HPLC法测定黄蜀葵花中金丝桃苷及槲皮素含量

为建立黄蜀葵花中主要活性成分金丝桃苷及槲皮素含量的高效液相色谱(HPLC)测定方法,以金丝桃苷和槲皮素标准品为对照,色谱柱采用COSMOSIL5C18-AR-Ⅱ(4.6mm×250mm,5μm),流动相为0.4%磷酸溶液、乙腈,柱温为35℃,波长为360nm,流速为1.0mL·min-1,梯度洗脱分离。结果表明:金丝桃苷回归方程为y=351.5x+202.1(r=0.999 5),金丝桃苷浓度为5.296~52.96μg·mL-1时呈良好的线性关系;槲皮素回归方程为y=364.9x+23.84(r=0.999 6),槲皮素浓度为5.272~52.72μg·mL-1时呈良好的线性关系。该方法操作简便、重复性好、精密度高,可作为黄蜀葵花中金丝桃苷和槲皮素的质量控制方法。     

饲料中辅酶Q_(10)反相高效液相色谱检测方法的建立

为建立饲料中辅酶Q_(10)高效液相色谱检测方法,将饲料用正己烷提取,色谱柱为Eclipse XDB-C18(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙醇-甲醇(体积比为65∶35),流速为1.0mL·min~(-1),检测波长为275nm,柱温为38℃,外标法定量检测。结果表明:辅酶Q_(10)在浓度为0.81~51.75μg·mL-1的范围内呈良好的线性关系,决定系数R_2=0.999 9,3个不同浓度下样品的回收率分别为88.78%、90.16%和97.77%,相对标准偏差为1.93%~3.22%。该方法具有灵敏度高、重现性好和准确性高的优点,可用于饲料中辅酶Q_(10)的检测。     

亚热带农业小流域水系溶存甲烷浓度和扩散通量研究

【目的】研究亚热带丘陵地区农业小流域水系溶存甲烷(CH_4)浓度分布特征及其扩散传输特性。【方法】在一年周期内(2014年4月13日至2015年4月12日),利用扩散模型法对湘江下游脱甲小流域4级河流溶存CH_4浓度及扩散通量的时空变异及其影响因素进行研究。【结果】脱甲小流域水系溶存CH_4浓度年均值为(0.61±0.43)μmol·L~(-1),变化范围为0.03—2.23μmol·L~(-1);扩散通量在一年内的变化为1.71—290.08(63.36±50.76)μg C·m~(-2)·h~(-1),表现为大气CH_4的净源。河流溶存CH_4浓度和通量的时空分布均呈现出显著的差异:时空变化规律具有一致性,其中季节变化特征均为春高((0.74±0.41)μmol·L~(-1),(93.58±65.24)μg C·m~(-2)·h~(-1)),冬低((0.53±0.38)μmol·L~(-1),(50.79±33.03)μg C·m~(-2)·h~(-1));空间分布呈现自上游到下游波动增加的趋势。影响脱甲小流域河流溶存CH_4浓度和扩散通量的环境因子中,溶解氧(DO:3.49—12.79(7.90±1.78)mg·L~(-1))与河流溶存CH_4浓度(r=-0.39,P0.001)和扩散通量(r=-0.36,P0.001)均呈显著负相关,溶解性有机碳(DOC:0.92—7.38(2.99±1.25)mg·L~(-1))与河流溶存CH_4浓度(r=0.50,P0.001)和扩散通量(r=0.44,P0.001)均呈显著正相关,两者是影响河流溶存CH_4浓度和扩散通量的主导因子;另外,水体铵态氮(NH4+-N:0.02—4.37(1.26±1.03)mg·L~(-1))、硝态氮(NO3--N:0.24—2.66(1.43±0.55)mg·L~(-1))、盐度(以电导率EC表示:50.36—248.43(138.37±47.54)μS·cm-1)与河流溶存CH_4浓度和扩散通量均呈显著正相关;河流水体p H(5.89—8.54(6.82±0.31))与CH_4浓度呈正相关(r=0.20,P0.05),与通量之间无显著关联。【结论】脱甲小流域内,农业面源污染、畜牧养殖以及居民生活废水和污水的排入造成的河流水体中DOC、氮含量的增加以及DO的降低,均能加剧河流中溶存CH_4气体的产生和排放,使其成为大气CH_4的一个重要潜在排放源。     

