猪、兔感染弓形体免疫机理的探索 Ⅲ.电泳自显影法和琼脂扩散法检测血清抗体

为了继续探索猪、兔感染弓形体病免疫的机理,我们采用放射对流免疫电泳自显影法和琼脂扩散沉淀法,检测弓形体强、弱毒虫株免疫猪、兔血清中的抗体.现将试验结果分述如下.     

猪弓形体病免疫研究初报

对本病的免疫研究,据国外报导,灭活苗虽能产生一定的抗体,但免疫力很差,达不到防病的效果;弱毒虫株虽能产生免疫作用,但免疫动物体内带虫问题尚未得到解决.我们选用了南京汤山系弓形体虫株(简称NT株),传鼠114代,通过猪肾细胞传代,并用紫外线照射致弱,经安全性及近期免疫源性的初步测定,效果良好.     

猪兔感染弓形体后免疫机理的探索——Ⅳ.猪感染弓形体强弱毒虫株后的变态反应

自Frenkel(1948)氏发现变态反应可诊断弓形体病以来,大量资料证实有较高的检出率.本试验企图通过皮内变态反应,检测“NTA”与“NT”虫株免疫动物的变态反应并进行比较,以探索两种虫株的细胞介导免疫机理.材料与方法抗原制备:参照哈尔滨兽医研究所(1979)猪弓形体病研究组的变态反应抗原制备方法略加改进.     

猪、兔感染弓形体免疫机理的探索 Ⅱ.中和试验法检测免疫血清抗体

本研究在于应用中和试验法检测猪、兔感染弓形体强、弱毒虫株的血清中是否存在中和抗体,以期为阐明其免疫机理积累资料.材料与方法(一)试验动物 选健康白兔7只,体重3公斤左右.在每只兔背部剪去毛,然后用不褪色的彩笔划分16～20个小方格,每格约400平方毫米.每只兔供4～5份血清样品的检验.     

间接血球凝集试验检测猪弓形体病抗体

猪弓形体病的诊断,除进行虫体分离、病料涂片检查外,还可应用免疫血清学方法检测血清中抗体.现将我们以弓形体裂解物致敏双醛固定的绵羊红血球,检测猪弓形体病血清中的抗体的试验结果报告如下:     

仔猪乳前攻击猪瘟强毒免疫试验

仔猪乳前猪瘟免疫,经前一阶段试验证实,在仔猪生后即行猪瘟兔化弱毒苗注射,间隔0.5,1.5,3.5,4.5小时后令其吸吮初乳,饲养155天行兔体中和抗体测定,0.5小时组5头猪的血清对10只家兔有90%(9/10)获得中和.为进一步验证其免疫效果,应用石门系猪瘟强毒进行攻击试验.     

仔猪乳前对猪丹毒菌苗免疫力的试验初报

猪丹毒G4T(10)弱毒菌苗具有较好的免疫效力,但哺乳仔猪由于受母源抗体的影响,接种后往往不能获得理想的免疫力.二次免疫虽好,但需增加一倍的防疫费用;否则就必须等到9周龄以后接种疫苗才能获得坚强的免疫力;由于防疫注射时间太迟,在哺乳后期又难以避免发生猪丹毒病.如何排除母源抗体影响,选择最佳免疫日龄,是一个亟待解决的问题.Wang等(1973)研究证实,胎儿在发育后期对肠病毒已具有良好的免疫应答能力.据此,我们对新生仔猪在哺初乳前试行猪丹毒菌苗接种,5个月后攻击强毒菌获得较好的免疫力.     

