微生物显色法快速检测水产品中恩诺沙星残留

针对水产品中恩诺沙星残留,通过筛选药物敏感菌株和显色剂,建立了一种基于显色反应来判断结果的微生物检测方法.以腾黄八叠球菌(Sarcina ureae)为指示菌株,以氯化三苯四氮唑显色为显色剂,阳性样品呈肉眼可辨的红色,阴性样品呈无色,最低检测限可达50 μg/kg.经酶联免疫法(最低检测限可达12 μg/kg,回收率在74.25%～93.38%之间)和高效液相色谱法(最低检测限可达5.0 μg/kg,回收率在78.20%～91.27%之间)验证,该方法准确、可靠.不同于传统的方法,该方法更为快速、便捷、易于结果判定,是对现有检测方法的一种有益的补充和完善,极其适合在生产、销售、流通等非实验室条件下作为初筛方法使用.     

肉鸡组织中诺氟沙星残留的微生物学检测方法研究

以藤黄微球菌（Micrococcus luteus,28001）为工作菌,用杯碟法测定诺氟沙星在鸡组织中的残留。结果表明,诺氟沙星在磷酸盐缓冲液、肌肉、肝脏和肾脏中的最低检测限分别为0.12μg/ml、0.25μg/g、0.30μg/g、0.03μg/g。标准曲线的工作范围为0.12～1.92μg/ml。在肌肉、肝脏和肾脏中分别添加诺氟沙星0.50、0.60和1.00μg/g的回收率分别为（72.87±8.87）%（、82.61±9.99）%和（92.21±9.39）%。该方法灵敏度和回收率高,操作简便,不需特殊设备,样品用量少,易于推广,适用于诺氟沙星的定量分析。     

两种剂量下恩诺沙星及其代谢物环丙沙星在虹鳟体内的代谢残留

为研究不同给药剂量下恩诺沙星(enrofloxacin, ENR)及其代谢物环丙沙星(ciprofloxacin, CIP)在虹鳟Oncorhynchus mykiss(体质量70.48 g±5.41 g)体内的代谢和消除规律,挑选健康虹鳟257尾,分为低剂量组(126尾,随机分为21个亚组,每组6尾)和高剂量组(132尾,随机分为22个亚组,每组6尾),在(15±2)℃条件下,分别以20、50 mg/kg生产实际使用剂量ENR对虹鳟进行单次口灌,于不同时间点采集其肝脏、肌肉、皮肤、肾脏、血浆和剩余组织,经高效液相色谱-串联质谱测定各组织药物浓度,采用DAS 2.0药代动力学软件用非房室模型统计矩方法分析药代参数并进行比较。结果表明:20 mg/kg剂量下,ENR在虹鳟肝脏、肌肉、皮肤、肾脏、剩余组织和血浆的药物达峰浓度(C_(max))值分别为13.349、11.164、23.378、114.196、33.762 mg/kg和3.361 mg/L,药物消除半衰期(t_(1/2z ))分别为100.928、60.780、67.283、111.586、56.523、320.705 h; 50 mg/kg剂量下,ENR在虹鳟对应组织的C_(max)值分别为43.302、35.909、53.315、305.098、121.254 mg/kg和8.456 mg/L,t_(1/2z )分别为204.193、115.639、102.405、121.852、201.834、325.593 h;两种剂量下虹鳟各组织均能检出环丙沙星,且高剂量下ENR及其代谢物CIP在虹鳟体内的吸收速度及程度均大于低剂量组,两种剂量下ENR和CIP均分别在虹鳟肾脏和肝脏中富集含量最高,高剂量下ENR消除速度较快,但残留时间较长。研究表明,在(15±2)℃下,建议ENR 20 mg/kg剂量对虹鳟单次口服给药休药期不低于768 h(32 d),50 mg/kg剂量下休药期不低于1 008 h(42 d)。     

大肠杆菌对环丙沙星和恩诺沙星的敏感性恢复

为给制定临床使用抗菌药物的轮换用药方案,降低耐药性的危害提供科学依据,采用单因素试验和正交试验方法,研究不同细菌传代、营养因素和耐药菌下大肠杆菌耐药菌株D600对环丙沙星、恩诺沙星耐药水平的影响。结果表明:D600经210代传代,对环丙沙星的最小抑菌浓度(MIC)由128μg/mL(高度耐药)降至32μg/mL(中度耐药),而对恩诺沙星的MIC值没有变化;在稀释32倍的LB肉汤培养基中传代,D600对环丙沙星、恩诺沙星的MIC值由≥128μg/mL(高度耐药)分别降至0.25μg/mL和1μg/mL(敏感)。营养因素水平越低、传代次数越多、耐药菌比例越小,D600对药物的MIC值越小,直至恢复到敏感。且上述因子对环丙沙星敏感性恢复的作用强于恩诺沙星。     

水产品体内血、肝、肾、肌肉中恩诺沙星及其代谢产物的测定研究

研究了恩诺沙星及其代谢产物环丙沙星在水产品各组织(血、肝、肾、肌肉)的提取、净化方法,建立了一套水产品血、肝、肾、肌肉中恩诺沙星及其代谢产物环丙沙星准确、简便的测定方法.并应用该套测定方法初步研究了中华鳖中恩诺沙星的代谢规律.     

