改进Tricine-SDS-PAGE法分析重组牛乳铁蛋白肽

为了有效分离3.1kDa乳铁蛋白肽,试验调整分离胶中聚丙烯酰胺浓度及凝胶的交联度,并加入适量甘油,改进了传统的Tricine-SDS-PAGE方法。结果表明,该方法与常规的SDS-PAGE和Tricine-SDS-PAGE相比较,改进的凝胶不仅可以有效分离3.1kDa的肽,而且对分子量为212kDa的大分子量蛋白也有很好的分离效果,明显优于常规的SDS-PAGE和现有的Tricine-SDS-PAGE方法。     

一种新型调驱用交联剂的研制

本文针对地层水矿化度低的油藏研制了一种新型交联剂,该交联剂属于Cr3+体系,是在原有CL型交联剂的基础上通过加入助剂、调节剂后形成的新型交联剂。该交联剂在低矿化度(矿化度为2185mg/L,其中Ca2++Mg2+含量为41mg/L)条件下与聚合物溶液形成的交联体系具有良好的交联增粘性。在室内对该交联剂低矿化水交联体系的静态交联延缓性、体系粘弹性、剪切恢复性等性能进行了评价,试验结果表明:研制的交联剂与聚合物溶液的初始静态交联时间为5h~7h,具有缓交联性;形成体系具有良好的粘弹性;随着剪切保留率的提高,交联体系恢复率呈上升趋势,实验剪切保留率约40%时,恢复50h后,粘度恢复率为70%左右。研制的新型交联剂可用于低矿化地层水油藏实施交联聚合物驱油技术。     

家禽血浆、聚丙烯酰胺凝胶和电泳贮备液保存的探讨

本试验对鸡和鸭血浆、聚丙烯酰胺凝胶、电泳贮备液的保存时间及保存条件进行了研究。结果表明:鸡血浆在—20℃条件下保存6个月,解冻2次,对研究鸡血浆蛋白(酶)多态性(血浆运铁蛋白Tf、前白蛋白Pra、淀粉酶Amy、脂酶Es)没有影响;鸡血浆在—20℃条件下保存8个月,解冻3次,对研究鸡血浆Tf、Pra多态性无影响;鸭血浆在—20℃条件下保存8个月,解冻3次,对研究鸭Tf、Pra、Es、Amy、血红蛋白Hb多态性无影响;聚丙烯酰胺凝胶和贮备液(分离胶、浓缩胶、电极缓冲液、分离胶和浓缩胶缓冲液)在 4℃冰箱内保存8个月,不影响鸡和鸭血浆蛋白(酶)多态性的研究效果。     

不同温度下环氧化合物与丝素蛋白作用形成的凝胶结构

用氨基酸分析、热分析以及溶解法分析了丝素蛋白与环氧化合物(PGDE)在不同反应温度下形成的凝胶的微观结构。结果表明:在较高温度下形成的凝胶(CFG),其丝素蛋白上的酪氨酸(Tyr)、组氨酸(His)和赖氨酸(Lys)与PGDE发生了交联,热分解峰出现在299.4℃,难溶解。CFG形成了环氧化合物与丝素蛋白大分子交联的三维网络结构。而在冰点以下形成的凝胶(PFG),其丝素蛋白没有发生交联反应,热分解峰出现在294.7℃,较容易溶解。PFG具有丝素分子之间氢键结合的三维网络结构。     

鹅基因PCR-SSCP分析条件优化的研究

SSCP是一种新的分子遗传标记分析方法,但影响其试验效果的因素很多。本试验从多个方面对鹅OBR基因SS-CP方法的影响因素进行分析,结果发现应用15%的聚丙烯酰胺凝胶常温下低压电泳(丙烯酰胺/N,N′-亚甲基双丙烯酰胺为29∶1)效果最佳,条带清晰,容易识别,可应用于其他SSCP分析方法的参考。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳快速鉴定牛乳蛋白质的研究

试验利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对牛乳进行快速质量检测研究,通过对样品稀释倍数、电压条件、染色时间、漂洗时间及次数等条件进行摸索,获得了条带清晰的牛乳蛋白电泳图谱.结果表明,快速聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定牛乳蛋白质的最佳条件是,用8%分离胶在120V电压下电泳.使用超级灵敏度蛋白质电泳快速染液染色,煮沸染色1 min,振荡10min,可实现快速鉴定牛乳蛋白的目的.     

