苎麻多倍体诱导技术研究

以秋水仙素为诱变剂,此较了不同浓度和时间对苎麻不同器官或部位进行处理的诱导效果。种子处理,由于胚根生长受到严重抑制,生活力差,成活率低,有效诱导率仅0.65％。首次成功地进行了苎麻实生幼苗茎尖处理,平均诱导率达9.04％,为国内已报道最高诱导率的5倍。处理的直接效应多数形成嵌合体,采用嫩梢扦插等繁殖方法即可分离完全多倍体。根据苎麻多倍体主要特征特性,采取大田目测或结合成熟花粉粒镜检进行初选,最后以染色体计数为准的鉴定程序,既省时又可靠。     

苎麻多倍体诱导的研究

我们从1982年开始,以不同浓度的秋水仙素溶液处理苎麻种子、地下茎和试管苗,1983年4月诱导苎麻多倍体成功,以后又获得了43株多倍体单株,并用组织培养等快速无性繁殖方法迅速扩大群体,进行纤维产量、品质比较试验。     

提高橡胶树多倍体诱导率的方法研究

在暴露条件和暗处理条件下用秋水仙素溶液处理RRIM600,PR107,GT1,海垦1,海垦2,天任31-45,红星1和93-114等15个无性系的萌动芽,已全部诱导产生形态稳定的多倍体。经细胞学鉴定,这些多倍体无性系的体细胞染色体数大多为72条。在暗处理条件下用秋水仙素溶液处理嫩芽,诱导率可高达60％,个别无性系高达100％。研究了多倍和二倍组织占不同比例的嵌合枝条在生长过程中的消长特点,发现并非在任何情况下,嵌合体的生长都是向着有利于二倍组织的方向发展的。应用本文所提出的暗处理诱导法,只需处理个别植株韵少量萌动芽,即可获得人工诱导的多倍体,这种多倍体在不同程度上夹杂着少数的二倍性细胞,因而只能称为外部形态稳定的多倍体,即“外稳型多倍体”。只有经过进一步分离纯化,并在有性繁殖中不再出现二倍体时,才能称为遗传型稳定的多倍体。     

澳洲坚果多倍体的化学诱导及流式细胞术鉴定

以澳洲坚果品种‘云澳57’、‘云澳51’、‘云澳41’和‘云澳58’的萌动种子和幼嫩顶芽为材料,采用浓度为0.1％~0.3％的秋水仙素分别处理48、72（种子）或96 h（顶芽）,对种子的发芽率、幼苗形态和顶芽存活率等进行观测,并对有形态性状变异的植株进行流式细胞术倍性检测。结果表明：随着秋水仙素浓度和浸泡时间的增加,种子的发芽速率减慢,发芽率呈现显著的降低趋势,且不同品种对秋水仙素浓度的敏感性有所差异;大多数处理后种子萌发的幼苗出现了植株矮化、生长缓慢、第一对真叶显著变小或畸形甚至缺失、茎干明显增粗、叶尖出现分叉或卷曲、根系变为须根系等性状,部分幼苗叶片显著增大或分枝显著增多。不同浓度的秋水仙素溶液均可导致澳洲坚果嫁接苗顶芽存活率的降低,但大多顶芽并未出现形态变化。流式细胞术检测发现,在处理后种子萌发的幼苗中出现了多倍体,但均为2C+4C或2C+4C+8C的嵌合体,且多倍体诱变率在5％以下;经秋水仙素处理的嫁接苗顶芽并未检测到倍性变化。     

木薯成熟种茎多倍体诱导及鉴定

以木薯品种SC205和新选048的成熟种茎为材料,利用秋水仙素对侧芽进行滴液法处理诱导多倍体,使用流式细胞仪鉴定木薯植株倍性,并通过形态学、解剖学、生理学方法鉴定和分析多倍体、嵌合体和二倍体特征特性。结果表明:通过诱变处理获得了木薯四倍体和嵌合体植株,四倍体和嵌合体植株与二倍体相比表现出最上部全展叶第1和第2叶叶形指数降低、叶片厚度增加,气孔密度变小,叶绿体数目增加,气孔长度、保卫细胞长度和宽度增大,叶绿素a含量、叶绿素b含量、类胡萝卜素含量、叶绿素总量、SPAD值增高,净光合速率、气孔导度、胞间CO2浓度、蒸腾速率增大。     

