茶多酚对猪精液常温保存效果的影响

【目的】研究茶多酚(TPP)对猪精液常温保存效果的影响。【方法】手握法采集20月龄健康杜洛克种公猪精液,在基础稀释液中添加不同质量浓度的TPP(0(CK),0.01,0.02,0.04,0.08,0.16g/L)作为稀释液进行常温(17℃)保存,每隔24h检查精子活率、质膜完整率和顶体完整率,分别在精液保存0,2,4,6d时检测精液中的细菌含量,并在3d和6d时检测精液中的丙二醛含量(MDA)和总抗氧化(T-AOC)活性。【结果】添加0.02,0.04,0.08g/L TPP可明显提高猪精子活率、质膜完整率、顶体完整率和T-AOC活性,降低精液的MDA含量和细菌含量。且以0.04g/L TPP效果最佳,精液有效保存时间为6d。6d时0.04g/L TPP组猪精子活率、质膜完整率、顶体完整率、丙二醛(MDA)含量、总抗氧化(T-AOC)活性和细菌含量分别为60.02%,46.40%,75.25%,2.39nmol/L,2.31U/mL和2.19×106 CFU/mL。【结论】茶多酚能有效提高猪精液常温保存效果,最适添加量为0.04g/L。     

猪精液冷冻与常温保存技术的研究

为研究冷冻保存和常温((17±0.5)℃)保存后猪精子活率、活力和顶体完整率,比较了猪精液冷冻稀释液中2种甘油含量细管法的快速冷冻效果,以及不同解冻温度对冷冻精液的影响,采用细胞计数法、FDA-PI双重染色法与Giemsa染色方法检测精子的活率、活力和顶体完整率。结果显示:3%(体积分数,下同)甘油冷冻解冻后精液的活率、活力(38.54%、52.24%)显著(P<0.05)高于2%甘油组(15.63%、28.22%),但3%甘油组顶体完整率(11.55%)显著(P<0.05)低于2%甘油组(21.71%)。38℃水浴解冻后的精子在39℃培养箱中4 h内活率高于0.3,而50℃水浴解冻后1 h后的活率低于0.3。精液稀释液Anderohep和BTS在常温((17±0.5)℃)保存新鲜猪精子的活率与顶体完整率上效果相似,保存3 d内精子活率达0.6以上,保存6 d内精子活率为0.3以上。结果表明,使用3%甘油冷冻保存及2种常温保存稀释液均可以较好地保存精子。     

猪精液稀释液常温保存研究

选取3头健康、体况良好、24～36月龄的大约克夏公猪,随机分为3组,研究了3种不同的稀释液在常温下对猪精液保存效果的影响。试验结果表明:Ⅰ稀释液保存效果好,稳定性强,不需消毒,取用方便,避免了基层条件不足、操作不方便的缺点,适宜推广。     

牛磺酸与抗生素复合剂对猪精液常温保存效果的影响

牛磺酸(Tau)具有良好的抗氧化性,为研究Tau与抗生素联合使用对猪精液常温保存效果的影响,以不含抗生素Modena稀释液为对照基础液设计3组试验,设Modena稀释液+庆大霉素(2×10~5 IU)+复方新诺明(2.5×10~4 IU)为处理1,Modena基础液上分别添加0.5、1、5和10mmol/L的Tau为处理2,处理1配伍处理2则为处理3,每24h检测精子活率、顶体完整率、丙二醛(MDA)浓度以及总抗氧化能力(TAOC),分析Tau与抗生素复合剂对猪精液常温保存效果的影响。结果表明,处理3效果最好,处理2次之,处理1最差,各处理间差异显著,当处理3中Tau的添加量为5mmol/L时,猪精液保存5d后,精子活率为64.11%,顶体完整率为72.10%,T-AOC活性和MDA浓度分别为4.76U/mL和1.42nmol/mL。因此,Tau与抗生素复合剂可以提高猪精液的常温保存效果,最适添加浓度为5mmol/L。     

