欧李茎尖组织培养研究

以欧李3号、4号品种为试材,初步建立了茎尖组织培养的快繁体系。结果表明:欧李对激素反应比较敏感。分化基本培养基采用MS优于B5和W h ite。在MS 0.25mg.L-1BA 0.1mg.L-1IAA的分化培养基上,萌发速度快,成苗率高。增殖培养时,增殖系数随BA浓度增大而提高;欧李3号在MS 0.5mg.L-1BA 0.075mg.L-1NAA的培养基上,增殖系数为5.43;欧李4号在MS 0.4mg.L-1BA 0.05mg.L-1NAA的培养基上,增殖系数为4.56,增殖效果较好。壮苗培养时,欧李3号适宜的培养基为改良MS 0.075mg.L-1NAA,欧李4号适宜的培养基为改良MS 0.05mg.L-1NAA。生根培养时,欧李3号适宜的培养基为1/2MS 0.4mg.L-1NAA;生根率达72.3%,欧李4号适宜的培养基为1/2MS 0.2mg.L-1NAA;生根率达74.6%。移栽采用草炭、田园土、珍珠岩(5∶2∶1),成活率达72.7%。     

欧李杂交技术研究

本文通过对欧李花粉的采集时间,花粉的贮藏条件和贮藏时间,欧李的不同杂交时间的研究。结果表明：欧李在中花苞期、大花苞期和初花期花粉的生活力和发芽力较强,是花粉适宜的采集时间,而以大花苞期和初花期为最好。随着贮藏时间的延长,花粉的生活力和发芽力逐渐下降,在－１７℃条件下贮藏花粉生活力和发芽力下降速率较慢,在室温条件下贮藏花粉生活力和发芽力下降速率较快。欧李花粉在室温条件下贮藏２周,在－１７℃条件下贮藏     

欧李花芽分化及器官形成

对大叶系了树的花分化进行了三年取样,制作石蜡切片。观察了花芽分化各期主要特征,发现欧李花芽分化进程快,一朵花从开始分化到雌蕊原始体出现,只需一个月时间、若是,从总的结果枝上的花芽分化看延续时间,即使一个节位的不同花芽分化时期也不同,基分时间从６月２８日开始到翌年３月２８日,共９个月,在一个芽内能观察到数个分化时期不同的花芽原始体,其分化进程位于上面的早于侧面的。花芽内侧有一个叶芽,花芽分化早于叶芽     

欧李的组织培养与快速繁殖技术

以欧李春季萌发枝为外植体进行组织培养的初步研究。结果表明;L 6-BA1．omg／L NAA0．5mg／L培养基对欧李茎段的启动有较好的效果,同时MS的启动效果也较好;适宜继代增殖的6-BA浓度为0．5mg／L-1．0mg／L,NAA为0．img／L-0．5mg／L;增殖培养的激素组合中6-BA／NAA在1～10之间较适宜;较理想的生根培养基为L IAA0．5mg／L,生根率可达83．3％。     

欧李的组培快繁与移栽技术研究

以欧李幼茎作为外植体,进行组培快繁研究。结果表明:不定芽诱导的最佳培养基是MS+6-BA2.0mg/L+IBA0.2mg/L;增殖培养的最佳培养基是MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L;最佳生根培养基为1/2MS+NAA0.2mg/L+IAA2.0mg/L+琼脂5.0g/L+糖50 g/L,培养25d,生根率达80%以上。移栽时用灭过菌且通气透水性强的基质为好,移栽成活率在85%以上。     

欧李茎尖分生组织培养与快速繁殖技术研究

以欧李茎尖分生组织为外植体,研究了在培养基中添加不同的激素成分及不同浓度对不定芽诱导、继代增殖和生根培养的影响。结果表明:不定芽诱导的最佳培养基是MS 6-BA0.4mg/L IAA0.5mg/L;增殖培养的最适培养基为MS 6-BA0.3mg/L IAA0.4mg/L;最佳生根培养基是2/3MS IAA0.5mg/L。应用症状诊断和指示植物鉴定法进行病毒检测,平均脱毒率为73%。     