2-(N-烷基)氨基-4,6-二氯-1,3,5-均三嗪的制备及其对茧衣的固胶性能

以辛胺和十二胺分别与三聚氯氰进行反应,制备2-(N-辛基)氨基-4,6-二氯-1,3,5-均三嗪(简称TOAT)和2-(N-十二烷基)氨基-4,6-二氯-1,3,5-均三嗪(简称TDAT).将其产物作为交联剂对茧衣进行固胶实验.借助傅里叶变换红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy,F1R)和1H NMR等化学手段对改性反应产物进行了结构表征,证实了反应产物与预期目标的一致性.以练减率为主要考察指标,通过正交试验方法分别研究了反应产物最佳的固胶工艺技术条件,并通过热重分析仪、接触角、白度仪、扫描电镜、X射线衍射测试分析固胶前后丝纤维物化性能的变化.茧衣固胶实验及其分析测试结果表明,固胶最佳工艺技术条件为:固胶浴液pH 10.0,温度80℃,交联剂质量浓度12.5 g/L,时间4h;固胶后丝的耐热性和热稳定性均有大幅度提高;TOAT和TDAT固胶后丝的接触角分别为123.5°和132.8°,且固胶后对丝的白度几乎影响不大;固胶丝的表面形貌发生了明显变化,但固胶丝的结晶区几乎保持不变,说明固胶反应主要发生在丝纤维的非结晶区.     

垂直平板PAGE检测牛血清碱性磷酸酶同工酶方法的改进

在参考有关资料基础上,对用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检测牛血清碱性磷酸酶同工酶过程中凝胶配制、加样量及染色反应等条件进行了改进,探索出一套适用于牛及其它物种血清碱性磷酸酶同工酶分析的方法。     

宠物罐头复配增稠剂的研究与制备

当今，宠物食品发展迅速且前景广阔，尤其是湿粮罐头增速明显。宠物罐头生产过程中需加入增稠剂以保证肉制品状态，使其稳定不析水，但单一胶体具有局限性，而复合食品胶可以产生协同效应，具有较强的稳定性、保水性以及乳化能力。本试验以黄原胶和魔芋胶为主，筛选其凝胶较优协同范围，然后添加与其两者均具有协同作用的瓜尔胶，在不同浓度及不同比例下凝胶强度可提高25.6% ~ 58.5%（P < 0.05）|同时添加卡拉胶和氯化钾进行复配，各卡拉胶浓度下添加0.2%的氯化钾凝胶强度最低，随氯化钾浓度增加，凝胶强度可显著增加29.8% ~ 182.8%（P < 0.05）|在所有组合中以凝胶强度为指标筛选最佳复配组合并进行试验。综合罐头的各部分均匀度、保水率及质构分析数据，开发一款适用于宠物罐头的增稠剂产品。经试验最终选择黄原胶和魔芋胶复配比例为5:5，浓度为1.0%，瓜尔胶浓度为0.2%，卡拉胶浓度为0.4%，氯化钾浓度为0.4%的复配组合，即黄原胶：魔芋胶：瓜尔胶：卡拉胶：氯化钾为5:5:2:4:4，水溶液中添加量为2.0%，整体罐头中的添加量为0.3%。 [关键词] 宠物罐头|增稠剂|黄原胶|魔芋胶     

利用SRAP分子标记对北极狐遗传多样性的研究

相关序列多态性（SRAP）是近年来发展起来的一种新型分子标记技术,具有稳定、简便、中等产率、高共显性等优点。本试验利用北极狐的基因组作为模版,首次把SRAP方法引入到哺乳动物中进行分析,对北极狐SRAP反应条件进行了优化,产物用非变性的聚丙烯酰胺凝胶分离,得到的结果清晰、稳定、多态性高,结果用NTSYS-pcversion 2.1软件对北极狐群体的遗传多样进行了初步的分析。     