牛血清白蛋白对猪精液常温保存效果的影响

在猪人工授精技术中,良好的稀释液是提高精子活率的关键因素之一。为了研究牛血清白蛋白（BSA）对猪精液常温保存的影响,在基础液Modena中分别添加1、2、3、4、5和6 g/L 的BSA,检测精子活率、质膜完整率、顶体完整率以及总抗氧化能力（T AOC）和丙二醛（MDA）浓度,分析BSA对猪精液常温保存效果的影响。结果表明,Modena中添加3～5 g/L的BSA能显著延长猪精子有效保存时间、提高精子活率和质膜完整率、降低MDA的浓度（P<0.05）,但对顶体完整率和T AOC影响不大（P>0.05）,其中添加4 g/L的BSA效果最好,有效保存时间为7.5 d,经过7 d保存后精子活率、质膜完整率、顶体完整率分别为54%、49%和78%,T AOC和MDA的浓度分别为1.03 U/mL和17.51 μmol/L。研究结果说明,Modena中添加BSA能够提高常温保存精子的品质,其适宜添加量为4 g/L。     

猪常温精液生产应注意的关键环节

猪人工授精工作中,用于输精的精液品质直接关系与配母猪受胎率,精液生产技术工作必须严谨细致,笔者根据建平县种猪精液供应中心的经验,浅谈猪常温精液生产过程应注意的关键环节,供同行参考。1种公猪的饲养管理与利用1.1饲养管理养好种公猪是取得优质原精液的前提,通过科学的饲养管理,使种公猪保持不肥不瘦、精力充沛、性欲旺盛的健康种用体况。必须使用专门的公猪料实行限制饲养,每天喂料量2.5~3.0kg,分2~3次喂给,采精任务重时每天加喂1~2枚生鸡蛋。     

不同中效稀释粉对猪精液常温保存效果的比较

为对比不同中效稀释粉对猪精液常温保存效果的影响,试验选取业内知名度较高的9种中效稀释粉,其中国内3种和国外6种,分别编号为A、B、C、D、E、F、G、H和I,用12头杜洛克公猪精液进行了常温保存试验;对活力有效期内精液的pH值、活力、有效保存时长、畸形率以及顶体和质膜完整率的变化情况进行统计分析。结果显示:稀释粉E的活力在保存3 d后显著高于稀释粉C、D、F、G(P<0.05);稀释粉E、I的有效保存时长最长,达10.91 d和10.33 d,显著高于另外6种(P<0.05);稀释粉D、E、G、H稀释的精液畸形率较低,其中稀释粉D、E显著低于另外4种(P<0.05);稀释粉A稀释的精液自第2天后精子顶体完整率一直最高,显著高于稀释粉C、D、F(P<0.05);稀释粉E、H的质膜完整率较高,其中稀释粉H显著高于稀释粉D、F(P<0.05)。综上,9种中效稀释粉常温保存的猪精液质量达国标和产品标准的合格率均为88.89%,其中稀释粉E、H、I效果最好;稀释粉对精液质量影响的评定宜囊括多项指标进行综合考量。     

猪人工授精供精站标准化管理的要点

猪人工授精供精站的管理工作直接影响了猪精液的质量和人工授精的受胎率,现将我们的基本做法总结如下,供同行和从业者参考。     

猪精液冷冻保存试验效果初报

六种常温保存液对猪精液进行预处理后,再利用三种冷冻液进行冷冻保存试验,研究常温保存液和冷冻液对猪精液冷冻保存的影响及它们之间的配合效应,以冷冻-解冻后精子活力作为评定标准。结果表明:六种常温保存液对冻后精子的影响存在显著差异(P=0.003);三种冷冻保护液对冻后精子活力的影响无明显差异(P=0.585),但与常温保存液之间表现出明显的配合效应(P=0.0001),可能与常温保存液和冷冻液的成分及它们之间的相互关系有关。试验说明所选用的三种冷冻基础液对精子活力的影响不大,但与常温保存液配合后却能表现出很强的影响力;就单独分析两种因素对精子活力影响而言,常温保存液的预处理占主导地位。     

