玉米种子蛋白质电泳鉴定品种的研究──醇溶蛋白和盐溶蛋白的比较

用十二烷基碘酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）对玉米种子醇溶蛋白和盐溶 蛋白分别用于区分不同品种的效果作了比较。种子醇溶蛋白采用了７０％乙醇和 ５５％异丙醇两种溶剂分别提取。结果表明，两种溶剂提取的醇溶蛋白ＳＤＳ－ＰＡＧＥ 带谱均较简单，品种间差异小，难以把各供试品种互相区分开来。而种子盐溶 蛋白则显示出丰富的带谱，品种间在谱带数目、带的分布与强弱等特点均可见 较明显的差异，据此可将各供试品种互相区分开来．杂交后代中，还可见到某 些“杂种带谱”。利用玉米种子盐溶蛋白ＳＤＳ－ＰＡＧＥ在玉米品种鉴定中显示了一 定的应用潜力。     

四川小麦主栽品种醇溶蛋白遗传差异分析

采用酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＡＰＡＧＥ） 对四川省近５０ 年来年推广面积６６６ 万ｈｍ２ 以上的４０ 个小麦主栽品种进行醇溶蛋白位点特异性检测,分析了不同基因型间醇溶蛋白的遗传差异。结果表明：４０ 个品种具有３８ 种醇溶蛋白带型,其中９ 个品种具有１ＢＬ／１ＲＳ易位标记位点Ｇｌｉ Ｂｌｌ;醇溶蛋白电泳分离出的４６ 条带中,４０ 条具有多态性,占８４８ ％ 。供试品种间遗传距离（ＧＤ）在０ ～０６７ 之间,平均值为０３３ ,遗传变异较大,特别是早期品种与近２０ 年育成品种间,以及１ＢＬ／１ＲＳ易位系品种与非１ＢＬ／１ＲＳ易位系品种间均具有较大的遗传距离。聚类分析表明：供试品种在遗传距离０３５ 水平上明显聚为４ 类,具有相同血缘的品种大多数聚在了同１ 类。分析认为,四川小麦品种醇溶蛋白变异丰富,存在广泛的遗传多样性     

蛋白质电泳指纹图谱对烟草品种鉴定的研究

采用水平切片淀粉凝胶电泳检测了七种同工酶的酶谱图式,从中筛选出酯酶（ＥＳＴ）同工酶进一步作聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）分析。ＥＳＴ的ＰＡＧＥ酶谱显示出较高的多态性,各品种之间差显著,多态性酶带点８０％。ＥＳＴ的ＰＡＧＥ酶谱可作为 草１０个品种鉴定的同工酶指纹图谱。在本试验条件下,得到的烟草８个品种种子水溶蛋白的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和等电聚焦ＰＡＧＥ（ＩＥＦ－ＰＡＧＥ）图谱分辨率高、重复性强,其多态性     

热导系玉米种子贮存蛋白的生物指纹图谱分析

利用聚丙稀酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对热导系玉米种子的可溶性蛋白进行分析，结果表 明，清蛋白、球蛋白、谷蛋白都显示出丰富的带谱。自交系间谱带数目、带的强弱与分布等特点均可 见较明显的差异，可将各供试自交系互相区分出来；醇溶蛋白谱带均较弱，自交系间差异小，难以把 各供试自交系互相区分出来。尽管种子的可溶蛋白质 PAGE 图谱都可作为玉米自交系鉴定的蛋 白质指纹图谱，相比之下，利用清蛋白 PAGE 图谱较为理想。     

同工酶PAGE凝胶电泳在大白菜品种鉴定中的应用研究

利用ＰＡＧＥ凝胶电泳对９个大白菜品种子叶期ＥＳＴ同工酶和ＰＯＤ同工酶进行了品种鉴定分析。结果表明,８０－７、山东４号和山东６号可利用ＥＳＴ同工酶酶谱加以区分,小杂５６、山东６号和山东７号可利用ＰＯＤ同工酶酶谱加以区分。单纯利用ＥＳＴ同工酶或ＰＯＤ同工酶不能将供试的９个品种完全鉴别出来。由于ＥＳＴ和ＰＯＤ２种同工酶酶谱综合多态性要比单一的一种同工酶酶谱丰富,将这２种同工酶结合起来,可供试的９个大白菜     

温光型两系杂交小麦醇溶蛋白的电泳分析

运用酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术（Ａ－ＰＡＧＥ）对两系杂交小麦不育系，恢复系及其杂交组合Ｆ１种子醇溶蛋白进行电泳分析。结果表明：（１）湿光型不育材料Ｃ４９Ｓ的电泳谱带与恢复系材料有明显差异，不育系之间谱带非常相似，（２）杂交Ｆ１谱带主要表现为互补型和偏母本型，互补型的优势较强，偏母本型的优势较弱，电泳分析结果与育种研究和田间资料相符。因此，种子蛋白电泳技术不仅可以鉴定亲缘关系，判断杂种真伪，而且可以     