F107(F18ab)菌毛的提取、提纯及鉴定

将致仔猪水肿病菌株107/86在TSB、TSA培养基上传代,使之表达F107菌毛,大量收集菌毛化的细菌,利用热洗脱法提取菌毛.粗提菌毛经1 5%的聚丙烯酰胺凝胶电泳可见一条约15ku的条带,以染色的凝胶为对照,将未染色凝胶上的菌毛条带切下,捣碎,加生理盐水,37℃,2h后离心,吸出上清再次电泳,可见提纯的菌毛条带.用针对F107菌毛的单抗做免疫印迹反应,证实此条带为F107菌毛蛋白.     

雏鸡用水凝胶药物载体的研制

【目的】通过物理交联法和表征分析,研制一种用于雏鸡的加水搅拌即用型水凝胶。【方法】制备水凝胶,通过预试验和Box-Behnken响应面法优化配方,使用扫描电子显微镜(SEM)观察微观结构,通过傅立叶红外光谱(FTIR)中化学基团吸收峰位置的偏移情况判断分子之间的相互作用,通过差示扫描量热仪(DSC)研究理化性质的变化。【结果】该水凝胶载体的最优配方为:4%聚丙烯酸钠高吸水树脂、10%麦芽糊精、1.5%瓜尔胶,余量为水。SEM结果显示,高吸水树脂和水凝胶均为多孔网状结构,加入麦芽糊精和瓜尔胶后结构更紧密,空洞更小。FTIR表明三者间存在氢键结合和分子间缠绕,无新化学基团生成。DSC结果显示三者发生相互作用,吸热峰峰形较宽,熔点上升,热稳定性提高。【结论】制备了一种雏鸡用水凝胶载体,该水凝胶制备方法简单、成本低廉、使用便捷。     

DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染方法的探讨

聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)是聚合酶链反应、单链构象多态(PCR-SSCP)分析中不可缺少的技术,多用于单链DNA碱基移位、插入或缺失等基因变异情况的筛查,还可以广泛用于遗传育种、基因定位、种子活力测定等方面。银染方法的建立,始于1979年对蛋白质的染色,以后逐渐应用于核酸。对蛋白质与核酸的检测灵敏度可达到纳克水平,促进了生物大分子结构与功能的研究。电泳完毕后,首先用固定剂将核酸或蛋白固定到凝胶上,然后使银染剂中的银离子与之牢固结合,再通过还原剂将银离子还原,从而发生银棕色显色反应。1材料和方法1.1材料垂直板电泳系统,PC…     

可注射缓释制剂的剂型及设计概述

1溶液 在注射处方中加入胶凝剂或增粘剂例如聚乙烯醇、甲基纤维素、羟丙甲基纤维素、羟甲基纤维素钠或聚维酮,可形成药物分子的可生物溶蚀性骨架.肌肉注射或皮下注射后,药物从凝胶骨架的释放依赖于贮库中游离药物分子的浓度.一旦游离药物分子从凝胶表面被吸收,就会形成药物的浓度梯度,从而使药物分子从凝胶中分离.这类型的缓释性质在某种程度上可通过选择控制剂型粘性的适合凝胶或增粘聚合物来实现,或者通过改变这些物质的浓度来实现.如聚维酮用于土霉素不但能增溶,更可使作用时间延长至28～32小时.     

