家蚕无性繁殖性状的基因效应分析

利用世代平均值分析的多元回归程序，分析了家蚕无性繁殖性状的基因效应。结果表明，各世代间无性繁殖发生率水平存在显著差异，无性繁殖性状符合加性－显性遗传模型，表现为部分显性遗传，主要受加性效应所控制，显性效应比例较小，不存在上位效应。     

关于家蚕夏秋蚕抗病品种选育的几个问题

近几年来,由于蚕病蔓延而造成的損失是很大的,特别是夏秋蚕期較为严重。蚕病的发生,与蚕品种抗病力强弱,飼养的环境条件及病原体的传染都有密切的关系。脓病包括血液型和胃腸型,它的病原是病毒。軟化病近年来以空头性症状的居多,据中国农业科学院蚕业研究所从一九五九年以来连续     

单细胞蛋白的研究——Ⅰ.高蛋白酵母菌的选育

1984～1986年研究了单细胞蛋白,结果如下:1.经紫外线诱变,选育的117号酵母(Candida utilis)和136号酵母(Candida troPiealis)含蛋白质分别为干重的60.49%和53.19%。117号酵母含氨基酸17种,其中赖氨酸1113.04mg/100g,苏氨酸1088.40mg/100g和蛋氨酸478.44mg/100g,且具有繁殖快,耐酸性,生产性能稳定,适合用酒糟生产蛋白饲料。安检试验蛋白饲料合格。2 接种117号酵母生产酒糟蛋白饲料,大米酒糟和高粱酒糟含蛋白质分别为24.1%和25.8%。用117号酵母生产酒糟蛋白饲料,应在原料中增加氮和磷,氮源以(NH_4)_2SO_4较好,培养周期为14小时。如果同时接种白地霉(Geotrichum Candidum)还可提高蛋白质产量。     

家蚕凋亡相关基因ice的克隆及在大肠杆菌中的表达

ICE(白细胞介素-1β转换酶)是caspase家族 (半胱氨酸天门冬氨酸蛋白酶cys-teinylaspartate specific proteinase)中最早发现的成员,在多细胞生物细胞凋亡的过程中起着重要作用.为了深入了解模式昆虫家蚕ICE在凋亡通路中的作用,采用紫外线刺激家蚕细胞,PCR克隆获得2个新的ice基因不同剪切体,分别命名为ice-2和ice-5(GenBank登录号:DQ360829和DQ360830),并将这2个剪切体分别克隆进原核表达载体pET28a中,在大肠杆菌中诱导表达,对表达产物进行了检测,结果显示ICE-2和ICE-5蛋白表达过程中能发生自我剪切.     

家蚕BmHsp19.5基因的鉴定及在滞育卵中的表达分析

基于前期转录组学研究结果,从家蚕滞育卵和发育蚕卵中筛选出差异表达基因家蚕BmHsp19.5.为了进一步了解该基因的序列信息、表达特征以及在家蚕卵滞育过程中的功能,本文采用基因克隆、生物信息学方法以及qPCR检测等技术手段对该基因进行分析.结果表明:家蚕BmHsp19.5基因的ORF(open reading frame)框全长504 bp,共编码167个氨基酸,其蛋白的理论相对分子质量为1.95×10⁴.该蛋白65-157位氨基酸为Hsp20功能结构域,符合小热激蛋白家族结构特征.该基因在滞育卵和非滞育卵中表达量存在显著差异,在滞育卵中呈上调表达,且在第3 d达到最大值,推测该基因与滞育过程有关,可能在家蚕滞育进入时发挥了重要作用.     

魔芋杂交新品种选育的研究——Ⅰ. 魔芋的杂交技术

l987～1990年通过对花魔芋、东川魔芋,白魔芋3个魔芋种的种间和种内杂交试验,结果表明,花魔芋,东川魔芋,白魔芋是雌蕊先熟型异花授粉作物,在附属器释放微臭气味时,雄蕊成熟散粉前1～5d进行种内和种间人工授粉,结实率可达100%。花魔芋是完全自交不育,白魔芋的人工自交可育率很低。     

荧光茧色判性家蚕黄酮合酶Ⅰ（BmFNS Ⅰ）基因在家蚕组织内的表达差异

采用荧光定量PCR分别检测不同品种荧光判性家蚕雌、雄家蚕的中肠、丝腺和脂肪体中的黄酮合酶I（BmFNS I）基因的表达。结果表明,家蚕BmFNS I基因在各品种荧光判性家蚕中肠中的相对表达量最高,其次是脂肪体,在丝腺中的表达量较低,说明BmFNSI基因在对家蚕食物桑叶内的黄酮类化合物的合成代谢中起重要作用;但是在各品种荧光判性家蚕的雌、雄中肠中的表达并无明显差异,说明荧光判性家蚕雌、雄蚕在对桑叶内的黄酮类化合物的合成代谢途径上不存在差异,至少在FNS I基因所调节的黄酮类化合物的合成代谢上不存在差异。     