二维液相色谱法同时测定饲料中维生素A、维生素D_3、维生素E

建立二维液相色谱法同时测定饲料中VA、VE、VD_3含量的方法。采用皂化石油醚提取待测样品,以双四元泵阀切换双检测器二维液相色谱同时分析VA、VE及VD_3,以InfinityLab Poroshell 120 EC-C8(3.0 mm×150 mm,2.7μm)为一维色谱柱,流动相甲醇-乙腈-水0.6 mL·min~(-1)梯度洗脱,以Zorbax Eclipse PAH(4.6 mm×250 mm,5μm)为二维色谱柱,流动相甲醇1.0 mL·min~(-1)洗脱,柱温25℃,一维DAD检测器采用波长切换方式检测(VA:326 nm;VE:285 nm),二维DAD检测器检测(VD_3:264 nm)。结果表明,VA在0.0945～14.17μg·mL~(-1)浓度范围内线性关系良好,VE在1.21～181.5μg·mL~(-1)浓度范围内线性关系良好,VD_3在0.0163～2.445μg·mL~(-1)浓度范围内线性关系良好,相关系数r均为0.9998,分析时间为23 min。说明二维液相色谱法可快速准确测定饲料中维生素A、维生素D_3、维生素E。     

茄子果实中α-茄碱的高效液相色谱法检测

为建立一种快速、准确检测茄子果实中α-茄碱的方法,采用高效液相色谱法(HPLC),探索不同色谱条件下α-茄碱的分离效果和保留时间,确定较优色谱条件.结果表明:采用Waters Nova-pak C18色谱柱(150mm×3.9mm,4μm),以乙腈-0.05mol·L-1K2HPO4(70:30,V/V,H3PO4调pH值4.5)为流动相,流速0.7mL·min-1,柱温25℃,检测波长205nm的条件下,检测效果较好.α-茄碱在0.15～3.00g·L-1浓度范围内与峰高呈良好线性关系,r=0.9992;平均回收率为97.97%,RSD=1.17%(n=5).本研究建立的茄子果实中α-茄碱的定量分析方法精密度高、准确性好,适用于茄子果实中α-茄碱的定性与定量分析.     

沈阳周边农田土壤中微塑料组成与分布

为明确沈阳周边农田土壤微塑料的形态、物质组成及其空间分布特征,以沈阳周边农田土壤为研究区,共设置23个采样点,采集了84个土壤样品,采用密度分离浮选法提取出土壤中微塑料,利用光学显微镜以及热裂解气相色谱-质谱联用仪(Py-GC/MS),对土壤中的微塑料进行形态鉴定和定性定量分析。结果表明:研究区土壤中微塑料物理性状分为薄膜状、碎片状、纤维状和颗粒状;土壤中微塑料的浓度为217.30～2 512.18μg·g~(-1),平均值为1 327.69μg·g~(-1)。其中,聚乙烯(PE)微塑料的浓度最高,平均值为760.03μg·g~(-1);其次为聚丙烯(PP)和聚苯乙烯(PS),平均值分别为374.07μg·g~(-1)和193.59μg·g~(-1);土壤中微塑料浓度在空间上呈现出西部土壤(平均值1 569.59μg·g~(-1))东部土壤(平均值1 320.28μg·g~(-1))北部土壤(平均值1 217.56μg·g~(-1))南部土壤(平均值1 208.85μg·g~(-1))。土壤微塑料浓度从地表向下明显降低,从表层土壤(0～5 cm)的998.76μg·g~(-1)减少到深层土壤(20～30 cm)的193.00μg·g~(-1);不同的土壤种植模式对土壤微塑料浓度的影响明显,其中大棚土壤微塑料浓度较高,平均值为1 439.56μg·g~(-1),露天农田微塑料浓度平均值为1 187.76μg·g~(-1)。生菜、葡萄、黄瓜大棚种植以及露天农田覆膜玉米种植模式下土壤微塑料含量较高。研究表明,沈阳周边农田土壤中微塑料主要组成类型为PE、PP和PS,且随土层加深,土壤微塑料浓度明显降低。     

