转CMV—CP基因番茄植株的抗病表现

转ＣＭＶ－ＣＰ基因的番茄植株对ＣＭＶ侵染表现显著的抗性,温室中接种的植株无症率为Ｒ１代９４％,Ｒ２代９５．１％,Ｒ３代９５．４％,Ｒ４代９５％;大田中自然发病的植株无症率为：Ｒ２代６５．６％,Ｒ７６．９％。     

转CP基因线辣椒对CMV的抗病性组分研究

以转化 CMV外壳蛋白基因 ( CP基因 )的线辣椒 ( Capsicum annuum var. longunt)为试材 ,系统研究了 CP基因介导抗病性的组分和表达特点。摩擦接种黄瓜花叶病毒 ( CMV,浓度 2 0μg/ ml)后 ,转基因线辣椒显症延迟 4～ 1 0 d,显症率和严重度大幅减低 ,仅部分植株表现轻度花叶。接种叶片上 CMV侵入位点数目比未转化对照品种减少 6 7.0 %～ 86 .4 %。接种后第 9天 ,转基因株系接种叶中 CMV含量仅为未转化对照的32 .4 %～ 37.3%。病毒由接种叶向邻叶转出始期 ,比未转化对照晚 9～ 1 5h。接种后 3d,转基因株系 1 6— 1 3的未接种叶中未能检出 CMV,而同期未转化对照已有 4片邻叶检出了 CMV。接种后 6 d,1 6— 1 3仅上下位相邻叶检出了 CMV,此时对照已全株带毒。转基因株系接种后 6 d,整株 CMV含量为未转化对照的 4 2 .5%。这表明线辣椒 CP基因介导的抗病性是多组分的 ,包括对病毒的抗侵入、抗扩展和抗增殖     

双抗TMV和CMV转基因番茄后代的遗传分析

通过对转ＴＭＶ和ＣＭＶ双价外壳蛋白基因番茄Ｔ１代群体和Ｔ２代株系进行ＰＣＲ及ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎ鉴定，并分别进行温室及田间抗病毒试验，结果表明，Ｔ１代工程番茄植株中确有ＣＭＶ—ＴＭＶ双价外壳蛋白基因的遗传和分离，其遗传行为符合显性单基因的孟德尔遗传。Ｔ２代部分株系ＣＭＶ—ＴＭＶ双价ＣＰ基因已获得稳定遗传，共获得了３个遗传稳定的番茄株系。     

番茄双抗TMV和CMV基因工程的研究

在ＴＭＶ外壳蛋白（ＣＰ）基因的５′和３′端分别合成寡聚核苷酸引物Ｐ１和Ｐ２，并分别引入ＣｌａＩ和ＢａｍＨＩ位点，采用ＰＣＲ技术扩增ＴＭＶＣＰ基因，用ＣｌａＩＢａｍＨＩ消化后重组到ｐＢｌｕｅ ｓｃｒｉｐｔＫＳ＋中，并将该基因与ＣＭＶＣＰ基因重组在同一个表达载体ｐＥ３上获得双价ＣＰ基因表达载体ｐＥＴＣ２，转化番茄，获得再生植株。通过点杂交、ＰＣＲ检测和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，证实２、１２和１３号为转ＴＭＶ和ＣＭＶＣＰ基因的工程植株。工程植株在温室中表现正常，比对照植株表现出明显的抗性。     

转多基因抗病番茄

<正> 国家生物工程中心利用现代生物技术,率先获得了世界首例转多基因高抗烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、马铃薯 X 病毒(PVX)和抗青枯病、晚疫病两种真菌番茄植株。培育出了“DRD8012”、“DRD8013”、“DRD8018”三个早、中、晚熟和抗病番茄新品种。通过在病毒易发区的两广、海南和吉林等     

转多基因抗病番茄及试种示范

转多基因抗病番茄及试种示范唐绂忱国家生物工程中心利用现代生物技术，率先地获得了世界首例转多基因高抗烟草花叶病毒（ＴＭＶ）、黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）。马铃薯Ｘ病毒（ＰＶＸ）和抗青枯病、晚疫病二种真菌番茄植株。培育出了“ＤＲＤ８０１２”、“ＤＲＤ８０１３”...     

