间接血凝试验检验牛结核病初步研究

<正> 本试验的原理是用结核菌素作抗原,用绵羊红细胞作载体,将抗原吸附到红细胞表面,来测定血液中的抗体。动物感染结核分枝杆菌后3至4周在血液中可以测出抗结核菌的抗体。本试验采用红细胞直接吸附抗原和红细胞鞣化后吸附抗原两种方法,通过初步试验表明,检出率在80%以上,与国外资料相近。     

利用不同源红细胞检测鹅禽流感抗体效价的报告

从某一已免疫禽流感的种鹅场采取30份血样，分别以健康鸡红细胞悬液和健康皖西白鹅红细胞悬液为指示剂，对30份血样进行禽流感血凝和血凝抑制试验。结果：用鸡红细胞悬液作指示剂进行血凝试验，测出抗原4HAU为1：32；用鹅红细胞悬液作指示剂进行血凝试验，测出抗原4HAU为1：8以1：32倍数稀释抗原，分别用鸡红细胞和鹅红细胞悬液作指示剂进行血凝抑制试验，测出30份鹅血清禽流感H5免疫抗体效价的平均值分别为2^5.8和2^3.9；以1：8倍数稀释抗原，用鹅红细胞悬液作指示剂进行血凝抑制试验，测出30份鹅血清禽流感免疫抗体的平均效价为2^5.1。     

正向间接血凝试验在检测口蹄疫抗体中的应用

正向间接血凝试验是用已知血凝抗原检测未知血清中抗体的试验。抗原与其对应的抗体相遇，在一定条件下形成抗原抗体复合物，但这种复合物的分子团很小，肉眼看不见。将抗原吸附在经过特殊处理的红细胞表面，只需少餐抗原就能大大提高抗原和抗体的反应灵敏性，这种经过口蹄疫纯化抗原致敏的红细胞与口蹄疫抗体相遇，红细胞便出现清晰可见的凝集现象。     

牛双芽巴贝斯虫病补体结合试验研究

用单一株双芽巴贝斯虫高染虫率红细胞,经有控制的低渗溶解获得完整裂殖体,超声裂解和高速离心获得补体结合试验抗原。本研究提供了用这种抗原作小量法补体结合试验的程序。检查人工感染12天的牛血清,补反抗体已达到1:10的效价。研究初步证明了这种方法的特异性、敏感性和实用性。     

快速卡片凝集试验的改进及应用研究

用0.1M、pH3.0甘氨酸缓冲盐水去除体内培养染虫红细胞表面粘着抗体,用不同途径确保染虫红细胞不被白细胞污染,并严格控制超声处理红细胞的过程,使快速卡片凝集抗原达到较完美的质量,并大幅度减少抗原在制备过程中的损失。进一步优化试验条件,保证了这种试验的特异,敏感,快速和准确。     

鸡新城疫稳定抗原必须低温保存

我县已经推广了鸡新城疫的免疫监测技术,开始我们把鸡新城疫稳定抗原(以下简称抗原)保存于普通冰箱,由于电源不正常,抗原常由于温度过高很快失效。为此,我们试用低温冰箱保存,并在保存应用中作了一点试验,汇报如下: 抗原购于河南农业大学兽医系微生物教研室,当时测定血凝效价为5120,于-25℃低温冰箱一次性冷冻保存。试验用磷酸缓冲盐水及0.5％红细胞悬液,均按常规方法制备。     

用与聚苯乙烯胶乳微珠结合的单克隆抗体快速和定量检测抗传染性囊病病毒抗体

最近作者研制了一种新的竞争测定方法，用与聚苯乙烯胶乳微珠结合的单克隆抗体（MAb）和标化数量的IBDV抗原作胶乳凝胶抑制（LI）试验，检测IBDV抗体。用Balb／C／J‘鼠生产MAb，然后将其与聚苯乙烯胶乳微珠结合，于4”C下保存备用。用IBDV分离物感染3天的5周龄鸡法氏囊制备LI试验用的IBDV抗原。LI试验的原理与血凝抑制（HI）试验相似。LI试验中结合MAb的聚苯乙烯胶乳微珠相当于HI试验中的红细胞。使用标化数量的IBDV抗原。测定血清中LI滴度时，将用PBS稀释的血清样品与相同容量的标化数量IBDV抗原混合，取0．01ml混合…     

