波棱瓜叶片愈伤组织诱导研究初报

通过正交试验研究了6-BA、2,4-D和NAA不同激素配比的MS培养基对波棱瓜叶片愈伤组织形成的影响.结果表明,2,4-D对波棱瓜叶片愈伤组织形成的作用最显著,其次为6-BA和NAA.诱导愈伤组织的最佳培养基为:MS+2.0 mg/L 6-BA+2.0 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L NAA和MS+2.0 mg/L 6-BA+1.5 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L NAA,这两种培养基诱导率均达到90%.     

结缕草成熟胚愈伤组织的诱导及再生体系的研究

以结缕草的成熟胚为外植体,通过胚性愈伤组织诱导进行植株再生。结果表明在MS+2,4-D(2.0mg/L)+VB1(4mg/L)的培养基中,成熟胚可较高频率的诱导产生愈伤组织,诱导率为43.20%,但愈伤组织质量较差。将其在降低2,4-D浓度和添加6-BA,ABA的继代培养基中继代培养,可明显改善愈伤组织质量,增加胚性愈伤。筛选继代的胚性愈伤组织置于分化培养基MS+6-BA(1.0mg/L)+KT(2.0mg/L)+NAA(0.1mg/L)中,分化率45.6%。本研究建立了一套有效的以成熟胚为外植体结缕草组织培养再生体系。     

药用植物草麻黄细胞的悬浮培养

[目的]对草麻黄的子叶诱导出的愈伤组织,进行悬浮培养。[方法]采用组织培养的方法进行了愈伤组织诱导、愈伤组织继代和悬浮培养研究。[结果]MS+2.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L 6-BA为诱导子叶形成愈伤组织的理想培养基;MS+1.5 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L6-BA是愈伤组织的适宜继代培养基;2.0 mg/L 2,4-D+1.5 mg/L 6-BA+300 mg/L水解酪蛋白(CH)是愈伤组织悬浮培养的适宜培养基,愈伤组织干重增加量为0.80 g。[结论]初步选择出草麻黄愈伤组织细胞的悬浮培养条件,为麻黄细胞扩大培养及有效成分提取奠定基础。     

不同基因型甜高粱愈伤组织与丛生芽诱导条件优化

【目的】探讨不同培养基类型和激素配比对不同基因型甜高粱的愈伤组织和丛生芽诱导的影响,为建立高效稳定的甜高粱遗传转化体系奠定基础。【方法】以不同基因型甜高粱辽甜三号和北甜三号的成熟种子为外植体,在MS培养基中添加不同浓度2,4-D及2,4-D与NAA、6-BA或KT配比组合,对愈伤组织和丛生芽进行诱导;分别在B5、N6、MS和1/2MS培养基中添加不同2,4-D、NAA、6-BA组合,对愈伤组织进行诱导。【结果】适宜北甜三号愈伤组织和胚性愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2.0 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L NAA,辽甜三号为MS+2.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L NAA,可获得质量较好的愈伤组织,愈伤组织块大且色泽鲜艳。适于两个基因型甜高粱丛生芽诱导的最佳基本培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+0.5 mg/L 2,4-D,但不同基因型的诱导率有明显差异,以辽甜三号的诱导效果较好。【结论】不同浓度2,4-D与其他激素配比对两个基因型甜高粱的愈伤组织诱导有明显影响,以对辽甜三号的诱导效果较好;在MS、B5、N6、1/2MS基本培养基中,MS可作为愈伤组织诱导的最佳基本培养基。     

生长调节物质对半夏人工种胚形成的影响

以半夏叶片为外植体,研究了生长调节物质6-BA(6-苄氨基腺嘌呤)、2,4-D(2,4-二氯苯氧乙酸)、α-NAA(α-萘乙酸)、IBA(吲哚丁酸)对半夏人工种胚诱导和增殖的影响。结果表明,6-BA和2,4-D有利于半夏叶片愈伤组织的诱导和增殖,适宜培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L;6-BA、IBA和NAA对半夏人工种胚的诱导和增殖效果较好,适宜培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IBA 2.0 mg/L或MS+6-BA1.0 mg/L+NAA 2.0 mg/L。结果为对半夏人工种胚诱导及工厂化提供了试验依据。     