小麦抗白粉病优质高产T1BL.1RS易位系的鉴定与分析

本文从创制的８０ 个新选系中鉴定出１２ 个抗白粉病品系,应用醇溶蛋白Ａ－ ＰＡＧＥ 检测发现其中９ 个为１ＢＬ／１ＲＳ易位系。麦谷蛋白亚基ＳＤＳ－ ＰＡＧＥ 分析表明,有３ 个含５ ＋ １０ 优质蛋白质亚基。综合农艺性状表现评定出９８ －１２３６ 和９８－ １２６６ 两个品系表现优异。进一步对籽粒主要品质性状检测表明,这两个品系均优于对照品种川麦２８ 号。     

小麦抗白粉病优势高产Ｔ１ＢＬ．１ＲＳ易位系的鉴定与分析

本文从创新的８０个新选系中鉴定出１２个抗白粉病品系,应用醇溶蛋白Ａ－ＰＡＧＥ检测发现其中９个为１ＢＬ／１ＲＳ易位系。麦谷蛋白亚基ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明,有３个含５＋１０优质蛋白质亚基。综合农艺性状麦现评定出生９８－１２３６和９８－１２６６两个品系表现优异。进一步对籽粒主要品质性状检测表明,这两个品系优于对照品种川麦２８号。     

小麦抗条锈病优势高产T1BL.1RS易位系鉴定与分析

从创制的８０个新选系中鉴定出３个抗条锈病品系,应用醇溶蛋白Ａ－ＰＡＧＥ检测发现其均为Ｔ１ＢＬ．１ＲＳ易位系。麦谷蛋白亚基ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表明,３个抗病易位系均含５＋１０及１或２＾＊优质蛋白质亚基。综合农艺性状表现评定认为９８－１２６６品系表现特别优异。其籽粒主要品质性状检测表明,该品系优于对照品种川麦２８号。     

棉花种子超氧物歧化酶同工酶的研究

棉花种子超氧物歧化酶粗提液经ＰＡＧＥ分离及ＮＢＴ染色，显示出７条ＳＯＤ同工酶谱带。研究发现棉花种子ＳＯＤ同工酶具有一定的热稳定性，且在变性剂ＳＤＳ作用下仍保持一定活性，但β－疏基乙醇和脲试剂能使之失活。经用氮仿－乙醇和ＫＣＮ处理，证实棉花种子ＳＯＤ均为Ｃｕ－Ｚｎ－ＳＯＤ。     

烟叶超氧物歧化酶的研究

从烟叶中提取的超氧物歧化酶（ＳＯＤ），经ＰＡＧＥ垂直板电泳后，用氮蓝四唑（ＮＢＴ）法活性染色，并经凝胶薄层扫描（λ＝５９５ｎｍ），结果显示粗酶液有６条同工酶谱带，经纯化后的酶只有一条谱带。此纯酶液置冰箱３６ｈ后，可获得长方形结晶。结晶酶液用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００柱层析（１．５ｃｍ×１００ｃｍ）和ＳＤＳ－和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得其分子量分别为２４８３０和２８９００。用等电聚焦电泳测得该酶等电点为６．８０。该酶在ｐＨ５～９范围内活性较稳定，在７５℃保温１５ｍｉｎ活性尚保留５４％。此酶对ＫＣＮ、氯仿－乙醇不敏感，但受到ＥＤＴＡ，Ｈ_２Ｏ_２的强烈抑制，表明烟叶中分离纯化得到的ＳＯＤ为酶分子中结合Ｆｅ的Ｆｅ－ＳＯＤ。     

水稻黄矮病毒结构蛋白的分离及其小鼠腹小抗体的制备

从人工接种感染黄矮病毒的水稻茎杆中提取得到了部分纯化的ＲＹＳＶ制品，病毒制品，病毒制品经Ｔｒｉｃｉｎｅ－ＳＤＳ－ＰＡＧＥ得到分子量分别为８４ｋＤ，６０ｋＤ，３１ｋＤ和２９．５ｋＤ的４条主要蛋白带和分子量为１７０ｋＤ和４３ｋＤ的两条次要蛋白带。根据弹状病毒结构蛋白命名法，按分子量大小依次命名为Ｌ，Ｇ，Ｎ，ＮＳ，Ｍ１和Ｍ２蛋白。从电泳凝胶上切下Ｇ和Ｎ蛋白带，制成抗原免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，制得Ｇ和Ｎ...     

