鲅鱼加工副产物水解液中ACE抑制肽分离纯化研究

以鲅鱼加工副产物为原料,经脱脂后进行碱性蛋白酶酶解,分离纯化具有ACE抑制活性的小肽。水解液经超滤、离子交换层析、凝胶过滤层析和反相高效液相色谱等逐级纯化,得到较纯的ACE抑制肽。结果表明,分子量小于3 kDa的超滤组分IV具有最高的ACE抑制活性,达45.6%;超滤高活性组分进一步经DEAE-Sepharodse FF阴离子交换层析分离,得到3个组分,其中组分A2活性最高,ACE的抑制率达50.3%;A2组分继而经Sephacryl S-100HR凝胶过滤层析分离,得到2个组分,其中B2组分ACE抑制率达83.4%;最后,B2组分经反相高效液相色谱进行分离,得到活性更高的C2组分,为下一步氨基酸序列测定提供了基础。     

虎奶菇菌核多糖SHNP的分离纯化及形貌观测

利用DEAE-52纤维素柱层析和Sephadex G-1500凝胶柱层分离纯化热水浸提的虎奶菇菌核多糖,得到组分SHNP。利用紫外分光光度计和高效液相色谱鉴定其纯度,高效液相色谱测其分子量,气相色谱法进行单糖组成分析,环境扫描电镜观测了其分子形貌。结果显示, SHNP的分子量为1.463×106 Da,为只含葡萄糖的大分子葡聚糖,环境扫描电镜显示SHNP固体聚集体表面形貌较为规则、平整光滑且呈现排列紧密的片状和杆柱状结构。     

茶叶二氢黄酮醇还原酶/无色花青素还原酶反应产物的快速检测方法研究

利用薄层层析方法对儿茶素合成途径中的二氢黄酮醇还原酶/无色花青素还原酶促反应产物儿茶素C进行初步分离,用香草醛显色法进一步定量。以建立该酶促反应产物的快速检测方法。采用薄层层析方法,对薄层层析展开剂配方、及薄层分离产物均进行了研究。该方法检测波长为500nm,展开剂最优配方甲醇：乙酸乙酯：甲酸=8：8：1.5,层析分离所得显色产物为儿茶素C。以儿茶素C为标样,线性范围为50～500μg/ml,加标回收率为91.0%～93.0%之间,RSD为3.39%。建立了薄层层析与香草醛比色法结合检测儿茶素C含量的体系,该体系能够快速测定茶叶中DFR/LAR酶反应产物的含量。     

海带褐藻糖胶的分离纯化及其抗氧化活性测定

为更好地开发海带资源,分别采用DEAE-Sepharose FF弱阴离子交换柱层析、高效液相凝胶色谱对海带褐藻糖胶粗品进行分离纯化,结果表明,2种方法均可用于褐藻糖胶的分离,均分离出3个组分,离子交换层析分离出的组分命名为D-1,D-2,D-3。高效液相凝胶色谱分离的3种组分命名为H-1,H-2,H-3,其分子量分别为193.148,74.407,44.452 kD。对D-1,D-2,D-33种组分进行抗氧化活性测定,3种组分对DPPH自由基和·OH均表现出一定的清除能力,且分子量越小,清除自由基能力越强,体外抗氧化活性越好。     

丁香杀螨活性成分的追踪分离纯化与结构鉴定

采用部位提取、硅胶柱层析分离和薄层层析纯化,经体外杀灭家兔痒螨的活性检测,对丁香(Eu鄄geniacaryophyllataThunb)花蕾中的高效杀螨活性成分进行了追踪分离纯化,并进一步经理化性质、紫外光谱和红外光谱分析及与对照品活性比较进行结构鉴定。结果表明,丁香的高效杀螨活性成分主要存在于石油醚部位提取物中,其50%浓度体外杀死全部供试螨的平均时间为20min,柱层析和薄层层析分离纯化得到一种黄色油状化合物III,其50%浓度体外杀死全部供试螨的平均时间仅12min,化合物III的理化性质、紫外光谱、红外光谱及杀螨活性与丁香酚对照品完全一致,丁香酚为丁香的高效杀螨活性成分。     

青稞提取物溶解性及分子量分布研究

采用沉淀法和指标成分溶解量法,分析青稞提取物在不同溶剂中的溶解率和β-葡聚糖的溶解量;采用高效凝胶排阻色谱法测定青稞醇不溶物和醇溶物中β-葡聚糖的分子量分布情况。结果表明,青稞提取物在水和10%乙醇中有较好的溶解性,乙醇体积分数越高溶解性越差,几乎不溶。青稞醇不溶物中β-葡聚糖分子量分布主要在6万～20万Da;青稞醇溶物中不同溶剂里的β-葡聚糖分子量分布差异较大。青稞提取物在水和10%乙醇中有较好的溶解性,青稞醇不溶物中β-葡聚糖分子量分布在6万～20万Da,青稞醇溶物分子量分布在1万～20万Da,为青稞提取物应用提供借鉴意义。     