高效液相色谱法测定鳗鲡各组织中的乙酰甲喹残留量

建立鳗鲡各组织中乙酰甲喹残留量的高效液相色谱测定方法,高效液相色谱检测条件为:采用SunFireTM C_(18)柱(4.6mm×150mm,3.5μm),柱温35℃;以甲醇∶水(40∶60,体积比)为流动相,流速为0.8mL·min~(-1);采用二极管阵列检测器,检测波长239nm。结果表明:在0.05~2.5μg·mL~(-1)范围内,乙酰甲喹具有良好的线性关系,含量与峰面积的相关系数达0.999以上;乙酰甲喹在鳗鲡肌肉、肾、肝和血浆中的检出限分别为3μg·kg~(-1)、15μg·kg~(-1)、15μg·kg~(-1)、15μg·L~(-1),鳗鲡各组织中乙酰甲喹回收率在76%~90%,相对标准偏差均小于10%(n=6)。本方法简便、快捷、灵敏度高,具有良好的重复性,满足鳗鲡各组织基质内乙酰甲喹残留量的快速定量分析的要求。     

黄花忍冬茎和叶中绿原酸的提取及含量测定

采用超声提取法提取黄花忍冬茎和叶中绿原酸并用HPLC法测定其含量.Phenomsil C18色谱柱(150mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-0.4%磷酸溶液(13:87),流速为0.8 mL·min~(-1),检测波长为327nm.结果表明,在0.20-1.00μg范围内绿原酸呈现良好的线性关系(r=0.999 8),平均回收率为95.50%,RSD=2.86%.此方法快速简便,重现性好,绿原酸的含量因部位的不同而有差异.     

氟腺嘌呤溶液剂的制备及其浓度测定

为开发氟腺嘌呤新制剂并建立其浓度测定的方法,采用单因素正交设计试验法筛选出氟腺嘌呤溶液剂最优配方,采用高效液相色谱法(HPLC)测定溶液剂浓度。筛选出氟腺嘌呤溶液剂各因素最佳组合为溶媒用量为40%、助溶剂用量为50%、抗氧剂用量为0.2%、pH值约为3.0。建立的HPLC色谱条件为色谱柱Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5.0μm),流动相乙腈-水(0.1%磷酸+0.1%三乙胺)的体积比为18∶82,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃,紫外检测波长261 nm,进样体积10μL。辅料干扰试验显示氟腺嘌呤在出峰位置不受辅料干扰,专属破坏试验表明与降解产物均能分开。在50~100μg·mL-1的浓度范围内,峰面积(y)与药物质量浓度(x)呈良好线性关系(R2=0.999 3,n=5),回归方程为y=34 772x+14 371,精密度试验相对标准偏差(RSD)为0.4%(n=6),在80、100和120μg·mL-13个添加水平时,平均回收率为98.56%(RSD=0.53%),定量限和检测限分别为64和24 ng·mL-1,溶液剂平均浓度为40.08 mg·mL-1,平均标示含量为100.19%。该处方合理、制备工艺可靠,所建立的高效液相色谱法可用于氟腺嘌呤溶液剂的含量检测。     

