茭白遗传多样性与育种技术

茭白产品器官是茭白植株受菰黑粉菌侵染膨大后形成的肉质茎。通过分析茭白遗传多样性和遗传变异,认为茭白遗传变异来源很可能主要来自菰黑粉菌的遗传变异。讨论了茭白育种技术及需要研究的问题。     

怎样防除雄茭和灰茭

在茭白田内 ,人们往往会发现一些株形高大 ,在孕茭期不能结茭白的植株 ,通常称为雄茭 ;同时也会发现虽然结茭 ,但肉质茎较小、包叶不开裂的茭白 ,肉质茎剖开后 ,其中充满灰黑色粉末状物 ,这类茭白不堪食用 ,称为灰茭。雄茭、灰茭是如何产生的呢 ?茭白之所以能够形成肥大的肉质茎 ,是因为茭白植株被一种称为菰黑粉菌的真菌寄生后 ,其茎端不正常膨大而成。若茭白植株未被黑粉菌侵染寄生 ,则不能形成茭白的产品器官即可食用的肉质茎 ,有些植株可以抽穗开花。这些茭白植株即为通常称的雄茭。而另一些植株被毒力强的菌种侵染 ,膨大的肉质茎内形成…     

茭白黑粉菌及茭白植株中DNA的提取方法

研究了茭白黑粉菌及茭白植株中基因组DNA的高效提取方法。采用改进的CTAB（十六烷基三甲基溴化铵）法提取DNA,根据琼脂糖凝胶电泳检测、A260/A280的测定和PCR扩增结果表明,用改进的CTAB法提取茭白黑粉菌及茭白植株基因组DNA,所得DNA无论是纯度还是完整性都比较好,适合于酶切和PCR扩增,可以用于分子生物学研究。     

茭白黑粉菌不同培养形态及能谱分析

将茭白灰茭内的黑粉菌厚垣孢子放置在PSA培养基上培养,结果表明:茭白黑粉菌能够在PSA培养基上完成其生活史,但形成菌丝体及厚垣孢子需要较长的时间;X-EDS分析发现不同培养形态之间的原子比值存在差异,其中采集的与培养的厚垣孢子差异明显.     

美味黑粉菌冬孢子萌发条件的研究

研究了疏亲水界面、温度、pH值和不同物质对美味黑粉菌冬孢子萌发的影响,以探讨美味黑粉菌冬孢子在自然生境条件萌发的适应性。研究结果表明,疏水界面促进美味黑粉菌冬孢子萌发,在疏水的聚苯乙烯塑料培养皿和茭白茎表皮上,萌发率高;冬孢子萌发的最适温度为27～30℃,温度过高或过低均抑制萌发;酸性条件促进冬孢子萌发,最适pH值为3～4;蔗糖促进冬孢子萌发,且以1%浓度最适,但同样浓度的甘露醇、葡萄糖、海藻糖、D-果糖等抑制冬孢子萌发。     

玉米黑粉菌线粒体DNA的初步研究

玉米黑粉菌(Ustilago maydis)侵染玉米后可产生菌瘤,引起病害。幼嫩的菌瘤类似茭白,可供食用。我国东北地区素有食用习惯,在墨西哥还有罐头产品出售。玉米黑粉菌是一种担子菌,对此菌已有过多方面的研究报道。由于玉米黑粉菌生长繁殖快。     

菰黑粉菌对60Co-γ辐射的抗性研究

对PDA培养基上生长的菰黑粉菌进行了剂量范围为0～50 kGy的60Co-γ射线辐照.研究结果表明,菰黑粉菌对射线辐照具有极高的抗性,在10 kGy的60Co-γ射线辐照下仍可生长.本研究为筛选生产上有益性状黑粉菌突变体,用于创制茭白新品种作了探索.     

