DEB-2菌株产抗真菌活性物质的初步研究

为寻找新的抗真菌药物,对DEB-2菌株中产生的抗真菌作用的粗提物进行了初步研究.结果表明:DEB-2菌株发酵液中的抗菌物质可能是一种蛋白质或肽类物质、分子量大于3.5kD;该抗真菌物质具有较高的热稳定性,121℃处理20min活性没有损失,对变性剂脲、紫外线相当稳定,在酸碱条件下仍具有一定活性;对木瓜蛋白酶不稳定.     

Cp-S316菌株发酵培养基的优化及其对烟草赤星病菌的抑制作用

通过单次单因子试验和正交试验,对Cp-S316菌株抗真菌活性物质的发酵培养基进行了优化,获得适合菌株生长和抗真菌活性物质产生的最佳培养基配方为：土豆100g、乳糖40g、蛋白胨15g、硝酸钠0．5g、硫酸镁2g、水1L。经摇瓶发酵试验,发酵液效价比基础培养基配方提高了325．24％。Cp-S316菌株产生的抗真菌活性物质粗提物对烟草赤星病菌菌丝具有强烈的抑制作用,采用抑制菌丝生长速率法测定了其对烟草赤星病菌的抑制中浓度为EC50=0．248mg·mL^-1;显微镜下观察发现,活性物质能够引起菌丝原生质凝集。     

乙酰丁香酮对组培芦竹不定芽诱导和生长的影响

[目的]研究组培条件下乙酰丁香酮(AS)对芦竹不定芽诱导和生长的影响,为芦竹农杆菌介导转基因过程中AS的使用提供依据。[方法]将芦竹外植体预培养3 d后接种到添加100、250、500、1 000、2 500、5 000μmol/L AS的培养基中培养,以不添加AS为对照,观察芦竹的不定芽诱导数及不定芽的高度。[结果]AS在一定的浓度下对芦竹外植体不定芽的诱导和生长都有影响。培养基中添加1 000～2 500μmol/L AS,对芦竹的生长有显著的促进作用;添加AS对芦竹不定芽的诱导有抑制作用,浓度范围1 000～5 000μmol/L与100～500μmol/L相比,对芦竹不定芽诱导的抑制作用显著增强。[结论]AS浓度为100～500μmol/L为芦竹转基因过程中可以使用的合适浓度。     

卡那霉素和潮霉素对芦竹不定芽诱导与生长的影响

[目的]研究组培条件下芦竹（Arundo donax Linn.）对植物基因工程常用抗生素卡那霉素和潮霉素的敏感性,为芦竹基因工程载体构建及转基因植株筛选奠定基础。[方法]芦竹外植体预培养3 d后接种于添加不同浓度卡那霉素或潮霉素的不定芽诱导培养基中培养,研究2种抗生素对芦竹外植体不定芽诱导及生长的影响。[结果]2种抗生素在一定浓度下对芦竹外植体不定芽诱导和生长都有影响。潮霉素浓度在5～50 mg/L时,随着浓度增大,对芦竹不定芽诱导及生长的抑制作用均增强;浓度达到50～100 mg/L时,外植体生长、分化逐渐停止直至死亡。卡那霉素浓度在5～100 mg/L时,对不定芽诱导产生促进作用。[结论]潮霉素在较低浓度下对芦竹外植体不定芽诱导和生长产生抑制作用,适合作为芦竹转基因选择标记。     