不同激素配比对红掌叶片愈伤组织诱导的影响

以红掌幼嫩叶片为外植体,采用MS培养基,研究了4种激素(生长素2,4-D、NAA和细胞分裂素6-BA、KT)对愈伤组织诱导的影响。结果表明:生长素2,4-D效果优于NAA,细胞分裂素6-BA优于KT,2,4-D是主要的诱导因子。在几种激素组合中,以MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L的诱导效果较好。     

轮钟花组织培养的最佳外植体及培养基筛选

建立轮钟花的组织培养方法,为轮钟花进一步开发利用提供依据,以轮钟花茎段、叶及种子为外植体,通过添加不同浓度的6-BA、NAA和2,4-D于MS或1/2MS培养基中,筛选轮钟花组织培养繁殖的最适培养基及最佳外植体。结果表明:诱导茎段、叶形成愈伤组织的最适培养基为1/2MS+1.0 mg/L6-BA+1.0mg/L 2,4-D,诱导率为80.0%;诱导种子形成愈伤组织的最适培养基为1/2MS+1.0mg/L6-BA+0.5mg/L 2,4-D,诱导率为80.0%;诱导茎段愈伤组织继代培养的最适培养基为1/2MS+1.0mg/L6-BA+0.5mg/L 2,4-D;种子愈伤组织继代培养的最适培养基为1/2MS+1.0mg/L 6-BA+0.2mg/L2,4-D;诱导种子不定芽的最适培养基为MS+0.2mg/L 6-BA+0.3mg/L NAA,分化率为80.0%;种子是诱导轮钟花不定芽的最佳外植体。     

不同基因型甜高粱愈伤组织与丛生芽诱导条件优化

【目的】探讨不同培养基类型和激素配比对不同基因型甜高粱的愈伤组织和丛生芽诱导的影响,为建立高效稳定的甜高粱遗传转化体系奠定基础。【方法】以不同基因型甜高粱辽甜三号和北甜三号的成熟种子为外植体,在MS培养基中添加不同浓度2,4-D及2,4-D与NAA、6-BA或KT配比组合,对愈伤组织和丛生芽进行诱导;分别在B5、N6、MS和1/2MS培养基中添加不同2,4-D、NAA、6-BA组合,对愈伤组织进行诱导。【结果】适宜北甜三号愈伤组织和胚性愈伤组织诱导的最佳培养基为MS＋2.0mg/L2,4-D＋0.1mg/LNAA,辽甜三号为MS＋2.0mg/L2,4-D＋0.2mg/LNAA,可获得质量较好的愈伤组织,愈伤组织块大且色泽鲜艳。适于两个基因型甜高粱丛生芽诱导的最佳基本培养基为MS＋1.0mg/L6-BA＋0.2mg/LNAA＋0.5mg/L2,4-D,但不同基因型的诱导率有明显差异,以辽甜三号的诱导效果较好。【结论】不同浓度2,4-D与其他激素配比对两个基因型甜高粱的愈伤组织诱导有明显影响,以对辽甜三号的诱导效果较好;在MS、B5、N6、1/2MS基本培养基中,MS可作为愈伤组织诱导的最佳基本培养基。     

杨树叶片离体再生系统的构建

以杨树叶片为外植体,MS为基本培养基,使用不同激素不同浓度配比,建立了杨树叶片离体培养植株再生体系。结果表明：叶片的最佳诱导培养基为：MS＋2,4-D 1.0 mg/L＋6-BA 1.0 mg/L;不定芽培养基为：MS＋NAA1.0 mg/L＋6-BA0.5 mg/L。NAA与BA对愈伤组织诱导有调控作用,NAA/BA比值增大有利于不定芽的诱导,但不能超过4∶1;BA与2,4-D关系比较复杂,当2,4-D和6-BA的浓度均为1.0mg/L时,愈伤组织诱导效果最好。     