镇沅县猪供精站存在的问题及对策

介绍了镇沅县猪供精站现状,指出了猪供精站目前存在的问题,并提出了对策,以期为猪供精站的发展完善提供参考。     

猪精液保存与辅精技术

人工授精技术涉及调教采精．精液保存、正确的输精3个重要技术环节．“人工采精调教一法”见《农技服务》1993年8期。现就精液的保存与输精方法介绍如下．供参考。     

咖啡酸苯乙酯通过AMPK/FOXO3a信号通路缓解猪精液常温保存氧化应激的作用机制

【目的】探究咖啡酸苯乙酯（caffeic acid phenethyl ester,CAPE）通过AMPK/FOXO3a信号通路缓解氧化应激对猪精液的影响及其分子机制。【方法】选取8头成年（1—2岁）、健康状况良好长白种公猪进行鲜精采集,将质检合格的样品混池待用。试验设计如下：首先,在常温基础稀释液中分别添加0、0.02、0.04、0.06、0.08和0.10 g·L^-1浓度的CAPE,将精液样品与各个浓度组依次混合后放置室温平衡,随即转入17 ℃电子恒温冰箱进行常温保存。全自动精子分析仪（CASA）测定1—5 d精子运动学参数（总活率与渐进性活力）,筛选出最佳适宜浓度为0.06 g·L^-1。其次,将0.06 g·L^-1 CAPE与400 μmol·L^-1的H₂O₂建立氧化胁迫模型,在第1、3、5天分别采用CASA测定精子总活率与渐进性活力,荧光探针技术评估质膜完整性与顶体完整性,抗氧化试剂盒检测过氧化氢酶（catalase,CAT）与超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）活性,在第5 天利用实时荧光定量 PCR技术测定AMPK/FOXO3a信号通路下游靶向基因（AMPK、FOXO3a、SOD1、SOD2、CAT）及凋亡基因BAX的mRNA表达水平,蛋白免疫印记技术测定AMPK、p-AMPK蛋白表达。【结果】（1）浓度筛选试验中,0.06 g·L^-1的CAPE在保存第3 天显著提高精子的总活率并维持至第5天（P<0.05）,不仅如此,精子的渐进性活力在第1 天显著高于其他处理组（P<0.05）。（2）氧化胁迫试验中,H₂O₂处理组的精子质膜完整性、顶体完整性、总活率、渐进性活力、SOD与CAT活性在保存的第5天均极限显著低于空白组与CAPE+H₂O₂混合组（P<0.001）,而空白组与CAPE+H₂O₂混合组的总活率、顶体完整性、CAT与SOD活性不存在显著差异（P>0.05）。与CAPE+H₂O₂混合组相比,H₂O₂处理组AMPK、FOXO3a、SOD1、SOD2、CAT的mRNA表达水平显著降低（P<0.05）,BAX的表达水平显著升高（P<0.05）,而空白组与CAPE+H₂O₂混合组的AMPK、SOD1、CAT与BAX不存在显著差异（P>0.05）。在蛋白表达水平中,CAPE+H₂O₂混合组与H₂O₂组相比,AMPK、p-AMPK 与p-AMPK/AMPK比率显著提升（P <0.05）。【结论】在常温基础稀释液中添加0.06 g·L^-1CAPE可通过促进磷酸化AMPK的表达,诱导AMPK/FOXO3a信号下游抗氧化分子的转录,继而缓解H₂O₂介导的氧化危害对精液品质产生的影响,延长精液的保存时间,但CAPE保护精子氧化损伤更为深入的分子机制仍需作进一步探究。     

