大豆脂肪氧化酶缺失体的等电聚焦电泳鉴定

大豆脂肪氧化酶缺失体的等电聚焦电泳鉴定刘立军，丁安林，傅翠真，常汝镇（中国农科院作物所北京１０００８１）（中国农科院品种资源所北京１０００８１）大豆籽粒中影响大豆制品风味的脂肪氧化酶（Ｌｉｐｏｘｙｇｅｎａｓｅ，简称ＬＯＸ）含量约占总蛋白质含量的１％。...     

黔西及黔南山区大豆脂肪氧化酶缺失种质鉴定研究

以黔南、黔西山区海拔３００￣２０１０ｍ种植大豆品种资源为材料,进行大豆脂肪氧化酶缺失种质的鉴定筛选,结果表明,海拔３１０￣２０１０ｍ处均存在大豆脂肪氧化酶缺失异型材料,显示贵州地域蕴有丰富的大豆可用基因源。     

非变性PAGE在鉴定大豆脂肪氧化酶类型中的应用

为解决脂肪氧化酶检测复杂、费用昂贵、剧毒试剂对人体影响等问题,研究出一种安全、快速而经济有效的大豆脂氧酶检测技术。以Suzuyutaka脂氧酶缺失近等基因系和非缺失类型大豆冀豆12为材料,利用聚丙烯酰胺凝胶电泳探索非变性PAGE分析大豆脂肪氧化酶,通过对不同样品浓度、电泳条件和分离胶浓度的比较,摸索鉴定大豆Lox缺失类型的最佳条件。通过电泳条件优化分析发现,电泳样品中预样品的浓度为30%、分离胶浓度为11%、电泳时间为6 h时,3种脂肪氧化酶分辨清晰度最高;通过重复电泳的相对迁移率分析,表明在上述电泳条件下的检测结果比较稳定且重复性好;通过3种脂肪氧化酶酶带与缺失酶带对照比较和分子量测定两方面验证了所得到的3条脂肪氧化酶酶带。非变性PAGE是一种简单、经济、快捷而安全的检测分析大豆脂肪氧化酶同功酶的方法,因而可以用于资源分析、良种繁育以及生产、收购和加工利用中的大豆脂氧酶缺失类型鉴定。     

黔南山区大豆脂肪氧化酶类型及活性鉴定

由大豆脂肪氧化酶引起的脂质氧化过程可产生正腥味和苦涩味。通过等电聚焦凝胶电泳法对黔南山区的68份大豆地方品种的脂肪氧化酶测定，发现了17份LOX—3缺失体占25％。通过脂肪氧化酶漂白胡萝卜素试验，发现这17份材料的脂肪氧化酶活性均较低，其中荔波二月豆等4份材料与日本、美国的同类材料水平相当，具有很大的实用价值。     

中国大豆脂肪氧化酶类型鉴定及酶活性分析

大豆制品的豆腥味与脂肪氧化酶（Ｌｏｘ）引起酶促的脂质过氧化作用有关。应用改进的等电聚焦凝胶电泳方法，对中国２６个省９００份大豆资源进行类型鉴定，发现中国大豆资源中有缺失Ｌｏｘ－１、缺失Ｌｏｘ－２、缺失Ｌｏｘ－３及缺失Ｌｏｘ－２，３的珍贵材料，其中缺失Ｌｏｘ－３的材料较丰富。应用电泳图谱在激光光密度计上的发描，测定酶带峰值面积，比较了同一品种及品种间各条同工酶带活性差异。通过脂肪氧化酶漂白胡萝卜素生     

大豆中脂肪氧化酶同功酶的鉴定研究

大豆是高蛋白和优质油料作物,自古以来,其丰富的营养价值对改善国民膳食营养水平起着重要作用,但豆油的不稳定性以及豆制品具有的豆腥味,影响人们对大豆的更有效利用.大豆中存在约占总蛋白含量1%的脂肪氧化酶(Lipoxygenase,简称LOX),能催化空气中氧对不     

贵州大豆脂肪氧化酶缺失体的分布及其与生态环境的关系

从贵州大豆品种随机抽取１３８份进行脂肪氧化酶测定,豆奶加工试验和品质,农艺性状鉴定。结果发现３１份脂氧酶缺失品种,占鉴定总数的２２．４６％,包括缺失Ｌｏｘ２,Ｌｏｘ３和Ｌｏｘ２．３几种类型,以缺失Ｌｏｘ３类型较多。脂氧酸缺失大豆的分布以南部最多,北部最少,缺失类型则以中部最丰富。     

