宁夏三个葡萄品种高效再生体系的建立

以宁夏葡萄产业中大量种植的3个葡萄品种为试材建立再生体系.采用花药、茎尖进行愈伤组织诱导,比较了3种葡萄用花药、茎尖培养诱导愈伤组织形成、分化、生根的必须培养条件,获得不定芽分化再生植株.结果表明:葡萄花药愈伤组织形成胚性愈伤组织的能力很低,几乎不能分化成苗;而茎尖愈伤组织形成胚性愈伤组织的能力很高,分化成苗率极高,达100％.B5培养基诱导宁夏葡萄茎尖愈伤组织和分化丛生效果最好;KT有利于愈伤组织分化;茎尖浓度以0.8～1.0 cm最好.     

葡萄试管苗热处理脱毒技术研究

为加快培育葡萄优良品种无病毒苗木,提高脱毒效率,开展了葡萄试管苗热处理脱毒技术研究。将携带葡萄扇叶病毒(GFLV)、葡萄斑点病毒(GFkV)、沙地葡萄茎痘相关病毒(GRSPaV)、葡萄卷叶相关病毒-1(GLRaV-1)和葡萄卷叶相关病毒-2(GLRaV-2)的8个葡萄品种试管苗进行恒温热处理,对分离成活的62个茎尖进行RT-PCR和ELISA检测。结果显示,62个茎尖中,29个茎尖脱除了上述5种病毒,葡萄卷叶相关病毒-1、葡萄斑点病毒、葡萄扇叶病毒、葡萄卷叶相关病毒-2和沙地葡萄茎痘病毒的脱毒率分别为81.8%、80.0%、78.1%、75.0%和61.5%。采用试管苗热处理结合茎尖培养方法可获得良好的脱毒效果,适用于葡萄无病毒原种母本树的培育。     

葡萄组织培养快速繁殖及微茎尖培养研究

通过对葡萄组织培养快速繁殖和微茎尖培养的接种、继代繁殖、生根及移栽等关键技术的研究,筛选出适于多种品种生长的广潜培养基.采用价格便宜的化学试剂等代用品配制培养基,使其成本降低46.3%至58.2%.其茎段培养方法已应用于繁殖珍贵的葡萄品种苗木,微茎尖培养将为培育无病毒苗提供技术准备.     

葡萄组织培养快速繁殖及微茎尖培养研究

通过对葡萄组织培养快速繁殖和微茎尖培养的接种、继代繁殖、生根及移栽等关键技术的研究，筛选出适于多种品种生长的广谱培养基。采用价格便宜的化学试剂等代用品配制培养基，使其成本降低46.3%至58.2%。其茎段培养方法已应用于繁殖珍贵的葡萄品种苗木，微茎尖培养将为培育无病毒苗提供技术准备。     

果树通过茎尖培养无病毒苗

果树等木本植物茎尖培养的研究比草本植物要晚,在60年代开始,70年代有所进展。近几年才逐渐应用到苹果、悬钩子、樱桃、葡萄上。木本植物茎尖培养比较困难,其原因很多,但最主要的原因是未能掌握茎尖对养分的需求,特别是对激素的需求。     

用茎尖观察葡萄染色体

我们以葡萄茎尖为试材,卡宝品红染色,采用常规压片对葡萄染色体进行了观察。认为茎尖取材容易方便,只要在适于葡萄生长的条件下切取茎尖制片,分裂相多,效果很好。现将其实验方法介绍如下。     

“巨峰”葡萄热处理茎尖培养技术研究

以"巨峰"葡萄为试材,经热处理后取其茎尖进行离体培养,通过调整激素的种类和浓度,筛选出了适宜"巨峰"葡萄茎尖分化和生根的培养基;通过对不同移栽基质的研究,筛选出了移栽成活率较高的基质配方。结果表明:38℃热处理时葡萄苗发芽率最高,可达86.67%;以GS为基本培养基,附加BA 0.5mg/L与NAA 0.1mg/L,最适宜于"巨峰"葡萄茎尖分化成苗,分化率可达70.00%;生根培养基以GS+IBA 0.06mg/L的生根率最高。适宜"巨峰"葡萄茎尖组培苗移栽的基质为河沙1份+水苔1份。     

葡萄茎尖培养

<正> 葡萄茎尖培养莫雷尔(Morel,G.)在1960年初次试验成功;乔纳和韦布(Jona,R.,Webb,K.J.)在1978年利用“雷司令·西万尼”的茎尖培养成小植株;巴拉斯和斯基恩(Barlass,M.,Skene,K.G.M.)在1978年利用赤霞珠的茎尖培养出不定芽,并获得大量的幼茎。     

培养因子对葡萄茎尖丛生芽诱导的影响初探

葡萄茎尖培养无毒苗不仅加快优良品种的繁殖和推广速度,且为发展无病毒试管苗开辟了新途径.     

