猪繁殖与呼吸综合征研究进展

猪繁殖与呼吸综合征是1987年发现的一种猪的接触性传染病。目前还没有有效的疫苗和治疗措施。2006年夏季以来,我国部分地区陆续发生猪高致病性PRRS疫情,其死亡率高并呈多发态势,为进一步了解该病,本文综述了PRRS病源分子生物学及其防制。     

猪繁殖与呼吸综合征研究进展

猪繁殖与呼吸综合征是1987年发现的一种猪的接触性传染病。目前还没有有效的疫苗和治疗措施。2006年夏季以来,我国部分地区陆续发生猪高致病性PRRS疫情,其死亡率高并呈多发态势,为进一步了解该病,本文综述了PRRS病源分子生物学及其防制。     

规模养猪场猪繁殖与呼吸综合征的防控

秋冬季节是疾病的多发季节,猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是目前对我国乃至世界养猪生产最大的原发性疾病,由猪生殖与呼吸综合征病毒引起,以成年猪生殖障碍、早产、流产,死产和产木乃伊胎及仔猪呼吸异常为特征。近几年,该病给我国养猪业带来了很大经济损失,笔者根据多年的工作经验,谈几点粗浅认识,希望对大家能有所启示。     

猪繁殖与呼吸综合征的致病机理及防控措施

分析了猪繁殖与呼吸综合征的致病机理,介绍了其在生猪生产中的主要危害,并总结了其防控措施,以期为猪繁殖与呼吸综合征的防控提供参考。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒对猪免疫力的影响研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)对全世界养猪业而言是一种致命的病毒性疾病。它是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种严重的临床疾病,并且保持终身隐性感染的能力。PRRS也使我国养猪业遭受了巨大的损失,近年来尤其是高致病蓝耳病毒的出现,已严重影响我国生猪养殖业的健康发展。对猪繁殖与呼吸综合征的免疫作用机制及防制措施进行了综述,旨在为其今后的防制提供新的思路与方案。     

猪繁殖与呼吸综合征的防制措施

猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的一种猪繁殖和呼吸障碍的传染性疾病。母猪表现为流产、早产、死产,产木乃伊胎及弱仔等。仔猪和育肥猪则表现为呼吸困难。仔猪发病率和死亡率很高,对养猪业构成了重大危害。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒分子生物学研究进展

猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的猪的一种新传染病，分布广泛且对养猪业造成巨大损失．就猪繁殖与呼吸综合征病毒基因组结构、基因组编码蛋白、病毒结构蛋白的抗原性等方面的研究进展进行综述，为相关研究提供重要依据．     

猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究进展

从遗传变异、检测以及宿主免疫3个方面,对近年来在猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)方面的研究进行简要综述。     

猪繁殖与呼吸综合征在养殖中对母猪的危害与控制

猪繁殖与呼吸综合征疫病传播迅速,分布很广,孕母猪流产率及哺乳仔猪死亡率极高,对我国养猪业造成恶劣的影响,本研究将对其病原学特点、临床症状及其危害等进行分析,同时提出该病的控制方法,为猪繁殖与呼吸综合征疫病在我国的传播和防控提供理论支持。     

新疆南疆猪繁殖与呼吸综合征病毒分子流行病学研究

【目的】确定新疆南疆猪养殖场是否存在PRRSV感染,以及感染的PRRSV毒株类型及基因特点,从而针对性的有效防制PRRS。【方法】设计7对引物,对疑似PRRS发病猪场组织样品进行RT-PCR、克隆、测序和序列分析。【结果】47例样品,35例PRRSV阳性,阳性率高达74.47%（35/47）;35株均为美洲型毒株,其中有10株属于高致病性PRRSV,占总检测样品的21.28%（10/47）,占阳性样品的28.57%（10/35）;综合分析本研究采集样品猪养殖场不存在欧洲型毒株。【结论】新疆南疆存在美洲型PRRSV感染,且存在高致病性毒株。     