大豆脂氧酶分析鉴定技术的研究进展及在育种中的应用

大豆脂肪氧化酶分析鉴定技术是将大豆种子中分离与纯化的脂肪氧化同工酶,利用遗传分析、免疫、色谱分析、显色等方法进行定性或定量的分析,检测品种的脂氧酶缺失类型。随着无腥味大豆育种研究的深入,现已育成品种的商品化生产,食品加工业的蓬勃发展,对大豆脂肪氧化酶鉴定技术要求不断提高和改进。笔者综述了大豆脂肪氧化同工酶的生物特性、遗传学特点及其各种分析鉴定技术的优缺点、灵敏度和适应范围,并且认为,在比较分析的基础上,以选择有益材料培育新种质、新品种的辅助育种和食品加工的鉴定为目的,使用最经济有效的检测手段是快速准确筛选缺失品种的合理策略。进一步讨论了大豆脂肪氧化酶分析鉴定技术运用于辅助育种所存在的问题和应用前景     

美国大豆脂肪品质育种改良的最新进展

在过去二十年中,对食用油的需求稳步增加。根据美国农业部出版的资料,世界食用油的生产从1969年的1920万吨增加到1988年的3790万吨,提高97％。在1988年生产的食用油大约有38％为大豆油,而在1969年只占31％。因此尽管在同一时期其它油主要是菜籽油和棕榈油的生产和利用急剧提高,但由于世界对食用油的广泛需求日益增高也提高了大豆油的产量。仅仅在美国在糕饼油生产中,自1969年以来,大豆油的利用提高了70％。在人造黄油中利用增加     

脂肪氧化酶缺失体对玉米种子劣变的影响

利用作物脂肪氧化酶同功酶快速检测技术,对玉米种质进行脂肪氧化酶缺失体的筛选并组配杂交组合.结果表明:同功酶Lox-1、Lox-2缺失对延缓玉米陈化变质、延长种子寿命起着重要作用,Lox-3缺失在减轻储藏中仓储害虫危害也会有独特的作用.同时,在组配杂交组合时利用同时缺失Lox-1、Lox-2的材料做母本,这样的杂交种就较耐储藏.     

大豆种质资源抗大豆花叶病毒的鉴定

在温/网室人工接种高病害压的条件下,对筛选的300份综合农艺性状优良的大豆种质资源进行抗大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV)流行株系SC3和SC7的鉴定.结果表明,对SMV流行株系SC3表现抗病(高抗和抗病)的品种有84份,占鉴定品种的28.0％,对SC7表现抗病的有105份,占35.0％;兼抗SC3和SC7的有60份,占鉴定的20.0％;其中对SC3和SC7均表现高抗的品种如皖豆16、晋遗21、M0633和P9594等抗病资源用于大田生产将对SMV的流行起到控制作用.研究还发现,地方品种对强毒株系SC7有着较多的抗性资源,来自山西的4份种质资源对SC3和SC7的抗性均在中抗以上,可作为抗源用于抗病品种选育和与抗性相关的研究.对300份大豆种质资源的小区平均产量分析发现,高抗SMV品种的小区平均产量(514.39g)与高感品种的小区平均产量(517.34g)没有显著差异,由此可初步推测育成抗SMV且高产的品种是可能的.     

气象因素对黄淮夏大豆脂肪含量影响的研究

脂肪含量是大豆品质的重要指标之一，运用多种数理统计方法，对黄淮海区试南组5年夏大豆区域试验测定的大豆品种脂肪含量与平行观测的气象资料进行分析。结果表明：影响脂肪含量的综合气候关键期为9月上、中旬（鼓粒中后期），主导气象因子是日照时数，气温日较差对其也有重要影响。     

大豆三类优品质新种质的创新

依据遗传距离远的亲本杂交后代出现优异材料几率大的原理及遗传学上性状互补的原理,选用国内综合性状优异的推广品种作母本,国外引进的缺失脂肪氧化酶（Ｌｏｘ）、缺失胰蛋白酶抑制剂（ＳＫＴＩ）的优质种质材料作父本进行杂交,首次将改进的ＳＫＴＩ、Ｌｏｘ和ＩＦ生化标记检测技术与大豆品质育种相结合,准确地进行了大豆品质的多隐性质量性状和数量性状基因的跟踪和辅助选择,在国内外首次创造出一批缺失ＳＫＴＩ、缺失Ｌｏｘ、ＳＫＴＩ和Ｌｏｘ双缺及高异黄酮（ＩＦ）含量的特异优质大豆新种质。     