橘色糖丝菌XA-1活性粗提物的分离与抗真菌活性研究

为明确橘色糖丝菌XA-1发酵液中抗真菌活性成分的分布及抑菌效果,采用大孔吸附树脂结合渗漉法,以辣椒疫霉病菌为供试靶标进行活性追踪,对发酵液中活性成分进行初步提取、分离;以菌丝生长速率法和10种植物病原真菌为供试菌株对活性粗提物进行抑菌谱研究,对100μg/mL浓度下抑制率在80%以上菌株进行毒力测定。结果表明:菌株XA-1发酵液中抗真菌活性成分主要分布在甲醇粗提物中,其在100μg/mL浓度下对10种供试植物病原真菌均具有抑制作用,除对豇豆轮纹病菌的抑制率为48.0%外,对其余9种菌株的抑制作用均高于59%,其中对高粱炭疽病菌和辣椒疫霉病菌的抑制作用最强,抑制率分别为93.3%和89.8%,EC_(50)值分别为19.33和22.24μg/mL。以上结果明确了橘色糖丝菌XA-1发酵液中抗真菌活性成分的分布、抑菌效果及敏感菌株,有望从中开发出防治辣椒疫病和高粱炭疽病的新型抗生素,为后续研究提供参考。     

链霉菌702所产抗真菌物质对水稻纹枯病菌的抑菌机制研究

研究了链霉菌702所产抗真菌活性物质对水稻纹枯病菌的抑菌机制,结果表明:702对纹枯病菌菌丝生长有强烈的抑制作用,EC50为1.128 05 mg/L;能显著的引起菌丝细胞内原生质凝集;对菌核及孢子的萌发有较强的抑制作用,15.11 mg/L和10.64 mg/L完全抑制菌核和孢子的萌发;对孢子形成也有一定的阻碍作用,22.66 mg/L完全抑制孢子形成.     

核桃青皮的化感作用Ⅱ层析分离物对几种植物幼苗生长的影响

核桃青皮层析分离物处理植物幼苗的结果显示:①核桃青皮醇提物的乙酸乙酯萃取相经过硅胶柱层析分离得到Fr1、Fr2、Fr3、Fr4、Fr5、Fr6六个组分,其中Fr2组分抑制植物根、芽生长的活性最高,对供试植物根、芽生长抑制率超过了50%。②Fr2再次经过硅胶柱层析分离得到6个组分,其中2Fr2组分抑制植物根、芽生长的活性最高,对黑麦草、三叶草、高粱根生长的半抑制浓度仅为1.30 mg/mL、1.56 mg/mL和1.266 mg/mL。③分离物中化感物质对植物幼根的抑制作用大于对幼芽的抑制作用。     

植物生长物质及培养基对红豆越橘叶片离体再生的影响

研究了5种植物生长物质和4种培养基对红豆越橘(Vaccinium vitis-idaea L.)"艾达"组培苗叶片再生不定芽的影响,为建立高效的离体叶片再生体系提供依据。结果表明:单独使用ZT、TDZ或CPPU都能获得较高的诱导率和较多的不定芽,其中比较好的处理有:CPPU 3. 0 mg/L的不定芽诱导率和不定芽总数分别为88. 3%和21. 3,TDZ 1. 0 mg/L为87. 5%和23. 2,ZT 4. 0 mg/L为91. 7%和23. 6。TDZ或CPPU对不定芽生长具有抑制作用。ZT 4. 0 mg/L+IBA 0. 1 mg/L是理想的组合,其不定芽诱导率和不定芽总数分别为82. 5%和33. 2。IBA或NAA浓度低时对不定芽伸长生长起促进作用,而高浓度时起到抑制作用。在WPM培养基上不定芽诱导和生长效果好于MS、1/2MS和1/4MS。     

拮抗细菌R26发酵滤液对灰葡萄孢菌的抑菌活性研究

在离体条件下,测定了拮抗细菌R26对灰葡萄孢菌的抑制作用,结果表明,R26发酵滤液能抑制灰葡萄孢菌丝生长,EC50值为10.63μL/mL;经R26发酵滤液(40μL/mL)处理后,灰葡萄孢菌体形态发生明显变化;R26发酵滤液能抑制灰葡萄孢菌孢子萌发,并能抑制芽管伸长,当浓度达80μL/mL时,对灰葡萄孢菌产孢量的抑制率达57.51%。     

