人外周血CD4+ T细胞F-actin的超分辨SIM成像

通过合成lifeact序列,将其克隆到pEGFP-C1载体上,构建了pEGFP-C1-Lifeact质粒,转染原代CD4+T细胞,实现对CD4+T细胞F-actin的荧光标记,结合超分辨3D-SIM荧光成像技术,研究人外周血CD4+T细胞F-actin的精细结构,并对其动力学过程进行连续观察。结果表明,CD4+T细胞F-actin分布在细胞膜周围,处于解聚和聚合的动态平衡状态,与普通荧光显微镜相比,超分辩SIM成像F-actin结构更加清晰,分辨率提高2~4倍。     

IL-17+γδT细胞的研究进展

IL-17是一种重要的炎症介质,最近研究显示γδT细胞是产生IL-17的主要细胞,并且产生IL-17的γδT细胞(IL-17+γδT细胞)参与多种疾病的发生发展,这为临床疾病的治疗提供了新的思路.该文对IL-17+γδT细胞及其在感染性疾病、自身免疫性疾病、肿瘤等的研究进展进行了综述.     

蒲公英多糖对雏鸡外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞亚群的影响

为研究蒲公英多糖对雏鸡免疫功能的调节作用机制,采用流式细胞技术检测了健康雏鸡、环磷酰胺处理雏鸡在服用蒲公英多糖[剂量80 mg/(kg·d)]和不服用蒲公英多糖情况下,外周血CD4<'+>和CD8<'+>T淋巴细胞数量的动态变化.结果发现蒲公英多糖能显著提高健康雏鸡外周血CD4<'+>T淋巴细胞数量(P<0.05),但对CD8<'+>T淋巴细胞数量及CD4<'+>/CD8<'+>T淋巴细胞比值作用不显著(P>0.05);能够提高环磷酰胺诱导免疫抑制雏鸡外周血中CD4<'+>和CD8<'+>T淋巴细胞数量(P<0.05),且对环磷酰胺诱导免疫抑制雏鸡外周血中CD4<'+>/CD8<'+>T淋巴细胞比值降低效果显著(P<0.05).本研究表明蒲公英多糖通过上调雏鸡血液中CD4<'+>T淋巴细胞水平,增强机体对抗原的免疫应答反应,从而增加机体免疫抵抗力,促进动物的生长和发育.     

米糠多糖对不同免疫状态雏鸡外周血CD4^＋和CD8^＋ T淋巴细胞亚群的影响

为探讨米糠多糖对不同免疫状态雏鸡免疫功能的调节作用机理,采用流式细胞技术检测了健康雏鸡、环磷酰胺处理雏鸡和人工感染传染性法氏囊病毒雏鸡在服用米糠多糖（剂量150 mg/（kg.d））和不服用米糠多糖情况下,外周血CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞亚群数量的动态变化。结果表明：米糠多糖能够提高健康雏鸡外周血CD4^＋T淋巴细胞比率,对CD8^＋T淋巴细胞作用不明显;能够提高环磷酰胺和传染性法氏囊病毒诱导免疫抑制雏鸡外周血中CD4^＋和CD8^＋T淋巴细胞数量。     

轮状病毒肠炎患儿外周血CD4+CD29+T细胞表达及其与治疗关系

目的 了解轮状病毒(RV)肠炎患儿外周血CD4+CD29+T细胞表达及其与治疗关系.方法 69例RV肠炎患儿分为观察组及对照组,分别给予抗RV免疫球蛋白及常规抗病毒治疗;比较两组患儿治疗前后外周血CD4+CD29+T细胞、IL-2、IL-12水平变化,粪便内RV-RNA含量及腹泻天数差异.结果 观察组治疗后CD4+CD29+T细胞、IL-2及粪便内RV-RNA水平均显著低于治疗前及对照组(P＜0.01),而IL-12水平显著增高(P＜0.01).观察组腹泻天数明显少于对照组(P＜0.01).RV肠炎患儿粪便内RV-RNA、腹泻天数与外周血CD4+CD29+T细胞、IL-2水平呈正相关(P＜0.01或0.05),而与IL-12呈负相关(P＜0.05).结论 外周血CD4+CD29+T细胞、IL-2水平升高及IL-12水平降低是RV肠炎的细胞免疫特征,且与病毒数量及腹泻程度明显相关.     

