马铃薯脱毒种薯生产技术及种薯基地建设的研究报告

利用往复聚丙烯酰胺凝胶电泳法（Ｒ－ＰＡＧＥ）检测筛选出感染ＰＳＴＶ的块茎，采用酶联双抗体夹心法检测主要马铃薯病毒状况，筛选出无毒苗做为原原种生产的基础苗。脱毒试管苗经扩大繁殖后，经常会出现某些病毒浓度增高的情况，因此，每年再进行类病毒和主要马铃薯毒病的检测筛作为下一年应用的基础试管苗。研究出的准确，简易检测类病毒的双向聚丙烯酰胺凝胶电泳技术比往复电泳示灵敏度高６４倍，甚至取一段２ｃｍ长，重４０微克     

PSTVd，PLRV和PVS在马铃薯试管苗不同部位继代积累规律研究

 为研究病毒和类病毒在马铃薯试管苗不同部位的积累规律,利用实时荧光定量PCR和DAS-ELISA两种方法检测马铃薯纺锤块茎类病毒(Potato spindle tuber viroid, PSTVd)、马铃薯卷叶病毒(Potato leafroll virus, PLRV)和马铃薯S病毒（Potato virus S, PVS）在马铃薯试管苗基部和顶端继代培养5代（继5代）后的含量。结果表明：PSTVd,PLRV和PVS在马铃薯试管苗常规组织培养过程中是逐代传递的,其在马铃薯试管苗顶端和基部的积累规律存在显著的品种差异,分别供试的7个品系中,存在PSTVd顶端积累和基部积累效应的各3个品系,存在PLRV顶端积累和基部积累效应的分别为4个和2个品系,存在PVS顶端积累和基部积累效应的分别为3个和2个品系,其中PSTVd的顶端积累效应最强为基部的4倍;同一马铃薯品系的顶端和基部对不同病毒和类病毒的积累趋势相对一致。实时荧光定量PCR是一种灵敏度很高的定量检测马铃薯病毒和类病毒的方法。     

马铃薯试管苗保存毒源PVA技术的研究

报道了含PVA毒源的马铃薯试管苗保存技术及效果。在无菌条件下切取毒源马铃薯茎尖于盛MS培养基的试管中培养,当毒源马铃薯长至12 cm时单节切段进一步扩繁培养。利用免疫电镜法、电镜负染法筛选出3管纯毒源材料。进一步试验表明:免疫电镜法鉴定证明毒源马铃薯试管苗接种3周后病毒含量明显提高;毒源马铃薯试管苗移至花盆中栽培表现出典型的PVA症;用毒源马铃薯的汁液接种指示植物表现典型PVA状,说明毒源马铃薯试管苗的PVA具有侵染力。用马铃薯试管苗保存PVA毒源,克服了传统保存中的不足,提高了保存效果。     

核果类病毒识别鉴定及脱毒技术

本文论述了近７年来进行核果类病毒识别检测及脱毒技术的研究结果。病毒识别检测主要方法；１．田间现有栽培苗病毒症状调查；２．生物学指示法；３．血清酶免疫法；４电镜及ｄｓ－ＲＮＡ检测法。脱毒技术用：小茎尖分生组织培养，微型嫁接法，热气处理法。     

马铃薯病毒试管苗保存技术及病毒侵染力的研究

无菌条件下切取毒源马铃薯茎尖于MS培养基中培养,当毒源试管苗长至10 cm时切取单节段扩繁。通过免疫电镜法、电镜负染法和DAS-ELISA法鉴定,筛选出4管纯毒源材料。筛选出的试管苗毒源经18个月保存病毒仍存在,将毒源试管苗移至花盆中栽培,试验管苗表现出马铃薯病毒A(PVA)侵染症状,用毒源马铃薯汁液接种的指示植物也表现典型PVA症状,说明毒源试管苗保存的PVA具有侵染力。用试管苗保存马铃薯病毒,可提高毒源保存效果。     

PP_（333）对马铃薯试管苗生长和长期保存的影响

研究了自然温度与恒温培养条件下，不同ＰＰ_（３３３）浓度处理对马铃薯试管苗生长和长期保存的影响，结果表明，自然温度培养对马铃薯试管苗延缓生长、延长保存时间、提高存活率更有利，存活率可达１００％，还有促进试管苗结薯的作用。随ＰＰ_（３３３）使用浓度的增加，抑制试管苗生长的作用也增强，保存时间也相应延长。１０ｍｇ／Ｌ处理经３００天培养后，株高几乎与原接种时一样，经ＰＰ_（３３３）处理的试管苗比对照矮壮、叶数增多、根数少而粗短，存活率高。试管苗继代保存期由１年转管４－５次，延长到１－１．５年转管１次。当转入恢复生长的培养基１０天后，就能恢复至正常生长状态。     