欧李的开发利用

晋城市野生果树资源十分丰富，其中欧李具有很大的利用价值，据内蒙兴安盟农牧业高新技术应用研究所报道，20年的实践证明，欧李有极强的耐旱、保持水土、防风固沙作用。尤其在水土保持、退耕还林、乔灌结合     

钙果的组织培养技术

钙果3号、4号是从野生欧李树种中选育出来的优良品种，欧李属蔷薇科樱桃属，因果实含钙丰富，又名钙果。它具有结果早、产量高、酸甜适度、香味浓、果个大、外观漂亮、含钙含铁量高的优点，特别是具抗旱、抗寒、耐贫瘠的特性，非常适合新疆的生态栽培特点。我们与新疆基业生物技术公司联合，     

欧李八氢番茄红素合成酶cDNA克隆、序列分析及在大肠杆菌中的功能表达

 【目的】克隆、分析欧李[Cerasus humilis（Bge）Sok]八氢番茄红素合成酶（phytoene synthase,PSY）基因,并利用大肠杆菌异源表达体系验证其功能。【方法】以欧李果实中分离的总RNA为模板,通过RT-PCR扩增到PSY cDNA中间片段,再利用RACE技术获得该基因cDNA全长并分析其序列;然后利用PCR技术获得欧李PSY cDNA编码区全长,将其克隆到原核表达载体pET-28a(+),获得重组质粒pET-ChPSY,转化大肠杆菌BL21（DE3）诱导表达,并利用工程菌株验证融合蛋白6×His-PSY的催化活性。【结果】欧李PSY cDNA全长1 559 bp,最大开放读码框为1 194 bp,可编码398个氨基酸,命名为ChPSY。核酸序列及其推导的氨基酸序列与已知其它植物PSY核酸、氨基酸序列之间的相似性分别在70%和65%以上,并且发现欧李PSY的N末端存在1—55个氨基酸残基组成的转运肽信号序列,在37—58和219—240氨基酸区域包含2个跨膜结构域。SDS-PAGE分析表明,原核表达获得了具有较高表达水平的融合蛋白6×His-PSY,相对分子量约为45.8 kD。通过大肠杆菌异源表达证实ChPSY可编码一个功能蛋白,促进工程菌株中β-胡萝卜素含量增加。【结论】该研究成功地克隆了欧李PSY cDNA全长并在大肠杆菌中功能表达,为进一步研究该酶蛋白特性和欧李果实类胡萝卜素的合成机制奠定了基础。     

欧李选种及繁殖研究综述

从选种、生物学特性及繁殖等方面综合论述了欧李选种、繁殖,为今后开展欧李的研究奠定了理论基础。     

不同处理对钙果扦插生根率的影响

通过对钙果不同枝条、基质、生根粉处理研究,结果表明钙果枝条的生根能力弱且普通的生根粉对其生根能力影响较小;扦插应选取基生半木质化枝条,宜选取通透性较好的基质;ABT1号处理的枝条在50~100 mg·L^-1浓度之间的生根率表现相近;ABT1号在蘸条30min后期生根率有明显的上升,2h后其生根率维持不再有明显上升。     

欧李茎尖玻璃化法超低温保存及植株再生

对欧李(Cerasus humilis)茎尖进行了玻璃化法超低温保存及植株再生研究,结果表明,预培养对欧李茎尖超低温保存有一定的影响,茎尖在含有0.5 mg.L-1BA和2 M甘油的B 5培养基上室温(25℃)下预培养3 d成活率最高;最佳预处理时间为60%PVS2处理10~20 min,玻璃化液(PVS2)处理时间为0℃下60 min.在优化的保存条件下,植株再生率达83.9%,再生植株生长和分化正常.这是欧李超低温保存成功的首例报道.     

