东乡野生稻抗寒基因的利用与前景展望

东乡野生稻是普通野生稻（φＮ／２８°１４’）,它具有特强的耐寒性、耐瘠性等有利基因资源,值得重视。本文阐述了东乡野生稻抗寒性的研究与利用,分析东乡野生稻耐寒基因资源利用的可行性和开发前景。     

红提葡萄抗寒栽培技术

介绍红提葡萄（Ｒｅｄ Ｇｌｏｂｅ）的品质特性及在宁夏的表现，提出了宁夏地区红提葡萄抗寒栽培技术。     

中国野生葡萄重要酿酒品质性状的研究

 中国野生葡萄各品质指标在种间、种内株系间存在着广泛的差异。有许多高糖适酸类型,其单宁、总酚普遍偏高,但仍存在一些接近于栽培种的类型,其颜色有白、桃红、红等。对其综合品质评价显示野生葡萄可以直接用作酿酒或经改良后使用的材料。     

中国野生葡萄染色体倍性研究

利用去壁低渗染色体计数法及流式细胞术法,首次系统地对中国野生葡萄18个种64个株系的染色体倍性进行了鉴定。结果表明,供试的中国野生葡萄全部为二倍体(2n=38)。同时也证明流式细胞仪不仅可以进行染色体倍性的鉴定,且制样简单、测定快速、结果可靠。     

贺兰山东麓酿酒葡萄综合抗寒栽培技术研究

为了解决酿酒葡萄遭受冻害的问题,根据当地气候条件,对宁夏贺兰山东麓酿酒葡萄产业冻害情况进行了详细分析,提出了几种有效的抗寒栽培技术,以及冻灾发生后的补救措施为加强综合管理和发芽处理,以期为葡萄酿酒产业用户提供帮助。     

葡萄生产中的抗寒与抗病

内蒙古自治区的葡萄生产在进入20世纪90年代以来无论从生产规模还是品种结构上较以往都取得了长足的进步，但是由于自然条件的限制，如何提高抗寒与抗病始终是摆在我们面前的两大课题。针对上述情况，结合本区的一些葡萄品种做了比较与分析，并提出了一些意见与建议。     

野生葡萄扦插研究

为探讨湖南永州境内几种野生葡萄的扦插生根特性,分别于2004年2月和2005年1月剪取野生状态的华东葡萄(有东安1号、2号、3号,冷水滩1号、2号,道县1号,芝山1号等7种不同株系)、腺枝葡萄、蘡奥葡萄、复叶葡萄、蛇葡萄5种野生葡萄和欧美杂种巨峰葡萄(对照)的枝条进行插扦试验.结果表明:1)5种野生葡萄的扦插成活率均极显著低于巨峰(80.0%).5种野生葡萄的扦插成活率从大到小依次为蛇葡萄(60.0%)、腺枝葡萄(32.5%)、华东葡萄(22.5%)、蘡奥葡萄(17.5%)、复叶葡萄(12.5%).华东葡萄不同株系间扦插成活率不同,东安3号成活率最高(60.0%),极显著高于其他株系,东安2号和冷水滩2号成活率最低,均为7.5%.2)不同浓度NAA对腺枝葡萄生根有一定的促进作用(生根率达50.0%,以质量浓度100 mg/L较为合适),而对华东葡萄和蘡奥葡萄作用不明显.3)在相同管理条件下,华东葡萄和腺枝葡萄生长势较好,华东葡萄枝蔓长但不粗壮,腺枝葡萄枝蔓的长度和粗度适中;蘡奥葡萄和复叶葡萄生长势较弱,蘡奥葡萄须根特别发达,但枝蔓很细弱,复叶葡萄侧根数少,枝蔓又细又短.     