猪精液冷冻保存研究进展

总结了国内外猪冷冻精液的研究成果,对冷冻保存机理进行了简要阐述,并从稀释液和冷冻保护剂、冷冻前处理、冷冻剂型、冷冻速率、解冻等方面阐述了影响猪精液冷冻的因素。     

猪冷冻精液受胎率试验

1990～1991年,利用本项研究确定的冷冻、解冻稀释液及成套冷冻技术程序生产的冻精,以杂交母猪和本地母猪为主进行配种试验,受胎率由30％提高到50％,1991年中间试验情期受胎率提高到70.59％,窝产仔8.34～9.73头。     

猪鲜精17℃保存剂效果对比试验

选择2种著名品牌猪精液常温保存稀释剂为对照组(对照一、对照二),试验组为本课题组经大量试验开发的猪精液常温保存稀释剂,旨在探讨研发的稀释剂对猪鲜精保存效果。试验结果表明,课题组研发的猪精液17℃常温保存稀释剂在有效保存时间和精子总存活时间方面均显著高于对照一组,而相对于对照二组,显著提高了大白种猪精液有效保存时间和精子总存活时间(P<0.05),其余各组差异均不显著(P>0.05)。试验中的3种不同稀释剂在前3d对精子质膜完整性均有较好保护作用, 3组间差异不显著(P>0.05);保存到第5天,试验组和对照二组中精子质膜完整性显著高于对照一组(P<0.05),但前2组之间质膜完整性无显著性差异(P>0.05);保存至第7天,对照一组、对照二组和试验组中精子质膜完整性分别为49.94±3.08, 58.83±2.22, 72.86±2.62,精子质膜完整性在该3组之间均存在差异显著性(P<0.05)。结果显示,在相同储存条件下,本课题组研制的精液常温保存剂对精液保存时间,质膜完整率等指标优于国内市场上著名品牌,且保存效果稳定。     

6种进口猪精液常温保存稀释粉的效果比较

为了解进口猪精液常温保存稀释粉的实际应用效果,选购市场上常见的6种进口稀释粉进行比较试验。结果表明:随着常温保存时间的延长,不同稀释粉组间,活力下降速度存在差异,其中DILTEC和CXM下降最快,PRIMXCELL组下降最慢。精子有效存活时间差异很大,由长到短的顺序为PRIMXCELLACTIYEXINZUANSpermProCXMDILTEC;总存活时间也是PRIMXCELL最长,达到384 h以上;保存120 h顶体完整率存在显著差异,从高到低顺序为PRIMXCELLSpermProXINZUANACTIYECXMDILTEC。说明法国的PRIMXCELL稀释粉最好,有效存活时间242 h,总存活时间384 408 h,保存120 h顶体完整率79.6%。     

不同稀释液对猪精液常温保存效果的研究

选取杜洛克公猪精液作为试验材料,比较5种稀释液对猪精液的保存效果,结果表明:用葡萄糖—柠檬酸稀释液,所保存精液的pH值、精子活率、精子畸形率等品质指标表现良好,且稀释液的成本低廉,自配简单易行,适于农村养猪户推行;基层常用的葡萄糖稀释液保存3 d时的精子活率性状表现不佳,仅适合于现配现用。BL─液(美国)稀释液的保存效果也比较好,但该稀释液组分复杂,配制较难,成本也较高,可在规模养猪场中推广。     

绵羊精液常温保存稀释液筛选

对生产中常用的几种绵羊精液常温保存稀释液进行筛选，比较其在不同温度下的活力、保存时间，结果表明：葡-柠液在25℃-30℃、5℃条件下保存，效果最好，以其作稀释液，母羊情期受胎率77．8％，其方法简便适用，是较理想的稀释液；VB12液，用其作稀释液，母羊情期受胎率71．2％，其来源广，价格便宜，是目前生产中比较适用的稀释液。