弓形虫紫外线弱毒虫株的培育及免疫研究（第二报）

本文报道了弓形虫NT强毒虫株,经紫外线全暴露垂直连续照射,通过细胞致弱培养筛选出抗辐射变异虫株NTA-Ⅲ系。本虫对猪、兔和小鼠的毒力均明显减弱。猪安全试验116头,21头出现弱反应,占18.1％,无重病或死亡;非带虫免疫试验36头,连续测35128天,均末查到虫体和包囊。用含虫数10~5/毫升弱毒虫苗每头猪接种1毫升,6个月免疫保护力为100％。     

猪弓形体病的调查与研究

<正> 猪弓形体病是由龚地弓形体原虫引起的一种重要寄生虫病,亦是人畜共患的疾病.该原虫分布甚广,可感染多种动物.我国最早在福建发现,从猫、兔体内分离到了弓形体原虫(于恩庶1957年),1978年上海畜牧兽医研究所又从一暴发"无名高热病"猪场的患猪体内分离到弓形体原虫.我省猪"无名高热病"不少,但病因迄今未详.为查清猪弓形体病在我省是否存在及其流行情况,于1980年2月-1981年6月,在郑州、南阳、许昌、新乡、开封等地对部分猪只作了流行病学调查、鼠继代虫株回归猪试验、猪弓形体病康复猪的免疫效果观察、穿取鼠蹊     

用免疫酶标记法诊断急性猪弓形体病

最近,我们应用美国进口及国产的辣根过氧化物酶,标记弓形体免疫血清的球蛋白,检查了人工感染的急性弓形体病,获得了较满意的结果。现将试验结果报告如下。 材料和方法 1.弓形体免疫血清球蛋白(IgG)的提取 弓形体高免血清的制备及球蛋白的提取,参照“荧光抗体诊断猪弓形体病”的方法。猪弓形体高     

鉴别PRRSV野毒感染与弱毒活疫苗TJM-F92免疫d120-ELISA方法的应用

本实验研究了免疫后攻毒的GST-d120特异性抗体血清动力学变化特点,d120-ELISA和IDEXX检测不同免疫状态临床样品S/P值之间的区别与联系,并根据结果判断免疫动物是否发生野毒感染或存在弱毒疫苗的母源抗体。血清动力学实验中,免疫组6头实验动物免疫弱毒活疫苗TJM-F92(简称TJM-F92),对照组4头实验动物注射等体积PBS,第28天2组分别注射强毒TJ F3,采集血清,绘制血清动力学曲线。d120-ELISA检测结果显示,免疫组中5头免疫及攻毒后均为阴性,1头免疫1d~28d为阴性,攻毒后血清抗体水平上升并在第14天转为阳性;对照组4头动物攻毒后17d左右出现抗体阳性转化。IDEXX检测结果显示,免疫组均在第10天左右出现血清阳性转化,抗体水平逐渐上升并维持较高水平,攻毒后血清抗体无较大变化;对照组在攻毒后7d左右出现阳性转化。结果表明,d120-ELISA检出抗体阳性的时间要晚于IDEXX试剂盒10d左右,但d120-ELISA能够检测出IDEXX试剂盒无法检出的免疫TJM-F92后发生强毒感染的动物。临床应用试验中,采集并检测HP-PRRSV的TJM-F92和弱毒活疫苗JXA1-R(简称JXA1-R)免疫14d和28d后的临床血清样品,以及疑似发生PRRSV感染和未发生感染的灭活疫苗免疫猪场的样品。试验结果显示,d120-ELISA检测TJMF92免疫阳性血清为阴性;在免疫14d和28d后,d120-ELISA检出JXA1-R临床免疫血清阳性率为0%(0/15)和86.7%(13/15),相应IDEXX检出阳性率为86.7%(13/15)和100%(15/15)。d120-ELISA和IDEXX检测免疫灭活疫苗并疑似发生PRRSV感染的猪群样品的阳性率分别为45.0%(9/20)和100%(20/20),而检测未感染猪场样品的阳性率分别为0%(0/30)和40%(12/30)。综上所述,血清动力学试验和和临床应用试验结果证明,d120-ELISA可以鉴别野毒感染与TJM-F92或灭活疫苗免疫动物,为组装ELISA试剂盒、筛选并剔除TJM-F92免疫动物中发生野毒感染的动物、净化猪群奠定了基础。     

