微小毛霉凝乳酶的制备工艺

以食用菌菌糠和豆渣1∶1 (w/w)混合物作为微小毛霉固体发酵培养基,探讨微小毛霉凝乳酶粉末制剂的制备工艺.制备过程包括:三角瓶固体发酵、加水提取、Al2 (SO4)3絮凝、微滤除菌、超滤浓缩、室温醇沉、40℃真空干燥等7个步骤.结果显示:凝乳酶在水溶液中的热变性为52℃左右,而在70％含水酒精中的变性温度则降至35℃...     

微孢根霉产凝乳酶的发酵条件优化

筛选得到一株高产凝乳酶的菌株F518,鉴定为微孢根霉。通过单因素试验优化了微孢根霉F518液体发酵产凝乳酶的发酵条件。结果表明:发酵产酶的最适碳源为酒糟,最适氮源为酵母浸粉,培养基最适初始pH为5.0。在优化后的发酵条件下30℃培养72h,微孢根霉F518产凝乳酶活性最高,达到1 001SU/mL。微孢根霉F518在凝乳酶生产方面有很大的应用前景。     

微小毛霉凝乳酶的分泌表达、产物纯化及鉴定

采用基因工程的方法对微小毛霉(Mucor pusillus)凝乳酶进行分子改造,获得适于乳品工业生产用的凝乳酶,克隆到了微小毛霉凝乳酶基因,构建了酵母表达质粒pPIC9K/M。线性化后电击转入毕赤酵母GS115,在甲醇诱导下进行凝乳酶的初步发酵试验,通过pH反应及酶抑制反应试验证明,重组凝乳酶获得了分泌表达。SDS-PAGE分析表明重组凝乳酶的分子量约为46 kD,与理论值(45.3 kD)基本相符,培养基上清液中凝乳酶的活性为311.8 U/mL,纯化的总回收率为51.89%,纯度达到92%。     

微小毛霉凝乳酶基因的克隆及在毕赤酵母GS115中的表达

以微小毛霉基因组为模板,PCR扩增得到凝乳酶结构基因,经EcoRⅠ和NotⅠ双酶切后,连接穿梭载体pPIC9K,转化大肠杆菌感受态细胞DH5α,并测定其核苷酸序列。测序结果证实扩增得到的片段为凝乳酶基因,与GenBank报道的序列（No.X06219）存在6对碱基的区别。将重组质粒电转化毕赤酵母GS115,构建重组菌P.pastorisGS115/pPIC9K-m cp,通过筛选得到抗G418浓度达到3.0 mg/m l、具有多拷贝基因的整合重组菌pPIC9K-m cp-03。用甲醇诱导进行初步发酵试验,测得该重组菌凝乳酶活力为5 660 U/m l,比微小毛霉发酵液提高50多倍,且发酵液电泳结果表明毕赤酵母自身分泌的蛋白很少,只能看到约38.5 ku的凝乳酶蛋白条带。     

提高曲拉精制干酪素色泽质量的研究

曲拉制作干酪素的工艺过程发生了明显的褐变反应。试验对发生褐变反应的工艺条件及添加抑制剂的方法进行初步研究。研究表明,55℃、pH10.5的条件下溶解,55℃鼓风干燥能减缓褐变反应发生;采用溶解与干燥两步抑制法(溶解时、干燥前分别添加氧化还原剂)能显著抑制褐变反应的发生。     

阿维菌素凝胶微球的制备及性能评价

以海藻酸钠和氯化钙为成球材料,以壳聚糖和PVA为覆膜材料,制备负载阿维菌素的凝胶微球。以载药率、包封率和溶胀率为主要筛选指标,通过正交试验优化,确定了最优制备工艺条件,各组分质量分数:海藻酸钠1%、氯化钙4%、壳聚糖2%、PVA 2%、戊二醛1.5%。同时,测定了阿维菌素凝胶微球的溶胀率和缓释性能。结果表明,凝胶微球在pH 7时溶胀率最大,温度和pH对载药微球的缓释性能有一定影响。     