红江橙与柠檬愈伤组织诱导的研究

以MT为基本培养基,采用L9(34)正交设计法,研究了不同培养基配方对红江橙和柠檬不同外植体愈伤组织诱导的影响。结果表明,上胚轴、下胚轴、子叶均能诱导出愈伤组织,但不同外植体在形成愈伤组织的时间和过程上有差别;红江橙上胚轴、下胚轴、子叶愈伤组织诱导的最佳实验培养基配方分别为MT 2,4-D 1.00 mg/L 6-BA0.50 mg/L 蔗糖30 g/L、MT 2,4-D0.50 mg/L 6-BA0.50 mg/L 蔗糖40 g/L、MT 2,4-D 0.50mg/L 6-BA1.00 mg/L 蔗糖20 g/L,此时愈伤组织诱导率均为100%;柠檬上胚轴、下胚轴愈伤组织诱导的最佳实验培养基配方分别为MT 2,4-D1.00 mg/L 6-BA0.50 mg/L 蔗糖30 g/L、MT 2,4-D1.00 mg/L 6-BA2.00 mg/L 蔗糖20 g/L,此时愈伤组织诱导率分别为55%、29%。     

耧斗菜的组织培养

以耧斗菜幼嫩叶片及叶柄为外植体,研究了不同生长调节物质对外植体愈伤组织诱导、不定芽分化和生根的影响。结果表明,在培养基MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L上诱导叶柄产生愈伤效果最好,诱导率为80.5%;在培养基MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L上叶片愈伤诱导效果最好,诱导率为92.7%。继代培养基为MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L和MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 2.0 mg/L。在培养基MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L中分化芽;分化的芽在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 0.5 mg/L中增殖。生根培养基为1/2 MS+NAA0.1 mg/L或1/2 MS+IBA 0.2 mg/L。     

猫须草组织培养研究

[目的]研究猫须草离体培养的最佳激素配比和最佳培养基。[方法]以猫须草幼嫩茎段为外植体,以MS为基本培养基,比较不同浓度和不同种类的生长激素对茎段腋芽萌发、愈伤组织增殖及丛生芽生根的影响。[结果]6-BA可促进腋芽萌发,分化丛生芽。随着6-BA浓度的增加,萌发腋芽的数量反而减少,当6-BA的浓度大于2.5 mg/L时,茎段便不再长出腋芽,而是在其顶端出现愈伤组织。在一定浓度范围内,随着2,4-D浓度的增加,愈伤组织的生长就越旺盛,当2,4-D浓度为2.0 mg/L时,愈伤组织增殖效果最好。NAA浓度为1.0 mg/L时诱导茎段生根效果最好,生根率达到100%。[结论]适宜的诱导培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.1mg/L,适宜继代增殖培养基为MS+2,4-D2.0 mg/L,茎段生根的适宜培养基为MS+NAA1.0 mg/L。     

不同培养基对金线兰愈伤组织诱导的影响

应用正交设计法考察不同培养基和4种植物生长物质对诱导金线兰愈伤组织生长的作用,研究了不同培养基对金线兰愈伤组织诱导的影响。结果表明,6-BA对诱导金线兰愈伤组织生长效果显著,2,4-D、NAA和KT效果不显著;金线兰愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2,4-D 3.0 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+KT 0.25 mg/L。     

半夏愈伤组织诱导与分化最适培养基筛选

以半夏[Pinellia ternata(Thunb.)Breit.]叶片为试验材料,研究不同培养基配方对半夏叶片的诱导脱分化、愈伤组织增殖及分化的影响。结果表明,适合半夏叶片诱导脱分化的培养基为MS+0.8 mg/L6-BA+1.8 mg/L NAA+0.1 mg/L 2,4-D;适合愈伤组织增殖的培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L2,4-D;适合分化生长的培养基为MS+0.8 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+3.0 mg/L 2,4-D。     