伪狂犬病病毒(PRV)不同毒株抗原相关性研究

为了解PRV不同毒株之间的抗原性差异,评价弱毒FB株预防新型PRV的潜力,以4株PRV(FA、FB、Bartha-K61和FJ2012)毒株及其高免血清为材料,应用交叉中和试验测定PRV不同毒株的抗原性差异,通过FB免疫猪攻毒试验评价弱毒FB株对新型PRV的保护潜力。结果表明:中和抗体测定表明兔抗FB株、FA株、Bartha-K61株和FJ2012株高免血清的中和效价分别为1∶54、1∶91、1∶91和1∶215。交叉中和试验显示FB株与FA株、FB株与FJ2012株、FA株与FJ2012株的抗原相关性(R值)均大于0.8,Bartha-K61株与FA株、FB株、FJ2012株的R值均小于0.4,表明FB株与FJ2012株的抗原相关性高于Bartha-K61株与FJ2012株。仔猪免疫攻毒试验显示FB免疫猪能抵抗新型PRV(FJ2012株)的攻毒,保护率100%。提示PRV弱毒FB株有望成为预防新型猪伪狂犬病毒(FJ2012株)的疫苗候选株。     

猪弓形体病的萤光抗体快速诊断

猪弓形体病的诊断,一般都采用虫体分离,病料涂片染色检查及病愈后检测血清中抗体等方法,或需时较久,或检出率不够高.为了达到快速诊断,我们进行了直接萤光抗体诊断的试验,并与姬姆萨染色法作检查比较.现将初步结果报告如下:一、材料和方法1.高免血清制备(1)高免兔血清制备:以健康家兔2只(编号14、17)免疫.第一次用弓形体小白鼠的腹液,以PBS作1:10稀释,腹腔接种0.5毫升(约合325万虫体).接种后5至6天发病,病程约一周.康复后,即进行第二次接种,接种抗原量加倍.然后再第三、第四次接种,中间相隔一周.每次接种量按前次各递增0.5毫升.末次接种后第10天放血,分离血清,冷冻保存在-20“C.     

鸡新城疫免疫程序的研究——Ⅱ.单克隆(N-79型)LaSota 系弱毒疫苗对雏鸡饮水免疫的试验

单克隆(N-79型)是新城疫 LaSota 株经克隆纯化制成弱毒疫苗。应用鸡胚尿囊液的疫苗毒对13—26日龄的雏鸡经饮水免疫,1毫升疫苗免疫200只雏鸡,免疫14天后血清 HI 抗体滴度上升到高峰。免疫鸡经新城疫强毒毒株攻击试验证明,鸡体的血清 HI 抗体滴度在3 Log2就能抵抗新城疫强毒的感染。每毫升疫苗经饮水免疫500只雏鸡也可产生坚强的免疫力。这疫苗也可用于滴鼻免疫。这疫苗对雏鸡经2次饮水免疫(间隔4周),免疫期可达5个月以上。这疫苗在一个养鸡场使用时,在免疫后45天该场的鸡群受到新城疫强毒侵害,凡是用过新城疫 B_1和 LaSota 系疫苗免疫的鸡有一部分被感染死亡,而应用单克隆(N-79型)疫苗免疫的鸡没有死亡。     

猪繁殖呼吸综合征弱毒疫苗的研制

PRRSV—SА弱毒株免疫仔猪,无不良临床表现,不排毒;免疫怀孕母猪,母猪精神、食欲、体温均正常,并在预产期顺利产仔,表现出良好的安全性。SА弱毒免疫猪后2周即产生抗体反应,免疫仔猪4～6个月后,能抵抗强毒攻击;母猪在配种前2周免疫,在怀孕90-96d时,用强毒攻击,不表现任何临床症状,并顺利产仔,表现出坚强的免疫力。用SА弱毒制备成冻干疫苗,免疫猪表现出良好的安全性和免疫力。证明PRRSV—SА弱毒疫苗能预防猪繁殖呼吸综合征。     