HPLC法测定复方乌骨藤胶囊中三七皂苷R_1、人参皂苷Rg_1和人参皂苷Rb_1的含量

建立HPLC法测定复方乌骨藤胶囊中三七皂苷R_1、人参皂苷Rg_1和人参皂苷Rb_1的含量。采用Kromasil C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈(A)—水(B)为流动相进行梯度洗脱;流速1.0mL·mL~(-1),柱温40℃。结果表明:三七皂苷R_1在0.229-2.29μg范围内线性关系良好(r=0.9996),平均加样回收率(n=6)为98.7%;人参皂苷Rg_1在0.814-8.14μg范围内线性关系良好(r=1.0000),平均加样回收率(n=6)为99.2%;人参皂苷Rb_1在0.771-7.71μg范围内线性关系良好(r=0.9996),平均加样回收率(n=6)为99.3%。本方法操作简便,结果准确,灵敏度高,重现性好,可作为复方乌骨藤胶囊中所含三七的质量控制方法。     

氟腺嘌呤溶液剂的制备及其浓度测定

为开发氟腺嘌呤新制剂并建立其浓度测定的方法,采用单因素正交设计试验法筛选出氟腺嘌呤溶液剂最优配方,采用高效液相色谱法(HPLC)测定溶液剂浓度。筛选出氟腺嘌呤溶液剂各因素最佳组合为溶媒用量为40%、助溶剂用量为50%、抗氧剂用量为0.2%、pH值约为3.0。建立的HPLC色谱条件为色谱柱Diamonsil C18(4.6 mm×250 mm,5.0μm),流动相乙腈-水(0.1%磷酸+0.1%三乙胺)的体积比为18∶82,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃,紫外检测波长261 nm,进样体积10μL。辅料干扰试验显示氟腺嘌呤在出峰位置不受辅料干扰,专属破坏试验表明与降解产物均能分开。在50~100μg·mL-1的浓度范围内,峰面积(y)与药物质量浓度(x)呈良好线性关系(R2=0.999 3,n=5),回归方程为y=34 772x+14 371,精密度试验相对标准偏差(RSD)为0.4%(n=6),在80、100和120μg·mL-13个添加水平时,平均回收率为98.56%(RSD=0.53%),定量限和检测限分别为64和24 ng·mL-1,溶液剂平均浓度为40.08 mg·mL-1,平均标示含量为100.19%。该处方合理、制备工艺可靠,所建立的高效液相色谱法可用于氟腺嘌呤溶液剂的含量检测。     

反相高效液相色谱法检测复方新诺明水溶性粉中SMZ和TMP的含量

应用反相高效液相色谱法测定复方新诺明水溶性粉中SMZ和TMP的含量,其色谱条件:色谱柱为ALL-TECH-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-盐溶液(30∶70),检测波长为230 nm。在该色谱条件下,SMZ浓度在16.7~167.0μg/mL范围内,线性方程为y1=25.904x1 2.435,r1=0.9999;TMP浓度在3.36~33.60μg/mL范围内,线性方程为y2=102.799x2 3.672,r2=0.9996;SMZ和TMP的平均回收率分别为99.76%和99.42%。该方法操作简便、快速灵敏、准确实用。     

鞘脂合成中间产物及其抑制剂的OPA-HPLC-UV检测方法

为建立能同时测定真菌鞘脂合成过程中SPT抑制剂以及中间产物二氢鞘鞍醇、植物鞘氨醇的检测方法。利用邻苯二甲醛衍生化,高效液相色谱法测定。色谱柱为Inertsil C8-3柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相由乙腈-磷酸溶液,柱温25℃,流速1m L·min-1,检测波长230 nm。结果表明,二氢鞘鞍醇浓度在3.125~100.0μg/m L(r=0.9993)、植物鞘鞍醇浓度在5.0~500.0μg·m L-1(r=0.9971)范围内与衍生物峰面积呈良好的线性关系。证明该检测方法准确、可行,为下一步对虫草中的SPT抑制剂以及鞘脂中间产物进行同时检测提供了帮助。     