不同激素组合对草麻黄愈伤组织诱导的影响

［目的］研究不同激素组合对草麻黄愈伤组织诱导的影响。［方法］以草麻黄子叶为外植体,在附加不同浓度和比例2,4-D、NAA、6-BA、KT的MS培养基中,比较不同激素组合对愈伤组织诱导的影响,并绘制出草麻黄愈伤组织的生长曲线。［结果］结果表明,最适合草麻黄愈伤组织诱导的培养基为MS＋2,4-D 2.0 mg/L＋6-BA 1.0 mg/L,诱导率最高为77.5%。草麻黄愈伤组织生长曲线呈S形,在第8天左右进入快速增长期,最佳继代时间在24 d左右。［结论］2,4-D与6-BA配合使用更有利于草麻黄愈伤组织的诱导。     

丽蚌草组织培养及植株再生

以丽蚌草(Arrhenatherum elatius var.tuberosum ‘Variegatum’)茎叶连接的组织为外植体,探讨不同培养基对丽蚌草愈伤组织的诱导、生芽诱导及生根的影响.结果表明:当培养基为B5+2,4-D 4 mg/L+CH 0.3 g/L时,丽蚌草叶片诱导愈伤组织效果最好;当培养基为MS+6-BA 5 mg/L+NAA 2 mg/L时,丽蚌草愈伤组织生芽效果较好;当培养基为1/2MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 1.0 mg/L+0.1％活性炭时,生根效果最好.     

白亮独活的组织培养和植株再生研究

建立了白亮独活组织培养和小植株再生的体系。以叶片为外植体,在含不同生长调节物质的MS培养基中培养,结果表明,在MS培养基上附加2,4-D 2.0 mg/L和6-BA 0.5 mg/L对愈伤组织的诱导率可达100%;而愈伤组织继代最合适的培养基培养为附加2,4-D2.0 mg/L和6-BA0.2 mg/L的MS培养基;苗的诱导以附加6-BA2.0 mg/L的MS培养基效果最好;生根在附加NAA0.2mg/L和IAA0.5 mg/L的1/2 MS培养基中最好。     

半夏叶柄愈伤组织诱导与分化最适培养基筛选

以半夏(Pinellia ternata(Thunb.)Breit)叶柄为外植体,研究不同培养基配方对诱导脱分化、愈伤组织增殖及分化的影响。结果表明,适合半夏叶柄诱导脱分化的最佳培养基是MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA;最适愈伤组织增殖培养基是MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L 6-BA;最适分化培养基是MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA。     

刺嫩芽快繁体系的建立

[目的]研究刺嫩芽快速繁殖技术。[方法]以刺嫩芽的叶片、叶柄和幼茎为外植体进行组织培养,建立刺嫩芽快繁体系。[结果]3种刺嫩芽外植体中,叶片的愈伤组织诱导效果最好,在4种不同激素浓度的MS培养基上均能诱导出愈伤组织;MS培养基中适当增加2,4-D和少量的6-BA,可显著提高愈伤组织诱导率;最适诱导培养基为MS+6-BA2.0mg/L+2,4-D1.0mg/L,叶片诱导率高达36.7%;最佳增殖培养基为MS+6-BA1.0mg/L+2,4-D1.5mg/L;最适分化培养基为MS+6-BA2.0mg/L+2,4-D0.5mg/L,平均诱导分化率达85.0%;琼脂加入量控制在7.5～8.0g/L及适当降低6-BA的含量时,可有效防止外殖体玻璃化的产生。[结论]该研究建立的刺嫩芽快繁体系,试管苗驯化率可达85.0%,具有一定的推广与应用价值。     

人参发根的愈伤组织诱导

采用L9(34)正交试验设计方法研究了2,4-D、KT和6-BA3种植物生长调节物质在人参发根愈伤组织诱导中的作用.结果表明:人参发根愈伤组织诱导的最佳培养基为MS 2,4-D1mg/L 6-BA0.1mg/L;人参发根愈伤组织生长的最优培养基为MS 2,4-D1.5mg/L KT1.5mg/L.