肺结核患者治疗前后外周血γδT细胞及其记忆表型变化

目的 观察肺结核患者治疗前后外周血γδT细胞及其记忆表型变化.方法 采用流式细胞术检测39例肺结核治疗前患者(治疗前组)、36例肺结核治疗3个月后患者(治疗后组)及28例健康人(对照组)外周血γδT细胞及其记忆表型变化.结果 治疗前组外周血γδT细胞明显高于治疗后组和对照组(P＜0.01或0.05),CD45RA-CD27+γδT细胞明显低于治疗后组和对照组(P＜0.01),而CD45RA-CD27-γδT细胞高于治疗后组和对照组(P＜0.01).结论 肺结核患者外周血γδT细胞及其记忆表型转化可能与结核发生、发展密切相关.     

CD4~+CD25~+调节性T细胞的研究进展

异基因造血干细胞移植技术是血液系统恶性肿瘤治疗上的一个历史性突破,但移植排斥反应及移植物抗宿主病(graft versus host disease,GVHD)极大地限制该技术应用,而CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory Tcells,Tregs)的发现有可能解决该难题。Tregs是一类具有免疫调节功能的T淋巴细胞,通过细胞接触和分泌抑制性细胞因子等途径,在维持机体免疫自稳、调控免疫应答方面起重要作用。有动物实验表明Tregs能够预防移植排斥和GVHD的发生,同时保留移植物抗白血病作用的功能。该文综述了其特性、作用机制以及在移植免疫耐受中的作用和应用前景。     

佛波酯对猪中性粒细胞巨噬细胞表面分子抗原-1的作用及有关信号机制研究

【目的】研究佛波酯诱导猪中性粒细胞黏附分子巨噬细胞表面分子抗原-1表达的作用及有关信号机制。【方法】采用密度梯度离心法分离纯化猪外周血中性粒细胞,以流式细胞术检测中性粒细胞巨噬细胞表面分子抗原-1表达,分别以实时荧光定量PCR、Western Blot法检测信号蛋白p38丝裂原活化蛋白激酶、胞外信号调控激酶的基因表达和磷酸化活性。【结果】20、30 nmol/L的佛波酯能极显著促进猪中性粒细胞巨噬细胞表面分子抗原-1的表达(P<0.01)。与对照相比,佛波酯在0.5、6 h可明显增加猪中性粒细胞p38丝裂原活化蛋白激酶的基因表达量(P<0.05,P<0.01);在0.5、3和6 h可极显著增加猪中性粒细胞胞外信号调控激酶的基因表达量(P<0.01)。与对照相比,佛波酯在1、5和30 min可极显著促进p38丝裂原活化蛋白激酶磷酸化活性(P<0.01);在0.5、1、5和30 min可明显促进胞外信号调控激酶磷酸化活性(P<0.05,P<0.01)。【结论】佛波酯能诱导猪中性粒细胞黏附分子巨噬细胞表面分子抗原-1的表达,其机制至少与上调p38丝裂...     

流式细胞术检测海洛因成瘾者外周血T细胞亚群的变化

目的 :观察海洛因成瘾者外周血 T细胞亚群的变化。方法 :用流式细胞术检测 5 0例海洛因成瘾者 (成瘾者 )和 5 0例正常人(对照组 )外周血 T细胞亚群的数目。结果 :海洛因成瘾者外周血 CD3+、CD4+、CD8+细胞数明显低于正常人 ( P<0 .0 5～ 0 .0 1 ) ,CD 4+/CD8+比值显著低于正常人 ( P<0 .0 1 )。结论 :海洛因成瘾者机体细胞免疫功能处于抑制状态。     

CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在血液系统疾病中的研究进展

CD4＋CD25＋Foxp3＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋Foxp3＋regulatory Tcell,Tregs）是能抑制自身免疫T细胞活化的T细胞亚群,具有免疫无能和免疫抑制两大特征。Tregs的数量和功能在移植排斥反应、多种自身免疫性疾病的发生及肿瘤免疫逃逸中发挥着重要作用,它与血液系统疾病的发生发展密切相关,对预后判断及指导治疗具有一定的意义。本文就Tregs的来源、功能及其与血液系统疾病的关系作一综述。     

类风湿关节炎患者关节液中IL-17的定量检测

目的探讨类风湿性关节炎（RA）患者关节液中IL-17的含量与关节炎症损伤的相关性,为研究RA的关节损伤机制提供科学依据.方法应用ELISA方法定量检测RA组40例和对照组40例关节液中IL-17的含量,应用t检验比较两组差异性.结果 RA组关节液中IL-17的含量显著高于对照组（P〈0.01）.结论 RA组关节液中具有较高的IL-17检测值,证实IL-17是RA患者关节滑膜损伤的重要因素之一.     

