苏云金芽孢杆菌杀虫晶体蛋白研究及应用概述

作为应用最广最有效的细菌杀虫剂,苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)在形成芽孢时可产生具有杀虫活性的杀虫晶体蛋白(ICPs)。迄今为止,ICP已有近800种,对鳞翅目、双翅目、同翅目、膜翅目、鞘翅目、蜱螨目等害虫都具有特异性的毒杀作用。该文概述了ICP的结构、功能及基因分类,以及其基因工程研究及应用,为Bt杀虫蛋白的推广应用及其定向改造提供参考。     

表达苏云金杆菌δ－内毒素蛋白基因大肠杆菌对四种林业害虫作用的生物测定

四株表达苏云金杆菌δ－内毒素蛋白基因的大肠杆菌对林业主要害虫杨扇舟蛾Ｃｌｏｓｔｅｒａａｎａｃｈｏｒｅｔａ（Ｆａｂｒｉｃｉｕｓ），马尾松毛虫Ｄｅｎｄｒｏｌｉｍｕｓｐｕｎｃｔａｔｕｓ（Ｗａｌｋｅｒ），舞毒蛾Ｌｙｍａｎｔｒｉａｄｉｓｐａｒ（Ｌｉｎｎａｅｕｓ），杨尺蠖Ａｐｏｃｈｅｉｍａｃｉｎｅｒａｒｉｕｓ（Ｅｒｓｃｈｏｆｆ）幼虫作用进行了室内生物测定，结果表明：该四株菌对上述四种昆虫幼虫均表现出较高的杀虫活性，而且能显著抑制昆虫幼虫的生长发育。     

温度和增效剂对苏云金杆菌杀虫活性的影响

采用人工饲料法,将苏云金杆菌分别与糖精、碳酸钠、硫酸镁、氯化镁、硫酸锌等增效物质混合后,添加到人工饲料中,在3个温度梯度下分别测试了各增效剂不同稀释度对＆的杀虫效果的影响。结果表明,多数增效剂随温度和浓度的降低对＆的杀虫效果影响差异显著,在15℃条件下,增效剂糖精（0．02g／L）、碳酸钠（0．20g／L）、硫酸镁（0．10g／L）对Bt的杀虫活性比单用Bt显著提高,并且提高了速效性。     

高毒力苏云金杆菌株的筛选

为选育对目的害虫毒力高,生产性能稳定的菌株,收集了101个苏云金杆菌株,经初选、复筛和营养细胞酯酶分析,从中选出82038(galleriae 酯酶型)、83002(dendrolimus 酯酶型)、83016(galleriae 酯酶型)3株优良菌株。用3菌株与生产菌株7216—13对舞毒蛾、杨尺蠖、柳毒蛾和杨扇舟蛾进行毒力测定表明,除对杨扇舟蛾毒力较低外,对其它几种害虫均有80%以上的杀虫效果。     

苏芸金芽孢杆菌孢子囊超微结构的研究

用电子显微镜观察了分属于苏芸金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)23个 H-血清型的30个亚种和3株新分离菌株孢子囊超薄切片的超微结构。结果表明苏芸金杆菌30个亚种的芽孢和伴孢晶体在孢子囊中形成的部位、形状及数量有所不同。大部分亚种的伴孢晶体位于孢子囊的一端,以单个晶体存在于孢外膜之外,只有幕虫亚种(Subsp.finitimus)的伴孢晶体位于孢外膜之内。在孢子囊中晶体的形状分别为菱形、方形、圆形、不规则形。其数量大多数为一个。从不同森林土壤中分离到的87052、85020、85040三株菌,其中87052菌株伴孢晶体为圆形,与已知圆形伴孢晶体的亚种形态特征相似,其它两株菌在形态特征上与已知 30个亚种在孢子囊的超微结构上有着一定的差异。     

苏云金芽孢杆菌83016菌株的研究

通过对83016菌株生理生化特性、不同培养和发酵条件下制备物室内毒力测定方法比较及小试产品对松毛虫等5种森林害虫林间防治试验结果表明,该菌株属苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种;三种不同制备方法的室内生测比较,以光密度测定法较其它两种方法简便可靠,适用于进行大量菌株筛选;83016菌株发酵产物和小试产品对马尾松毛虫等害虫有较高的毒性。     

苏云金芽孢杆菌的细胞接合——质粒和染色体转移

<正> 关于通过细胞接合使苏云金芽抱杆菌的一些质粒进行转移的现象,首先是Gonzalez 等报道的,他们曾发现了一个高频率的质粒转移,特别是含有50 MDa 前毒素基因的质粒可以从苏云金芽孢杆菌Kurstaki 亚种HD_(73)转移到腊状芽孢杆菌(形成品体的HD_(73)的衍生物)或苏云金芽孢杆菌thuringiensis 亚种HD_(200)同时也发现了从Kurstaki 亚种菌株(HD_(263—1))