‘阳光玫瑰’葡萄试管苗热处理结合茎尖和腋芽培养脱毒技术研究

为进一步优化葡萄试管苗脱毒体系,以携带葡萄蚕豆萎蔫病毒（GFabV）、沙地葡萄茎痘相关病毒（GRSPaV）、葡萄灰比诺病毒（GPGV）、葡萄卷叶相关病毒–3(GLRaV-3)和葡萄病毒E(GVE)共5种病毒的‘阳光玫瑰’葡萄试管苗为材料,研究了热处理方式和时间以及热处理后茎尖和腋芽培养对脱毒的影响。结果表明,热处理方式影响试管苗的存活率和脱毒效率,以38℃/光照8 h+32℃/黑暗8 h变温处理效果最佳,其次为38℃/光照16 h+32℃/黑暗8 h变温处理以及38℃恒温/（光照16 h+黑暗8 h）处理。取38℃/光照8 h+32℃/黑暗8 h热处理10、15、20、25、30和40 d的试管苗1.5 mm左右的茎尖和茎尖下第1、2腋芽接种培养,茎尖存活率高于腋芽,繁殖成苗后检测,均脱除了上述5种病毒,其中热处理10 d的平均脱毒率为52.38%,25和30 d的脱毒率均达100%;随热处理时间延长,接种茎尖和腋芽的存活率下降,故热处理时间以25 d为宜。     

葡萄组织培养快速繁殖体系研究

以葡萄茎尖、茎段、叶柄、根尖为外植体,对葡萄外植体的选择、愈伤诱导、茎叶分化苗、不定根诱导及试管苗的练苗移栽过程进行研究。结果表明:外植体以茎尖为最佳,茎尖愈伤诱导最适培养基:l/2MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 0.10 mg/L,诱导率达95%;茎叶分化以1/2MS+6-BA 1.5 mg/L+IBA 0.10 mg/L,分化率达100%;生根培养以1/2MS+IBA 1.0 mg/L为佳,生根率达90.3%。     

环境因子对葡萄试管苗移栽成活率影响的观察

<正> 近年来,国内在葡萄离体繁殖技术方面开展了不少研究,并取得明显进展。刘培德等(1984)报道了葡萄茎尖培养,曹孜义等(1979)报道了葡萄试管苗快速繁殖技术,为葡萄快速繁殖提出了一套     

山葡萄茎尖、无芽茎片、花穗柄诱导成苗

为了高倍繁殖山葡萄优质苗木,我们对山葡萄茎尖、无芽茎片、花穗柄、叶柄、叶、卷须等进行了组织培养。通过两年试验,在调整部分营养成分的 MS、B5培养基中诱导出山葡萄茎尖苗、无茅茎片苗、花穗柄苗。叶、叶柄、卷须只诱导出愈伤组织,没有出苗。试验证明,山葡萄管苗由试管到田间必须经过几个过渡,成活率才高。     

西伯利亚百合脱毒技术研究

运用茎尖培养、热处理结合茎尖培养、病毒唑结合茎尖培养、热处理加病毒唑结合茎尖培养4种方法,脱除西伯利亚百合品种CMV、LSV和LMoV病毒,分析了4种处理后的成苗率和脱毒率。结果表明：以热处理加病毒唑结合茎尖培养法效果最为明显。     

