正向间接血凝试验在检测口蹄疫抗体中的应用

正向间接血凝试验是用已知血凝抗原检测未知血清中抗体的试验。抗原与其对应的抗体相遇,在一定条件下形成抗原抗体复合物,但这种复合物的分子团很小,肉眼看不见。将抗原吸附在经过特殊处理的红细胞表面,只需少餐抗原就能大大提高抗原和抗体的反应灵敏性,这种经过口蹄疫纯化抗原致敏的红细胞与口蹄疫抗体相遇,红细胞便出现清晰可见的凝集现象。     

用弓形虫代谢分泌抗原制备间接血凝诊断试剂的研究

用弓形虫代谢分泌抗原(E／SA)致敏绵羊红细胞制备间接血凝诊断试剂，进行人和动物弓形虫病血清抗体检测，并用弓形虫虫体抗原致敏的红细胞间接血凝诊断试剂进行对照试验。结果表明，在弓形虫阴性、阳性血清检测中，弓形虫E／SA间接血凝诊断试剂与弓形虫虫体抗原间接血凝诊断试剂的符合率为100％；在人工感染兔血的检测中，E／SA致敏的间接血凝诊断试剂比虫体抗原致敏的间接血凝诊断试剂的阳性检出时间提前2d，显示弓形虫E／SA间接血凝诊断试剂具有早期诊断和生前诊断的应用价值。     

2种不同红细胞悬液对鸽血清抗体监测的影响

本试验分别利用鸽红细胞悬液和鸡红细胞悬液进行血凝和血凝抑制试验,检测鸽血清中的禽流感H5抗体和新城疫抗体水平,比较两者检测结果的差异。结果表明,在血凝试验中,对于无论是禽流感抗原还是新城疫抗原,鸽红细胞检测的血凝价均小于鸡红细胞检测的结果。在血凝抑制试验中,鸽红细胞检测鸽血清中的抗体水平大于鸡红细胞检测。     

“O”型口蹄疫正向间接血凝试验的操作体会

O型口蹄疫正向间接血凝试验是一种微量的体外免疫反应,主要利于抗原、抗体在一定条件的特异性反应形成抗原-抗体复合物,由于该复合物微小,所以采取先将抗原与红细胞结合,再让其与特异性抗体反应,使带有抗原的红细胞出现凝集现象,从而利用凝集现象进行免疫效果的判断。论述了O型口蹄疫正向间接血凝试验的操作体会。     

如何做好正向间接血凝试验

正向间接血凝试验的原理是将可溶性抗原吸附于与免疫无关的载体(红细胞)表面,此吸附抗原的红细胞与相应的抗体结合,在有电解质存在的适宜条件下发生的肉眼可见的凝集性反应.充分理解正向间接血凝试验的原理,对整个试验的操作和结果判定都具有很大的指导意义. 实验室正向间接血凝试验常在96孔110° V型血凝板上进行,操作步骤可简化为:①稀释液→②待检血清→③对倍稀释→④血凝抗原→⑤震荡静置→⑥结果判定六个环节.     

应用间接血凝试验检测兔出血症病毒抗体的研究

应用纯化兔出血症病毒抗原,以戊二醛醛化绵羊红细胞为载体,成功地建立了间接血凝试验用以检测兔出血症病毒抗体.与血凝抑制试验和琼脂双扩散试验比较,其敏感性比血凝抑制试验高32倍,比琼脂双扩散试验高1024倍.致敏红细胞于4°C保存四个月仍有效.     