菰黑粉菌中Ueubc2的克隆及表达分析

茭白是我国第二大水生蔬菜,它的形成与其内生真菌菰黑粉菌的侵染密切相关.根据菰黑粉菌转录组数据库设计特异引物,采用RT-PCR扩增获得Ueubc2基因,序列分析发现Ueubc2是玉米瘤黑粉菌中ubc2的同源基因,编码蛋白含有SAM、RA、SH3结构域,作用于MAPK信号通路.同时通过实时荧光定量PCR对Ueubc2基因进行表达分析,发现在融合生长过程中Ueubc2上调表达,并在菌丝形成时其表达量最大,随着菌丝生长表达量逐渐降低,表明其在菰黑粉菌真菌二型态转变过程中具有重要作用.     

无锡名蔬--茭白

无锡茭白是无锡出产的一种著名蔬菜，久负盛名，是无锡名特产品之一。茭白原产我国，以长江以南低洼地区种植最多。它是由古人称之为“菰”的一种多年生水生宿根草本植物上长出的一种肥大嫩茎，这种嫩茎并不是正常形成的。菰的根际有一名色匍匐茎，春天萌生新株，初夏或秋季抽生花茎。茭白生长全靠一种菰黑粉菌在其间起作用，该菌的菌丝入侵菰的花茎后，会分泌出一种吲哚乙酸的刺激素，使花茎细胞增生，使其不能正常抽开花，而膨胀形成肥大的嫩茎，即是蒙白。蒙白种植要有专门的技术，如种植不当，黑粉菌以黑色厚垣抱子状存在于斐肉中，就成…     

菰黑粉菌转录调节因子Rbf1的克隆及表达分析

为研究菰黑粉菌的形态转换机制及灰茭形成机理,利用菰黑粉菌的转录组数据,分别从正常茭白中的菰黑粉菌(MT型)和灰茭中的菰黑粉菌(T型)中扩增得到Rbf1基因及开放阅读框序列.结果表明,2种菰黑粉菌的Rbf1基因序列相同,开放阅读框全长为1 281 bp,无内含子,NCBI中blast及进化分析表明,菰黑粉菌Rbf1基因与玉米黑粉菌具有较高的同源性;另外,菰黑粉菌不同生长阶段的Rbf1基因的表达量检测结果发现,Rbf1基因在菌丝生长前后表达量有显著差异,在菌丝生长12 h后表达量明显升高,表明Rbf1基因在菰黑粉菌的菌丝形成及生长过程中具有重要作用.     

草菇染色体核型的鉴定

利用等高锁状同源电场凝胶电泳（CHEF）,获得草菇的电泳核型.综合两组脉冲电泳的电泳条件、溴化乙锭染色以及DNA杂交分析结果,草菇染色体DNA至少可分为9个谱带.这一结果和以前用光学显微镜观察草菇的染色体数目的结果相一致.以混浊酿酒酵母和粟酒裂殖酵母等的相对迁移率为基准,草菇染色体长度估计在1.32～5.4Mb之间,染色体组总长约25Mb.     

富硒金针菇菌丝体酯酶同工酶和可溶性蛋白研究

采用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，研究了不同硒浓度对金针菇001号菌株不同生长期菌丝体酯酶同工酶活性和可溶性蛋白合成的影响。结果表明，低浓度硒可提高酶活性并促进蛋白质合成，而高浓度硒则产生抑制作用。     

Study on apoptotic and nonapoptotic injuries induced by hydrogen peroxide in cardiac myocytes

AIM: To study apoptotic injury induced by reactive oxygen species-hydrogen peroxide (H₂O₂) on cardiac myocytes.METHODS:Cultured rat neonatal cardiac myocytes were treated with H₂O₂ of various concentration to observe apoptotic injury of cardiomyocytes by agarose gel electrophoresis, Giemsa-stained smears of cell, and flow cytometry, meanwhile lactate dehydrogenas (LDH) and malondialdehyde(MDA) were determined to assess the effect of H₂O₂ on lipid peroxidation and permeability of the plasma membrane. RESULTS: 5 mmol/L H₂O₂ caused cultured cardiomyocytes apoptotic morphological characteristics, including nucleosomal DNA fragmentation in myocytes by agarose gel electrophoresis (DNA ladder), cell shrinkage, nuclear condensation, and chromatin margin by Giemsa-stained cell smears, and aneuploid peak(AP)-apoptotic bodies occurrence by flow cytometry.CONCLUSIONS: H₂O₂-induced apoptosis in myocytes was a time-and concentration-dependent process. Treatment with low concentration of H₂O₂(＜1 mmol/L) only caused cardiomyocyted early biochemical changes, such as increase of free radicals level and membrane permeability ,which were pro-apoptotic injurious features. High concentration of H₂O₂ (＞10 mmol/L) rapidly induced a necrotic form of death characterized by smeared patterns of DNA digestion on agarose gel electrophoresis and lethal membrane disruption (as measured by LDH release). Exposure of 5~10 mmol/L H₂O₂ induced cardiomyocytes apoptosis concurrently with biochemical changes of LDH and MDA increase in the medium.     