稻谷、大米中甲基1605残留量的测定(薄层层析法)

本文介绍的内容,是参照广州商品检验局“大米中甲基1605及666残留量检定(簿层层析法)”一文的有关部份,进行稻谷、大米测定实践的小结。其中分配提取以石油醚—二甲基亚砜代替己烷一乙睛,展开剂以甲基环己烷一丙酮(4 1)代替己烷一丙酮(9 1)。实践证明,使用薄层层析法测定甲基1605,最低检出量达0.2微克,回收率在80％以上;对稻谷、大米中的残留具有较高的选择性,测定的重现性强,较简速,是半定量法检查稻谷、大米卫生质量的可行方法之一。     

高压液相色谱法分离氨基酸

Stein和Moore发展的利用茚三酮反应和离子交换色谱法是分离和测定氨基酸的标准方法。最近有人提出用荧光测定代替茚三酮反应进行检测,氨基酸则被转化为fluram衍生物。然而,用离子交换色谱法不能充分体现高压液相色谱法的优点,特别是流动相流速高的优点。塑料离子交换微球比固体无机物质易压缩,所以流动相的流速不直接随所加压力而变化。另外,离子交换色谱法所使用的洗脱剂也一不适于极灵敏的荧光检测。为了利用现代高压液相色谱法的优点,在硅胶上进行分离看来较为     

樟芝多糖的分离纯化和抗氧化活性

【研究目的】研究樟芝多糖分离纯化的方法以及其体外抗氧化活性,【研究方法】水浸提樟芝多糖,Sevag法除蛋白,利用sephadexG-200凝胶柱层析进行分离纯化,红外光谱、高效液相色谱测定结构和分子量,并进行樟芝多糖的体外抗氧化试验。【结果】樟芝菌丝体多糖ACP1和樟芝发酵液多糖ACP2多糖含量分别为31.76%和38.09%,提取率分别为1.59%和4.89%,特性粘度为[η]=8.382和[η]=1.999。红外光谱测定表明,ACP1、ACP2具有多糖的特征吸收,并且其糖环为吡喃环。ACP1、ACP2经高效液相色谱GPC柱分离得到三个峰,计算得各组分的数均分子量和重均分子量。利用sephadexG-200凝胶柱层析ACP1和ACP2后各得到2个洗脱主峰ACP1-1和ACP2-1。对ACP1-1和ACP2-1进行纯度鉴定,结果表明两者为均一多糖,超氧自由基的清除率分别达到61.6%和54.7%,【结论】樟芝多糖具有较强的抗氧化能力。     

茶叶中花青甙的研究简报

自伟尔斯塔蒂(Willsatter1913—1916)倡导花青甙的化学以来,迄今已有近70年的历史。对花青甙的分离鉴定,主要是采用纸层析、薄层层析、光谱特性、气相层析及质谱仪等技术,并对花青甙的红色染料生产、食品饮料、萄葡酒生产等方面作了大量的     

黑龙江茴鱼卵黄脂磷蛋白分离纯化及抗血清的研制

采用SephadexG-200凝胶过滤层析法,对黑龙江茴鱼卵黄蛋白粗提液进行分离纯化,层析洗脱共得到3个蛋白峰.用聚丙烯凝胶电泳、免疫扩散等方法研究表明:黑龙江茴鱼卵黄蛋白(Yolk protein)含有分子量分别为567.2,486.3,157.5 kDa的3种蛋白,由分子量分别为80.7,68.7,46.8,39,...     

利用虫体蛋白特异性区分三种象虫

本文报道了利用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）和凝胶渗透液相色谱法（GPC）分别对3种象虫虫体蛋白进行分离分析。初步分析结果表明：凝胶电泳法具有较高的分辨能力，电泳图谱能明显地区分3种象虫；凝胶渗透液相色谱法分析结果无差异，但对3种象虫虫体蛋白的胰蛋白酶水解液的分离结果有明显的区别。     