马铃薯种质的试管苗复壮研究

以贵州省马铃薯研究所保存的马铃薯种质试管苗为试验材料,研究外源植物生长激素、植物生长延缓剂、活性炭及培养方式对试管苗复壮的影响,结果表明:外源植物生长激素和植物生长延缓剂的长期使用,均可造成马铃薯种质试管苗长势的退化;降低或不添加外源植物生长激素或延缓剂,可一定程度缓解马铃薯种质试管苗长势退化、复壮试管苗;活性炭的添加和液体培养对马铃薯种质试管苗生长势的恢复有较显著的效果。     

马铃薯脱毒试管苗培养研究初报

试验以马铃薯茎尖脱毒快繁成熟理论为指导，探讨自然光照培养、固体和液体培养基培养对马铃薯试管苗生长的影响。结果表明：采用自然光照培养的试管苗株高显著降低，试管苗单株有效节数显著增加；液体培养基培养试管苗植株生长势强，移栽后缓苗快，成活率高。     

B9和PP33对马铃薯试管苗生长的影响

研究了不同浓度的B9和PP333处理在室温与恒温培养条件下对马铃薯试管苗生长的影响。结果表明：B9和PP333均不同程度地抑制试管苗徒长，促使节间缩短、叶绿素含量增加，形状壮苗，同时有利于试管苗较长时间保存。相对于B9，PP333处理的效应更佳，促进组织中SOD活性增加可能是PP333促进马铃薯试管苗生长健壮，并适宜较长时间保存的机制之一，不同培养条件（温度等）对试管苗的生长也有明显影响。     

脱毒马铃薯试管苗培养及试管薯诱导研究

以脱毒马铃薯试管苗和试管薯为研究对象,以其试管苗的培养和试管薯的诱导为研究目标,通过茎尖分生组织培养技术对脱毒马铃薯试管苗进行了培养,分析不同培养基和不同激素含量对脱毒马铃薯试管苗生长情况的影响。结果表明,相比于固体培养基来说,液体培养基不仅能够促进脱毒马铃薯试管苗的快速、健壮生长,而且还能够有效节省生产成本。当外界环境适宜时,马铃薯试管苗的形成和发育在没有任何激素的情况下也能够形成微型薯。但与相同环境下含有诱导结薯激素的培养基相比,其结薯率较低,且结薯较晚。     

高效低成本生产健壮马铃薯试管苗技术研究

为了简化马铃薯脱毒试管苗培养方法，降低生产成本。进行了调整培养基成分、试管苗复壮和改进实验设备三方面研究。结果表明，以食用棉白糖、倍力凝作为蔗糖、琼脂的替代物，再将微量元素减半，用经过滤的自来水配制的培养基对马铃薯苗的生长不会产生负面效应，培养成本可降低84．4％。对生长势弱的马铃薯苗，附加2mg／L IBA的2倍MS液体培养基对其有促壮作用。用回收旧罐头瓶作培养容器，用聚丙烯膜、线绳封口，不仅对试管苗的生长无任何影响，而且可节约投资达90％以上。     

香石竹试管苗对营养物质吸收消耗规律

为加快香石竹试管苗的繁殖速度，对培养基中营养物质的变化进行了研究。结果表明，香石竹试管苗吸收磷，氮符合幂函数曲线，培养过程中培养基的糖含量直线下降，通过回归分析，培养基中ＰＯ４＾３－，ＮＨ４＾＋，ＮＯ３＾－，总氮与糖的含量对其培养时间的回归系数分别为－０．９４９０，－０．９０９０，－０．９４００，－０．９０６０，经统计检测都达到极显著水平，试管苗高生长与鲜重增长遵循双曲线函数关系，而丛生芽分化遵循     

PP333对马铃薯试管苗生产和长期保存的影响

研究了自然温度与恒温培养条件下，不同ＰＰ３３３浓度处理对马铃薯试管苗生长和长期保存的影响，结果表明，自然温度培养对马铃薯试管苗延缓生长，延长保存时间，提高存活率更有利，存活率可达１００％，还有促进试管苗结薯的作用，随ＰＰ３３３使用浓度的增加，抑制试管苗生长的作用也增强，保存时间也相应延长１０ｍｇ／Ｌ处理经３００天培养后株高几乎与原接种时一样，经ＰＰ３３３处理的试管苗比对照矮壮、叶数增多，根数少而粗     

马铃薯茎尖脱毒及病毒鉴定技术研究

为探讨利用马铃薯茎尖分生组织获得脱毒苗以及脱毒苗鉴定的方法,本实验以马铃薯茎尖分生组织为培养对象,通过外源激素分化愈伤组织形成组培苗,并用分子生物学的手段对病毒进行鉴定。实验中将本地小黄皮马铃薯品种的芽通过显微镜切下0.2～0.3 mm的茎尖,在基本培养基(MS)+0.5 mg·L^-1 6-苄基腺嘌呤(6-BA)+0.1或0.5 mg·L^-1萘乙酸(NAA)培养基中进行试管苗分化培养,当分化出的试管苗培养到苗长5～10 cm时,转接到MA+6-BA 0.15 mg·L^-1+NAA 0.2 mg·L^-1培养基中进行壮苗培养,然后采用qRT-PCR的方法对小黄皮马铃薯试管苗进行病毒检测,实验表明,在试管苗中未检测出马铃薯X病毒(potato virus X,PVX)、马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)、马铃薯H病毒(potato virus H,PVH)和马铃薯M病毒(potato virus M,PVM)等,大田种植的脱毒试管苗形成试管薯后,其产量和品质明显优于对照组。该研究为马铃薯...     

