高油酸转基因大豆HOA_(80)对生物多样性影响的检测

对生物多样性影响的检测是转基因植物环境安全评价体系中一个重要的环节,也是转基因植物是否会产生环境潜在风险的重要评估指标。本试验研究了高油酸转基因大豆HOA80、受体大豆SW80和对照大豆吉育71对大豆田昆虫种类、指示昆虫(龟纹瓢虫、大豆蚜虫和大豆食心虫)种群数量、大豆主要病害(花叶病毒病、霜霉病和胞囊线虫)和大豆根瘤的影响。结果表明:高油酸转基因大豆HOA80、受体大豆SW80和对照大豆吉育71相比,对大豆田昆虫种类及指示昆虫种群数量消长的影响无差异;对大豆主要病害和大豆根瘤菌影响也无差异;说明高油酸转基因大豆HOA80对农业生态环境没有潜在风险。     

抗草甘膦转基因大豆的抗性及栽培地生存竞争能力研究

研究以实验室自主培育的抗草甘膦转基因大豆SHZD32-01为材料,以非转基因受体中豆32和适合当地栽培的皖豆31为对照,通过田间喷施不同剂量草甘膦,比较转基因大豆和受体大豆成活率及株高的差异;此外,在常规栽培条件下,比较不同时期的转基因大豆SHZD32-01、受体大豆和皖豆31的株高、复叶数、相对覆盖度的差异及成熟期(R8)后繁育系数和落粒率的差异,研究转基因大豆在常规栽培条件下的生存竞争能力。结果表明,SHZD32-01在喷施1.230~4.920kg/hm2草甘膦条件下生长不受抑制;栽培地条件下,不同时期的3个大豆品种的上述调查指标均无显著差异。因此,SHZD32-01对草甘膦抗性较好,无栽培地生存竞争优势,不具有杂草化的潜力。     

PCR检测转基因大豆

［目的］定性检测转基因大豆。［方法］以非转基因大豆和CP4-EPSPS转基因大豆为材料,以大豆内源基因Lectin和外源基因5-莽草酸-3-磷酸合成酶基因（CP4-EPSPS）为检测的目的片段,建立PCR反应体系。采用改进CTAB法提取大豆基因组DNA,并对所提DNA进行PCR扩增和电泳检测,确定转基因大豆的PCR检测限。［结果］改进CTAB法提取的大豆基因组DNA电泳条带清晰完整,转基因大豆和非转基因大豆基因组DNA均可扩增出约409 bp的条带即Lectin基因,而只在转基因大豆中检测出CP4-EPSPS特异性片段;当转基因大豆的含量为100%～0.2%时,均可扩增出特异性条带。［结论］该研究建立了转基因大豆的PCR检测方法。     

浅析转基因大豆

中国是目前全世界上最大的大豆进口国。我国自身大豆的产量是1300万吨到1400万吨,而我国大豆需求的数量超过了7000万吨,2012年进口量高达5838万吨。其中大部分为转基因大豆。仅大豆这一项来说以后必须依靠进口。转基因大豆产量高,生产成本是提高我国大豆的单产和总产的有效途径,也可以有效的解决我国大豆进口的问题。     

转基因高油酸甘蓝型油菜新种质的获得

在获得转fad2基因ihpRNA的甘蓝型油菜的基础上,应用气相色谱技术分析了转基因株系W-4(T_1代)单株自交种子(T_2代)的脂肪酸组成.结果显示:由49个单株组成的T:代群体油酸(C_(18:1))含量变幅为55.87%84.73%,其中有19个(占38.8%)单株种子油酸含量大于75%,有11个(占22.4%)单株种子油酸含量大于80%;受体(对照)的油酸含量变幅为55.28%～67.43%;获得的转基因高油酸材料(油酸含量≥75%)种子中亚油酸(C_(18:2))和亚麻酸(C(18:3))含量明显低于受体;高油酸材料的油酸脱饱和指数ODP值为5%~12%,而受体的ODP值高达20%～36%.基于ODP值,可以推测转基因高油酸材料种子中的FAD2活性受到有效抑制,从而阻止了油酸向亚油酸、亚麻酸的合成.     

