上海地区屠宰场猪红斑丹毒丝菌的分离鉴定

为了解上海地区猪红斑丹毒丝菌在健康猪群中的带菌状况,本试验选择上海地区标准化屠宰场的上市猪为研究对象,采集鼻拭子、肺脏、扁桃体和下颌淋巴结等样本,进行猪红斑丹毒丝菌的分离,采用VITEK 2 Compact系统和VITEK MS快速鉴定系统进行鉴定,并设计1对16S rRNA基因引物,对分离菌株进行PCR扩增,随机选取16株分离菌进行测序及16S rRNA同源性分析。结果显示,49.07%（105/214）的样本中分离到猪红斑丹毒丝菌,分离菌株同参考菌株及疫苗株之间16S rRNA同源性为99.6%~100.0%。本试验结果表明上海地区猪群中确实存在猪红斑丹毒丝菌的健康带菌状况。     

3株猪红斑丹毒丝菌湖南株的分离与鉴定

从湖南3个不同地区的临床疹块型猪病病例中,分离获得3株能在2 d内致死小白鼠,1~4 d内致死鸽的革兰氏阳性菌,生化鉴定和16S rDNA PCR测序鉴定结果显示3株分离菌均为猪红斑丹毒丝菌,药敏试验显示,3株猪红斑丹毒丝菌均对青霉素等耐药,对恩诺沙星等敏感。     

红斑丹毒丝菌的分离鉴定及药敏试验

为确定引起广东潮州某猪场后备母猪发病的病原,采用自制的含马血清的牛心浸汁替代琼脂培养基,从送检的肝脏组织病料中分离到菌落形态一致的1株细菌,根据其菌落形态特征、革兰染色观察、生化特性和16SrDNA序列分析,最终鉴定为红斑丹毒丝菌,将其命名为CZ1。CZ1对31种常用抗菌药物的药敏试验结果显示,该菌对青霉素类和头孢菌素类、四环素类、呋喃类、大部分氨基糖苷类、大环内酯类、喹诺酮类均敏感;对磺胺类药物、利福平和氟罗沙星耐药。对菌株CZ1和实验室早前分离的韶关株SG7分别进行小鼠LD50测定,测得CZ1株和SG7株的LD50分别为1.02×10^4 CFU/mL和7.3×10^3 CFU/mL,表明CZ1株的毒力弱于韶关分离株SG7株。用大鼠分别制备抗CZ1株和SG7株高免血清,血清玻片凝集试验显示,抗CZ1株和SG7株高免血清均能与自身菌株新鲜培养物发生强的凝集反应。交互凝集试验显示,抗CZ1株高免血清能与SG7株新鲜培养物发生强的凝集反应,抗SG7株高免血清能与CZ1株新鲜培养物发生强的凝集反应,表明此次潮州分离株CZ1与SG7株很有可能属于同一种血清型分离株。而2种抗血清均不与现有疫苗株GC42发生凝集反应,提示猪丹毒病的病原血清型可能发生了变化。     

湖北部分地区红斑丹毒丝菌分离株耐药性分析

采用药敏纸片扩散法对31株湖北部分地区分离株进行19种临床常用抗生素耐药性试验分析,结果表明:临床分离株对卡那霉素、链霉素、阿米卡星、多粘菌素B、万古霉素和磺胺异恶唑的耐药率为100%,庆大霉素、复方新诺明、氧氟沙星、壮观霉素、林可霉素和四环素的耐药率分别为96.8%、83.9%、32.3%,25.8%,22.6%和9.67%,对头孢拉定、阿莫西林和阿奇霉素高度敏感。     

红斑丹毒丝菌的分离鉴定及疫苗的免疫保护作用

自重庆地区屠宰场猪扁桃体样品分离红斑丹毒丝菌,在测定血清型、Spa基因型和致病性的基础上,研究了弱毒疫苗G_4T_(10)的免疫保护作用。结果显示,从146份样品中分离33株红斑丹毒丝菌,其中27株对小白鼠具有致病性;19株和2株分别在试管凝集试验和琼扩试验中与兔抗G_4T_(10)血清呈阳性反应;12株为SpaA型,21株为SpaB型;在弱毒疫苗G_4T_(10)的免疫保护试验中,被动或主动免疫小白鼠对11株分离细菌的攻击具有保护作用。结果表明,健康猪群红斑丹毒丝菌的带菌率高,弱毒菌苗G_4T_(10)对多数菌株缺乏免疫保护。     