高效液相色谱法检测土壤中氧化乐果残留

采用高效液相色谱法优化了土壤中的氧化乐果残留测定条件,优化结果为:色谱柱为Inertsil QDS-SP4.6*250mm,流动相为甲醇/水(V/V=10/90),溶剂为超纯水,检测波长210nm,柱温25℃,进样量为20μL,总流速1.0mL·min~(-1);氧化乐果在0.1~10.0μg·mL~(-1)范围内,其质量浓度与峰面积呈良好的线性关系(R~2=0.9992),最低检测限0.1μg·mL~(-1)。采用振荡提取法,提取剂为丙酮和乙酸乙酯,提取后的溶液以弗罗里硅土为固相萃取柱,淋洗剂为丙酮/乙腈(1/3)。采用上述方法对土壤样品进行测定,加标回收率为在70%~120%,相对标准偏差在2.08%~8.08%,说明该方法的准确度和精密度均符合农药残留分析的要求,适合土壤中氧化乐果的残留量检测。     

喹啉高效降解菌株Alcaligenes sp. WUST-qu的筛选、鉴定及降解特性

从某焦化厂污水处理系统的活性污泥中筛选到一株喹啉高效降解菌WUST-qu,对其形态、分类地位、降解特征和生长动力学进行表征。结果表明,该菌株为革兰氏阴性菌,有芽孢,长为1.15μm±0.08μm(n=20),宽为0.26μm±0.01μm (n=20);16S rRNA基因核苷酸序列比对结果表明,该菌株属产碱杆菌属微生物(Alcaligenes sp)。菌株WUST-qu能在初始pH为5.0～9.0内有效降解喹啉,最适初始pH为中性到略偏碱性(7.0～8.0)。在该条件下,菌株能在接种后的48 h内将最高初始质量浓度为700 mg·L~(-1)的喹啉完全降解。进一步研究表明,菌株WUST-qu不仅能够有效降解喹啉,还能有效降解苯酚,在MSM初始pH为8.0的条件下,菌株WUST-qu能在32 h内将初始质量浓度为700 mg·L~(-1)的苯酚完全降解。其以喹啉为唯一碳源生长时的动力学参数为μ_(max)=1.657 6 h~(-1),K_s=36.42 mg·L~(-1),K_i=81.418 mg·L~(-1)。     

咖啡中咖啡因和绿原酸的含量测定

建立了RP-HPLC法测定咖啡中咖啡因和绿原酸的含量,采用ZORBAXSB-C18柱(150mm×4.6mm,5 μm),以醋酸缓冲液为流动相,流速为0.8mL·min-1,紫外检测波长为254 nm,测定咖啡中咖啡因的含量;以柠檬酸缓冲液和甲醇梯度洗脱(80:20→50:50),流速为0.5 mL·min-1,紫外检测波长为325 nm,测定咖啡中绿原酸含量.结果咖啡因在0.05～0.80 mg·mL-1的浓度范围内呈良好的线性关系r=0.999 73),平均回收率(n=6)为99.28%,RSD为3.25%;绿原酸在0.04～0.64 mg·mL-1的浓度范围内呈良好的线性关系(r=0.99903),平均回收率为99.39%,RSD为2.73%.     

高效液相色谱测定甲酸盐中的甲酸

文章建立一种使用高效液相色谱对甲酸盐中甲酸含量的准确测定方法,以硫酸溶液0.0275%作流动相,流速1.0 mL·min~(-1),样品用流动相定容,紫外检测波长206 nm。当待测样品中甲酸浓度在200～1 000μg·mL~(-1)范围之间时能呈现良好的线性关系,R~2=0.9999,RSD为±1.0%(n=6),检出限为1μg·mL~(-1),此方法具有简捷、可重复性高等优点。避免由于化学沉淀所引起的测定误差,可实现甲酸盐中甲酸的分离和准确定量。     

