(一)猪瘟疫苗免疫接种是预防和控制猪瘟的主要手段,目前我国瘟猪疫苗种毒均为猪瘟兔化弱毒,疫苗有组织苗和细胞苗2种类型。组织苗主要是利用猪瘟兔化弱毒接种3～5日龄乳兔,接种36小时后取乳兔的肝、脾及肌肉组织制成的疫苗。细胞苗是猪瘟兔化弱毒经犊牛睾丸细胞或ST细胞培养制成的疫苗,犊牛睾丸细胞有可能携带牛病毒性腹泻粘膜病病毒。生     

3种不同类型佐剂的猪瘟E2基因工程亚单位疫苗免疫效果的比较研究

为了筛选用于制备猪瘟E2基因工程亚单位疫苗的佐剂,用水佐剂、双相佐剂以及油包水佐剂分别制备了 3种猪瘟E2基因工程亚单位疫苗,在猪上进行了免疫效果的评价.本试验选取4～5周龄猪瘟病毒病原、抗体阴性猪40头,随机分为8组,每组5头,其中3组用于3种不同佐剂制备的亚单位疫苗的单次免疫效果评价,3组用于疫苗的二次加强免疫效果...     

基于哺乳动物细胞表达系统的猪瘟基因工程E2亚单位疫苗动物免疫效果评价

猪瘟E2基因工程亚单位疫苗能诱导机体产生抗CSFV中和抗体,被认为是最具应用前景的新型猪瘟疫苗。本研究利用稳定表达重组CSFV E2蛋白的细胞系HEK-293T-E2,制备E2亚单位疫苗并在动物体内检测其免疫原性。结果显示,制备的E2亚单位疫苗能成功诱导试验兔和仔猪产生抗CSFV抗体,相比对照组,试验动物能够抵抗猪瘟标准强毒石门株的攻击,并且没有产生体温升高及其他不良反应,证实了该疫苗的有效性和安全性。本研究为新型猪瘟亚单位疫苗的研发提供了重要线索。     

猪瘟不同免疫程序对免疫效果的影响

猪瘟严重危害养猪业,但目前尚未找到有效的治疗方法,只能以预防为主。因此,避免猪场发生猪瘟必须认真进行免疫。目前我国普遍使用的是“猪瘟细胞培养弱毒冻干活疫苗”,但各地免疫失败情况屡见不鲜,给养猪场户造成不应有的损失。     

纳米磷酸钙作为猪瘟多肽疫苗佐剂的研究

为了探索纳米磷酸钙(NCaP)作为猪瘟多肽疫苗佐剂的可行性,本研究利用猪瘟多肽疫苗作为抗原,制备纳米磷酸钙吸附猪瘟多肽疫苗。将制备好的疫苗免疫兔后,分别检测兔抗体水平和攻毒后体温变化情况。检测结果显示,纳米磷酸钙对猪瘟多肽吸附率达70%;免疫后纳米磷酸钙佐剂组抗体水平低于弗氏佐剂,但与游离猪瘟多肽疫苗组相比,有较大提高;除弗氏佐剂组外,所有实验兔均有体温升高现象,纳米磷酸钙佐剂组体温升高的时间与空白组相比推迟16 h。结果表明,NCaP作为佐剂相对游离猪瘟多肽可提高其免疫效果,但其诱导的抗体水平低于弗氏佐剂组。     

猪瘟病毒DNA疫苗注射小鼠的免疫学研究

猪瘟是猪的一种高度接触性传染病,由黄病毒科瘟病毒属的猪瘟病毒(Classical Swine Fever Virus,CSFV)引起。自猪瘟病毒被确认以来,国内外投入大量人力物力致力于疫苗的研究,并研制出具有强保护作用的兔化弱毒苗等疫苗品种,在防制猪瘟方面发挥了巨大作用。与传统疫苗相比,DNA疫苗具有易于构建和制备、稳定性高等特点,能通过不同途径诱导机体产生体液和细胞免疫。关于猪瘟病毒DNA疫苗的研究国内外均有报道[1]。试验利用已经构建成功的猪瘟病毒DNA疫苗给小鼠肌肉注射,研究其免疫作用,为确定疫苗的保护效力和进一步改良提供依据。1材料和…     

猪瘟疫苗中BVDV污染一步法RT-PCR检测方法的建立与应用

为建立一种快速检测猪瘟(CSF)疫苗中牛病毒性腹泻病毒(BVDV)污染的方法,试验根据GenBank上登录的BVDV 5'端非编码区基因组序列设计1对引物,经一步法RT-PCR反应条件的优化,建立了检测猪瘟疫苗中BVDV污染的一步法RT-PCR。结果表明:该方法对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病毒、牛副流感病毒3型、牛传染性鼻气管炎病毒的扩增结果均为阴性,对BVDV基因组RNA的检测灵敏度达0.1 ng,与细胞培养法的符合率达100%。应用该方法对猪瘟疫苗、牛血清等138份样品进行BVDV污染的检测,阳性污染率达11.59%。该一步法RT-PCR具有良好的特异性、敏感性、准确性和适用性,可用于猪瘟疫苗生产中血清、细胞、毒种、半成品等的质量控制及猪瘟疫苗临床应用中的质量检验。     