羊药浴暴发红斑丹毒丝菌感染—羊药浴跛的调查与诊断

羊药浴暴发红斑丹毒丝菌感染──羊药浴跛的调查与诊断梁国煦，王焕忠，金家宝（上海汽巴—嘉基禽畜保健有限公司，２００３３５）钱心元，罗玉峰（中国兽药监察所）由红斑丹毒丝菌（Ｅｒｙｓｉｐｅｌｏｔｈｒｉｘｒｈｕｓｉｏｐａｔｈｉａｅ原丹毒杆菌）感染，所致绵羊多...     

吖啶橙免疫荧光菌团法快速检测鱼源红斑丹毒丝菌的实验研究

研究建立了快速检测红斑丹毒丝菌的吖啶橙免疫荧光菌团离心培养法。该方法能检出560个菌在选择性肉汤中10h的培养物或每毫升含5×10~4个菌的抗原悬液;不与李氏杆菌等16种其他细菌发生反应;操作简便,不需要特殊的仪器设备,可于15～18h内报告结果(常规分离法需2～3d);应用离心培养法与常规分离法检测了325尾鲜鱼,阳性率分别为48.0％和55.7％,两者无显著差异(p>0.05)。从鱼体分离出的红斑丹毒丝菌的大多数菌株(18/19)具有毒力;对分离菌株的血清型鉴定发现,有3株菌可能是新的血清型。     

Isolation and Identification of Erysipelothrix rhusiopathiae from Abattoirs in Shanghai Area

In order to comprehend the status of Erysipelothrix rhusiopathiae carried in swinery in Shanghai area, samples of pigs were collected from some standard abattoirs in Shanghai area, including nasal swab, lung, tonsil and mandibular lymph nodes. Strains were isolated from these samples for detecting the Erysipelothrix rhusiopathiae. Several kinds of methods were used, such as VITEK 2 Compact system and VITEK MS system. A pair of primers was designed to amplify the 16S rRNA gene. 16 PCR products selected randomly were sequenced and 16S rRNA homology analysis was conducted. As a result, strains were isolated from 49.07% (105/214) samples and were identified as Erysipelothrix rhusiopathiae.16S rRNA homology in strains of isolation and reference were 99.6% to 100.0%. The result indicated that the situation was very severe for so many carriers of Erysipelothrix rhusiopathiae in health group in nursery.     

1株猪丹毒杆菌的分离与鉴定

为确定导致安徽和县某猪场猪只发病的病原,从该猪场送检病料(心、肺、脾、肝)中分离并纯化细菌,根据其形态特征、PCR鉴定及生化试验结果,确诊为猪丹毒杆菌。spa A基因序列分析结果显示该菌与猪丹毒杆菌G4T10(Gen Bank登录号:KF150604.1)有99%的同源性。全自动生化反应报告该菌为丹毒丝菌的概率高达95%。小鼠攻毒试验表明,试验组小鼠在腹股沟皮下注射该菌后,4 d内全部死亡;死亡小鼠剖检可见全身败血性出血,各脏器均有病变,从死亡小鼠的血液、心、肝、脾、肺等组织中分离到与该感染菌株形态特征完全一致的细菌。药敏试验结果表明,该菌对β-内酰胺类和大环内酯类抗生素敏感,对链霉素、卡那霉素、四环素、多西环素、林可霉素和磺胺异恶唑耐受。     

猪丹毒杆菌的分离鉴定及其SpaA基因的遗传变异分析

为确定导致福建某猪场猪只发病的病原,从病猪心、肺中分离并纯化细菌,根据其形态特征、培养特性、生化试验及PCR鉴定,确定为猪丹毒杆菌。SpaA基因测序结果表明该分离菌在第609位点处出现了由胸腺嘧啶突变为鸟嘌呤,对应的氨基酸是由甲硫氨酸突变为异亮氨酸。致病性试验结果表明,2．1×10^8CFU／mL的菌液10倍稀释后,感染28日龄健康昆明小鼠,该分离菌对28日龄健康小鼠的半数致死量为2．1×10^3.5CFu／mL,死亡小鼠的剖解病变表现为心肌有白色坏死点,肝脏实变、坏死,肺出血和脾脏梗死等,并分离出与感染菌株形态特征完全一致的菌落。药敏试验结果显示,该分离菌株对青霉素、红霉素、氨苄青霉素、强力霉素、先锋霉素、阿奇霉素等较为敏感。     