两种口蹄疫抗体检测方法的操作体会

正免疫抗体效价检测,已成为现代动物疫病防控科学评价动物免疫接种效果的有效方法之一。正向间接血凝试验通常只用于O型口蹄疫抗体检测,该方法主要利用口蹄疫抗原来检测血清中是否含有口蹄疫抗体或判定抗体滴度能否达到免疫保护标准。液相阻断ELISA适用于O型、亚洲I型和A型口蹄疫抗体检测,其操作较正向间接血凝试验相对繁琐,但该方法精准性和稳定性高,既能评价口蹄疫免疫情况,又能检测口蹄疫病毒     

埃博拉病毒抗体间接血凝检测方法的建立

以纯化后的埃博拉病毒(Ebola virus,EBOV)糖蛋白(GP)作为抗原,致敏醛化的绵羊红细胞,进行最佳反应条件优化,建立间接血凝抗体检测方法。以EBOV高免马血清、纯化的IgG和精制免疫球蛋白F(ab’)_2为待检样品进行检测,并将检测结果与假病毒中和试验检测结果相比较。结果显示,该方法可特异性检测EBOV抗体,与马尔堡病毒、裂谷热病毒等的阳性血清均不发生反应;与假病毒中和试验测得的抗体效价增长规律相一致。结果表明,本试验成功建立了EBOV抗体间接血凝检测方法,该方法安全、简便、快捷,为EBOV疫苗免疫后的效果评价提供了又一新的检测方法。     

检测鸡抗猪流行性腹泻抗体的微量间接血凝试验方法的建立

为了监测鸡抗猪流行性腹泻病毒(PEDV)抗体水平,探讨猪源PEDV免疫蛋鸡血清抗体与蛋黄抗体的消长规律及其相互关系,进行了微量间接血凝试验(IHA)检测鸡抗PEDV抗体的方法研究。使用现场分离、鉴定的PEDV,制备IHA的抗原,采用方阵设计方法进行试验。结果显示:抗原以1∶64稀释的敏感性最高,绵羊红细胞最敏感,在37℃30min条件下,红细胞的致敏效果最好;进行IHA试验时以0.7%的致敏绵羊红细胞最敏感,血凝模式最佳;IHA的最适反应温度和时间以室温25℃1～2h后观察最佳;具有较高的特异性与敏感性,方便、快捷,凝集图形清晰,易于判定,结果可靠。     

山羊痘血清学诊断技术研究

本实验研制了山羊痘的五种血清学检测方法并进行了比较分析，结果表明：琼脂凝胶扩散试验（AGP）适于基层兽医开展山羊痘病例的诊断，对流免疫电泳技术（CIE）能提高对抗原或抗体的分辨能力，荧光抗体技术（FAT）能对感染细胞进行山羊痘病毒定位检测，反向间接血凝试验（RPHA）主要用于临床痘疹痂皮和感染细胞中山羊痘抗原的定量测定，而正向间接血凝试验（IHA）不失为一种山羊痘抗体的最佳监测方法。     

间接血凝试验检测鸭肝炎病毒抗体的研究

粗提DHV经Sephadex G200柱层折纯化后作为致敏用抗原,戊二醛法固定绵羊红细胞、BDB法致敏抗原红血球,建立了检测DHV抗体的间接血凝试验,其最佳致敏条件为:50%醛化红血球0.1ml、BDB2ml、DHV抗原0.5mg、37℃15min。本试验还对不同鸭血清的IHA抗体及免疫雏鸭的抗体水平等进行了检测,经与中和试验比较,阳性结果符合率为84.6％。     

猪瘟间接血凝抗体与猪瘟病毒感染的相关性分析

运用猪瘟间接血凝方法和猪瘟抗原ELISA方法对广西6个规模猪场送检的1614份血清进行猪瘟免疫抗体滴度和猪瘟病毒的检测,观察不同间接血凝抗体与感染猪瘟病毒是否存在一定关系。结果发现在任何一个免疫抗体滴度,都有可能有感染猪瘟病毒,二者无明显相关性,当间接血凝抗体滴度过低(小于1:16)或过高(大于1:512)时猪感染猪瘟病毒的机会相对大一些。     

血凝抑制试验的影响因素及控制

正血凝抑制试验(HI试验)的原理是病毒在适宜条件下对鸡的红细胞具有凝集作用,这种凝集作用可以被特异性抗体所抑制,抗体与病毒结合后,可使血凝素不能吸附于红细胞表面的受体上,红细胞将进行自然下落,沉降到V形孔底部,利用这种特性检测血清中的病毒抗体的试验就叫血凝抑制试验。血凝抑制试验的方法是将     