高效液相色谱法检测草鱼可食用组织中甲硝唑的残留

建立了草鱼的肌肉、皮肤组织中甲硝唑残留检测的高效液相色谱法(HPLC)，样品中甲硝唑选用乙腈提取、Silica(SiO2)固相萃取柱净化、氮气吹干浓缩、紫外检测(波长325nm)、HPLC测定。该方法可检出鱼肉、鱼皮组织中甲硝唑的最低定量限为1μg／kg。在空白样品中添加浓度为1μg/kg时，鱼肉、鱼皮中甲硝唑的平均回收率分别为69％和75％，日间变异系数均小于15％。结果表明，该方法的样品处理方法简单，最低检测限、准确度和精密度均符合残留检测方法要求。     

不同基因型空心菜对环丙沙星及恩诺沙星的吸收累积特征

人类医疗和动物养殖均大量使用抗生素,通常大部分以药物原形随粪尿排出,造成环境污染[1-4].珠三角地区、天津市等地蔬菜基地土壤、蔬菜中普遍检出抗生素[5-8],危害农产品安全和人体健康.筛选污染物低累积蔬菜品种是保障蔬菜质量安全的重要策略.对于重金属、邻苯二甲酸酯等污染物低累积蔬菜品种筛选已有一些报道[9-11],但对于抗生素低累积蔬菜品种筛选尚未见报道.为此,本研究探讨了广州地区7种主要基因型空心菜-水培系统(设置污染水平Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ分别为0.05、0.25、1mg·L-1)中环丙沙星和恩诺沙星的吸收累积与残留特征,以期为农产品安全提供科学参考.     

诺氟沙星间接竞争酶联免疫检测方法的建立

以人工合成的诺氟沙星-卵血清白蛋白(NFLX-OVA)为检测抗原,NFLX标准品为竞争半抗原,两者与一定量的NFLX抗血清反应.结果表明,理想的包被抗原质量浓度为0.5 μg/mL, NFLX抗血清稀释倍数为1 :32 000,酶标二抗稀释倍数为1 :3 000,最小检测量为34.5 ng/mL.得到回归方程(y=-18.418x+94.986,r2=0.984 3)和标准曲线,从而建立了快速定量测定NFLX含量的间接竞争酶联免疫(ci-ELISA)检测方法.     

HPLC紫外法同时检测生鲜乳中环丙沙星和恩诺沙星残留

[目的]建立能同时检测环丙沙星和恩诺沙星残留的HPLC紫外检测法。[方法]采用10%三氯乙酸为提取液,直接从生鲜乳中提取环丙沙星和恩诺沙星,并进行HPLC检测。[结果]环丙沙星和恩诺沙星的最低检测限为5μg/L,在10~200μg/L浓度范围内呈良好的线性关系(r0.99),平均回收率为84%~112%,变异系数均小于5%。[结论]该方法不仅除蛋白和脂肪效果好,而且回收率较为理想,可以很好满足确证方法的要求,且重现性好。     

池塘养殖条件下恩诺沙星及其代谢产物在斑点叉尾鮰体内的残留消除规律

在池塘养殖条件下,每天以20mg/kg和40mg/kg剂量的恩诺沙星药饵投喂斑点叉尾鮰,周期为5d,研究恩诺沙星及其代谢产物在斑点叉尾鮰体内的分布与残留消除规律。分析结果显示,低剂量组和高剂量组斑点叉尾鮰肝脏中恩诺沙星的达峰时间分别在给药期间第3天和第4天,达峰时的药物含量分别为12.24、15.97mg/kg。低剂量组肝脏、肌肉和血液中的消除曲线方程分别为C=0.25e-0.136 t、C=0.31e-0.082 t和C=0.23e-1.37 t,消除半衰期分别为5.10、8.43和5.06d。高剂量组肝脏、肌肉和血液中的消除曲线方程分别为C=0.70e-0.173 t、C=0.50e-0.096 t和C=1.08e-0.182 t,消除半衰期分别为4.00、7.22和3.81d。恩诺沙星在斑点叉尾鮰体内可代谢为环丙沙星。在用药138d时,低剂量组鱼体肌肉中恩诺沙星含量为0.013mg/kg;高剂量组为0.019mg/kg。药物在斑点叉尾鮰各组织中的消除顺序依次为血液肝脏肌肉。     

草鱼、鲤、鲢、鳙和尼罗非鲫脂肪酶活性的比较研究

草鱼和鲤肝胰脏脂肪酶活性明显比肠道的高(P<0.025);鲢和鳙肝胰脏脂肪酶活性明显低于肠道的(P<0.025);尼罗非鲫肝胰脏和肠的脂肪酶活性几乎相等(P>0.05),而胃脂肪酶活性明显比肝胰脏和肠道的低(P<0.005)。五种鱼的肝胰脏脂肪酶活性由高到低的顺序为:草鱼>尼罗非鲫>鲤>鳙>鲢;肠脂肪酶活性由高到低的顺序为:鲢>鳙>尼罗非鲫>草鱼>鲤。结果表明:鱼类的食性与脂肪酶活性无明显相关。草鱼、鲢和鳙的肠脂肪酶活性,中肠略高于前肠和后肠;尼罗非鲫和鲤的肠脂肪酶活性由前往后逐渐下降。     

