草莓主栽品种丰香高效离体再生体系的研究

以目前国内草莓主栽品种丰香为试材，研究影响不定芽再生的各种因素，以建立简单、快速、高效的叶片离体再生体系。结果表明，对某一特定的基因型来说，外植体类型和外源激家种类对其再生芽的发生频率和数量都有明显的影响。TDZ对芽再生的效果明显比BA强。丰香叶片在LS TDZ2.0mg/L 2,4-D0.1mg/L IBA0.2mg/L的分化培养基上再生频率可稳定在46％～52％，平均每叶片再生芽数为1．6～2．2，10～28天叶龄的叶片再生能力较高。     

草莓叶片再生体系的建立

以广西草莓的主栽品种丰香无菌苗的叶片为外植体，接种在一系列改良MS培养基上进行培养。实验结果表明：丰香在MS TDZ 2．0mg／L IAA 0．25mg／L培养基培养时，叶片再生频率达到88％以上，适合于进行遗传转化研究。     

草莓高效离体再生体系的研究

以丰香和章姬叶片为试材．研究影响小定芽再生的诸多因素,以建立简单,快速、高效的叶片离体再生体系,为草莓的遗传转化研究与应用奠定基础结果表明．对某一特定的基因型来说,外值体类型和外源激素种类对其再生芽发生频率和数量都有明显的影响:丰香叶片在MS TDZ2.0mg／L 2．4-D0.1mg/L IBA0.2mg／L分化培养基上再生频率达83.2%,平均每叶片再生芽数为1.4个;章姬叶在MS mg/L NAA0.1mg/L IBA0.2mg/L分化培养基上再生频率达65.7%,平均每叶片再生芽数为1.3个,10-30d叶龄的叶片再生能力较强,另外8.0mg/L AgNO3能有交往地控制外植体的褐化,促进芽的分化。     

草莓叶片离体再生技术的研究

以红颊、章姬、丰香叶片为试材,对影响草莓叶片不定芽再生的主要因素进行了试验研究,建立了草莓离体叶片的再生体系。试验结果表明,基因型、不同激素种类和配比、叶龄直接影响了草莓叶片再生芽的发生。基因型是影响草莓叶片再生能力的决定因素,叶片四周刻伤处理能有效地提高不定芽的诱导率,适度的暗培养有利于不定芽的发生。叶片愈伤组织的诱导培养基以MS＋TDZ2～3mg/L较理想,芽伸长的理想培养基为MS＋6-BA0.3～0.5mg/L,生根培养基以1/2MS＋I-BA0.3mg/L较适宜,移栽成活率可达90%以上。     

‘丰香’草莓叶片再生体系的建立

以草莓(Fragaria ananassa Duch.)主栽品种‘丰香’叶片为外植体,就不同质量浓度生长激素对叶片外植体成活率、愈伤组织、不定芽的诱导率和再生芽生根培养的影响进行了研究,并建立了再生体系.结果表明:MS+1.5 mg/L噻苯隆(Thidiazuron,TDZ)+0.4 mg/L吲哚乙酸(3-indolebutyric acid,IBA)培养基最适于叶片不定芽分化,再生芽在1/2MS+0.1 mg/L IBA培养基上生根效果最好.     

丰香草莓叶片的植株再生研究

[目的]为采用叶片组织培养技术进行大规模生产草莓种苗提供依据。[方法]以丰香草莓叶片为外植体,用4种不同的培养基诱导其愈伤组织,并对愈伤组织进行扩繁,筛选最佳的诱导培养基。[结果]MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基最快产生愈伤组织,愈伤组织诱导率、生根率、不定芽诱导率均最高,分别为69.4%、10%、11.67%,且愈伤组织体积较大,生根总数最多,不定芽生长茂盛,叶片多而大,最终获得具根系可移植室外的完整植株543株,增殖扩繁倍数达50,增殖效果极好。MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1mg/L培养基的愈伤组织诱导率为63.8%,且愈伤组织体积最大。[结论]草莓叶片诱导愈伤组织、不定芽并最终获得大量再生植株的最佳培养基是:MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L。     

根瘤农杆菌介导草莓转基因研究

本研究以‘丰香’草莓(Fragaria ananassa cv. Toyonoka)试管苗叶片为外植体材料,运用根瘤农杆菌(包含pBI121-DHN)介导法转‘丰香’草莓,构建青稞(Hordeum vulgere L. var. nudum Hook. f.)脱水素基因(dhn4)编码区的过量表达载体pBI121-DHN。结果表明,经过抗生素筛选,获得再生草莓植株,提取转基因草莓叶片DNA,经PCR扩增,获得预期大小的外源插入片段。此"丰香"草莓转基因技术,为未来开展生物技术育种打下了基础。     

“晶瑶”草莓叶片再生体系的建立

以草莓"晶瑶"为试材,研究了暗培养时间、培养温度、激素配比、硝酸银浓度、不同植物凝胶等对不定芽再生的影响,建立了"晶瑶"草莓叶片的离体再生体系。结果表明:硝酸银对"晶瑶"草莓叶片再生有抑制作用;暗培养15 d、28℃的培养温度、以Phytagel为凝固剂有利于"晶瑶"草莓叶片再生;TDZ 1.5 mg/L+IBA 0.3 mg/L是较好的诱导培养基激素配比,此时不定芽的再生率达到76.77%,平均再生芽数达到4.3个。     

三个草莓品种的组织培养研究

为生产出高产优质草莓,提高效益,以草莓达斯、弗州、丰香3个品种为试材研究草莓茎段离体再生.以MS 为基本培养基,采用添加不同浓度梯度的植物生长调节剂对草莓幼苗进行了丛芽诱导、试管苗增殖,再接种至 MS 、1/2MS 培养基中进行生根诱导,筛选出最佳生根培养基.结果表明:最佳增殖芽培养基分别为:达斯、弗州 MS +2.0 mg?L‐16‐BA +0.1 mg?L‐1 NAA ;丰香 MS +0.5 mg?L‐16‐BA +0.05 mg?L‐1 NAA .1/2MS培养基是草莓的最佳生根的基本培养基;其中在1/2MS +0.5 mg?L‐1 IBA 上试管苗生根率达100%且长势强壮,根粗且多.3个材料试管苗离体愈伤组织诱导率均较高,为高产优质草莓生产提供了依据.     

发根农杆菌诱导草莓毛状根的研究

[目的]建立高效的发根农杆菌诱导草莓生根再生体系。[方法]以适合安徽省栽培的草莓优良品种丰香为试材,利用发根农杆菌R1601侵染植物细胞,观察发根农杆菌诱导草莓离体叶片产生毛状根的效果。[结果]发根农杆菌R1601培养成功;Carb有效除菌浓度为500 mg/L;当发根农杆菌R1601的菌液OD600=0.6时,草莓叶片毛状根的诱导率最高,而高于或低于该密度,诱导率均呈下降趋势。[结论]建立了发根农杆菌诱导草莓毛状根再生体系,为草莓利用发根农杆菌进行抗除草剂bar基因转化研究奠定基础。