猪瘟兔化弱毒疫苗株基因组的遗传变异分析

参照已发表的猪瘟病毒基因组序列设计了9对引物，用RT-PCR从猪瘟兔化弱毒疫苗株细胞培养物中扩增得到了覆盖猪瘟病毒基因组全长的9个cDNA片段，将所得cDNA片段分别克隆至pMD18-T载体中，经测序和拼接后，获得了猪瘟兔化弱毒疫苗株基因组全序列。序列分析表明，猪瘟兔化弱毒疫苗株基因组全长12310个碱基，其5’非编码区（5＇-NCR）和3＇-NCR分别由373和239个碱基组成，在3’末端有富含T的碱基插入，其间为1个大的开放阅读框架，编码3898个氨基酸残基的多聚蛋白，与国内外已发表的另外7个猪瘟兔化弱毒疫苗株基因组全序列相比，核苷酸同源性为98．7％～99．9％，氨基酸同源性为98．6％～99．9％。基因组全序列比较显示，猪瘟兔化弱毒疫苗株基因组在遗传上相当稳定。     

关于“浅谈规模猪场疾病防治”一文中“合理免疫程序”的商榷

《中国动物检疫》第１５卷第４期刊载的《浅谈规模猪场疾病防治》一文“合理免疫程序”中论述的猪瘟免疫的两种方法,本人阅后,认为不妥,缺乏科学依据,特提出来与胡至刚同志商榷。目前,我国预防猪瘟主要使用猪瘟兔化弱毒疫苗和猪瘟细胞培养活疫苗,免疫期为一年。所以...     

猪瘟活疫苗（传代细胞源）的田间免疫效果试验

目前猪瘟疫苗主要有牛睾丸细胞苗、兔脾淋组织疫苗和传代细胞源活疫苗（ST传代细胞疫苗）,该疫苗采用国际认证的同源传代ST细胞培养,批间差异极小。稳定性好,病毒培养液中病毒含量高,而且避免了其它病毒污染的威胁．到2009年12月31日止,公司在农业部规定的广东、湖南、河南、四川、江苏、山东、辽宁和福建等8省（区）共销售使用了猪瘟活疫苗（传代细胞源）2000多万头份,     

动物病毒疫苗的研究现状与展望

１　动物病毒疫苗的发展概况动物病毒疫苗的研制大致分为四代。由感染组织和随后以感染鸡胚的胚液或组织制备的疫苗，如兔病毒性出血症组织脏器苗，鸡新城疫鸡胚苗等被视为第一代疫苗；以人工感染的细胞培养物制成的弱毒疫苗或灭活疫苗、以及筛选异源或同源自然弱毒株研制的弱毒苗，如猪瘟兔化弱毒牛睾丸细胞苗为第二代；这两代疫苗统称为传统疫苗。目前常用有湿苗、冻干苗、灭活油乳剂苗等。由于是用完全病毒制备而成，故不可避免有一些与特异性免疫无关的成分存在，可能引起局部或全身不良反应，因此人们急需获得一种只含有特异性抗原的新…     

猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞旋转培养制造猪瘟冻干苗的研究

为了克服猪瘟兔化弱毒乳免疫苗成本高,易污染的缺点,弥补采用常规猪肾细胞制造猪瘟弱毒疫苗的潜在致病危险性。本文成功的在犊牛睾丸细胞上连续增殖猪瘟化弱毒,特别是利用次代或二代细胞进行转瓶堵养,收获的猪瘟兔化弱毒其毒价稳定,细胞不易老化脱壁。现已制成猪瘟兔化弱毒犊牛睾丸细胞培养冻干疫苗,生产工艺简单,成本较低。疫苗对猪的免疫原性良好,免疫期一年以上。性能稳定,在-15℃可保存13个月,4℃保存半年以上,25℃也可保存14天。经7691头猪的免疫接种试验,证明本苗安全,无一死亡,个别猪有反应,其反应率仅为0.74%。     

动物接种疫苗发生不良反应的原因

<正>疫苗对动物机体的刺激可发生正常生理反应和非正常的病理反应,这些都是动物机体的生物学效应,机理相对复杂,通常情况下,动物由于接种疫苗出现副反应的原因主要归结为三个:即疫苗质量、机体及操作等原因。1疫苗原因1.1疫苗质量问题在疫苗制备过程中,外源病原污染常常导致副反应发生,如猪瘟活疫苗中污染了猪瘟强毒病源,当接种这种疫苗时就会出现猪瘟疫情。另外灭活疫苗由于抗原灭活不全,接种此类疫苗也会导致疾病发生。