双低菜籽粕对草鱼和鲤甲状腺、肝、肾组织结构的影响

以组织学方法,研究了投喂不同含量双低菜籽粕对草鱼和鲤甲状腺、肝、肾组织的影响。结果表明:在试验的前28 d,双低菜籽粕各不同含量的日粮(17%、34%、51%、68%)对草鱼甲状腺、肝脏组织没有影响,但菜籽粕含量为68%的试验组草鱼肾小管上皮出现颗粒变性。第42天后,菜籽粕含量为68%的试验组草鱼甲状腺滤泡上皮轻度增生,滤泡结构不规则;菜籽粕含量等于或大于51%的试验组草鱼肝脏出现颗粒变性和空泡变性,肾小球有透明变性,肾脏轻度淤血。在试验的第28天,双低菜籽粕含量等于或大于52.2%的试验组鲤甲状腺滤泡上皮细胞的高度增加,肝细胞空泡变性,有轻微的肾小球透明变性。第42天后菜籽粕含量等于或大于34.8%的试验组鲤甲状腺滤泡上皮细胞的高度增加,滤泡胶质的边缘出现缺刻;肝脏出现淤血,部分肝细胞坏死;肾小球透明变性,肾脏淤血。     

鱼籽酱中盐酸环丙沙星和恩诺沙星高效液相色谱检测方法的建立

建立了鱼籽酱中盐酸环丙沙星和恩诺沙星的高效液相色谱-荧光检测方法。样品经甲醇及酸化乙腈提取,提取液经氮吹浓缩,残渣用2 mL流动相溶解,正己烷脱脂净化,采用Eclipse XDB-C18色谱柱,以乙腈∶0.02 mol · L -1草酸（14∶86）为流动相,荧光检测器检测。盐酸环丙沙星和恩诺沙星的检出限分别为1、0.5μg · kg -1,在添加量5～120μg · kg -1范围内,平均回收率均大于80％,相对标准偏差均小于5％。说明该方法灵敏、准确,满足常规残留检测要求。     

草鱼转铁蛋白受体cDNA序列克隆及其组织表达差异

根据斑马鱼血清转铁蛋白受体(TfR)序列(NM_001009918)设计并合成一对引物,提取草鱼肝脏组织总RNA,RT-PCR扩增获得草鱼TfR cDNA部分序列873bp,获得GenBank登陆号为FJ613322.将测序结果用DNAman软件与斑马鱼的序列进行比对,发现核苷酸同源性为84%,氨基酸同源性为81%.利用半定量RT-PCR技术检测TfR草鱼脂肪、肌肉、肠、脑、黏液、性腺、鳔、肝脏、心脏、脾脏、鳃、鳍12种组织的表达差异结果表明,TfR在草鱼12种组织中均可表达,其中在脑与鳍中表达量最高,但与在心脏、性腺中的表达量无显著差异(P0.05),在黏液与鳔中表达量最低,二者之间无显著差异(P0.05).     

关于唐代草、青、鲢、鳙养殖业兴起的原因

从池养鲤为主到四大家鱼的形成,是我国渔业史与我国渔业科技史上的重要突破。对于突破的原因,从本世纪60年代到现在一种相当流行的看法是:唐代禁捕、禁食鲤的法律,促使人们去寻找新的养殖种类,从而草、青、鲢、鳙养殖业逐渐兴起与形成。本文从历史文献记载,从大量史料分析与科学论证,否定了上述论断,认为这一重大突破是我国生产力长期发展的结果,是我国渔业科学技术长期发展的结果,是商品生产价值规律推动的结果,唐代一度颁布的禁捕、禁食鲤律并非这一重大突破的主要原因。     

鲤、鲢、鳙、草鱼苗和鱼种饥饿致死时间的研究

作者观测了全长6.6～177.6 mm的鲤、鲢、鳙、草鱼苗和鱼种的饥饿致死时间及饥饿死亡时皮肤和肠的组织学及亚微结构变化。在水温18.0～23.0℃时,这几种鱼苗50％饥饿致死时间为7.3～12.0d,耐饥饿力由强至弱依次为:鲤(10.4～12.0d)>鳙(9.6 d)>草鱼(8.8 d)>鲢(7.3d)。夏花至春片鱼种的50％饥饿致死时间为15～271d。水温与鱼的饥饿致死时间呈负相关。饥饿致死的鲤苗皮肤破裂,指纹状细胞界限不清,排列散乱,粘液细胞小,神经丘萎缩;鲢、鳙鱼苗肠粘膜细胞核和细胞器或肿胀或萎缩或溃解。