欧李对碳酸盐胁迫的光合响应

[目的]研究欧李对碳酸盐胁迫的光合响应。[方法]以浓度为100、200、300mmol／L的NaHCO3溶液浇灌3年生欧李苗,在盆栽条件下,于第7、11、15、21、30、36天测定苗木光合作角各项指标。[结果]随胁迫时间的延长,处理植株的气孔导度（岱）、蒸腾速率（开）、净光合速率（n）均呈现先升高后降低的趋势,前期高于对照,后期低于对照。胞间CO2浓度（a）前期升高,中期下降,后期变化不大。叶绿素a含量在前期变化不大,中期呈上升趋势,后期有所下降;叶绿素a／叶绿素b在整个处理时期变化平稳。[结论]整个处理期间,欧李显示出较强的耐盐性。     

欧李ChPSY基因的原核表达

为了解欧李果实类胡萝卜素合成过程中八氢番茄红素合成酶基因的作用和功能,将从欧李成熟果实中分离的ChPSY cDNA序列,连接到原核表达载体pET-28a(+),导入大肠杆菌BL21(DE3)体内诱导表达。SDS-PAGE分析表明,1.0 mmol/LIPTG诱导4 h,表达了相对分子量约为45.8 kD融合蛋白产物;IPTG的浓度和诱导时间优化表明,1.2 mmol/LIPTG诱导6 h时,融合蛋白的表达量最大。此外,Western-blot试验证实,表达的融合蛋白能与抗6×His的单抗发生特异性反应。这为欧李八氢番茄红素合成酶基因ChPSY生物学功能的深入研究奠定了基础。     

钙果采摘装置技术参数的试验研究

为实现钙果的机械化采摘,根据钙果果实的生长特性及种植方式,设计了一种钙果采摘机。该机构利用旋转的钢丝碰撞果实进行脱果,通过调整双摘果辊轴心距,可适应不同形状和尺寸钙果的采摘。为确定机构的最佳工作参数,在分析机构特点和工作原理的基础上,对研制的样机进行了三因素混合的正交试验研究。根据因素的不同搭配对摘不净率的综合影响效果,得到各指标的最佳参数:摘果辊直径140mm,转速300r·min-1,进给速度80mm·s-1。研究结果可为钙果采摘装置的后续优化设计与改进提供重要的依据和技术基础。     

顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用法分析 欧李果实挥发性成分

【目的】 优化前处理影响因素,分析欧李果实挥发性成分,明确挥发性成分特点并对果实特征性香气成分进行评价。【方法】 以欧李果实为试材,采用顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联用法（HS-SPME-GC-MS）测定其挥发物成分,通过优化前处理影响因素,确定最佳试验条件。利用解卷积系统（AMDIS）与NIST11质谱数据库以及保留指数（RI）对其挥发性成分进行鉴定,内标法确定挥发物含量,并计算香气强度值（OAVs）,评价欧李果实香气品质与特征。【结果】 在欧李果实中累计鉴定出63种挥发物,含量范围为0.01—3.25 μg·kg ^-1。挥发物以酯类、烷类为主,并有少数醇类、芳香类、醛类、萜类、酸类、酮类,其中苯甲酸乙酯含量最高。通过参考相关挥发物香气阈值并计算部分挥发物OAVs可知,己酸乙酯、乙酸苯乙酯、β-芳樟醇、乙酸己酯、壬醛等物质对欧李果实香气成分构成具有重要作用,而烷烃不具有特征性香气。欧李果实香气主要为青香、花香、果香、脂蜡香和其他少数香型（木香型、芳香油香型等）,并以青香、花香、果香型物质为主,三者总含量达到挥发物总量的80%。【结论】 优化确立的试验条件为：果肉去核切碎处理,取样量5 g,萃取温度50℃,萃取时间与平衡时间均为30 min。SPME前处理条件对果实挥发性成分检测到的种类与含量有较大影响,通过优化试验条件可以获得最佳检测结果。欧李果实挥发物组成复杂,除烃类物质香气品质较弱外,多数具有特征香气,且香气强度属中高级,酯类物质是欧李果实的重要挥发物组成,清香型、花香型和果香型是欧李果实香气成分的主要特点。     

水分胁迫对欧李果实生长发育的影响

[目的]为欧李人工栽培及节水灌溉提供理论依据。[方法]研究不同程度水分胁迫对欧李果实生长发育的影响。[结果]结果表明:水分胁迫下,欧李果实生长受到抑制,单果鲜重减少及硬度增大,有机酸含量升高,含糖果量降低,风味变差。[结论]水分胁迫通过何种途径抑制果实发育,仍需进一步加以研究。