‘阳光玫瑰’葡萄组培脱毒快繁技术研究

【目的】培育‘阳光玫瑰’葡萄组培脱毒苗木,初步建立‘阳光玫瑰’葡萄组培脱毒快繁技术体系。【方法】采用MS为基本培养基,以植物生长调节剂6-BA、NAA和IBA为变量,接种后‘阳光玫瑰’葡萄组培苗的生长状况为因变量;通过热处理结合茎尖培养技术,在32℃预热处理7 d,再逐渐升温至37℃热处理30 d后,剥取茎尖进行培养,待获得完整植株时,利用RT-PCR检测方法对‘阳光玫瑰’葡萄组培苗进行病毒检测。【结果】‘阳光玫瑰’葡萄嫩茎段外植体经75%乙醇30 s+0.1%氯化汞8 min处理,外植体的污染率和褐化率最低;经消毒灭菌的外植体接种到添加含有6-BA和NAA的MS培养基上诱导萌发,在1.5 mg·L~(-1)6-BA和0.2 mg·L~(-1)NAA的培养基上萌芽率最高;将启动培养获得的无菌新芽,接种到含有6-BA和NAA的MS培养基中进行继代培养,在1.0 mg·L~(-1)6-BA+0.1 mg·L~(-1)NAA的培养基中单芽增殖效果最明显;把继代培养中生长健壮的单芽切下,转入添加IBA和NAA的1/2 MS培养基中进行生根培养,在添加0.4 mg·L~(-1)IBA和0.2 mg·L~(-1)NAA的1/2 MS培养基上生根效果最佳;采用热处理结合茎尖培养进行‘阳光玫瑰’葡萄组培苗的脱毒处理,热处理植株的成活率为78%,茎尖成活率为60%,经检测,再生植株不带葡萄卷叶病毒1(GLRaV-1)、葡萄卷叶病毒3(GLRaV-3)、葡萄病毒A(GVA)、葡萄斑点病毒(GFkV)、葡萄扇叶病毒(GFLV)。【结论】初步建立了‘阳光玫瑰’葡萄组培脱毒快繁技术体系,为‘阳光玫瑰’葡萄组培脱毒苗的工厂化生产提供了技术支撑。     

西伯利亚百合脱霉技术研究

运用茎尖培养、热处理结合茎尖培养、病毒唑结合茎尖培养、热处理加病毒唑结合茎尖培养4种方法,脱除西伯利亚百合品种CMV、LSV和LMoV病毒,分析了4种处理后的成苗率和脱毒率.结果表明:以热处理加病毒唑结合茎尖培养法效果最为明显.     

草莓茎尖培养脱毒效果研究

以草莓"丰香"品种为材料,利用匍匐茎剥取茎尖,以茎尖培养结合改良热处理、冷处理、二次脱毒等方法来进行草莓脱毒研究,用电镜及野生草莓小叶嫁接法进行鉴定,结果表明,草莓脱毒效果与剥取的茎尖大小有关,茎尖越小,脱毒效果越好.以0.5mm(毫米)大小剥取茎尖,直接剥取茎尖法不能够彻底清除病毒,而二次脱毒法、改良热处理 茎尖培养法、冷处理 茎尖培养法等获得的植株都没有检测到病毒,脱毒效果良好.其中改良热处理 茎尖培养法的茎尖成活率最高,达47.37%.因此最适宜的脱毒法为改良热处理 茎尖培养法,即先将草莓匍匐茎放在40℃热水中处理4h(小时),再剥取≤0.5mm(毫米)大小的茎尖进行培养,脱毒效果良好.     

茎尖培养等处理脱除梨病毒的技术研究

以梨茎尖培养、热处理＋茎尖培养、试管苗热处理＋茎尖培养３个处理，对适于北方栽培的３个梨矮化砧和７个梨品种进行脱除茎沟病毒和褪绿叶斑病毒试验。经１９９３—１９９５年对３个处理的试管苗用室内血清快速诊断法检测表明，茎沟病毒和褪绿叶斑病毒的平均脱除率，茎尖培养处理分别为７８．１％和９５．０％，热处理＋茎尖培养和试管苗热处理＋茎尖培养两个处理均为１００％。较详细叙述分析了茎尖培养技术及其效应。还讨论了３个脱除病毒处理的优缺点。     

广西葡萄良种脱毒研究进展

建立葡萄脱毒技术及繁育和推广葡萄良种脱毒苗木,对于广西葡萄产业的健康可持续发展极为重要。本研究团队在广西率先开展了葡萄脱毒技术研究,目前已建立了10种葡萄主要病毒的RT-PCR检测方法,并建立了热处理结合茎尖培养的葡萄脱毒技术,且已成功对"阳光玫瑰""夏黑"和"巨峰"3个葡萄优良品种的带毒单株进行了脱毒。研究成果有助于进一步推动广西葡萄产业的健康可持续发展。     

果树茎尖离体微型嫁接

近十几年来,随着果树组织培养技术的发展,逐渐兴起了离体微型嫁接技术。所谓茎尖离体微型嫁接,是从田间或组织培养的新梢上切取大小为1mm之内的茎尖作接穗,在离体条件下嫁接在培养基中培养的实生幼砧上并培养成苗的技术。目前,在柑桔类、苹果、桃、杏、李、樱桃和葡萄等果树上都已成功。西班牙、美国等国已将此技术应用