PP333浸种对伊丽莎白甜瓜种子萌发及幼苗生长的影响

应用生长调节剂PP3 3 3 对伊丽莎白甜瓜进行浸种处理 ,研究其对伊丽莎白甜瓜种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明 :PP3 3 3 对伊丽莎白甜瓜种子发芽势及发芽率表现出不同程度的抑制作用 ;PP3 3 3 浸种处理能提高伊丽莎白甜瓜叶片叶绿素含量、光合速率及可溶性糖含量 ,降低电导率水平 ,促进伊丽莎白甜瓜光合作用 ,并提高其抗性 ;PP3 3 3 浸种处理能显著降低株高 ,增加茎粗 ,并提高根冠比 ,有利于培育壮苗。PP3 3 3 5 0mg·L-1为处理伊丽莎白甜瓜的最适浓度     

倭竹族14-3-3非ε类基因编码区单核苷酸多态性

为研究倭竹族Shibataeeae中14-3-3非类基因的结构及其编码区单核苷酸多态性,分别从倭竹族5个不同属的代表种中获得14-3-3b,14-3-3c,14-3-3e,14-3-3f的基因全长。这些基因均包含5个外显子和4个内含子,编码序列（CDS）大小为771~789 bp。14-3-3b,14-3-3c,14-3-3e和14-3-3f编码区序列中分别有21,19,26和17个单核苷酸多态性（SNP）位点,SNP频率分别为1SNP/38 bp,1SNP/41 bp,1SNP/30 bp,1SNP/46 bp,基因核苷酸多样性（）值分别为0.012 17,0.011 83,0.015 21,0.010 38。同一基因在不同竹种间氨基酸序列一致性均达99%以上,毛竹Phyllostachys edulis Pe14-3-3b,Pe14-3-3c,Pe14-3-3e,Pe14-3-3f蛋白的理化性质非常相似,均为亲水性蛋白,含量较多的是丙氨酸（ala）,谷氨酸（glu）,亮氨酸（leu）,等电点为4.75~4.90,这4个蛋白的二级结构也非常相似,-螺旋结构含量最高,无规则卷曲其次,-转角和延伸链很少。上述研究为进一步探索竹类植物14-3-3生物学功能奠定基础。图3表3参27     

水稻OsV3IP2和OsV3IP3原核表达与鉴定

通过生物信息学分析确定OsV3IP2和OsV3IP3的可溶性肽段,获得可溶性的OsV3IP2和OsV3IP3外源表达蛋白质,将相应的编码区克隆于原核表达载体p ET32a中,进行IPTG诱导表达,利用SDS-PAGE和Western blot检测目的蛋白质。结果表明,利用生物信息学软件对蛋白质的二级结构进行预测,将OsV3IP2、OsV3IP3分别分为2个和4个部分。将其分别克隆到p ET32a后,采用0.2 mol/L IPTG在10、20、30℃诱导表达。经SDS-PAGE和Western Blot分析,证明OsV3IP2-1、OsV3IP 2-2、OsV3IP 3-1表达的融合蛋白存在于上清液中,而OsV3IP 3-2、OsV3IP 3-3表达的融合蛋白存在于沉淀中,获得了OsV3IP2-1、OsV3IP 2-2、OsV3IP 3-1可溶性目的蛋白,为进一步体外验证OsVDAC3与OsV3IP2、OsV3IP3的互作奠定了基础。     

H3K4和H3K9三甲基化在猪体外成熟卵母细胞和克隆胚胎中的表达分析

该研究主要运用单细胞免疫荧光技术分析猪卵母细胞和克隆胚胎发育过程中,H3K4和H3K9三甲基化(H3K4me3,H3K9me3)的表达情况.收集体外成熟0h,6h,12h,24h,30h,36h,42h的猪卵母细胞;同时通过体细胞核移植操作获得一细胞、四细胞、桑葚胚和囊胚期克隆胚胎,经过免疫荧光染色,在激光共聚焦显微镜下观察H3K4me3和H3K9me3修饰在卵母细胞和胚胎中的变化情况.免疫荧光结果显示,在不同减数分裂阶段的猪卵母细胞内均能观察到H3K4me3的表达,并且呈现出逐渐下降的趋势;在生发泡期(GV),生发泡晚期(L-GV)和生发泡破裂(GVBD)阶段的卵母细胞中能发现明显的H3K9me3表达,随着减数分裂的进行,H3K9me3表达消失,在第一次减数分裂中期前阶段(Pre-MI)到第二次减数分裂中期(MⅡ)阶段卵母细胞中未发现H3K9me3荧光信号.H3K4me3和H3K9me3在不同发育阶段的猪克隆胚胎中都有表达,其中H3K4me3在不同阶段胚胎中荧光信号强度相近,H3K9me3在四细胞胚胎中荧光强度降低,在桑葚胚和囊胚中荧光强度出现升高的趋势.以上结果说明,H3K4me3参与调控猪卵母细胞体外成熟的整个过程,H3K4me3和H3K9me3在猪体细胞核移植胚胎早期发育过程中可能具有调控作用.     

两种分光光度法测定苦荞中黄酮含量的比较

通过精密度试验、稳定性试验、重现性试验和回收率试验对比了NaNO2-Al(NO3)3法和AlCl3比色法的差异.结果表明,精密度对比试验中NaNO2-Al(NO3)3法和AlCl3比色法的测定结果精密度值都比较小,符合精密度试验的要求,两种方法没有明显的区别;稳定性对比试验中,NaNO2-Al(NO3)3法受其他物质影响较大,而AlCl3比色法受其他物质影响不明显;重现性对比试验中,NaNO2-Al(NO3)3法测定黄酮的含量均比用AlCl3比色法测定的含量高;回收率对比试验中,用AlCl3比色法测定得到的回收率比NaNO2-Al(NO3)3法测定得出的回收率高.     