火龙果茎段组织培养快繁技术研究

以火龙果的幼嫩茎段为外植体进行组培快繁研究,结果表明,火龙果不同长度的茎段均能产生愈伤组织,茎上的不定芽大部分可以启动生长,其中,以3 cm长的幼嫩茎段诱导效果最佳,愈伤组织诱导率为100%;不定芽诱导培养基以MS+6-BA 4 mg/L+NAA 0.1 mg/L效果最好,诱导率可达75%;当6-BA质量浓度为8 mg/L和NAA质量浓度为0.05 mg/L时,不定芽的繁殖系数最高,当6-BA质量浓度为1 mg/L和NAA质量浓度为0.2 mg/L时,虽然不定芽的繁殖系数低,但其不定芽生长较快、苗壮,可以依生产的需要交替使用这2种培养基;适宜的生根培养基为1/2 MS+IBA2.0 mg/L。     

发光杆菌Photorhabdus sp.1029 发酵液抑菌活性研究

测定了发光杆菌1029发酵液对10种常见植物病原菌的抑菌活性,并初步研究了温度、pH值和紫外线对发酵液活性的影响.结果表明,发光杆菌1029发酵液的抑菌谱较广,其对拟茎点病菌、荔枝霜疫霉病菌、马铃薯环腐病菌和烟草青枯病菌抑制作用较强.发酵液活性组成中既有耐高温、紫外线的成分,也有对两者敏感的成分,但在pH7～8时抑菌作用最强.     

球毛壳中抗真菌物质对树皮腐烂病菌的抑制作用

[目的]阐明球毛壳中抗真菌物质对树皮腐烂病菌的抑制作用机制。[方法]通过平板对峙培养、发酵液萃取、薄层层析分离和抑菌活性测定等方法,研究毛白杨内生真菌球毛壳ND35产生的抗真菌物质对树皮腐烂病菌的抑制作用。[结果]球毛壳ND35的抗真菌物质粗提物对杨树和苹果树腐烂病菌有较强的抑制作用,对2种病菌的菌丝生长抑制率分别是66.4%和72.6%。对分生孢子萌发的抑制率分别是92.2%和80.4%。薄层层析分离和活性测定结果证明,抗真菌物质2号组分在对树皮腐烂病菌的抑菌过程中起主要作用。[结论]球毛壳中抗真菌物质对于树皮腐烂病有生物防治潜力。     

连翘内生真菌的分离及其抑菌活性初步研究

采用PDA培养基从连翘茎、叶中分离到19株内生真菌,对其分别进行液体培养,将发酵产物中的发酵液用高压蒸汽湿热灭菌,菌丝体晾干研磨后用丙酮提取。用发酵处理液和丙酮粗提物采用生长速率法对一些植物病原菌进行抑菌活性测定。结果表明:抑菌率在50%以上的活性菌株,发酵液组中有1株(5.26%),菌丝体组中有13株(81.25%),表明其抑菌活性成分主要为胞内代谢产物(存在于菌丝体粗提物中)。筛选出2株抗菌谱较广的内生真菌(J4和J8),其中J8对9种病原真菌抑菌活性较强,J4对6种病原真菌抑菌活性较强。     

4株海洋真菌发酵液对植物病原真菌的作用

为筛选对植物病害有较好抑制作用的拮抗菌,采用菌落生长法、孢子萌发抑制法和纸碟法测定了从东海岛沿岸海水中分离筛选到的4株海洋真菌的发酵液以及抗菌活性物质粗提物对7种植物病原真菌的抑制作用。结果显示,4株海洋真菌发酵液对7种植物病原真菌的生长有抑制作用,其中菌株179的抑菌效果最好,平均抑菌率达到70．6％;4株海洋真菌的发酵液对兰花炭疽菌2—2和弯孢菌的分生孢子萌发抑菌率均超过96％,特别是菌株152对盘多毛孢菌分生孢子萌发抑菌率达到100．0％;菌株132和152的抗菌活性物质粗提物对镰刀菌,以及菌株179和182对兰花炭疽菌2—2的抑菌效果较好,抑菌带宽分别为15．8、23．3、15．8和16,7mm。试验结果表明,这4株海洋真菌对7种病原真菌具有较好的拮抗作用,有开发利用价值。     