电泳谱带法在作物品种纯度鉴定上的应用研究

在１９８９～１９９５年期间，以玉米、高粱、番茄、西瓜、黄瓜、辣椒、白菜、萝卜、瓠瓜、甜瓜等１０种作物为试材，研究了ＥＳＴ，ＰＯＤ，ＡＥＳ和ＡＤＨ４种同工酶的ＰＡＧＥ电泳和ＩＥＦ，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ，ＰＡＧＥ蛋白质电泳谱带法在品种纯度鉴定上的应用。除甜瓜外，在其它作物上都取得了突破性进展，并对电泳应用技术进行研究和改进，在玉米上完成了联合应用试验已开始在生产上试用。     

牛冠状病毒4H12/1D4单链基因片段在大肠杆菌中的表达

用ＥｃｏＲＩ酶切ＰＲ５Ｂ４质粒，采用“Ｖ”字形内槽电洗脱法回收约０．８０４Ｋｂ牛冠状病毒基因工程抗体４Ｈ１２／１Ｄ４单链基因片段，并将其插入载体质粒ＰＥＴ－１７ｂ的ＥｃｏＲＩ位点构成重组质粒ＰＥＴ－Ｄ４，将重组质粒转化ＤＨ５α感受态细胞，在ＩＰＴＧ的诱导下表达，细菌裂解物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳筛选，发现含ＰＥＴ－Ｄ４细菌经诱导新增一条约２８ＫＤα蛋白带，该蛋白带与设计基因工程抗体的大小相符，经光密度扫描，表达量约占菌体总蛋白的１４％     

异源2号和绵阳26号小麦在分子水平上的差异性

应用酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＡＰＡＧＥ）、基因组原位杂交和ＲＦＬＰ标记研究了异源２号和绵阳２６号在醇溶蛋白和ＤＮＡ水平上的差异性。ＡＰＡＧＥ分析表明,异源２号和绵阳２６号至少有９条醇溶蛋白差异带,且异源２号含有小麦背景中１ＲＳ的醇溶蛋白标记位点Ｇ１ｄ１Ｂ３。基因组原位杂交结果证实异源２号含有黑麦的１ＲＳ,而绵阳２６号则不含黑麦染色质,ＲＦＬＰ分析结果进一步表明,位于第１同源群的短臂ＲＦＬＰ探针均能     

"西南302"油菜(Brassica napus)种子贮藏蛋白的分离及部分性质

用油菜品种“西南３０２”（Ｂ．ｎａｐｕｓ）为材料,研究了油菜种子贮藏蛋白的分离及部分性质。用Ｎａ２ＨＰＯ４－ＮａＯＨ（ｐＨ１１．４）缓冲液抽提蛋白。４％￣２０％连续梯度ＳＤＳ－ＰＡＧＥ垂直板电泳表明,该贮藏蛋白组分十分复杂,其分子量范围是８,０００￣１９８,０００,带型不仅多,而且含量很不一致,其中低分子量蛋白质（８,０００￣３０,０００）含量占５０％￣６０％以上。凝胶等电聚焦电泳表明,等电点范围     

大鼠肝酷蛋白激酶Ⅱ的分离纯化和鉴定

依次采用ＤＥＡＥ－纤维素、肝素－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ，酷蛋白－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ和羟基磷灰石层析将大鼠酷蛋白激酶Ⅱ纯化了２４８６倍，回收率９．５％。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ表明ＣＫⅡ由三个不同亚基组成，分子量分别是３７，３５和２６ＫＤ。该激酶利用酷蛋白为底物，Ｃａ＾２＋，Ｃａ＾２＋－磷脂酰丝氨酸的ｃＡＭＰ对ＣＫⅡ的活性无影响，而肝素对该酶的活性有抑制作用。     

小麦淳溶蛋白电泳指纹鉴定和分析的微机辅助系统

“小科醇溶蛋白电泳指纹鉴定和分析的微机辅助系统”是配合Ａ－ＰＡＧＥ技术建立的,以Ｔｕｒｂｏ Ｃ为编程语言和开发环境,可在８０３８６及其以上微机运行。系统实现了大量小麦种质醇溶蛋白电泳指纹档案的微机管理和对小麦品种及其特征谱带准确、快速的搜寻、鉴定及遗传分析,亦适于小麦分类、演变和亲缘关系等方面的研究应用。介绍了系统的基本结构、主要功能、特点及应用实例。     

干旱对小麦幼芽蛋白质组分及等电点的影响

通过水平薄层变性聚丙烯酰胺弟前夕民聚集（ＩＥＦ）、十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）和双向电泳（ＥＦ×ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）研究表明，干旱引起小麦幼芽蛋白质组分及含量变化，主要在分子量为２０－４８ｋＤ、等电点（ｐＩ）为５．３４－５．６５，并且干旱诱导小麦幼芽产生４１．５ｋＤ蛋白亚基，ｐＩ蛋白亚基，ｐＩ为５．６５；分子量为３６．２和１５．８ｋＤ的两个蛋白亚基含量明显增加。     

辣椒种子人工老化前后PEG处理的生理生化变化

选用伏地尖、华大２号、华椒１号、早杂２号、短牛角、海花３号、７２８１等７个辣椒品种为材料，对辣椒种子老化前后经聚乙二醇（ＰＥＧ）处理的生理生化变化进行了研究，结果表明：用ＰＥＧ处理能有效地保持种子活力并改善老化种子性能，使种子内溶物蛋白质渗漏减少，超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性提高，膜脂过氧化作用的最终产物丙二醛（ＭＤＡ）含量降低，种子呼吸强度增高。这些指标均表明种子老化前进行ＰＥＧ处理效果比老化处