牛附红细胞体病双抗体夹心ELISA诊断方法的建立

用过碘酸钠改良法制备酶标抗体,建立了从血液中检测奶牛温氏附红细胞体抗原的双抗体夹心ELISA。试验结果表明:抗体最适包被量为156μg/mL;酶标抗体最适工作浓度为1∶400;抗原及酶标抗体的作用温度和时间分别为37℃、1 h;封闭液为5%犊牛血清;底物显色时间为15 min;对温氏附红细胞体抗原的最低检出量为6.64μg/mL;全血及带有附红细胞体的红细胞与纯化抗体反应的最大稀释倍数分别为1∶160和1∶40,可按照此浓度检测血液中的附红细胞体抗原。对该方法进行特异性阻断试验、交叉性试验和重复性试验,结果表明此法是一种特异、灵敏、快速的诊断方法,并适合作群体检测。     

犬DEA1.1血型抗原保存的研究

本试验采用甘油化冻存红细胞及醛化固定红细胞的方法探索适合犬DEA1.1血型抗原保存方法,用3%、6%、10%、20%、30%和40%(w/v)浓度的甘油溶液保存犬DEA1.1血型红细胞,分快速冻存、程序降温两组处理,并对甘油化红细胞进行溶血情况、回收率、物理性状、保存期及抗原效价的测定;用0.25%、0.5%戊二醛,1.5%、3%甲醛和0.5%、1%多聚甲醛分别固定犬DEA1.1血型红细胞,检测犬红细胞醛化稳定性,以及醛化红细胞与新鲜红细胞DEA1.1血型抗原效价符合率。结果显示,30%浓度甘油程序降温组去甘油化后红细胞溶血率、细胞破损率最低,回收率最高且物理性状新鲜红细胞相似,抗原性与新鲜红细胞符合率可达93%,保存期可达12个月;用戊二醛醛化固定120 d的红细胞稳定性及犬DEA1.1抗原的敏感性不变,抗原滴度与新鲜红细胞的符合率可达到100%。表明30%浓度甘油的程序降温冻存与0.25%～0.5%戊二醛醛化固定都能较好保存犬DEA1.1抗原性。     

犊牛腹泻大肠杆菌二种新纤毛抗原菌株的分析鉴定

本报告用因子血清玻板凝集反应首次从国内分离的54株犊牛腹泻大肠杆菌中检出5株新表面抗原菌株,并用电子显微镜技术证实这种表面抗原为纤毛抗原。用玻板凝集反应、免疫扩散和免疫电源试验及电子显微镜技术对菌株进行分析鉴定的结果表明:5个菌株产生二种纤毛形态相同,但抗原性完全相别的纤毛抗原。其中2个菌株产生242菌株型纤毛抗原,暂标记为F242纤毛抗原;3个菌株产生293菌株型纤毛抗原,暂标记为F293纤毛抗原。二种新纤毛抗原菌株产耐热肠毒素(ST)性和部分动物红细胞的甘露糖抗性血凝特性测定表明:3株F293抗原菌产生ST,对豚鼠和兔红细胞具有甘露糖抗性血凝特性,而对绵羊红细胞不具有该特性;2株F242抗原菌对不产生ST,对豚鼠、兔和绵羊红细胞均具有甘露糖抗性血凝特性。     

马动脉炎病毒血凝抑制试验研究及其应用

用马动脉炎病毒（EAV）免疫SPF豚鼠，4周后采血做血凝抑制试验（HI），其抗血清可以抑制血凝抗原对小鼠红细胞的凝集反应，抗原和抗血清在4℃感作24h后可以检测到最高的HI抗体效价，同时结果显示HI抗体与中和抗体产物呈正相关。对561份来自新西兰、吉尔吉斯、沙特阿拉伯及内蒙古、新疆的马血清用HI试验和微量血清中和试验（NT）进行EAV抗体检测，HI和NT阳性符合率为94．7％，血凝抑制抗体与中和抗体效价呈显著的正相关。     

2种不同红细胞悬液对鸽血清抗体监测的影响

本试验分别利用鸽红细胞悬液和鸡红细胞悬液进行血凝和血凝抑制试验,检测鸽血清中的禽流感H5抗体和新城疫抗体水平,比较两者检测结果的差异。结果表明,在血凝试验中,对于无论是禽流感抗原还是新城疫抗原,鸽红细胞检测的血凝价均小于鸡红细胞检测的结果。在血凝抑制试验中,鸽红细胞检测鸽血清中的抗体水平大于鸡红细胞检测。     