怀来盆地葡萄抗寒栽培技术

综述了多年来相关专家、学者关于葡萄抗寒栽培的研究成果及实际生产的经验,探讨了关于怀来盆地葡萄抗寒栽培技术,主要包括选用抗寒砧木、越冬防寒、预防霜冻、霜冻害补救措施等内容,以期为我国北方寒冷地区进行葡萄抗寒栽培提供技术指导。     

Detecting RAPD Markers Linked to Ripe Rot Resistance Genes in Chinese Wild Vitis

With F1 individuals of the cross combination 88-110 of 83-4-96 ( V. quinquangularis Rehd. )× Muscat Rose ( V. vinifera L. ), the RAPD marker OPC15-1300 linked to ripe rot ( Gloeosporium fruetigenum Berk. ) resistance genes in Chinese wild Vitis was gained using bulked segregation analysis(BSA). And it was found that OPC15-1300 could be hereditary from the resistant parent (83-4-96) after the marker was tested in 50 F1 plants of the cross combination 88-110, 32 accessions of 8 Chinese wild Vitis species and 14cultivars of V. vinifera L. Also, it has provided a solid basis for molecular marker-assisted selection (MAS)and for possibly cloning disease resistance genes in the future.     

东乡野生稻的研究与利用

从多角度对东乡野生稻的研究和利用现状进行了综合评述,指出了研究中存在的问题,对未来的研究方向提出了建议。     

中国野生葡萄及其F_1代抗白粉病的遗传表现

 通过田间自然鉴定的方法，研究了中国野生葡萄９个种３５个株系及其与欧洲葡萄品种种间杂交４个组合的杂种１７１株和自交后代１６株的抗白粉病遗传表现。结果表明，中国野生葡萄及其Ｆ１代在田间自然条件下抗白粉病的表现形式是丰富多样的。中国野生葡萄对白粉病的抗性属于多基因控制的显性独立遗传，在感病的中国野生葡萄中也存在着微效抗病基因。     

中国野生华东葡萄抗霜霉病抑制消减文库构建及初步分析

 【目的】分离和获得中国野生华东葡萄抗霜霉病相关基因片段的EST序列。【方法】以高抗霜霉病的中国野生华东葡萄（V.pseudoreticulata）白河-35-1 株系为材料,以田间接种葡萄霜霉菌的幼嫩叶片为处理,以田间自然生长的未接种幼嫩叶片为对照,分别提取RNA,采用抑制消减杂交技术构建抗霜霉病基因的消减正交和反交两个文库,在文库中,选择3个EST序列,用半定量PT-PCR检验构建文库中EST片段的表达情况。【结果】构建的文库中EST片段的大小在150～900 bp,经筛选文库,得到正交库有效的ESTs 85条,反交库ESTs 29条,所获序列经过BLASTn和BLASTx网上序列比对,其中有78条ESTs与GenBank中其它植物相关基因序列有较高的同源性,31条为未知功能序列,已登录GenBank 114条ESTs,登录号:FG106789-FG106902。进一步利用半定量RT-PCR 对文库中3个基因的表达情况进行了分析,证明这些EST序列是可以表达的。【结论】经初步分析这些序列的功能,涉及抗病信号传导、能量代谢、蛋白质代谢、核酸代谢、光合作用及膜运输和代谢等方面,其中获得与抗病直接相关的ESTs 23条,下一步是通过对获得的EST序列进行末端快速分析（RACE）技术,获得抗霜霉病基因全长序列,并进行原核和真核表达研究验证基因全长序列功能,为研究葡萄抗霜霉病的基因提供依据。     