连翘酯苷A对内毒素致鸡脾淋巴细胞白介素-17的影响

[目的]研究内毒素和连翘酯苷A对鸡脾淋巴细胞中白介素-17(IL-17)水平的影响。[方法]将1日龄雏鸡正常饲养至50日龄时,心脏采血处死,表面消毒后,剖检用脾淋巴细胞分离液分离脾淋巴细胞,将脾淋巴细胞分为20个组,具体为4个剂量组×5个时间点。4个剂量组分别为:对照组、LPS组(5μg/m L)、连翘酯苷A预防低剂量组(200μg/m L连翘酯苷A+5μg/m L LPS)、连翘酯苷A预防高剂量组(400μg/m L连翘酯苷A+5μg/m L LPS)。5个时间点分别为0、6、12、24、48 h。通过采用ELISA和Real time-PCR方法检测脾脏淋巴细胞中IL-17水平。[结果]ELISA结果显示,与正常组相比,LPS组脾脏淋巴细胞中炎症因子IL-17含量升高;与LPS组比较,连翘酯苷A组脾脏淋巴细胞中上述炎症因子含量下降,表明脾脏中炎症因子的变化呈正相关性,通过抑制LPS诱导的鸡脾脏中上述炎症因子的升高,减轻炎症反应。Real time-PCR结果显示,与正常组相比,LPS组脾脏淋巴细胞中炎症因子IL-17 mRNA表达量升高;与LPS组比较,连翘酯苷A组预防组脾脏淋巴细胞中上述炎症因子表达量下降,变化呈相关性,试验表明连翘酯苷A可以通过转录水平抑制LPS诱导的鸡脾脏淋巴细胞中上述炎症因子表达量的升高,减轻炎症反应。[结论]连翘酯苷A抑制鸡脾脏淋巴细胞中IL-17水平,可起到抗炎功能。     

流式细胞术检测拉米夫定对慢性乙型肝炎患者T细胞亚群的影响

目的研究拉米夫定对慢性乙型肝炎（CHB）患者细胞免疫功能的影响.方法采用流式细胞术检测50例CHB患者在服用拉米夫定前后外周血T细胞亚群,同时检测45例健康体检者外周血T细胞亚群作为对照.结果CHB患者在使用拉米夫定后,CD4 T细胞百分比较使用前明显升高（P〈0.05）,CD8 T细胞百分比明显下降（P〈0.05）,CD4/CD8明显升高（P〈0.05）.结论拉米夫定可改善CHB患者的细胞免疫功能.     

银屑平丸对BALB/c小鼠银屑病样模型血清中IL-17、IL-23表达的影响

目的 建造BALB/c小鼠背部银屑病样模型,探讨中成药银屑平丸治疗银屑病的可能作用机制。方法 选取48只BALB/c小鼠,随机分为空白组、模型对照组、雷公藤组、银屑平丸高、中、低剂量组,8只/组。给予除空白组外其余小鼠背部皮肤外涂咪喹莫特软膏连续8 d,1次/d,建立模型小鼠。末次给药后,观察小鼠背部皮肤进行皮损面积和严重程度指数（psoriasis area and serenty index,PASI）评分;检测血清中IL-17、IL-23水平;取背部皮肤组织进行组织病理比较。结果（1）银屑平丸各组和雷公藤组对银屑病样小鼠背部皮肤PASI评分比较无明显的差异（P>0.05）,而较模型对照组和空白组评分均有明显的差异（P<0.05）。（2）各组银屑病样小鼠外周血IL-17和IL-23含量明显高于空白组（P>0.05）。而银屑平丸各组和雷公藤组均与模型对照组外周血中含量有明显的差异（P<0.05）。（3）银屑平丸各组和雷公藤组对银屑病样小鼠背部皮肤组织病理变化较模型对照组和空白组有明显差异（P<0.05）。结论 银屑平丸改善银屑病模型小鼠的作用机制可能通过抑制IL-17、IL-23,起到减轻小鼠银屑病样皮损的发生、发展的作用。     

CD58及雌酮对妊娠早期山羊EML分泌IL—2及IL—4的影响

将妊娠17d山羊子宫内膜淋巴细胞(EML)放入含不同剂量PHA-P,CD58和雌酮的介质中进行体外培养,并分别用生物学方法和双抗体夹心ELISA法测定培养上清液中IL-2和IL-4的水平。结果表明,CD58和雌酮处理组EML分泌的IL-2水平低,与细胞对照组差异不显著,并显著低于PHA-P处理组。3个浓度CD58处理组IL-4分泌水平高达5.40～6.36ng/mL,高浓度雌酮处理组IL-4分泌量也达到4.77ng/mL,与细胞对照组差异均极显著,而且CD58能以剂量依赖方式促进EML对IL-4的分泌。     

