L-半胱氨酸盐酸盐处理延缓香蕉果实采后成熟的初步研究

以"巴西"香蕉为试材,利用0.05%的外源L-半胱氨酸盐酸盐处理,测定常温(24±1)℃贮藏过程中果实硬度、色差、可溶性糖含量及多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)和果胶裂解酶(PL)活性,初步探索L-半胱氨酸盐酸盐处理延缓香蕉果实成熟的机理。结果表明:0.05%L-半胱氨酸盐酸盐处理能够延缓香蕉果实硬度和果皮H值的下降,并减缓果皮L值和C值以及果肉可溶性糖含量的上升,从而保持贮藏品质;同时,通过抑制果皮PPO和POD活性减缓在贮藏后期的褐变,并抑制果肉PL活性推迟香蕉软化进程。因此,0.05%L-半胱氨酸盐酸盐处理可延缓香蕉果实常温贮藏的成熟进程,具有一定的应用价值。     

枣树2-半胱氨酸氧化还原酶基因Zj2-CP的生物信息学分析及表达载体的构建

本研究使用生物信息学相关软件对本课题组前期获得的枣树2-半胱氨酸氧化还原酶基因Zj2-CP(Gen Bank登录号:AB812086)的c DNA序列进行了分析。结果表明:该序列是一个全长为834 bp的开放阅读框,可编码277个氨基酸,分子质量为30.65 k D,理论等电点8.95,无信号肽和跨膜区,不属于分泌蛋白,有亲水性;二级结构以无规则卷曲为主,三级结构成弯曲螺旋状。氨基酸序列相似性分析表明,Zj2-CP基因编码的氨基酸序列与豇豆、玉米氨基酸序列的同源性最高,达到90%。以Zj2-CP基因的c DNA序列为模板进行PCR扩增,用内切酶消化后与载体PEZR(K)-LNY连接并转入大肠杆菌感受态细胞DH5α中,经酶切及测序证明,植物表达载体构建成功。研究结果可为深入探讨枣树2-半胱氨酸氧化还原酶基因的功能及枣树抗逆机制提供基础。     

牛奶中β-内酰胺酶半定量快速检测试纸的研究

青霉素经β-内酰胺酶分解得到的产物青霉噻唑酸具有还原性,与亚铜试剂发生络合反应生成紫红色络合物,在一定范围内络合物的颜色深浅与β-内酰胺酶的量呈线性关系。将醋酸纤维素膜(CA)作为显色层放在亚铜试剂(2.5%2,2'-联喹啉乙醇溶液与0.2 mol/LCuSO_4溶液均匀混合)中浸泡10 min,进行显色反应,45℃下真空干燥30 min,制得β-内酰胺酶半定量快速检测试纸;配制β-内酰胺酶标准品溶液0~250 U/m L(0,6,12,25,50,100,150,200,250 U/m L),在显色层进行显色反应后,利用分光测色仪测定不同梯度下的颜色,得到L*值,a*值和b*值,并应用色彩模块软件进行模拟,按照β-内酰胺酶标准液的浓度梯度进行排列、粘贴,制成β-内酰胺酶标准比色卡。通过试验得出β-内酰胺酶在牛奶样品中最低检出限为6 U/m L,相对误差范围7.51%~15.38%。β-内酰胺酶半定量快速检测试纸具有快速、操作简单、经济实用、易于普及和现场测定的优点。     

L-α-氨基酸-铜(Ⅱ)-邻菲咯啉型SOD模拟物活性及对玉米幼苗抗盐害作用的影响

[研究目的]试验旨在研究新型超氧化物歧化酶模拟化合物,这些模拟物具有较高的SOD活性且有助于提高作物抗逆作用.[方法]用改进的氯化硝基四氮唑蓝(NBT)光还原法测定了两个L-α-氨基酸-铜(Ⅱ)-邻菲咯啉型SOD模拟物[Cu(Phen)(L-Met)(H2O)]Cl·2H2O(1)和[Cu(Phcn)(L-Lcu)(H2O)]Cl·2.5H2O(1)(L-Met=L-蛋氨酸,L-Leu=L-亮氨酸,Phen=1,10-邻菲咯啉)催化歧化超氧阴离子自由基(O2·-)的活性并研究了模拟物在中度盐害的情况下对玉米幼苗抗盐害作用的影响.[结果]结果表明这些模拟物具有较高的SOD活性,在10-7～10-8mol/L1浓度范围内对NBT光还原速率均能达到50%以上的抑制率.在中度盐害的情况下,用这些模拟物对玉米浸种,八叶期后对幼苗的生理生化指标进行检测,发现生物量提高了31.95%～39.34%(鲜重)和32.12%～48.76%)(干重),叶绿素含量提高了3.25%～8.52%,体内SOD活性提高了37.78%～46.99%.[结论]这些SOD模拟物能有效抑制玉米幼苗所受的盐害胁迫作用.