猪丹毒QL251弱毒菌株的稳定性试验

猪丹毒ＱＬ２５１弱毒株在马丁肉汤、血液琼脂斜面、小白鼠及猪丹毒敏感猪体内连续传代后，测其安全性和免疫原性。试验证明，ＱＬ２５１无论是在培养基上，还是在动物体内传代后都是稳定的，仍然保持了原有的特性。     

丹毒丝菌spaA基因免疫保护区的克隆与功能研究

本研究以丹毒丝菌XJ1249基因组DNA为模板,根据GenBank已发表的丹毒丝菌表面保护性抗原A (SpaA)的序列设计引物进行PCR扩增,得到大小约1 029 bp的spaA基因N端免疫保护片段(spaA-N)。将spaA-N连接到载体pGEX-4T-1上构建重组原核表达质粒pGEX-spaA-N,对重组质粒进行序列验证后,在IPTG的诱导下,表达和纯化重组蛋白r-SpaA-N,并研究其对小鼠的免疫保护作用。结果显示:分离纯化的重组蛋白具有免疫原性,并对小鼠具有免疫保护性,能够有效防止丹毒丝菌对小鼠的侵染。研究结果为进一步研究丹毒丝菌致病机理,开发新的猪丹毒诊断试剂盒和亚单位疫苗奠定了基础。     

猪丹毒丝菌灭活疫苗免疫佐剂的筛选

旨在筛选适宜于猪丹毒丝菌灭活疫苗的佐剂。以分离鉴定出的猪丹毒丝菌1a型HG-1株灭活菌体为抗原分别配制矿物油佐剂疫苗（简称矿物油疫苗）、氢氧化铝胶佐剂疫苗（简称铝胶疫苗）、ISA201双相油乳佐剂疫苗（简称ISA201疫苗）、GEL02水溶性聚合物佐剂疫苗（简称GEL疫苗）、IMS1313水溶性纳米佐剂疫苗（简称IMS1313疫苗）共5种佐剂的灭活疫苗。小鼠免疫保护试验结果表明,二免14 d后使用约为4 LD₅₀的HG-1株对小鼠进行腹腔攻毒,矿物油疫苗和GEL疫苗的保护率分别为100%（7/7）和71%（5/7）,其他三种佐剂疫苗的保护率均为14%（1/7）。本研究进一步选择铝胶疫苗和GEL疫苗进行猪体对比试验;仔猪安全性试验结果表明,两种佐剂疫苗的副反应均较小;免疫保护试验结果表明,两次免疫后使用约为16 LD₁₀₀的HG-1株对免疫仔猪进行耳缘静脉攻毒,两种佐剂疫苗的保护率分别为60%（3/5）和100%（5/5）。本研究最终选择GEL佐剂作为开发猪丹毒灭活疫苗的最适佐剂。     

猪丹毒丝菌CbpB蛋白对小鼠的免疫效果分析

探究猪丹毒丝菌(ER)CbpB蛋白的免疫原性和保护作用,为深入研制ER基因工程亚单位疫苗提供新的思路和技术储备.以表达的ER重组蛋白CbpB、SpaA、CbpB+SpaA以及ER灭活全菌体(V-AEr21)、商品化弱毒疫苗、商品化灭活疫苗分别免疫小鼠.利用间接ELISA检测小鼠血清中IgG抗体,血清杀菌试验测定功能性抗...     

Occurrence, isolation and serotyping of Erysipelothrix rhusiopathiae in cattle and pig slurry

In a survey on the occurrence of potential pathogenic bacteria in slurry, Erysipelothrix rhusiopathiae (E. rh.) was found in samples from 49 % of 84 cattle herds, 44 % of 32 pig herds, and 39 % of 67 cattle and pig herds. Among E. rh. isolates from 81 of the herds, 16 different serotypes were distinguished, including 1 serotype not previously described, which was designated serotype 23.Procedures of isolation and serotyping are presented and discussed, and the serotype distribution within the different herd categories is outlined.