家蚕食道下腺组织化学和分泌颗粒去向的探讨

本试验采用组织化学方法和聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳,分析了家蚕食道下腺细胞RNA的变化,以及分泌颗粒的化学性质和分泌去向。试验表明,龄初时细胞中RNA含量极低,至催眠期,细胞中RNA明显增多。分泌颗粒对Millon试剂和酸性快绿均呈阳性反应。而电泳结果表明,食道下腺分泌3种蛋白,脂肪体分泌6种蛋白,从迁移率角度分析,这9种蛋白分别和血液中的蛋白十分相似。     

紫苏叶提取物及其保健功效的研究

机体的衰老和老年性疾病的形成是一个缓慢的发展过程,它涉及自由基对机体连续性损伤及修复的交替反应。衰老的自由基学说认为,衰老是机体组织中持续进行的活性自由基反应引起的有害作用积累的结果。活性氧自由基可以引发生物膜的不饱和脂肪酸发生脂质氧化反应,损伤膜结构和功能,导致功能和代谢紊乱。脂质过氧化产物丙二醛易使生物大分子产生交联作用,除形成常见的“寿斑”外,还可导致酶的失活或ＤＮＡ的变质,乃至诱发细胞的癌变。Ｈ２Ｏ２是活性自由基反应的前提,参与自由基反应,是引发人体不饱和脂肪酸发生脂质过氧化的重要物质。…     

滩羊血红蛋白多态性的变异研究

滩羊起源于我国的蒙古羊,是分布于西北宁夏、甘肃等地的特有裘皮用品种。自然条件下,滩羊自发双胎率不到3%,这对产后早期利用羔裘皮的滩羊品种是一个严重缺陷。为此,作者对目前已选择出的经产双羔母羊或公羊的子代试验群进行了血红蛋白多态性的分析,并以基础群单羔羊为对照,阐明血红蛋白基因在人为选择繁殖性状的条件下的变迁规律。一、材料与方法滩羊血样均采自甘肃景泰,其中双胞胎试验群82只,正常单胎羊27只,共计109只。血红蛋白的分型采用聚丙烯酰胺不连续缓冲体系电泳方法(门     

壳聚糖黏膜佐剂促进黏膜免疫的研究进展

近年来通过黏膜部位释放抗原物质的新型免疫方法受到了越来越多的关注,其中鼻腔免疫被认为是最有前景的给药途径,佐剂可以提高或优化对通过黏膜或系统途径接种抗原的免疫应答,新的黏膜佐剂和传递系统是疫苗领域的研究热点,本文就纳米载体-壳聚糖作为特殊的黏膜免疫佐剂和PEG交联壳聚糖季铵盐智能水凝胶体系作为新型的鼻腔免疫传递系统作一...     

Spinigerin α抗菌肽的分离纯化及其活性研究

Spinigerinα抗菌肽是一种源于白蚁的线性抗菌肽,包括25个氨基酸,不含半胱氨酸,呈α-螺旋结构。本研究采用凝胶加热-层析法,对Spinigerinα抗菌肽样液通过水浴加热至100℃保持20³0 min,除去不耐热的部分蛋白,经葡聚糖凝胶SephadexG-25脱盐层析分离得到Spinigerinα抗菌肽提纯物。根据SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱绘制分子质量标准曲线,计算Spinigerinα抗菌肽的分子质量。试验结果表明:SDS-PAGE电泳表现为单一条带,其分子质量为2.74 ku;Spinigerinα抗菌肽对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌均有抑菌作用,最小抑菌浓度分别为0.5 mg/mL、0.3 mg/mL、0.2 mg/mL。     

正交设计优化崇明白山羊SSR-PCR反应体系

以崇明白山羊基因组DNA为模板,利用正交试验设计L16(45),对影响崇明白山羊SSR-PCR反应体系的5个因素(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP及引物的浓度)进行优化。结合单因素完全随机试验筛选各因素的最佳水平,针对MCB3224引物建立了崇明白山羊SSR-PCR的最佳反应体系。结果表明:在20μL的反应体系中,5个因素的最佳水平分别为Taq DNA聚合酶0.5 U、Mg2+2.5 mmol/L、模板DNA 30 ng、dNTP 0.20 mmol/L,引物0.8 mol/L;引物的最佳退火温度为57.3℃。利用16份崇明白山羊的DNA模板和2个微卫星引物验证此反应体系,聚丙烯酰胺凝胶电泳,结果显示该体系稳定可靠且普适性较好。