利用一步法RT-PCR检测柑橘裂皮病类病毒

 柑橘裂皮病(CEVd) 是限制柑橘产量的一种重要类病毒病害, 国内外已经建立了多种方法检测该病害的病原。本研究初步建立了快速灵敏检测CEVd的一步法RT-PCR技术。经过与生物学鉴定和双向聚丙烯酰胺凝胶电泳(sPAGE) 方法的比较检测, 表明该RT-PCR方法检测周期短, 灵敏度高, 有利于对类病毒在春季和冬季浓度低时进行快速准确的检测。应用该技术对大量田间寄主进行了检测。     

福鼎槟榔芋脱毒复壮技术研究

槟榔芋是薯蓣科植物,因其肉质细腻酥甜、营养丰富,且具有独特的槟榔花纹而闻名海外。但是传统槟榔芋培养技术培育出来的产品产量低、病毒频发,导致产品品质的下降,严重影响了槟榔芋产业的发展。目前,槟榔芋脱毒复壮技术的突破成为解决这一难题的关键。鉴于此,本文分析了槟榔芋的脱毒复壮技术的意义,介绍了脱毒复壮技术的主要技术流程和操作要点,探讨了槟榔芋的产业化发展前景,并对槟榔芋产生的社会效益进行了预测。     

葡萄叶片蛋白质双向电泳技术体系的建立

现对葡萄叶片中总蛋白质的双向电泳技术体系进行了初步探讨,比较了不同等电聚集程序、不同pH胶条以及不同SDS-PAGE凝胶浓度的双向电泳效果。结果表明:葡萄叶片蛋白质使用等电聚焦程序B、pH范围为4~7的胶条和12%的SDS-PAGE凝胶可以得到较为理想的双向电泳分析结果;采用7 cm胶条最大可以分离出143个有效蛋白质点。     

利用茭白薹管结构差异快速辨别雄茭的方法

为了提高茭白产量,需要寻找一种快速辨别雄茭的方法。本试验在比较茭白的雄茭与正常茭、灰茭薹管内部结构差异的基础上,通过田间试验验证了薹管内部结构差异与茭白孕茭的关系:正常茭、灰茭的薹管髓腔内有丝状物,而雄茭薹管髓腔内则完全没有丝状物。髓腔内有丝状物的薹管均能孕茭,无丝状物的薹管则不能孕茭。利用薹管髓腔内有无丝状物可以快速区分出雄茭薹管,是一种高效快速辨别雄茭的新方法。     

辣椒叶片基因组DNA提取方法的研究

本项研究采用SDS法、CTAB1法、CTAB2法及CTAB3法对辣椒叶片基因组DNA进行提取,通过琼脂糖凝胶电泳法与紫外吸收检测法对DNA的纯度进行检测。试验证明几种提取方法均能提取出辣椒叶片的基因组DNA,其中CTAB3法提取的DNA经琼脂糖凝胶电泳检测得到一条迁移率很低的整齐清晰的DNA条带,所提取DNA的质量和纯...     

甜菜SRAP扩增产物两种不同检测方法的比较

为了研究不同电泳及染色方法对甜菜SRAP扩增产物的影响,以6个甜菜二倍体品系为材料,比较变性聚丙烯酰胺凝胶电泳与非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳对SRAP—PCR扩增产物用不同银染方法的检测效果进行了比较分析。结果显示：非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳与变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的分辨率差异不大,但非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳具有灌胶简单易学,显色时间短,节省药品等特点,可以作为今后甜菜SRAP电泳及显色的首选方法。