桔梗多糖的分离纯化与含量测定

利用离子交换凝胶柱层析法分离纯化桔梗多糖,并对纯化组分进行纯度鉴定和糖含量及蛋白质含量测定。桔梗饮片经热水浸提、乙醇分步沉淀得桔梗粗多糖PPS80,Sevage法脱蛋白后,通过DEAE-Sepharose FF离子交换和Sephadex G-75凝胶柱层析进行纯化鉴定。分别采用苯酚-硫酸法和考马斯亮蓝染色法测定纯化后各组分的糖和蛋白质含量。试验结果表明,从桔梗粗多糖PPS80中分离得到2个均一性组分PPS80-I和PPS80-II,糖含量分别为90.32%和86.75%,蛋白质含量分别为0.48%和1.96%。该试验首次采用DEAE-Sepharose FF离子交换柱层析结合Sephadex G-75凝胶柱层析有效分离纯化出桔梗多糖均一性组分,为桔梗多糖的进一步研究提供基础。     

拮抗放线菌RA-2所产抗生素的分离提纯及稳定性研究

拮抗放线菌RA-2发酵液经过乙酸乙酯萃取,浓缩,硅胶GF254薄层层析分离提纯到抗生素。对该抗生素进行不同温度、pH以及UV不同时间照射处理后,测定该抗生素的抑菌活性。试验结果表明：25℃水浴30min,该抗生素的抑菌活性为70.88%,在25-65℃之间,抗生素的抑菌活性与原液的抑菌活性在P〈0.05水平上无显著性差异。不同pH处理后,在pH5-9之间,抗生素具有较强的稳定性。不同UV照射时间的处理后,照射15、45min的抑菌活性与未照射原液的抑菌活性在P〈0.05水平上无显著性差异。拮抗放线菌RA-2所产的抗生素组分单一。硅胶GF薄层层析分离的组分2具有抑菌活性,为35.49%。     

应用薄层层析分离茶中的氨基酸

纸层析与薄层层析是微量物质分析中最常用的枝术,近廿年来,薄层层析的研究报导相应地比纸层析增加较多。甚至有人预言薄层层析将会取代纸层析。在我国、薄层层析的研究开始较晚,在茶叶研究中报导更少。本文应用微晶纤维素薄层层析法分析茶中氨基     

烟曲霉毒素—由烟曲霉产生的新的霉菌素毒

从青贮饲料上分离的烟曲霉的培养物可使鸡胚至死。通过薄层层析可以观察到四种吸收紫外线的物质存在,这些物质分别定名为烟曲霉毒素(Fumitoxin)A、B、C、D。这些毒素都己被分离,结晶烟曲霉毒素A是提取物中最多的。本文也主要论述烟曲霉毒素A的分离和部分特征,它完全不同于以前报道的在烟曲霉中所见的毒素。     

短波紫外线诱导采后番茄苯丙氨酸解氨酶的分离纯化

以番茄为试材,经2.4kJ/m2短波紫外线(UV-C)照射,取果皮经冰浴研磨、硫酸铵分级沉淀、凝胶过滤和离子交换层析,分离纯化苯丙氨酸解氨酶。经测定,紫外照射组PAL活性为81.0U/mL,比对照组高5U/mL,分离纯化倍数为16.4倍,纯化获得的酶经SDS—聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,其亚基分子量约为76kD。     

芒果苷的分离纯化及鉴定研究

优化由芒果皮和叶中提取芒果苷的分离纯化条件并对其进行鉴定。采用紫外分光光度法对芒果苷进行定量分析。不同的大孔树脂对芒果苷粗提液进行分离纯化,并利用薄层层析法对芒果苷进行定性分析。结果表明,供试的3种大孔树脂中D101型大孔树脂吸附、解析效果最优,70%乙醇对于芒果苷的洗脱效果最好。纯化后芒果皮和叶的芒果苷含量分别为1.537,1.981 mg/m L,与纯化前相比分别提高了1.43倍,1.51倍。纯化后的芒果苷薄层层析的谱带与芒果苷标准品的相符合。     

纳豆中γ-PGA的分离纯化和鉴定

采用野生和诱变的纳豆枯草芽孢杆菌菌株,经固体发酵生产γ-PGA,比较了得率和纯度的差异。通过乙醇沉淀、离心和真空冷冻干燥方法对γ-PGA进行分离纯化,并采用薄层层析的方法鉴定,选择不同分配剂的配比和不同的载体,获得了最佳层析步骤。     

绿豆渣ACE抑制肽的纯化鉴定及构效关系初探

以绿豆淀粉生产副产物中的绿豆渣为原料,酶解制备血管紧张素转换酶(Angiotensin converting enzyme,ACE)抑制肽。采用超滤法、凝胶层析色谱法、反相高效液相色谱法进行分离纯化,对分离出的高活性组分进行二级质谱结构鉴定。结果表明,在绿豆渣中能分离出3条具有ACE抑制活性的肽链,分别为FLVNPDDNENL,FLVNPDDNENLRII,KDNVISEIPTEVLDL,并对构效关系进行分析。