苍耳提取液与植物内生真菌抗菌活性研究(英文)

[Objective] The study was aimed to provide theoretical foundation for developing a new fungicide with high activity,low toxicity and low residua.[Method] Based on the plant growth rate and inhibition zone methods,the antifungal activity of extracts of every organ of Xanthium sibiricum,the fermentation liquid of endophytic fungi MC4-23,and the extract of mycelium were tested with six kinds of pathogenic fungi and three kinds of pathogenic bacteria respectively.[Result] The extract of every organ of Xanthium sibiricum,the fermentation liquid of endophyic fungi MC4-23,and the extract of mycelium all had antifungal activities.The acetone extracts of Xanthium sibiricum had stronger antifungal activities than the ethanol extracts of Xanthium sibiricum.The extracts of leaf have the strongest antifungal activities against fungi and bacteria.The inhibition rates of the six pathogenic fungi were all above 47.8%,and the inhibition diameters of the three pathogenic bacteria were all above 0.5 centimeter.The fermentation liquid of endophytic fungi also had strong activities against the fungi and bacteria.The inhibition rates of the six pathogenic fungi were all above 68.1%.The extracts of root of Xanthium sibiricum and the mycelium of endophytic fungi were all had antifungal activities.[Conclusion] Xanthium sibiricum and endophyic fungi MC4-23 had great value of development and utilization.     

苍耳提取液与植物内生真菌抗菌活性研究(英文)

[Objective] The study was aimed to provide theoretical foundation for developing a new fungicide with high activity,low toxicity and low residua.[Method] Based on the plant growth rate and inhibition zone methods,the antifungal activity of extracts of every organ of Xanthium sibiricum,the fermentation liquid of endophytic fungi MC4-23,and the extract of mycelium were tested with six kinds of pathogenic fungi and three kinds of pathogenic bacteria respectively.[Result] The extract of every organ of Xanthium sibiricum,the fermentation liquid of endophyic fungi MC4-23,and the extract of mycelium all had antifungal activities.The acetone extracts of Xanthium sibiricum had stronger antifungal activities than the ethanol extracts of Xanthium sibiricum.The extracts of leaf have the strongest antifungal activities against fungi and bacteria.The inhibition rates of the six pathogenic fungi were all above 47.8%,and the inhibition diameters of the three pathogenic bacteria were all above 0.5 centimeter.The fermentation liquid of endophytic fungi also had strong activities against the fungi and bacteria.The inhibition rates of the six pathogenic fungi were all above 68.1%.The extracts of root of Xanthium sibiricum and the mycelium of endophytic fungi were all had antifungal activities.[Conclusion] Xanthium sibiricum and endophyic fungi MC4-23 had great value of development and utilization.     

Preliminary Studies on Antifungal Activity of Xanthium sibiricum and the Endophytic Fungi

[Objective] The study was aimed to provide theoretical foundation for developing a new fungicide with high activity,low toxicity and low residua.[Method] Based on the plant growth rate and inhibition zone methods,the antifungal activity of extracts of every organ of Xanthium sibiricum,the fermentation liquid of endophytic fungi MC4-23,and the extract of mycelium were tested with six kinds of pathogenic fungi and three kinds of pathogenic bacteria respectively.[Result] The extract of every organ of Xanthium sibiricum,the fermentation liquid of endophyic fungi MC4-23,and the extract of mycelium all had antifungal activities.The acetone extracts of Xanthium sibiricum had stronger antifungal activities than the ethanol extracts of Xanthium sibiricum.The extracts of leaf have the strongest antifungal activities against fungi and bacteria.The inhibition rates of the six pathogenic fungi were all above 47.8%,and the inhibition diameters of the three pathogenic bacteria were all above 0.5 centimeter.The fermentation liquid of endophytic fungi also had strong activities against the fungi and bacteria.The inhibition rates of the six pathogenic fungi were all above 68.1%.The extracts of root of Xanthium sibiricum and the mycelium of endophytic fungi were all had antifungal activities.[Conclusion] Xanthium sibiricum and endophyic fungi MC4-23 had great value of development and utilization.     