番茄不同品种抗青枯病研究

用南昌市郊区蔬菜技术推广站育成的两个新品种（Ｆ＿１）洪番１，２号及对照早丰、郑州８５３、西粉三号等品种（系）进行接种试验，结果表明：番茄不同品种对青枯病的抗性有很大差异，其中洪番２号和１号抗病性较强，其病情指数分别为１４．２和２０．０．经方差分析，多重比较ＬＳＤ测验，洪番１号与２号之间的差异性显著；洪番１号和２号与早丰、郑州８５３和西粉三号的病情指数均达到极显著差异。     

欧亚种葡萄（Vitis vinifera）品种的自交和杂交后代对霜霉病（Plasmopara viticola）抗性的分析

通过温室幼苗接种鉴定、田间自然鉴定的方法,研究了几个欧亚种葡萄品种的自交和杂交后代群体的霜霉病感病性及其分布。研究结果表明,即使利用感病的欧亚种葡萄品种进行自交或杂交,在其后代群体中也能出现一些抗病单株,虽然它们的比例较少;后代群体中抗病植株的比例与亲本的感病性呈反相关。温室幼苗接种鉴定结果与田间自然鉴定结果存在着高度的一致性;叶片抗病性与果穗抗病性呈正相关。本文对利用欧亚种葡萄品种间霜霉病感病性的差异进行优质抗病育种途径进行了探讨。     

番茄青枯病的抗性遗传研究

以不同抗青枯病水平的番茄品种（品系）进行５×５双列杂交的遗传分析表明，番茄对青枯病的抗性至少由３对基因控制；在抗性遗传效应中，加性成分占主导地位；广义遗传力为９７．０％，狭义遗传力为６９．０％；抗病对感病为不完全显性；湘引和亚鲜具较多的正效基因，对于加强它们杂交后代的抗性水平有较高的一般配合力。，区组间Ｆ＝２．１１０，表明５×５完全双列杂交的２５个遗传型间Ｑ值差异很显著。可作进一步分析。２．１协方差（Ｗｒ）对方差（Ｖｒ）的回归分析５个亲本家系的方差（Ｖｒ）及各亲本家系Ｆ１与其轮回亲本间的协方差（Ｗｒ）列于表２。据表２的资料，求得Ｗｒ随Ｖｒ的回归直线为Ｗｒ＝０．３４＋０．９５Ｖｒ，回归系数ｂ＝０．９５，达到极显著水平，很接近Ｈａｙｍａｎ模型中的回归系数期望值Ｂ，表明本研究符合Ｈａｙｍａｎ模型。以Ｗｒ为纵坐标．Ｖｒ为横坐标，作回归直线Ｗｒ＝０．３４＋０．９５Ｖｒ及抛物线Ｗｒ＝为亲本的表现型方差，其值为１８．５），该抛物线为限制各亲本家系的（Ｗｒ，Ｖｒ）点可能出现的区域，它给出了任何Ｖｒ，Ｗｒ的最大值（图１）。２．１．１各亲本的基因分布沿着回归直线，携带最多正效基因的亲本最接近原点，携带最多负效基因的亲本离原点最     

烟草不同生育阶段对黄瓜花叶病毒侵染的表现

为了探索烟草不同生育阶段对CMV的侵染反应、为防治烟草黄瓜花叶病提供理论依据。1984～1986年对不同生育阶段的烟草品种“Speight G28”、“Nc89”、“中烟15”以CMV接种。观察其侵染和发病情况及对各个器官和产量的影响、试验结果指出:3个品种从大十字期至现蕾期对CMV的侵染无抵抗能力,但各生育阶段的耐病性存在明显差异。SpeightG28,中烟15自大十字期至50天属于感病阶段、50天后属于耐病阶段。“Nc89”前40天属于感病阶段。在感病阶段中、前两个品种又有两个高峰期、分别为从大十字期至第10天和第40天左右、“Nc89”为第10天和第40天。第一次高峰尤为严重、病情指数可达80以上、产量降低35%左右、潜育期短13～15天、推迟现蕾期30～50天、个别植株不能现蕾。耐病阶段病情指数低于40以下,产量降低10%左右。植株的感、耐现象与体内的蛋白质、总糖的含量有密切的关系。     