甜叶菊多倍体离体诱导技术体系的建立

以甜叶菊茎段为外植体,用不同浓度的秋水仙素在试管苗茎段再生植株过程中进行不同时间处理,探讨适合于甜叶菊离体多倍体诱导的最佳秋水仙素处理时间和浓度,初步建立甜叶菊离体诱导多倍体的技术体系。结果表明,秋水仙素对甜叶菊植株形成影响较大,秋水仙素处理的最佳剂量为0.1%处理3 d,再生植株总数高且多倍体比率达42.3%;同时,再生苗生根也受到了一定影响;多倍体苗叶片厚实、颜色较深、植株矮化,气孔增大,单位面积气孔数较少;多倍体细胞核体积增大,染色体数加倍。     

低浓度秋水仙素离体诱导甜叶菊多倍体技术体系的建立

以甜叶菊茎段为外植体,采用不同低浓度秋水仙素在甜叶菊试管苗茎段再生苗初期进行长时间持续处理,以探讨低浓度秋水仙素诱导甜叶菊多倍体的优势及适合长时间诱导甜叶菊的秋水仙素浓度,简化甜叶菊离体诱导多倍体技术环节。结果表明:0.025%的秋水仙素浓度适合于甜叶菊多倍体离体诱导的持续诱变,直至试管苗再生而无需清洗外植体和更换培养基,简化了诱导技术环节,提高了甜叶菊多倍体离体诱导效率;多倍体植株田间农艺性状表现为叶片大而厚实、开花延迟、花蕾较大等特征。旨在建立低浓度秋水仙素离体诱导甜叶菊多倍体技术体系。     

木薯多倍体植株的诱导研究

利用秋水仙素作为诱导剂,对不同木薯品种进行多倍体诱导试验。结果表明,用4尧6g/L的秋水仙素处理木薯腋芽生长点,其诱导效果比较好。对变异枝条进行无性繁殖和染色体鉴定,结果显示变异后代在形态特征、染色体数目上都有变化,显示出了多倍体的特征。     

离体培养橡胶树体细胞诱导纯多倍性无性系方法的研究初报

研究结果表明,用0.5%的秋水仙素处理橡胶树二倍体花药体细胞愈伤组织(浸泡或滴溃)dl可有效地从多倍性的细胞再分化成多倍性胚状体并再生植株。所诱导培育获得的多倍胚状体及植株,通过细胞学鉴定表明具有多倍体表型特征的,其体细胞染色体数为2n一72,未见嵌合现象,对照的2n= 36     

金钱树四倍体的诱导与鉴定

以金钱树块茎为材料,采用秋水仙素溶液处理不定芽生长点,研究秋水仙素浓度和处理时间的诱变效果。结果表明：0.1%的秋水仙素溶液浸泡处理块茎的不定芽48 h效果最好,其诱导率为30%。通过流式细胞仪对金钱树植株DNA相对含量的测定,鉴别出四倍体和嵌合体。四倍体植株与二倍体植株在叶厚、保卫细胞大小、气孔密度等方面存在明显差异,其中气孔的形态及密度可作为鉴别四倍体、嵌合体和二倍体的重要性状。     

离本培养橡胶树体细胞诱导纯多倍性无性系方法的研究初报

研究结果表明，用０．５％的秋水仙素处理橡胶树二倍体花劳逸结合本细胞愈伤组织（浸泡或滴渍）１ｄ可有效地从多倍性的细胞再分化成多倍性胚状体并再生植株。所诱导培育获得的多倍胚状体及植株，通过细胞学鉴定表明具有多倍体表型特征的，其体细胞染色体数为２ｎ＝７２，未见嵌合现象，对照的２ｎ＝３６。     