犊牛腹泻大肠艾希氏菌菌株的鉴定

本文采用玻片凝集反应、酶联免疫吸附测定、琼脂扩散试验对北京农业大学兽医学院分离自犊牛腹泻的3株大肠杆菌进行了鉴定。结果表明:3株均产生F41抗原,其中两株同时还产生K99抗原。用豚鼠、马、绵羊红细胞做甘露糖抗性血凝试验显示,3个菌株均具有F41抗原的血凝特性。     

血凝性脑脊髓炎病毒血凝抑制试验方法的研究

为检测某猪场的猪感染血凝性脑脊髓炎病毒的情况,用250 mL/L 的鸡红细胞和200 g/L的高岭土去除非特异性物质,使用4单位抗原及5 mL/L鸡红细胞做HI 试验,发现这些条件较适宜。用此法对其他5 种猪传染病抗血清进行检查,发现均不产生非特异性血清学反应。另外,本试验用滤纸吸附血清与分离血清做HI比较试验,其HI价差异不显著,从而为以后进行血清学调查提供了一种便利的方法。用分离的HEV与日本HEV 67N毒株抗原进行比较,两者的HI价一致。     

微量血凝和血凝抑制试验常见问题探究

在疫苗生产中红细胞凝集试验(HA)是主要检测抗原血凝价是否符合要求的诊断方法,红细胞凝集抑制试验(HI)作为一项抗体监测技术,已在大中型养禽企业、兽医门诊和实验室工作中广泛应用。但是由于实验用材料不标准、操作不规范等因素,影响到试验结果的准确性,     

“O”型口蹄疫正向间接血凝试验的操作体会

O型口蹄疫正向间接血凝试验是一种微量的体外免疫反应,主要利于抗原、抗体在一定条件的特异性反应形成抗原-抗体复合物,由于该复合物微小,所以采取先将抗原与红细胞结合,再让其与特异性抗体反应,使带有抗原的红细胞出现凝集现象,从而利用凝集现象进行免疫效果的判断。论述了O型口蹄疫正向间接血凝试验的操作体会。     

间接血凝试验检测鸭肝炎病毒抗体的研究

粗提DHV经Sephadex G200柱层折纯化后作为致敏用抗原,戊二醛法固定绵羊红细胞、BDB法致敏抗原红血球,建立了检测DHV抗体的间接血凝试验,其最佳致敏条件为:50%醛化红血球0.1ml、BDB2ml、DHV抗原0.5mg、37℃15min。本试验还对不同鸭血清的IHA抗体及免疫雏鸭的抗体水平等进行了检测,经与中和试验比较,阳性结果符合率为84.6％。     

细胞壁抗原用于布氏杆菌病诊断试验的研究

用培养的布氏杆菌菌体，通过超声波裂解、反复离心制备出布氏杆菌细胞壁抗原。将细胞壁抗原作1：128稀释，用作牛种布氏杆菌酶联免疫吸附试验（ELISA)的抗原；将布氏杆菌细胞壁抗原作1：32稀释，用作平板凝集试验抗原；把细胞壁抗原作1：16稀释用作试管凝集试验抗原，分别建立了牛布氏杆菌ELISA试验、平板凝集试验和试管凝集试验。用这3种方法，检测已知200份平板凝集试验阴性血清，5份平板凝集试验阳性血清。结果5份阳性血清在平板凝集试验、试管凝集试验和ELISA试验中均为阳性；200份阴性血清在平板凝集试验和试管凝集试验中均为阴性，在ELISA试验中有1份为阳性?试验证明，细胞壁抗原，既能用于传统的平板凝集试验和试管凝集试验，又能用于ELISA试验。     

硒和维生素E对于鸡球虫病免疫力发生的影响

已发现硒和维生素 E(V_E)对宿主防卫系统的发育和维持起着重要作用。迄今关于日粮中添加硒和 V_E 增强免疫应答的报道,多数用绵羊红细胞作抗原。本研究     

犬的血型与输血疗法

1 犬的血型 通过直接或间接凝集反应以及溶血反应,人们逐渐认识了犬的各种红细胞抗原.到目前为止,已报道的犬血型有红细胞抗原(DEA)1.1(A1)、红细胞抗原1.2(A2)、红细胞抗原3(B)、红细胞抗原4(C)、红细胞抗原5(D)、红细胞抗原6(F)、红细胞抗原7(Fr)和红细胞抗原8(He).