苍耳提取液与植物内生真菌抗菌活性研究

[目的]为研制高效、低毒、低残留的新型杀菌剂提供理论依据。[方法]采用生长速率法和抑菌圈法,分别以水稻纹枯病菌等6种植物病原真菌和大肠杆菌等3种病原细菌为供试菌种,对苍耳各器官(根、茎、叶、果)提取液、植物内生真菌MG4-23的发酵液及菌丝体提取液进行抑菌活性测定。[结果]苍耳各器官提取液、植物内生真菌发酵液及菌丝体提取液均有抑菌作用。苍耳的丙酮提取液抑菌活性要好于乙醇提取液。苍耳中抑菌活性最高的器官是叶,对6种供试病原真菌的抑制率均在47.8%以上,对3种病原细菌的抑制直径均在0.5 cm以上。植物内生真菌发酵液的抑菌活性也很明显,对6种供试病原真菌的抑制率均在68.1%以上,对3种病原细菌也具有抑制性。苍耳根和植物内生真菌菌丝体提取液的抑菌活性也较明显。[结论]苍耳和植物内生真菌MG4-23均具有较大的开发利用价值。     

2种拟补骨脂素化合物室内抑菌活性测定

[目的]为了测定2种拟补骨脂素化合物F(a)、S(b)的室内抑菌活性。[方法]采用菌丝生长速率法进行测定。[结果]化合物F(a)、S(b)对供试植物病原真菌均有较好的抑制作用,其中化合物F(a)对8种植物病原菌的EC50均小于58.00mg/L,其中对苹果炭疽病菌抑制效果最好,EC50仅为12.74mg/L;化合物S(b)对8种植物病原菌的EC50均小于63.00mg/L,其中对葡萄白腐病菌抑制效果最好,EC50为18.61mg/L;化合物F(a)、S(b)对其他植物病原菌也具有较好的抑制作用。[结论]该研究为今后研制开发新型仿生农药奠定了基础。     

药用植物马蔺的内生真菌分离及其抑菌活性的研究

[目的]研究药用植物马蔺内生真菌资源的多样性及其抑菌活性特征。[方法]通过组织块法对内生真菌进行分离,并选择小麦全蚀病菌、枸杞黑果病菌、番茄灰霉病菌、黄瓜枯萎病菌和黄瓜立枯病菌5种植物病原真菌和枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌4种细菌作为指示菌,采用对峙法和改进的菌块法测定抑菌活性。[结果]从马蔺不同组织器官中分离出32株内生真菌,以根部的最多,茎叶次之;经形态学初步分类鉴定其属于3个目,3个科,4个属。其中,有22株内生真菌对2种或2种以上的植物病原真菌指示菌有不同程度的抑制作用,占菌株总数的68.8%;有12株内生真菌对2种或2种以上的供试细菌指示菌具有不同程度的抑制作用,占分离菌株总数的37.5%;有7株内生真菌对3种以上的植物病原真菌指示菌具有明显的抑制作用,占菌株总数的21.9%;有2株内生真菌对2种供试细菌指示菌有明显的抑制作用,占分离菌株总数的6.3%。马蔺内生真菌对供试植物病原真菌指示菌和供试细菌指示菌有明显抑制作用,且抑制植物病原真菌的范围较宽;2株高活性菌株来源于马蔺叶部,对5种供试真菌指示菌具有明显抑制作用;2株高活性菌株来源于马蔺根部,对2种供试细菌指示菌具有明显抑制作用;1株高活性菌株对4种供试真菌指示菌和1种供试细菌指示菌有明显抑制作用。这5株高活性内生真菌菌株属于束丝菌属、镰孢霉属、梭孢霉属和组丝核菌属。[结论]药用植物马蔺具有丰富的内生真菌资源,并具有明显的抑菌活性。