金龟子绿僵菌生物学特性及其对草地贪夜蛾的侵染

【目的】探究金龟子绿僵菌（Metarhizium anisopliae,ZKJGL）生长发育所需要的营养条件以及对草地贪夜蛾（Spodoptera frugiperda）幼虫的侵染力,为草地贪夜蛾生物防治研究以及生防菌剂的开发提供参考。【方法】室内测定温度、光周期、pH以及氮源、碳源对金龟子绿僵菌菌株ZKJGL菌丝生长和产孢的影响,并测定其对草地贪夜蛾2龄幼虫的活性。【结果】金龟子绿僵菌ZKJGL菌丝生长和产孢的适宜温度为20～25℃、pH=7、全黑暗条件,对碳源和氮源要求不高,麦芽糖、酵母膏或蛋白胨的利用率较好。孢子浓度为5×10⁸cfu/mL的金龟子绿僵菌ZKJGL菌株侵染草地贪夜蛾后累计死亡率达77.78%,LC₅₀为4.406×10⁶cfu/mL,LT₅₀少于4 d。【结论】金龟子绿僵菌ZKJGL易于培养,对营养条件、光照要求不高,对草地贪夜蛾的幼虫具有较强的致病力,可作为优良菌株进一步研发生物农药应用于防治草地贪夜蛾。     

绿色木霉TR-8菌株的生物学特性研究

绿色木霉菌TR-8是一株具有生防潜力的拮抗菌。研究发现TR-8菌株在PDA培养基、查彼培养基和基本培养基上均能较好生长,在基本培养基上生长最快,3种培养基对孢子产生影响不大。温度对菌丝生长和孢子产生影响显著,30℃时菌丝生长最快,25℃时产孢量最大。TR-8菌株在pH值2～10范围内均可生长,pH值5～6时菌丝生长最快,pH值为7时孢子产生量最大。光照处理对菌丝生长影响不明显,但可明显促进孢子产生。葡萄糖和麦芽糖为菌丝生长和产孢的最佳碳源。天冬酰胺是菌丝生长和孢子产生的最佳氮源。不同维生素对菌丝生长和孢子产生作用不同,烟酸对菌丝生长最有利。微量元素对菌丝生长有一定的促进作用,Mn有利于孢子产生。镰刀菌的菌丝提取物对TR-8的孢子产生具有促进作用。     

绿豆根腐病菌生物学特性研究

研究结果表明,尖孢镰孢菌菌丝生长范围在5～35 ℃,生长的最适温度为30 ℃。尖孢镰孢菌产孢的最适温度为30 ℃,0 ℃以下不产生孢子。立枯丝核菌菌丝生长范围在10～35 ℃,生长的最适温度为30 ℃。尖孢镰孢菌在pH为6.26时生长最快,产孢量最高;立枯丝核菌在pH为5.35时生长最快。尖孢镰孢菌孢子在光暗交替条件下产孢量最多,立枯丝核菌在光暗交替条件下菌丝生长最好。尖孢镰孢菌的菌丝在以蔗糖为碳源的培养基上生长最快,而在以麦芽糖为碳源的培养基上产孢最多;立枯丝核菌在以淀粉为碳源的培养基上生长最快。尖孢镰孢菌在以硝酸钙为氮源的培养基上生长最快,而在以谷氨酸为氮源的培养基上产孢最多;立枯丝核菌在以L-半胱氨酸为氮源的培养基上生长最快。     

藜致病真菌的鉴定及其生物学特性研究

从野外自然患病的藜植株上分离一高致病菌株(Hf-05),经人工接种试验证实为侵染藜的病原菌。菌株形态学和ITS序列分析结果表明,菌株Hf-05为玉蜀黍赤霉菌的变种。生物学特性研究结果表明,Hf-05的最适C源为麦芽糖,在麦芽糖中最易产孢,最适N源为硝酸钠;pH为8时生长速度最快,孢子萌发率最高;25℃是菌丝生长最适宜的温度;孢子萌发的最适宜温度为30℃;黑暗条件更有利于该菌株生长。     

油茶叶斑病菌的分离、鉴定及生物学特性研究

对中国热带农业科学院油茶研究中心油茶资源圃采集到的油茶叶斑病叶片进行病原菌分离、鉴定,并研究其生物学特性。通过对病原菌培养特性、形态特征的观察及rDNA的转录间隔区(ITS)序列测定,与Genbank中同源性较高的菌株进行序列对比,最后将菌株20-1确定为可可毛色二孢菌(Lasiodiplodia theobromae)。生物学特性研究表明,20-1菌丝在PDA培养基上生长最快,菌丝生长的最适宜温度是20～35℃,pH值及光照对菌丝生长的影响均不大,果糖为最佳碳源,硝酸钠为最佳氮源。     