气相转化-化学发光法测定土壤中的亚硝态氮

试验探究了将亚硝态氮(NO_2~-)还原转化为一氧化氮(NO)气体与化学发光法检测NO相结合的方法(气相转化-化学发光法,简称NC法)对土壤NO_2~-含量测定的适用性。在室温条件下,采用浓度为50%的冰醋酸提供酸性条件,以抗坏血酸为还原剂,将NO_2~-还原为NO气体,生成的NO被高纯氮气载入化学发光法氮氧化物分析仪的NO检测通道,实时记录NO信号值并积分信号峰面积,通过已知NO_2~-浓度系列的标准曲线,确定样品中的NO_2~-浓度。结果显示:NO信号值的峰面积与样品的NO_2~-浓度显著正相关(P0.01),线性检测范围为2~500μg·L~(-1)(以纯N计,下同),检出限为2μg·L~(-1),对土壤NO_2~-浓度的检出限为10μg·kg-1(以水土比为5∶1计),优于比色法的检出限15μg·kg-1;重复测定10次50μg·L~(-1)标准溶液的峰面积变异系数为1.2%,精度为1.2μg·L~(-1)(95%置信区间),对应的土壤NO_2~-浓度检测精度为6μg·kg-1,优于比色法的检测精度11μg·kg-1;检测已知浓度NO_2~-的回收率为90%~97%。与比色法相比,NC法测定酸性土壤NO_2~-浓度的准确度相当,精度更优,但该方法测定碱性土壤NO_2~-浓度的结果偏高,可能是碱性土壤中大量的Ca~(2+)、SO_4~(2-)和CO_3~(2-)对测定有干扰,而且NC法测定NO_2~-浓度的分析时间较比色法长,单个样品需8~15 min。     

超高效液相色谱法测定救必应末中紫丁香苷和长梗冬青苷含量

本研究建立了一种定性定量测定救必应末中紫丁香苷和长梗冬青苷的超高效液相色谱方法。用带有二极管阵列检测器的超高效液相色谱仪(UPLC-PAD)对救必应末中紫丁香苷和长梗冬青苷进行色谱分离和快速定量测定。以ACQUITY UPLC~(TM )C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm)为分离柱,柱温:35℃;流动相体系:A项为乙腈,B项为水,进行梯度洗脱;流速:0.35 mL·min~(-1);进样量:2μL;检测波长为210 nm。通过光谱图、保留时间参数对紫丁香苷、长梗冬青苷进行定性定量检测。结果表明,紫丁香苷在10～200μg·mL~(-1)的范围内线性良好(R~2=0.999);长梗冬青苷在30～600μg·mL~(-1)的范围内线性良好(R~2=0.999);方法检出限为2.5μg·mL~(-1)紫丁香苷、7.5μg·mL~(-1)长梗冬青苷,方法定量限为10μg·mL~(-1)紫丁香苷、30μg·mL~(-1)长梗冬青苷,完全满足检测需求。该方法色谱分离较好,分析速度较快,前处理简单,适用于救必应末中紫丁香苷和长梗冬青苷的定性定量检测。     

用于农村污水安全灌溉的新型氮磷无机化反应器的实验研究

以常用的农村污水处理工艺"厌氧池+好氧生物滤池"为研究对象,通过运行参数的调控,把该工艺以除磷脱氮达到一级B排放为目的,转变为以除碳保磷保氮的资源化利用为目的,成为用于农村污水安全灌溉的新型氮磷无机化反应器。实验结果表明:在进水COD浓度为174~384 mg·L~(-1),NH_4~+-N浓度为28.45~97.28 mg·L~(-1),TN浓度为37~141.9 mg·L~(-1),TP浓度为3.65~14.57 mg·L~(-1),厌氧池水力停留时间HRT=4 h,好氧生物滤池水力负荷HLR=5.4 m~3·m~(-2)·d~(-1)时,氮磷无机化反应器的出水NH_4~+-N浓度为45 mg·L~(-1)左右,PO3-4-P浓度为6.5 mg·L~(-1)左右,COD平均浓度均在60 mg·L~(-1)以下,粪大肠杆菌群10 000个·L~(-1),均满足《农田灌溉水质标准》(GB 5084—2005)中可生食蔬菜安全灌溉的水质要求。研究表明新型氮磷无机化反应器可以实现农村生活污水安全灌溉。