显微注射抗冻剂对牙鲆(Paralichthys olivaceus)胚胎毒性及冷敏感性的影响

摘要 鱼类胚胎冷冻保存经过多年研究,尽管有所突破,但目前仍未达到应用水平,其主要原因是由于鱼类胚胎体积大、卵膜通透性差等特点,导致传统的平衡法,无法使抗冻剂足够、有效的进入胚胎内部起到保护胚胎的作用。而在鱼类胚胎冷冻保存中利用显微注射技术,可直接将抗冻剂注射到鱼类胚胎卵黄囊内,这一定程度上弥补了普通平衡法的不足,提高抗冻剂对胚胎的保护程度。本研究主要对抗冻剂的选择、抗冻剂对牙鲆胚胎的注射剂量、注射浓度、以及注射后牙鲆胚胎的冷敏感性进行了比较分析。结果表明：1、牙鲆胚胎较适宜的显微注射剂量为750pl。2、几种抗冻剂注射牙鲆胚胎后的毒性大小相对排列为PVP>蔗糖,DMSO > MeOH > PG,其中注射PG获得的胚胎成活率和孵化率最高,注射PVP获得的胚胎成活率和孵化率最低,而PG与MeOH组成混合抗冻剂PM毒性更低获得的胚胎成活率和孵化率更高。而任何一种抗冻剂均随着浓度的增加其毒性随之增加。3、另外,在冷敏感实验中,显微注射6M的PM的胚胎胚胎,应用程序化法处理,以2℃/min的速率降至-20℃,平衡10min后解冻处理,发现注射PM的胚胎低温处理后成活率为25.07±1.57%,而6M的PM五步平衡法同步处理的对照组胚胎成活率为20.88±2.84%,说明显微注射的胚胎冷敏感性一定降低。     

Lox酶缺失大豆新品种耐储藏特性的研究

通过对8个脂肪氧化酶缺失大豆新品种和1个正常大豆品种进行高温(40℃)耐储藏实验,实验期间对9个大豆样品的发芽率、脂肪酸值、过氧化值、粗脂肪含量、水溶性氮指数、脂肪酸成分、色泽进行检测,结果表明:脂肪氧化酶缺失大豆样品在储藏期间的品质变化比正常品种缓慢,大豆中脂肪氧化酶的缺失可在一定程度上提高大豆储藏品质的稳定性.     

玉米种子脂肪氧化酶LOX-3缺失与耐贮性研究

以脂肪氧化酶(LOX-3)缺失纯合体云油199-18和NT6621、LOX-3不缺失纯合体061842、LOX-3不缺失杂合体064021以及该4个亲本组配的4个组合为试验材料,在自然越夏条件下进行种子耐贮性的遗传、生理研究。结果表明:以LOX-3缺失体云油199-18、NT6621和LOX-3不缺失体061842、064021的LOX-3活性差异达显著水平;在组配的4个F1杂交后代中LOX-3缺失是独立遗传并且受隐性基因控制,结合电导率、丙二醛含量和脱氢酶活性等生理指标进一步证明LOX-3缺失种质相对较耐贮藏。     

大豆不同结荚部位籽粒蛋白质、脂肪含量分析

对4个不同类型大豆品种的上、中上、中、中下、下、分枝六部分籽粒进行品质分析,各部分蛋白质和脂肪含量差异显著、极显著。蛋白质含量从上至下由高变低（40.010%、38.890%、38.110%、36.428%、35.888%）;无限结荚习性大豆脂肪含量（19.983%、20.873%、21.242%、21.797%、21.908%）与蛋白质相反;亚有限结荚大豆脂肪含量上至中下由低变高（21.411%、21.993%、22.113%、22.538%）,下部 (22.151%)低于中下部;分枝上籽粒蛋白质、脂肪含量与中上部差异不显著;全株品质平均值(38.024%、21.760%)接近于中部值。     

利用SSR方法鉴定大豆品种纯度

本研究以遗75—14，中黄14，中品662和中品661共4个品种为试验材料，利用不同连锁群上的SSR引物对其随机选择个体进行分析，以确定分析品种纯度所需的引物数，为大豆品种资源的保存及品种指纹图谱的建立提供理论依据。通过11对SSR引物对遗75—14，中黄14，中品662各10个单株的检测，发现中品662纯度最高，遗75～14次之，而中黄14的纯度最低。用SSR引物对中品661和中品662每10个单株混合样品分析并经单株检测验证，其纯度分别为99．0％和98．3％，研究结果表明，10个植株混合时，即使有一个单株为杂合位点也能被检测出来，并发现用3—5对位于不同连锁群的SSR引物可以对随机或混合样品进行快速、准确的纯度鉴定。     

利用RAPD标记鉴定大豆种质

本研究以５７个中国大豆祖先吕系及育成品种和１８个美国大豆祖先品系为ＤＮＡ样品来源，通过随机引物ＰＣＲ扩增基因组ＤＮＡ的多态性，探索利用ＲＡＰＤ标记鉴定和相关种质的可能性。研究结果表明，５０个１０摩尔随机引物共扩增可分辩产物２４６个，其中８２．４％的随机引物可产生多态性产物，所扩增产物的５４．４％至少在两个基因毒草境存在差异。上ＰＣＲ扩增产物分别以１和０记录存在与否。扩增产物间的成对比较可产生非相似