果胶酶高产菌微紫青霉SW09的鉴定及发酵特征

从云南烟田采取土样多份,以果胶为惟一碳源,通过初筛和摇瓶复筛,筛选到l株果胶酶高产真菌SW09。通过菌落形态观察、生理生化指标试验和l8S r DNA保守序列分析,经初步鉴定为微紫青霉,将其命名为Penicillium janthinellum SW09,并以发酵罐深层液体培养确定其发酵生长周期为72 h,产聚半乳糖醛酸酶活力最大达到3 071.99 U/m L,为烟梗果胶质的生物降解奠定基础。     

重组凝乳酶摇瓶发酵条件的初步优化研究

凝乳酶是一种酸性蛋白酶,用作动物饲料添加剂,可提高动物特别是幼龄动物对饲料中蛋白成分的消化吸收率,促进其生长。本试验研究了由毕赤酵母胞外表达多拷微小毛霉凝乳酶的摇瓶发酵条件。确定最佳表达条件为：甲醇每24 h添加1.0%,无氨基酵母氮源培养基（YNB）添加1.5%,采用pH6.0的磷酸缓冲液,诱导120 h,在此条件下,重组凝乳酶的产量可达6 500 IU/ml。     

茁霉多糖生物合成及在食品工业中的应用

综述了茁霉多糖的分子结构、性质、生物合成,并且简要叙述了茁霉多糖在食品工业中的应用。     

山奈酚分子印迹聚合物微球的制备及性能研究

为有效分离天然活性黄酮物质山奈酚,制备山奈酚分子印迹聚合物微球,以山奈酚为模板分子,4-乙烯基吡啶为功能单体,乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,乙腈为溶剂,采用扫描电镜、傅里叶红外光谱和热重分析进行表征,对其进行吸附性能测定。得到了最优的聚合反应条件是:反应温度60℃,功能单体与溶剂的体积比为1∶20,模板分子和功能单体的摩尔比为1∶8。合成的聚合物微球颗粒均匀,耐热性能好,对山奈酚具有良好的吸附能力,实际最大饱和吸附量是1.053mg/g。Scatchard分析表明聚合物对山奈酚存在特异性吸附性能。     

乳酪蛋白肽制备工艺的优化

[目的]研究制备乳酪蛋白肽的最佳工艺.[方法]以乳酪蛋白为原料,以水解度为考察指标,确定碱性蛋白酶为乳酪蛋白的最佳水解酶.利用单因素试验考察酶解温度、pH、投酶量、酶解时间和底物浓度对水解度的影响,确定主要影响因素.通过L9(34)正交试验获得碱性蛋白酶的最佳水解条件.利用凝胶色谱法确定乳酪蛋白肽的分子量.[结果]试验得出制备乳酪蛋白肽的最佳工艺为:酶解温度60℃,pH 7.0,投酶量1.5％,酶解时间150 min.制备的乳酪蛋白肽分子量为2 kD.[结论]研究可为乳酪蛋白活性肽的产业化研发提供理论依据.     

用蛋黄蛋白和酪蛋白制备磷酸肽的比较研究

对用胰酶水解酪蛋白和蛋黄蛋白制备磷酸肽进行了比较研究。结果表明：10%蛋黄蛋白溶液经胰酶水解1，2，3，4h（酶：底物=1:10）后制备的磷酸肽中N，P摩尔比分别为6.39：1,5.94:1,5.69:1和4.93:1，10%酪蛋白（酶：底物=1：50）的相应N，P摩尔比分别为5.58:1,5.47:1,4.79:1和4.75:1。说明蛋黄蛋白经胰酶水解后产生的磷酸肽的纯度与酶蛋白水解产生的磷酸肽相似。各水解时间点时，由蛋黄蛋白所制备的磷酸肽的产率分别为12.58,11.74,11.59和10.63，酪蛋白相应值分别为14.00，12.08，12.47和13.17。说明水解1h两种蛋白均能获得更多的磷酸肽。实验表明，经胰酶水解后，蛋黄蛋白与酪蛋白一样能产生具有持钙功能的磷酸肽。     

Effect of Ultrasonic Treatment on the Extracting Activity of Kid Rennet

Using 2-3 weeks kid abomasums as materials, the ultrasound intensity, extracting time, NaC1 concentration and pH value in extracting solution and ratio of abomasums to extracting solution were studied by ultrasonic method. The results showed that the main factor affecting kid rennet activity during extraction was ultrasound intensity, and then NaC1concentration, extracting time and ratio of abomasums to extracting solution in order. Kid rennet activity reached peak with ultrasound intensity 30 W cm-2, extraction time 40 min, NaC1 concentration 8%, pH value 3.0, ratio of abomasums to extracting solution 1:15.     