清温并用法对慢加急性肝衰竭大鼠结肠组织调节性T淋巴细胞/辅助性T淋巴细胞17细胞因子的影响

目的 研究清温并用法对慢加急性肝衰竭（acute-on-chronic liver failure,ACLF）大鼠结肠组织Treg/Th17相关型细胞因子表达的影响,探讨其抗ACLF肠源性内毒素血症（intestinal endotoxemia,IETM）的可能调控机制。方法 140只SD大鼠随机分为正常组、模型组、清法组、温法组及清温并用法组。牛血清白蛋白致敏法建立免疫性肝纤维化大鼠模型,腹腔注射D-氨基半乳糖+脂多糖急性攻击建立ACLF大鼠模型,各组予以相应干预,观察24 h内各组大鼠外周血内毒素、外周血Treg/Th17细胞比值、结肠组织Treg/Th17型细胞因子变化。结果 与正常组比较,模型组大鼠在各时间点内毒素明显升高（P<0.01）、Treg/Th17型细胞因子明显升高（P<0.01）、Treg/Th17比值明显降低（P<0.01）;与模型组比较,清法、温法、清温并用法组在1、12、24 h各个时间点内毒素、Treg/Th17相关细胞因子表达均降低（P<0.05）,以清温并用法组下降最显著（分别与清法组、温法组比较,P<0.05）;各组与模型组比较,仅清温并用法组Treg/Th17比值明显升高（P<0.05）。结论 清温并用法抗肝衰竭IETM的机制可能与调节结肠组织Treg/Th17型细胞因子失衡,促使Treg/Th17细胞恢复平衡有关。     

维生素B 17对HepG2细胞体内外生长的影响

分别通过体外培养和体内接种试验,探讨维生素B-17对HepG2细胞体内外生长的影响。结果表明:体外试验中,当维生素B-17的添加量为1.3 g/L时,HepG2细胞生长抑制率仅为5.62%;当添加量为10.5 g/L时,抑制率增加到30.99%;当添加42 g/L时,抑制率达到56.30%。体内试验低质量浓度和中质量浓度组瘤块生长抑制均不明显,与对照组相比差异不显著(P>0.05);高质量浓度组对肿瘤生长抑制作用最好,与对照组相比差异显著(P<0.05)。说明高质量浓度的维生素B-17对HepG2细胞体内外生长均有抑制作用。     

Alterations in T4 (CD4) protein and mRNA synthesis in cells infected with HIV

Cells infected with the human immunodeficiency virus (HIV) show decreased expression of the 58-kilodalton T4 (CD4) antigen on their surface. In this study, the effect of HIV infection on the synthesis of T4 messenger RNA (mRNA) and protein products was evaluated in T-cell lines. Metabolically labeled lysates from the T4+ cell line Sup-T1 were immunoprecipitated with monoclonal antibodies to T4. Compared with uninfected cells, HIV-infected Sup-T1 cells showed decreased amounts of T4 that coprecipitated with both the 120-kilodalton viral envelope and the 150-kilodalton envelope precursor molecules. In four of five HIV-producing T-cell lines studied, the steady-state levels of T4 mRNA were also reduced. Thus, the decreased T4 antigen on HIV-infected cells is due to at least three factors: reduced steady-state levels of T4-specific mRNA, reduced amounts of immunoprecipitable T4 antigen, and the complexing of available T4 antigen with viral envelope gene products. The data suggested that the T4 protein produced after infection may be complexed with viral envelope gene products within infected cells. Retroviral envelope-receptor complexes may thus participate in a general mechanism by which receptors for retroviruses are down-modulated and alterations in cellular function develop after infection.     

重组人白介素-10对兔皮肤移植排斥反应及外周血T细胞亚群的影响

目的 观察重组人白介素-10（rhIL-10）对白兔皮肤移植排斥反应及外周血T细胞亚群的影响.方法 36只白兔随机等分为供体组和受体组,再将18只受体白兔随机分为rhIL-10组（5、10μg·kg-1·d-1）、环孢素（CsA）阳性对照组（5、10 mg· kg-1·d-1）、rhIL-10＋ CsA联合组（5μg·kg-1·d-1 hIL-10＋5 mg·kg-1·d-1 CsA）、生理盐水阴性对照组（1 mL/d）.在移植前1d至术后8d连续肌注药物,观察各组皮片移植排斥反应情况及外周血CD4＋和CD8＋细胞数、CD4/CD8细胞比值.结果 rhIL-10组排斥反应发生时间比阴性对照组延长（P＜0.05）,而rhIL-10＋ CsA组排斥反应发生时间比低剂量rhIL-10及CsA组延长（P＜0.05）.在发生急性排斥反应时,CD4＋细胞数及CD4/CD8细胞比值升高,在皮片坏死时达到峰值.结论 rhIL-10可抑制白兔皮肤移植排斥反应,CD4/CD8细胞比值有助于监测排斥反应发生.