4株高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒的分离与鉴定

2007年7月从江苏某些猪场采集的具有明显高热症状的病料组织中分离出4株病毒,经对病毒的TCID50测定、血清学试验、病毒基因鉴定,确认这4株为美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒.病毒基因序列分析发现:4株病毒的NSP2基因均存在2处共30个氨基酸缺失,缺失氨基酸分别位于481位、532～560位.氨基酸序列同源性分析可见:分离株与VR2332株、MLV株的同源性很低,在60.3%至68.6%之间;与国内疫苗株CH-1a的同源性为83.1%～83.7%;与国内分离的变异株JXAI株、HUN4株、HB-1(sh)/2002株同源性很高,为91.2%～98.5%;同时4株分离株之间的同源性很高,为99.3%～100.0%.系统发育树表明:分离的4个毒株与JXAI毒株和HUN4株有较近的亲缘关系,与其他株的亲缘关系较远.动物回归试验表明,4株病毒均可以引起仔猪明显的临床高热症状.     

猪繁殖与呼吸综合征病毒分子生物学及免疫学的研究进展

猪繁殖与呼吸综合征病毒是严重危害世界养猪业的病原,其分子生物学及感染机制的研究,对猪繁殖与呼吸综合征的预防和控制非常重要。笔者对猪繁殖与呼吸综合征病毒的病原学特性、分子生物学特征、获得性免疫和免疫调节与逃避机制等方面进行了综述,以期为该病的深入研究提供参考。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒新疆株ORF3基因的克隆与测序

根据GenBank中已发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF3基因序列,设计合成了1对特异性引物,扩增出病毒ORF3结构基因。将该基因克隆到pMD18-T,构建了重组质粒pMD18-ORF3,并对筛选出的阳性质粒进行测序。应用序列分析软件对测序结果分析可知,克隆得到的ORF3基因组全长812 bp。通过DNAman对所测ORF3基因核苷酸序列与GenBank中登录的国内外PRRSV毒株核苷酸序列进行同源性比较。序列分析结果显示,XJPRRSV1/03与参考毒株VR2332、LV、CH-1a的核苷酸同源性分别为95.8%,89.8%,92.7%,氨基酸同源性分别为96.6%,88.5%,93.2%。XJPRRSV1/03与VR2332同源性最高。     

Influence of Hypericum perforatum Extract on Piglet Infected with Porcine Respiratory and Reproductive Syndrome Virus

To study the influence of Hypericum perforatum extract （HPE） on piglets infected with porcine respiratory and reproductive syndrome virus （PRRSV）, enzyme-labeled immunosorbent assay （ELISA） and cytopathic effect （CPE） were used to determine in vitro whether HPE could induce swine pulmonary alveolar macrophages （PAMs） to secrete IFN-γ, and whether PRRSV titers in PAMs were affected by the levels of HPE-induced IFN-γ. HPE （200 mg·kg-1） was administrated by oral gavage to piglets infected with the PRRSV in vivo to observe whether HPE affected the viremia, lung viral titers, and weight gain of piglets infected with PRRSV. The results showed that HPE was capable of inducing PAMs to produce IFN-γ in a dose dependent manner and HPE pretreatment was capable of significantly reducing PRRSV viral titers in PAMs （P〈 0.01）. Administration of HPE to the PRRSV-infected animals significantly （P〈 0.05） reduced viremia over time as compared with the PRRSV-infected animals. But there was not significant decrease in lung viral titers at day 21 post-infection between the HPE- treated animals and the PRRSV-infected control piglets. There were no significant differences in weight gain over time among the HPE-treatment animals, the normal control, and the HPE control animals. The PRRSV-infected animals caused significant （P〈 0.01） growth retardation as compared with the HPE controls and the normal piglets. It suggested that HPE might be an effective novel therapeutic approach to diminish the PRRSV-induced disease in swine.     