超声处理对羔羊皱胃酶提取活性的影响

 以2～3周龄羔羊皱胃为原料，利用超声提取法研究了超声强度，提取时间，提取液NaCl浓度，皱胃与提取液比例以及提取液pH对羔羊皱胃酶（kid rennet）提取活性的影响。结果表明，超声强度是影响羔羊皱胃酶提取活性的主要因素，其次为NaCl浓度，提取时间和皱胃与提取液比例。在超声强度为30 W·cm-2下提取40 min，提取液NaCl浓度为8%，pH为3，皱胃与提取液比例为1∶15时，羔羊皱胃酶提取活性最高。     

牛乳酪蛋白水解物的特性分析

牛乳酪蛋白经胰蛋白酶水解，对水解物进行氨基氮含量、水解度（DH）和游离氨基酸含量等测定，并通过SDS－PAGE电泳及Sephadex-G50凝胶层析，分析了相对分子质量的分布。结果表明，在水解条件为底物质量浓度50g/ml、pH7．4、温度45℃、酶量（m)：底物量（m）＝1：1000时，DH随时间延长而增大，水解前期DH增长迅速，3h后增长缓慢，6．0h的DH为20．48％。水解物中必需氨基酸含量约占游离氨基酸总量的73％－80％，此含量随水解时间的延长略有降低；水解物相对分子质量随DH的升高有所减小，经2－3h水解的产物，相对分子质量分布主要集中于2500－3400范围。     

多目标灰色局势决策原理在酪蛋白凝聚工艺参数优化上的应用

针对发酵法生产干酪工艺参数的不稳定性,采用多目标灰色局势决策的原理对试验中不同发酵酸度、CaCl2用量、热处理温度等评价数据进行灰色分析,获得主要工艺参数的最优组合为发酵乳酸度65°T,CaCl2用量0.2 g.L-1,热处理温度65℃.     

内切酶与端肽酶水解牛乳酪蛋白的研究

蛋白质经酶水解得到的多肽往往带有较明显的苦味,限制了其在食品中的应用.为优化牛乳酪蛋白的酶水解条件,采用枯草杆菌碱性蛋白酶Alcalase和风味蛋白酶Flavourzyme协同对牛乳酪蛋白进行水解,得到了Alcalase AF 2.4 L酶水解的最佳工艺条件是:底物浓度2％、pH值8.5、温度为55℃、加酶量为20μL...     

糖基化亚硝基血红蛋白制备工艺参数的优化

以鸭血为原料制备亚硝基血红蛋白,采用壳聚糖对亚硝基血红蛋白进行糖基化,研究了糖基化反应过程中亚硝基血红蛋白与壳聚糖浓度的比例、加热温度、加热时间及pH对反应产物浓度(吸光值)的影响.试验表明:壳聚糖糖基化鸭血亚硝基血红蛋最佳反应条件为:亚硝基血红蛋白与糖浓度比例为4.1:1,反应温度63℃,反应时间14 min,反应液pH5.3.     

乳中酪蛋白胶粒的扩散双电层及稳定性

酪蛋白是乳中重要的一种蛋白质,它的结构及其稳定性与乳品工业密切相关。本文详细地阐述了自然状态下乳中酪蛋白胶粒的双电层结构及其组成,並就酪蛋白胶粒的稳定性从理化方面进行了论述,同时对影响酪蛋白胶粒稳定性的各种因素(如乳中盐类的组成、pH、脱水作用、温度以及其它物质等)从理论上进行了探讨和分析。