冬种马铃薯试管苗壮苗技术研究

【目的】建立冬种马铃薯试管苗高效生产技术体系。【方法】在不同植物生长调节剂、光强和昼夜温差、培养器皿和封口材料、固液体MS和1．5MS培养基条件下对马铃薯试管苗进行壮苗培养。【结果】在MS培养基中添加B9和CCC，均对马铃薯试管苗壮苗培养有促进作用，但以B9的效果最佳、最持久；当光照强度为3000lx、昼夜温差为8℃左右时，即培养温度在18～26℃时壮苗培养效果较佳。与固体培养基相比，1．5MS液体培养基对试管苗的壮苗效果更明显；与试管和250mL罐头瓶相比，透光、透气性好的150mL三角瓶带塑料封口膜更有利于马铃薯试管苗壮苗培养，且操作方便，试管苗生长较好。【结论】在光照强度3000lx、温差为8℃条件下，在带塑料封口膜的150mL三角瓶中采用添加既的1．5液体MS培养基对马铃薯试管苗进行壮苗培养，可获得较好的培养效果。     

西吉县马铃薯种薯脱毒技术与应用效益

西吉县马铃薯脱毒种薯生产技术从1998年起,经过8年的试验研究,总结出了马铃薯茎尖组织培养脱毒技术、病毒及类病毒检测技术、试管苗切断扩繁技术、扦插快繁生产原原种技术和脱毒薯4年4级繁殖生产等5大技术体系,园区年生产马铃薯脱毒试管苗300万株,生产原原种1000万粒,年生产原种3000 t、一级种30000 t,取得了显著的应用效果。     

温度对马铃薯脱毒试管苗生长发育的影响

正马铃薯组织培养受多种因素的影响,其中温度是一个非常重要的因素。为降低工厂化生产马铃薯脱毒试管苗的成本,提高试管苗的质量,以及不同温度对马铃薯脱毒试管苗生长的影响,筛选出适宜的培养温度,为马铃薯脱毒试管苗工厂化生产提供理     

无机盐浓度对马铃薯脱毒苗微繁的影响

采用已脱毒的马铃薯试管苗为材料,研究MS培养基浓度和氮磷浓度对“Atlantic”马铃薯试管苗增殖和生长的影响,结果表明:1.0 MS培养基最适于马铃薯试管苗的培养,0.5 MS只对根的生长有利,而2.0 MS则只能促进茎粗的增加.MS培养基中氮浓度降为30 mM时,可促进马铃薯试管苗地上部和地下部的生长;磷浓度提高为2 500μM时,有利于马铃薯的增殖和地上部生长,磷浓度为1 250μM时,根的生长旺盛.     

不同组分及低磷钾胁迫的马铃薯试管苗快繁培养基研究

为培养出高品质、高效率、低成本的马铃薯脱毒试管苗,以马铃薯脱毒试管苗克新13为试验材料,以MS为基础培养基,研究不同组分的快繁培养基对马铃薯试管苗农艺性状、生物量及叶绿素含量的影响。结果表明:不添加有机物的培养基,可保证试管苗健康生长;不添加微量元素和铁盐的培养基不利于试管苗的生长。不添加有机物且大量元素中添加磷、钾素减半的低磷、钾胁迫的培养基没有对试管苗的生长产生不利影响,多数指标与在CK培养基上生长的试管苗水平较接近,而且在活叶数、有效茎节数、生物量、平均根长以及平均根条数方面优于全量添加的CK培养基。从节约成本的角度考虑,不添加有机物且大量元素中磷素和钾素减半的MS培养基可以应用于马铃薯试管苗的生产中。     

寡糖·链蛋白对马铃薯试管苗生长的影响

[目的]研究6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂对马铃薯试管苗生长的影响，确定该药剂对马铃薯试管苗促生的最适稀释倍数，以期为马铃薯试管苗的高效生产移栽和马铃薯生产的减肥减药提供理论依据。[方法]以马铃薯陇薯9号试管苗为试材，采用6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂进行不同稀释倍数的蘸根处理，研究该药剂对试管苗生长相关指标、结薯重及对温室移栽的影响。[结果]6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂对马铃薯陇薯9号的株高、根长、根数、叶片数和鲜重均有一定程度的促进作用，增强壮苗能力，也能增加试管苗移栽成活率和结薯重，该药剂150～300倍液对陇薯9号试管苗蘸根15～30 min,试管苗的各项生长指标、成活率和结薯重最高，植株生长健壮，生长状况最佳。[结论]6%寡糖·链蛋白可湿性粉剂使用效果理想，减少了用药次数，可在马铃薯生产过程中推广应用。