抗草甘膦转基因大豆（Glycine mac (L.) Merri）杂草性评价的试验实例

 【目的】评价美国孟山都公司生产的抗草甘膦转基因大豆40-3-2作为加工原料引入中国可能带来的演化为杂草的生态风险,验证转基因大豆杂草化环境安全评价条款的可操作性。【方法】在农田生态环境下比较了抗性大豆、受体品种和当地常规品种的生存竞争能力、繁育能力、自生苗、种子落粒性和延续能力。【结果】在适宜季节种植的转基因大豆的生存竞争能力和繁育能力明显低于当地常规品种,表现在复叶数少、植株较矮、结实率低;受体品种的生存竞争能力和常规品种相似,但繁育能力低于常规品种。在非适宜季节三者的生存竞争能力相似,而受体品种和抗性大豆的结实能力都比常规品种略强。3个品种的落粒性都不强,形成自生苗的可能性也都很小。所有供试大豆种子的延续能力都很弱。【结论】以上研究结果表明美国孟山都公司生产的抗草甘膦转基因大豆40-3-2在中国南京地区环境条件下演化为杂草的可能性较小,其作为加工原料进口后演化为杂草的生态风险小。试验证实了转基因大豆环境安全评价标准的杂草性条款具有可操作性。     

转基因大豆检测技术研究进展

基因工程技术的发展使转基因作物及其产品越来越多地进入人们的生活,转基因产品的安全性在世界范围内引起广泛关注,对转基因检测技术的要求也越来越高,因此,对转基因大豆检测技术的研究成为近年来研究的热点。重点介绍以蛋白和核酸为目标的检测技术,如ELISA、PCR和基因芯片技术的最新进展,并对不同方法的优缺点进行比较,为转基因大豆快速检测方法的选择、改进和后续研究提供参考。     

转基因大豆检测技术研究进展

基因工程技术的发展使转基因作物及其产品越来越多地进入人们的生活,转基因产品安全性在世界范围内引起广泛关注,对转基因检测技术的要求也越来越高.随着转基因作物品种的不断增加,现有的常规转基因检测方法已不能满足快速、灵敏、高通量及准确定量的要求,进而对转基因检测技术提出了更高的要求.文章通过对转基因作物蛋白质和核酸检测技术的研究进展进行综述,重点介绍ELISA、PCR和基因芯片技术在转基因大豆检测中的最新应用情况,并对不同方法的优缺点进行比较.近年来,蛋白质组学、生物分子互作及近红外光谱分析等新技术在转基因检测中逐渐兴起应用,其中质谱技术和同位素标记技术是今后转基因检测技术发展的方向;由于多重连接探针扩增(Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification,MLPA)技术可在单一反应管内同时检测多种转基因成分,实现了高通量转基因检测的目的,提高了转基因检测效率,今后需加强其在转基因大豆检测中的研究与应用.     

我国转基因玉米大豆应用抗性治理策略

为有序推进我国生物育种产业,保障转基因玉米大豆产业化安全、可持续实施,需建立科学的抗性治理策略,延缓靶标害虫和杂草抗性产生。查阅大量国内外相关靶标害虫和杂草抗性进化研究的文献,总结国际转基因玉米大豆抗性治理的经验教训,并分析我国转基因抗虫棉的相关实践,立足我国当今靶标害虫与杂草实际情况,进行分析讨论。依据玉米种植区域特点及虫情发生规律进行区域划分,并确定各区域推荐的转基因抗虫玉米基因类型和配套庇护所策略,提出适合我国现阶段产业特点的转基因玉米大豆抗性治理策略。在靶标害虫抗性治理方面,应根据我国玉米主产区的靶标害虫发生及迁移扩散为害规律,遵循整体布局、源头治理的原则,在转化体研发、品种审定等环节加强虫源和种源控制;同时,建议因地制宜,采取“一区一类基因一策”的害虫抗性治理措施。在田间杂草抗性治理方面,建议配合轮换使用不同抗性机理的转化体和不同作用机理的除草剂。     