用反转录-聚合酶链反应检测猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究

根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲型毒株的基因序列设计了一对特异性引物P1/P2,扩增的片段为550bp,根据欧洲型毒株设计了一对特异性检测引物P3/P4,扩增的片段为433bp,建立PRRSV的RT-PCR的检测与血清型鉴别方法。特异性试验表明,这2对引物均不能扩增其他常见的繁殖障碍相关病毒的RNA或DNA。敏感性试验表明,这2对引物可以分别到检测10-5TCID50和10-4TCID50的病毒含量。利用该方法对重庆、四川某些猪场中临床上疑似为PRRS的20份送检组织样品进行检测,只有引物P1/P2能扩增出与预期大小相符的RT-PCR产物;其中有15份样品呈PRRSV阳性结果,阳性率为75%,说明送检的样品感染的PRRSV为美洲型。试验结果表明该方法快速检测病料组织中PRRSV是可行的,是临床上对PRRS进行快速诊断和分子流行病学调查的实用方法。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒YA株ORF5基因的克隆与序列分析

以猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）YA株为材料，采用RT－PCR扩增其ORF5基因全长cDNA并进行序列测定和比较分析。结果YA株ORF5基因cDNA编码区长603bp，可编码200个氨基酸残基。与欧洲型代表株LV株、美洲型代表株VR－2332株在氨基酸水平上的同尖性分别为58％和90％，与国内首株分离株(CH－1a)的同源性高达95％，推测YA株属于美洲型。根据YA株ORF5基因编码的氨基酸序列，与具有代表性的12株美洲型毒株和2株欧洲型毒株绘制进化系统树，结果也显示YA株与美洲型分离毒株的遗传关系较近，而与欧洲毒株的遗传关系较远。进一步采用序列分析软件对推导的氨基酸进行比较分析，发现YA株ORF5编码的E蛋白存在5个潜在的N－糖基化位点，6个抗原位点，其糖基化位点的数目及抗原位点的分布与其它美洲毒株均存在一定程度的差异，但3个最主要的抗原表位相对保守。     

Characterization of Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus Deletion Mutant

The genome of the isolate of porcine reproductive and respiratory syndrome virus （PRRSV） from China, designated HPBEDV, was sequenced and analyzed. The size of the genome of HPBEDV was 15 334 nucleotides （nt）. Comparative analysis of HPBEDV with the genomic sequences of the domestic and other isolates （JXA 1, HUN4, CH-1 a, B J-4, VR2332, and LV） revealed that HPBEDV shared 98.4, 98.0, 89.0, 88.7, and 88.6% identity with the American strain JXA1, HUN4, CH- 1a, BJ-4, and VR2332, respectively, but only 54.7% identity with the European reference strain Lelystad virus. The NSP2 gene had 2 850 nt and encoded 950 amino acids （aa）, with two discontiguous deletions of 1 aa and 29 aa at positions 482 and 534-562, respectively, relative to VR-2332. Also, phylogenetic analysis with the published PRRSV genomic sequences indicated that the newly emerging isolate form a clade with the VR-2332 isolates. Therefore, HPBEDV was a novel strain with deletions in NSP2 gene.     

猪呼吸与繁殖综合症病毒RT-LAMP检测方法的建立

【目的】建立一种适用于猪繁殖与呼吸综合症病毒的快速、灵敏、特异性检测方法,即一步反转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP)。【方法】设计3对针对PRRSVN基因的8个位点的特异性引物,用优化后的反应体系检测RT-LAMP的特异性、灵敏性并对临床样本进行检测。【结果】RT-LAMP检测方法从核酸抽提到检测仅需要70min,肉眼即可观察检测结果,该方法具有良好的特异性,灵敏度是RT-PCR的10000倍,在对50份猪血液样本RNA的检测中,该方法与传统的RT-PCR检测方法具有很好的统一性(κ=0.83)。【结论】RT-LAMP检测方法可快速、灵敏、特异的检测PRRSV,并适用基层和现场检测。