侵染西洋芹菜的黄瓜花叶病毒及品种抗病性测定

1987～1989年,从田间采集病害样本55个,根据鉴别寄主和血清学反应的结果,黄瓜花叶病毒(CMV)占样本总数的66.45％,是危害西洋芹菜的主要毒源。代表分离物Ce-20的各种性状与典型的黄瓜花叶病毒相似。苗期抗病性测定表明,在7个西洋芹菜品种、意大利冬芹和南京本地芹菜中,未发现对黄瓜花叶病毒的免疫和高抗品种,其中西洋芹84-3和84-6两个品种比较耐病,意大利冬芹较为抗病。     

用早疫病菌粗毒素在种子发芽期鉴定番茄品种的抗病性

对８个番茄品种分别在种子发芽期用番茄早疫病粗毒素和在苗期用病原菌孢子人工接种进行了抗性鉴定和抗性植株筛选。结果表明，不同番茄品种对粗毒素的抗性与对病原菌的抗病性明显相关，用粗毒素鉴定的成活率与用病原菌孢子接种鉴定的病情指数的相关系数为ｒ＝－０．８４５，其绝对值大于ｒ０．０１＝０．８３４，达极显著水平。用粗毒素筛选出的抗性植株经人工接种病原菌孢子进行抗病性鉴定表明均属抗病。因此，可用致病毒素在种子发芽期进行抗病性鉴定和抗病植株的筛选。     

转基因水稻抗纹枯病性的杂种优势与配合力

用2个雄性不育系和5个转几丁质酶基因抗病品系按NCTI设计配制10个杂交组合,研究了转基因杂交水稻的杂种优势和配合力效应。结果表明,转基因水稻各抗性指标的一般配合力达极显著水平,但一般配合力的高低与其抗病性的强弱并不完全相关,而与其组合抗性呈极显著正相关;转基因杂交稻抗纹枯病性的超亲优势强度小,但组合间抗性差异极显著,病级和病情指数的特殊配合力也达极显著水平;转基因杂交稻抗纹枯病性遗传力高,受加性和非加性遗传共同控制,以加性遗传较为重要,源于转基因父本的加性效应明显高于不育系母本的加性效应。转基因水稻E14-1和Pin4具有较好的一般配合力效应,在抗病育种中有较大的利用价值;杂交组合Hai 3S／Pin 4和GD1／E14-1特殊配合力效应突出,是初步筛选出的优良抗性组合。     

应用DIBA法检测侵染辣椒的TMV与CMV的研究

采用斑点免疫结合法(Dot Immunobinding Assay,DIBA)检测侵染辣椒的TMV与CMV均具有极强的专化性.在可检测的感染叶片的汁液稀释范围内,用TMV与CMV的抗血清分别交叉检测CMV与TMV,均未出现阳性反应.检测感染叶片粗汁液的最高稀释度TMV为1:5 120;CMV为1:2560.利用3种不同封闭系统[TBST,TBST+3%牛血清白蛋白(3%BAs),TBST+3%酪蛋白(3%Casein)]检测,比较结果表明;采用TBST+3%BAS与TBST+3%Casein封闭效果较好:与免疫电镜(ISEM)检测TMV与CMV相比较,DIBA敏感性分别高出15与7倍.     

黄瓜花叶病毒辣椒分离株抗性遗传规律的研究

采用4×4完全双列杂交方法研究了辣椒对黄瓜花叶病毒辣椒分离株(CMV-P)抗性的遗传规律,研究结果表 明,辣椒对CMV-P的抗性至少受4对以上核基因控制,具有数量性状遗传特点;抗性的回交效应显著而正反交效应不显著;辣椒对CMV-P的抗性遗传经检验符合“加性——显性”模型,主要受基因的加性效应影响。群体中抗病基因频率高于感病基因频率。通过自交、回交、系统选择可获得抗病性超亲的系统。抗×感组合的F1代很难获得超亲组合,要获得高抗杂交组合需选双亲都高抗的亲本。