莱氏绿僵菌Nr0815分生孢子在化学农药中的相容性

为明确莱氏绿僵菌菌株Nr0815分生孢子在常见化学农药中的相容性,室内观察了2种除草剂(68%草甘膦铵盐可溶粒剂、200 g/L百草枯水剂)、3种杀菌剂(75%百菌清可湿性粉剂、80%多菌灵可湿性粉剂、65%代森锌可湿性粉剂)和2种杀虫剂(24%灭多威可溶液剂、20%甲氰菊酯乳油)对莱氏绿僵菌菌株Nr0815分生孢子萌发、菌丝生长和产孢量的影响。结果表明,7种化学农药对莱氏绿僵菌菌株Nr0815分生孢子萌发、菌丝生长和产孢量均具有一定的抑制作用,抑制效果表现为杀菌剂杀虫剂除草剂。其中,除草剂以68%草甘膦铵盐可溶粒剂对分生孢子萌发率、菌丝生长抑制率和产孢量的影响最小,在最大推荐使用质量浓度(8 000μg/mL)下,72 h时的孢子萌发率、菌丝生长抑制率和产孢量分别为(22.00±3.40)%、(72.79±2.49)%、(4.93±0.44)×10~8个/mL。除草剂杀菌剂杀虫剂中,莱氏绿僵菌菌株Nr0815分别与68%草甘膦铵盐可溶粒剂、80%多菌灵可湿性粉剂和20%甲氰菊脂乳油的相容性较好。     

臭椿炭疽病菌盘长孢刺盘孢(Colletotrichum gloeosporioides Penz.)生物学特性研究

本研究测定了不同培养基、碳源、氮源、温度、pH条件下臭椿盘长孢刺盘孢(Colletotrichum gloeosporioides Penz.)菌株SQD-107的生长、产孢和孢子萌发情况.该菌株在PSA培养基上生长最快、产孢最多;在供测碳源中病原菌对蔗糖、葡萄糖利用较好,供测氮源中对硝酸铵、氯化铵利用较好.菌丝生长的适宜温度范围为10-35℃,最适25℃;产生分生孢子的适宜温度范围为10～30℃,最适25～30℃;孢子萌发的适宜温度范围为5～35℃,最适25℃.在pH3～10的范围内该菌均能生长和产孢,菌丝生长最适pH7～8;产生分生孢子最适pH为7.孢子萌发最适pH 6～8.孢子的致死温度为60℃,持续时间10 min.     

用立式多层产孢箱同步生产多株生防真菌孢子粉

利用自主研制的一台立式多层产孢箱作为固相发酵产孢装置，对2株金龟子绿僵菌（Metarhizium anisopliae）、1株金龟子绿僵菌金龟子变种（Manisopliae var．anisopliae）和2株球孢白僵菌（Beauveria bassiana）同时进行了高纯度孢子粉生产的产能试验。每菌株接种6kg大米基质，等量分置于产孢箱的3层中，于25℃下发酵6d。在5株供试菌中，球孢白僵菌Bb2860菌株的产孢量最高，达到2．2×10^12个孢子/kg大米，表现出优异的工艺性状和商品菌剂开发潜力。     

绿僵菌ACCC30104菌株的分子鉴定

通过测定原定名为金龟子绿僵菌小孢变种的ACCC30104菌株的ITS1-5.8S-ITS2 rDNA区域序列,为该菌株正确归属提供了重要的分子依据.依据形态学和分子生物学的证据可将该菌株重新鉴定为金龟子绿僵菌鳞鳃金龟变种.     

金寨县桑黄的菌种鉴定与生长特性研究

针对皖西大别山金寨县永福桑黄菌种植合作社种植的桑黄菌开展研究,通过现代分子生物学技术对其18S rDNA 基因ITS区段进行克隆测序和序列特征分析,依据ITS序列分析结果将菌种鉴定为瓦宁木层孔菌(Sanghuangporus vaninii);对JS-1的基础培养基进行筛选,结果显示,PDA培养基最适合其生长;测定了JS-1菌株的生长特性,结果显示,温度在5~35 ℃区间内菌丝均可生长,最适生长温度为28 ℃;pH在4~10范围内菌丝均可生长,pH为7时最适合菌丝生长。以菌丝生长情况为指标筛选碳源和氮源,碳源为葡萄糖的培养基上菌丝生长速度最快且长势浓密,认为葡萄糖为其生长最适碳源;以马铃薯浸汁为氮源的培养基虽然生长速度略慢于蛋白胨和玉米粉,但菌落长势最为茂盛,且最早出现黄褐色软木状环纹,认为马铃薯浸汁为其生长最适氮源;在以葡萄糖为碳源,马铃薯浸汁为氮源的基础上,通过L₉(3⁴)正交试验得到JS-1菌株菌丝生长速度最快的培养条件为葡萄糖20 g·L^-1,马铃薯100 g·L^-1,pH为8,培养温度30 ℃;测定菌丝的致死温度为45 ℃。