抗除草剂转基因大豆的生态安全评价进展

中国是大豆(Glycine max)的起源中心,大豆是中国的重要作物。转基因大豆向环境释放后可能带来的生态风险问题越来越受到人们的重视。中国自然状态下分布着丰富的野大豆(G.soja)遗传资源,转基因抗除草剂大豆能够在自然条件下与野大豆发生基因交流。转基因抗除草剂大豆释放后,由于大量单一使用草甘膦,田间杂草已经进化出了抗药性。大量使用的除草剂以及转基因大豆根际分泌物会对土壤微生物、非靶标生物产生影响,并影响到植物的固氮能力。本文在综述研究进展的基础上,提出了转基因大豆生物安全研究与管理的建议,为我国将来转基因大豆的产业化提供参考。     

衡阳高油酸油菜产业发展前景与对策

在综合分析高油酸菜籽油的品质特性及用途的基础上,论述了发展高油酸油菜产业的重要意义,分析了高油酸油菜国内外研究进展与发展现状,分析了衡阳发展油菜生产的自然条件、产业基础、发展潜力,认为在衡阳发展高油酸油菜产业有优势,并就衡阳率先发展高油酸油菜产业提出了建议与对策.     

大豆5种油脂脂肪酸含量的配合力分析

试验选用2个吉林省主推大豆品种、3个美国低亚麻酸材料作为杂交亲本,按Griffing方法2进行双列杂交。对5种主要油脂脂肪酸含量进行了配合力分析。结果表明：油脂脂肪酸含量属数量遗传,亚麻酸和棕榈酸受加性效应控制,油酸和亚油酸受加性效应和非加性效应共同控制,以加性效应为主,硬脂酸含量受非加性效应控制。亲本油脂脂肪酸含量的平均值与一般配合力效应值呈密切的正相关。可直接通过亲本油脂脂肪酸含量的平均值间接选择一般配合力高的材料作杂交亲本。亲本的一般配合力效应值与特殊配合力效应值有时表现并不完全一致,最优的材料有时未必能配出最优的杂交组合,不能通过亲本的一般配合力效应值的表现来判断特定组合特殊配合力的表现。     

不同栽培方式对高油酸油菜的影响

通过高油酸油菜780的不同田间栽培对比试验,采用完全随机试验法对油菜的生物学性状、经济学性状以及品质性状进行研究。试验结果显示,最优的栽培方式为复合DP1W机除和有机DP1W机除,即施复合肥80 kg/667m~2,或施有机肥720 kg/667m~2,直播,1万株/667m~2,机械除草方式。以这两种方式栽培油菜,经济性状好,单株产量高,折合产量分别可达130.17和128.83 kg/667m~2。     

航天诱变高油酸甘蓝型油菜突变体分子标记的筛选

【目的】利用与候选基因FAD2紧密连锁的SSR标记对航天诱变的高油酸F2群体进行SSR标记分析,筛选与该高油酸性状紧密连锁的SSR标记及分析其突变位点。【方法】F2群体母本10L421为黄籽低油酸高亚麻酸自交系,父本10L422为航天诱变的高油酸低亚麻酸的突变株自交系后代。对4条染色体（A05、A01、C05及C01）上的候选基因FAD2上下游100 kb区域设计的148对SSR引物在两亲本、高低油酸混合池及F2群体中进行分析。亲本及群体油酸含量采用气相色谱分析,根据分子标记结果对F2群体油酸含量进行单标记分析。【结果】有36对引物在亲本间表现多态性,多态频率为24%。其中10对SSR引物在2个亲本和高油酸、低油酸极端群体间均具有相同的多态性。显著性检验和单标记分析表明,A05和A01上与FAD2共分离的SSR标记在0.01显著水平上与油酸性状相关,单标记分析分别解释表型变异31.1%和29.4%。【结论】A05和A01染色体上的FAD2是控制该突变体材料高油酸性状变异的主效位点,且该高油酸突变体是由于A05和A01上FAD2的双隐性突变所致。     