猪蓝耳病灭活与弱毒疫苗免疫效力的比较实验

正大兴区猪蓝耳病免疫主要使用高致病性猪蓝耳病活疫苗(JXA1-R株)和猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗(NVDC-JXA1株)。本实验选用未免疫过任何疫苗的断奶仔猪60头作为实验对象。实验猪分为3组,每组20头;按免疫程序依次注射弱毒苗、灭活苗和生理盐水。实验猪免疫后每隔半个月采样称重一次,共三个月。样品采用间接ELISA的方法诊断和定量检测猪繁殖和呼吸综合征抗体。通结果如下:与猪繁     

江苏省猪弓形体病流行病学的调查

猪弓形体病可分为急性、慢性或隐性.隐性感染不表现症状.但发育迟缓,母猪可引起流产或死胎,造成经济损失,影响养猪业的发展,也危害人的健康.1957年福建省卫生防疫站于恩庶等首先分离到弓形体.1977年以来上海、江苏、北京等省市从散发或暴发性的猪“高热病”中分离到弓形体,证实了我国存在猪弓形体病,并认为弓形体是猪“高热病”的一种重要病原.据国外报道,弓形体的感染率高低不等.为了解江苏省猪弓形体病的流行范围及流行规律,以便拟订防制措施,我们于1978～1979年以间接血球凝集试验检测了我省7个地区47个县市商品猪弓形体病抗体及部分其他家畜弓形体病抗体.     

猪瘟兔化弱毒苗在免疫猪体内动态分布研究

研究猪瘟兔化弱毒苗在免疫猪体内的动态分布,在注射猪瘟兔化弱毒苗后第1、7、14、21、28、35、63天采集免疫猪的脾、肾、肺、腹股沟淋巴结、扁桃体及血清,应用免疫组化、RT-PCR、猪瘟抗原、抗体检测试剂盒等方法,检测分析猪瘟病毒在猪体内的动态分布、存留时间及抗体水平。结果表明:应用免疫组化方法于免疫后第7~14天在脾脏、第7~21天在腹股沟淋巴结、第14~28天在肾脏组织分别检测到猪瘟病毒。在免疫后第7天检测到猪瘟病毒抗体,随后抗体水平持续上升至免疫后第63天;病毒抗原的分布与RT-PCR检测结果吻合。结论:猪瘟兔化弱毒苗在猪体内主要分布器官为脾、肾和腹股沟淋巴结,免疫后第7天脾和腹股沟淋巴结最早检测到猪瘟病毒,猪瘟病毒在肾停留时间可至免疫后第28天。实验过程中未在扁桃体、肺、外周血检测到猪瘟病毒。     

鸡毒支原体油乳剂灭活疫苗的研究

应用鸡毒支原体 (MG)F株、地方分离株SJ - 1制成油乳剂灭活疫苗 ,通过安全性、抗体产生时间、免疫效力和田间试验 ,证明该疫苗的安全性和免疫效力良好 ,注射常规剂量的 4倍 ,未见不良反应。接种后15天均可产生免疫力 ,30天后达高峰 ,免疫 6个月攻毒保护率为 94 %。不同地区的田间试验也取得满意效果     

溶藻弧菌疫苗对牙鲆免疫效果的研究

利用福尔马林灭活法制备了溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)疫苗,腹腔注射接种牙鲆(Paralichthys olivaceus),在以牙鲆血清为抗原制备兔抗鱼血清多克隆抗体的基础上,采用ELISA方法检测了接种疫苗后鱼血清中特异性抗体的变化;此外通过攻毒实验测定了疫苗对牙鲆的保护率。ELISA检测结果表明在接种疫苗后第7d抗体效价为1:64,在免疫后第7~8周达到最高抗体效价1:2048;攻毒实验结果显示受免鱼对溶藻弧菌的免疫保护率为73.3%,且溶藻弧菌疫苗对鳗弧菌(Vibrio anguillarium)、副溶血弧菌(Vibrio prarhaemolyticus)也具有一定的免疫保护性,其免疫保护率分别为56.25%、64.71%。