中国野生毛葡萄芪合成酶基因表达与抗白粉病分析

【目的】葡萄是世界性重要果树,欧洲葡萄品种因其优质高产被广泛栽培,但其突出缺点是抗病性弱,尤其易受白粉病危害。葡萄中芪合成酶（stilbene synthase,STS）的代谢产物白藜芦醇是植物体内具有抗病功能的植保素,果实中的白藜芦醇对人具有保健作用。中国野生毛葡萄‘丹凤-2’抗病性强且白藜芦醇含量高。论文旨在研究中国野生毛葡萄‘丹凤-2’芪合成酶基因（STS）及其功能,应用于抗病育种来提高欧洲葡萄抗病性及果实中芪类物质含量。【方法】同源克隆中国野生毛葡萄‘丹凤-2’芪合成酶基因VqSTS26和VqSTS32,构建pCAMBIA35S::VqSTSs::GFP过表达载体;以器官发生途径诱导的无核白分生愈伤组织作为受体材料,采用农杆菌介导法进行遗传转化,获得转基因葡萄植株;分别从转录水平和代谢产物水平比较转基因与野生型无核白在自然生长条件与人工接种葡萄白粉病菌（Uncinula necator）诱导下STS表达及芪类物质产生与积累的差异;通过显微观察白粉病菌在转基因与野生型无核白叶片上的生长发育进程,统计孢子萌发、菌丝生长与分生孢子梗形成数目,对转基因植株进行抗病性分析。【结果】通过PCR检测和Western blot鉴定,获得了稳定转化VqSTS26植株8株和稳定转化VqSTS32植株5株。在自然生长条件下实时荧光定量PCR分析表明VqSTS26、VqSTS32转基因无核白STS的表达量显著提高,芪合成酶上游基因PAL与下游基因RSGT的表达量上调,而与芪合成酶存在底物竞争关系的CHS表达下调;液相色谱分析表明芪类物质主要以糖苷的反式云杉新苷形式存在,VqSTS26、VqSTS32转基因无核白芪类物质的含量极显著高于野生型无核白。STS的表达及其产物合成受白粉病菌诱导,随白粉病菌诱导,STS表达量在1—2 dpi时显著升高,至7 dpi时表达量达最高;诱导表达产生的芪类物质由原来的反式云杉新苷新增加了反式白藜芦醇和葡萄素,且含量增加;转基因植株在STS表达量、芪类物质的积累方面均极显著高于野生型无核白。显微观察白粉病菌在葡萄叶片上的生长发育状态,对比野生型无核白,转基因植株白粉病菌生长受到抑制,菌丝发育更迟,7 dpi时转基因葡萄叶片上的分生孢子梗数量低于野生型无核白。【结论】过表达中国野生毛葡萄‘丹凤-2’VqSTS26和VqSTS32可以提高无核白中STS的表达量,促进芪类物质的形成与积累,抑制转基因无核白叶片上白粉病菌的生长。因此,中国野生毛葡萄‘丹凤-2’与其携带的STS及其产物,是定向改良欧洲葡萄品种白粉病抗性与芪类物质含量的重要种质资源与基因资源。     

The EST Analysis of A Suppressive Subtraction cDNA Library of Chinese Wild Vitis pseudoreticulata Inoculated with Uncinula necator

Uncinula necator is a worldwide serious fungus disease causing annual heavy lost on grapevine production. In order to get more informations on defense related EST sequences and help breeding program, we constructed and characterized a suppression subtractive hybridization cDNA library with artificially inoculated leaves and control Chinese wild Vitis pseudoreticulata clone Baihe-35-1, which is highly resistant to powdery mildew. In the library, the length of 58 EST fragments known as putative functions varied from 130 to 800 bp, and 60% of the ESTs exhibited high similarity to known sequences in database of GenBank with BLASTX analysis. These genes were involved in stress/defense response, detoxification, signal transduction, disease defense, and etc., and 14 ESTs remained unknown or hypothetical proteins, which may be new genes. The experiment provided an important basis for studying the disease-resistance mechanism and obtaining the genes for the aim of improving grapevine powdery mildew resistance.     

The Resistance of Chinese Wild Vitis to Uncinula necator and its Inheritance in F1 Generation

By natural field identification, the resistance of Chinese wild Vitis to Uncinula necator and its inheritance in F1 generation were studied with 35 clones of 9 Chinese wild Vitis species, 171 F1 individuals of 4 inter-species cross between Chinese wild Vitis and Vitis vinifera cultivars, and 16 individuals of selfpollinated Chinese wild Vitis. Results showed that the phenotypes of resistance to Uncinula necator in Chinese wild Vitis and its F1 generation were rich and diverse. Based on the segregation of resisitance to Uncinula necator in the progenies resulted from both interspecific hybridization and self-pollination, of Chinese native wild Vitis species and clones were controlled by polygenes showing dominant independent heredity. Minor resistant genes were also exist in Chinese wild susceptible Vitis species and clones.     

寒地野生三叶草形态特征及抗寒性研究

通过对寒地野生三叶草开发利用,研究了野生三叶草的形态特征与抗寒性.结果表明:野生三叶草成坪速度快、抗寒性优于进口同类草,观赏期比进口同类草长10余天,野生红三叶能在寒冷地区越冬,填补了东北地区园林绿化无红三叶的空白.