荧光茧色判性家蚕黄酮合酶Ⅰ（BmFNS Ⅰ）基因在家蚕组织内的表达差异

采用荧光定量PCR分别检测不同品种荧光判性家蚕雌、雄家蚕的中肠、丝腺和脂肪体中的黄酮合酶Ⅰ（BmFNS Ⅰ）基因的表达。结果表明,家蚕BmFNSI基因在各品种荧光判性家蚕中肠中的相对表达量最高,其次是脂肪体,在丝腺中的表达量比较低,说明BmFNSI基因在对家蚕食物桑叶内的黄酮类化合物的合成代谢中起重要作用;但是在各品种荧光判性家蚕的雌、雄中肠中的表达并无明显差异,说明荧光判性家蚕雌、雄蚕在对桑叶内的黄酮类化合物的合成代谢途径上不存在差异,至少在FNSI基因所调节的黄酮类化合物的合成代谢上不存在差异。     

外源DNA诱导家蚕遗传变异的研究

以１５个经济性状较好的家蚕品种为受体、４个蓖麻蚕品种的丝腺体ＤＮＡ及含抗菌肽的质粒ＤＮＡ为供体，采用注射处女蛾交尾囊的方法，以及取腹卵浸泡ＤＮＡ后再孤雌生殖的方法进行导入。     

变青链霉菌DNA的研究——Ⅰ.电泳过程中的特异性降解

变青链霉菌基因组DNA和质粒DNA在某些特定批号的电泳缓冲液中电泳时,双链DNA遭到很强的降解。变青链霉菌基因组DNA受到有限切割而产生的DNA片段的平均大小为6kb左右。天兰色链霉菌A3(2)和好几种其它链霉菌菌株的DNA,以及大肠杆菌的DNA在同样条件下并不受这种切割的影响。已经证明,这种特异性对变青链霉菌DNA的切割不是由于缓冲液中污染了微生物,进而产生核酸酶所致,而是由于某些批号的EDTA商品中污染了Fe~(2+)所致。变青链霉菌中DNA制备物“较差”的许多报道可能都是上述原因所致。     

DNA催化活性的研究：Ⅰ.裸露DNA分解萘酯活性的检测

将小麦、鲤鱼和λ－噬菌体的裸露ＤＮＡ溶液分别与萘酯－固蓝染色液混合温浴，检测出ＤＮＡ分解萘酯的活性，支持了王身立等关于绿豆ＤＮＡ具有分解萘酯活性的发现，讨论了ＤＮＡ催化活性检测的有关问题及ＤＮＡ催化活性研究的重要意义     

修饰的B.t.k-δ-内毒素基因在大肠杆菌及烟草中表达的抗虫性

利用合成的寡聚核苷酸引物及 PCR 扩增技术对 B.t.k-δ-内毒素基因进行了克隆和修饰。在大肠杆菌中表达的抗虫试验表明该修饰过的 B.t.k-δ-内毒素基因对鳞翅目昆虫如烟青虫和棉铃虫有较强的毒杀作用。随后,通过农杆菌介导将该基因转入烟草,RNA 点杂交及抗虫试验表明 Bt 基因在烟草中得到表达,其表达水平足以防治烟青虫的为害。     

玉米DNA拓扑异构酶Ⅰ基因片段的克隆

采用同源克隆结合cDNA末端快速扩增反应策略,对玉米DNA拓扑异构酶基因Top1片段进行克隆。结果表明:所克隆基因片段编码的氨基酸序列与水稻DNA拓扑异构酶序列具有较高的相似性。Top1在玉米胚乳中表达量最高,在玉米其他组织中也有表达。对玉米自交系1145 BAC文库进行筛选,获得了Top1基因的阳性BAC克隆。     

高等植物异源核酸转化研究——Ⅰ.DNA分离纯化方法比较试验

在普通实验室设备条件下,采用氯仿—异戊醇—琼脂糖分子筛(Sepharose—4B)法从紫菜苔叶片、花荚和幼苗分离总 DNA,方法简便,一天内即可完成。根据化学分析和紫外吸收、增色效应等物理特性测定,以及电泳行为观察,认为所得到的 DNA 的纯度不低于其他方法,并在一定程度上保持了大分子的天然状态,基本上符合转化试验要求。     

转基因技术在家蚕品种选育上的应用

本文介绍了家蚕转基因方法,综述了国内外转基因技术在家蚕新品种选育上的研究和应用,指出转基因技术是家蚕品种选育的重要途径.     

表达大肠杆菌耐热性肠毒素Ⅰ融合蛋白工程菌株的免疫原性研究

对已构建的重组质粒ｐＸＳＴ１进行了核苷酸序列分析和免疫原性研究。序列分析结果表明，该粒中含有２个正向串联在一起的ＳＴ１基因，且融合在ＬａｃＺ基因的上游，具有正确的阅读框架。免疫实验结果表明，构建的ＤＨ５α重组菌株安全无毒。