甘蓝型油菜高油酸材料的正反交遗传研究

用4个高油酸品系和4个常规(低含量型)油酸品系为亲本材料,通过正反交试验,用FOSS近红外分析仪测定油酸含量,初步分析了甘蓝型油菜中突变产生的高油酸特性的遗传规律.结果表明,常规亲本与高油酸亲本油酸含量稳定;高油酸含量在正交组合F1代种子中表现,且其高油酸含量介于常规亲本油酸含量与高油酸亲本油酸含量均值之间;甘蓝型油菜的高油酸特性由显性多基因控制,并具有累加作用,不受母性遗传的影响.     

基于广泛靶向脂质组学与近红外技术的高低油酸花生鉴评

[目的]探索一种能鉴定花生品种与评价品质的新型检测方法,筛选高油酸花生特异性脂质生物标志物.[方法]采用超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)技术,对2个油酸含量差异显著的花生品种,即高油酸品种开农1715(KN1715)和低油酸品种冀花7号(JH7H)进行农艺性状考察、近红外分析(Near infrared...     

基于CRISPR/Cas9基因编辑技术靶向敲除OsFAD2创制高油酸水稻突变体

【目的】水稻 OsFAD2 编码脂肪酸脱饱和酶,调节油酸（C18∶1）向亚油酸（C18∶2）转化,该基因突变后可提高水稻的油酸含量。为了创制高油酸水稻突变体并助力稻米油发展,利用 CRISPR/Cas9 技术对OsFAD2 进行定点编辑。【方法】以日本晴（粳稻）愈伤组织为材料,利用含有 CRISPR/Cas9-FAD2-sgRNA 载体的农杆菌介导获得转基因植株,Sanger 测序与荧光定量 PCR 鉴定阳性植株,最后利用气相色谱质谱（GC-MS）检测稻米籽粒脂肪酸含量变化。【结果】靶点序列测序检测表明 , 有 3 株OsFAD2敲除植株在 T0代产生了碱基变异,但是仅有 1 株不存在脱靶现象。随后阳性植株种子被扩繁至 T1 代,使得 OsFAD2 突变序列纯和、稳定,荧光定量 PCR 检测表明 OsFAD2 表达量比野生型植株显著减少。利用 T1 代转基因植株进行种子脂肪酸组分检测表明,敲除 OsFAD2 导致籽粒油酸含量显著上升约 30%。【结论】利用 CRISPR/Cas9 技术对水稻 OsFAD2 编码区序列进行靶向敲除并获得了高油酸水稻突变体,为后续高油酸稻米育种提供种质资源。     

夏大豆丰产增效技术研究

采用正交试验设计,研究了品种类型、栽培密度和种植方式3个因素对大豆产量的影响。结果表明：品种是夏大豆产量及各农艺性状的主要影响因素;3因素对夏大豆产量影响强度的顺序是品种类型〉栽培密度〉种植方式;在本区生态条件下,获得夏大豆最高产量的理论组合为：品种为有限类型沧豆6号,栽培密度2．4万秭／hm^2,种植方式为行距40cm。     

豆乳乳酸发酵特性的研究

以豆乳为主要原料,经除腥、调配等特殊处理,以保加利亚杆菌、嗜热链球菌为发酵菌种来研究豆乳乳酸发酵工艺,并经三因素、三水平正交试验。结果表明,以豆乳为主要原料制作酸豆乳具有传统酸乳的风味和外观,以及营养平衡、价格低廉等特点。