苎麻诱导无融合生殖及其胚胎学初步研究

通过使用13种不同的药剂配方对苎麻进行无融合生殖的诱导,首次获得了苎麻单倍体和混倍体植株。实验结果表明:随着药剂配方、施药方法、施药时间和苎麻品种不同,诱导效果各异,其中以9号和12号药剂诱导效果最好。在处理12个品种中,以“湘苎2号”最敏感。用9号药剂处理,其诱导结实率高达14.58％。当花序上大约半数雌花的柱头伸出子房时,药剂处理可收到最佳的诱导效果。药剂处理苎麻后,植株的生长会表现出一些异常现象。 对无融合生殖种子育苗移栽后的植株的生长发育特性和体细胞染色体进行了观察和分析。对445株AF1植株进行鉴定结果,其中混倍体180株占40.4％,多倍体7株占1.6％,单倍体6株占1.3％,其余为二倍体。在鉴定过程中发现了染色体数为14,21,28,35,42,49,56的一系列细胞.在非整倍体细胞中,含染色体数为21,35,49的细胞占绝大数。它们都是7的倍数,似乎苎麻染色体是7条为一组进行变化的。 对整体染色一透明方法进行了改进,结合石蜡切片的方法,首次成功地用于整个果实的胚眙学研究。     

诱导橡胶多倍体与其细胞学研究续报Ⅰ

本文报道从海垦8,热研2—14—39,热研7—18—65等优良无性系芽条诱导出45株多倍体植株,经细胞学鉴定,这些植株的体细胞染色体数大多为2n=54～72,每个植株的多倍细胞均占其总分裂细胞数的60％以上。这些多倍体植株的外部形态发生了显著的变异,如叶片显著增厚、叶色浓绿、叶脉增粗等。目前这些植株已进入无性系第2代和第3代筛选,其中最大的多倍体植株已高达2米,而且已开始出现多倍分枝。在试验研究过程中,我们发现采用秋水仙碱和激动素等诱导剂时,诱导当代芽条的第一蓬叶大多数属于嵌合体。至第二蓬叶时则几乎全部恢复正常(2n=36)。将当代第一蓬叶的嵌合体茎干进入无性第一代分离筛选时,约产生千分之一的突变芽,只有将这些突变芽继续芽接至第二代筛选时才能获得较多的多倍体植株,但这一代仍然有分离现象。分离出正常的植株约占30％。从无性第二代中再经细胞学鉴定,选出较纯的多倍体植株进行无性第三代筛选时,所获得的第三代植株几乎全部属于多倍体植株。     

亚麻多倍体诱导技术研究——I．秋水仙碱诱导形态变异率的影响因子研究

为建立亚麻多倍体化学诱导技术体系，通过清水浸泡时间与秋水仙碱溶液浓度、处理温度、处理时间的比较试验，研究了外界因子对亚麻多倍体诱导形态变异率的影响。结果表明：亚麻多倍体诱导，以清水浸种16小时，转入0．16％的秋水仙碱溶液，在20℃条件下浸泡12小时为最佳，其成活率为36．07％，诱导率达到24．67％，则诱导成活率为8．9％。     

苎麻花粉粒形态与倍性关系的研究

苎麻多倍体诱导成功,只是多倍体育种的开始。培育多倍体品种,必须筛选大量多倍体群体供选择应用。倍性鉴定最权威的检测手段自然是染色体镜检计数法,但染色体镜检技术性强,手续繁琐,特别是苎麻染色体镜检难度则更大。可见,寻     

秋水仙素诱导冬瓜多倍体的初步研究

以秋水仙素为诱变剂,对冬瓜自交系B98、B32和C30二倍体幼苗进行多倍体诱变。结果表明:当秋水仙素浓度为0.2%时,冬瓜的诱变率最高,可达35.2%;经秋水仙素处理后的材料茎长、叶长、叶宽、叶柄长和叶面积的变异系数比对照大,说明秋水仙素可致冬瓜的茎和叶产生显著变异。详细调查了D5代材料与对照的叶面积、节间长和茎粗、瓜形等29个性状。结果表明:多倍体节间长显著变短(幅度达29.30%),茎变粗(幅度达44.68%),叶面积明显增大,叶片变厚,单片叶重显著增加(由34.87 g/片增至41.38 g/片)。多倍体第一雌花节位由第21.47节下降至第14.47节,但每株平均雌花数却显著增加(由4.87朵/株增至6.87朵/株)。多倍体单瓜重及瓜长稍下降,但肉变厚,肉质致密性增加,增幅分别达7.07%和10.56%;单瓜产籽量(重量与籽粒数)下降46%,达显著水平,千粒重不变,而休眠期显著缩短(收种后30 d的发芽率由59.61%提高至85.2%)。利用D5代处理材料与现有优良二倍体自交系进行配组杂交,其F1代表现肉厚、瓜肉比重大、无籽或空瘪籽等优点。     