影响血凝抑制试验的因素

多种病毒具有凝集相应红细胞的能力，如正粘病毒科、副粘病毒科、披膜病毒科、细小病毒科以及腺病毒科等的病毒，而且这种凝集红细胞的能力又可被特异性的抗体所抑制，基于这种现象所进行的试验分别称之为红细胞凝集试验和红细胞凝集抑制试验，习惯上又称为血凝试验和血凝抑制试验。作为一种经典的血清学反应，血凝抑制试验主要应用于两个方面：（１）应用标准病毒悬液或血凝素测定血清中的相应抗体；（２）应用特异性的抗体鉴定新分离的病毒。该试验具有以下优点：（１）敏感性强，可以检测到微量的抗体和抗原，是较敏感的血清学反应之一；…     

用反向间接血凝抑制试验检测传染性法氏囊病血清抗体

利用扬州大学农学院畜禽病原微生物研究室提供的传染性法氏囊病单克隆抗体致敏红细胞。用反向间接血凝抑制试验检测传染性法氏囊病血清抗体。试验表明：反向间接血凝抑制试验具有很高的特异性，能被传染性法氏囊病抗原特异性地阻断，且不与鸡马立克氏病，白血病，传染性脑脊髓炎，减蛋综合征，新城疫等血清出现交叉反应。     

猪瘟的免疫血清学检测技术

本文综述了血清中和试验、猪瘟间接血凝试验、正向间接血凝试验、荧光抗体技术、免疫酶测定技术、间接ELISA、夹心-ELISA、DOT-ELISA、PPA-ELISA、C-ELISA、抗原捕获ELISA等在猪瘟血清学检测上的应用情况,并对其优、缺点作了浅析.     

多头绦虫抗原特性的研究：应用IHA观察绵羊免疫及感染后的抗体？…

为了观察绵羊用多头蚴抗原免疫及感染后的抗体消长规律，为羊脑多头蚴病的免疫预防和免疫诊断提供依据，本试验应用多头蚴原头节可溶性抗原，囊壁可溶性抗原，囊液粗抗原致敏绵羊红细胞对绵羊免疫３次及虫卵攻击感染后的血清抗体进行间接血凝试验检测。结果表明，原头节抗原免疫组，囊壁抗原免疫组，囊液抗原免疫组及原头节ＥＳ抗原免疫组在首次免疫后１周，抗体滴度迅速升高，第３次免疫后１周达到峰值，虫卵感染后开始下降，到感染     

用间接血凝试验检测猪传染性胸膜肺炎

经戊二醛化－鞣酸化处理的绵羊红细胞用胸膜肺炎嗜血杆菌（ＨＰ）抗原致敏,以间接血凝试验（ＩＨＡ）检测猪传染性胸膜肺炎病血清抗体。致敏红细胞抗原的最佳浓度为１００－１５０μｇ／ｍＬ,超免疫血清的抗体效价达１：５１２－１：１０２４,对人工感染１４ｄ的猪血清阳性检出率达８０％,与猪瘟、猪肺疫、喘气病、猪萎缩性鼻炎阳性血清无效叉反应。     

影响血凝和血凝抑制试验的因素及分析

某些病毒的血凝素能够选择性地使某种动物的红细胞发生凝集的现象称之为血凝(HA)。当病毒悬液中加入特异性抗体,能够阻断血凝现象的发生,叫作血凝抑制(HI)。这两种方法可用于病毒鉴定、病毒性疾病的诊断、病毒抗原变异的监测、抗体效价的检测,是目前兽医实验室常用的检测方法之一,主要应用于新城疫免疫效果检测和禽流感疫情监测。     

正向间接血凝试验的操作体会

正向间接血凝试验是将抗原吸附（致敏）于与免疫无关的颗粒性载体（红细胞）表面,然后与相应的抗体作用,在适宜电解质存在的条件下发生肉眼可见的特异性凝集现象。在基层动物防疫工作中,由于各方面条件不足,为了准确进行免疫效果评估和疫情预测,正向间接血凝试验成为首选的试验方法。