秋水仙素诱导黑麦根尖细胞染色体的畸变效应

为了解秋水仙素对黑麦根尖细胞染色体的畸变效应,以黑麦种子为材料,在不同浓度的秋水仙素(0.05%、0.10%、0.15%、0.20%、0.25%)处理下观察了不同时间(12、24、36、48 h)根尖细胞染色体畸变情况,并分析了畸变率与细胞加倍指数.结果表明,秋水仙素能明显诱导染色体变异,除加倍外,光学显微镜下还可观察到多种畸变现象.随着处理时间的延长和秋水仙素浓度的增加,细胞的加倍指数和畸变率均表现为先上升后下降的趋势,加倍指数最高为5.20%(0.15%浓度处理36 h),畸变率最高为8.10%(0.15%浓度处理24 h).可见,秋水仙素对黑麦根尖也有一定的毒害作用.     

Stock6杂交诱导的玉米单倍体化学加倍效果研究

以单倍体诱导系Stock6诱导的单倍体为材料,用6个浓度秋水仙素人工加倍玉米单倍体,比较不同秋水仙素浓度处理不同部位的加倍效果。单倍体雌雄育性的自然恢复结果表明：不同基因型单倍体存在很大差异,部分单倍体植株无雌穗,有雌穗的单倍体自然育性恢复为25%～50%,单穗结实1～84粒;雄穗自然散粉率最高仅为14.3%。秋水仙素加倍试验表明：浸种法和浸芽法对单倍体药害程度较轻,但散粉率和加倍率均低;浸根法处理的单倍体散粉率和加倍率均高于对照,但受低成活率影响,100%加倍率的单倍体散粉率仅有6.7%;注射法的处理效果最好,获得的加倍植株最多。     

不同倍性苎麻同工酶及光合作用研究

对不同倍性苎麻酯酶同工酶及过氧化物酶同工酶进行了初步研究，发现酯酶同工酶酶带少，活性弱、倍性之间差异很小。而过氧化物酶同工酶酶带多、活性强、倍性之间差异大，其中Ｒｆ＝０．０２７和Ｒｆ＝０．０８２两条酶带为多倍体所特有，可作为其特征酶带。另外，还对不同倍性苎麻的光合作用特性也进行了初步研究，发现不同倍性之间净光合强度、蒸腾强度、气孔阻力、叶温均有很大差异。多倍体光合强度大、单倍体最低、二倍体居中；蒸腾强度以二倍体最大、三倍体次之，四倍体、单倍体较小；气孔阻力以单倍体最大，多倍体较小，二倍体居中。     

橡胶树人工多倍体染色倍性研究

以经秋水仙素诱导成功的少垦2和PR107品系16a树龄的橡胶树人工多倍体无性系（处理）和其亲本二倍体（对照）植株为材料，分析多倍体橡胶树细胞染色体倍性的组成情况和纯合程度，并分析比较多倍体与二倍体之间及其树间和部位间细胞染色体倍性组成的差异情况。结果表明：（1）这2个品系的多倍体植株系由多种染色体倍性的细胞嵌合在一起构成，且以多倍细胞为主；在植株之间或部位间，这些不同倍性细胞的比例结构或嵌合程度差异很大；经过16a的生长，这些橡胶树多倍体的三倍细胞比例明显增加，而相应的四倍细胞比例大幅度下降，四倍细胞有逐渐向三倍细胞转化的趋势。（2）对照的2个品系的亲本二倍体各植株以及植株内的各部位的细胞，基本上是二倍体，细胞染色体倍性较纯合，植株间和部位间各种染色体倍性细胞比例差异均不显著。本上是二倍体，细胞染色体倍性倍性较纯合，植株间和部位间各种染色体倍性细胞比例差异均不显著。