PP_(333)、GA_3对麝香百合切花品质及叶绿素含量的影响初探

用PP3 3 3 、GA3 溶液分别对麝香百合进行叶面喷施处理 ,试验结果表明 :叶面喷施GA3 对百合花茎长度及花朵数的增加影响最显著的浓度为 2 0 0mg/L ,其次为 5 0 0mg/L ;叶喷PP3 3 3 对茎长增加以浓度 1 0 0mg/L显著 ,而对花朵数增加以 2 0 0mg/L显著。叶绿素含量以GA3 2 0 0mg/L浓度的最高 ,其次为GA3 5 0 0mg/L ,且GA3 处理叶绿素含量总体上高于PP3 3 3 。     

稀土离子对嗜鞣管囊酵母产酒精的影响

研究了3种稀土离子镧(La3+),铈(Ce3+),钕(Nd3+)对嗜鞣管囊酵母酒精发酵的影响。结果表明:La3+,Ce3+,Nd3+3种离子单独使用,在发酵培养基中的离子浓度分别达到5μmol/L时,能不同程度地促进菌体产酒精,随着La3+,Ce3+,Nd3+浓度的逐渐提高,对发酵过程产生抑制作用;La3+,Ce3+,Nd3+3种离子交叉使用时抑制或不影响菌体发酵。     

松材线虫和拟松材线虫14-3-3蛋白基因全长cDNA克隆与分析

[目的]对松材线虫和拟松材线虫的14-3-3蛋白基因进行全长cDNA克隆,并进行序列分析。[方法]根据GenBank数据库中14-3-3蛋白EST序列BXC56（登录号为FG589472）、BMCl20（登录号为FG589351）,采用RACE技术获取松材线虫和拟松材线虫14-3-3蛋白的全长cDNA克隆Bxl4-3-3a和Bml4-3-3a,并对克隆片段序列进行分析。[结果]Bx14-3-3a全长1039bp,包含一个756bp的开放阅读框,编码蛋白含有251个氨基酸残基,包含2个14-3-3蛋白标签,编码蛋白分子量为61．43kD,等电点为4．88。Bx14-3-3a基因组结构中包含4个外显子和3个内舍子序列。Bm14-3-3a全长992bp。有与Bx14-3-3a编码完全相同的氨基酸序列。序列比对结果表明,14-3-3在真核生物间高度保守,Bx14-3-3A和Bm14-3-3A蛋白在系统进化上与线形动物门（Nematomorpha）的物种近缘关系较近,与植物线虫南方根结线虫（Meloidogyneincognita）系统发育关系上最为亲近。[结论]Bx14-3-3a和Bm14-3-3a的成功克隆,为进一步研究其功能及其调控因子对形态、致病力、繁殖力和环境适应性等方面的分子调控机制奠定了重要基础。     

两种分光光度法测定苦养中黄酮含量的比较

通过精密度试验、稳定性试验、重现性试验和回收率试验对比了NaNO2-Al（NO3）3法和AlCl3比色法的差异。结果表明,精密度对比试验中NaNO2-Al（NO3）3法和AlCl3比色法的测定结果精密度值都比较小,符合精密度试验的要求,两种方法没有明显的区别;稳定性对比试验中,NaNO2-Al（NO3）3法受其他物质影响较大,而AlCl3比色法受其他物质影响不明显;重现性对比试验中,NaNO2-Al（NO3）3法测定黄酮的含量均比用AlCl3比色法测定的含量高;回收率对比试验中,用AlCl3比色法测定得到的回收率比NaNO2-Al（NO3）3法测定得出的回收率高。     

香蕉14-3-3蛋白基因Ma-14-3-3d的克隆及序列分析

[目的]克隆分析香蕉中14-3-3蛋白编码基因。[方法]采用PCR与RACE技术相结合的方法克隆香蕉14-3-3基因,并进行CDNA测序及同源性分析。[结果]所克隆cDNA全长866 bp,编码197个氨基酸残基,具有植物14-3-3蛋白基因的特征结构域,并与其他植物来源的14-3-3蛋白具有很高的序列相似性,将其命名为Ma-14-3-3d(Musa acuminate14-3-3gene)。[结论]Ma-14-3-3d蛋白与来源于单子叶植物的14-3-3蛋白位于同一进化枝上。     

宁夏小麦Glu-A3与Glu-B3位点等位变异组成分析

低分子量谷蛋白亚基(LMW-GS)与小麦品质密切相关。为给宁夏小麦的品质改良提供参考,应用STS分子标记,对宁夏98份小麦品种Glu-A3和Glu-B3位点的等位基因变异类型组成进行检测和分析。结果表明,宁夏98份小麦品种Glu-A3位点存在Glu-A3a(4.0%)、Glu-A3b(2.0%)、Glu-A3c(55.1%)、GluA3d(10.1%)和Glu-A3e(28.5%)5种等位变异;Glu-B3位点存在Glu-B3a(2.0%)、Glu-B3b(8.1%)、Glu-B3c(5.0%)、Glu-B3d(7.1%)、Glu-B3f(21.4%)、Glu-B3g(2.0%)、Glu-B3h(15.3%)和Glu-B3i(13.3%)8种等位变异。宁夏参试品种共存在23种等位变异组合形式,其中引黄灌区存在18种组合类型,Glu-A3c/Glu-B3j(17.7%)和Glu-A3e/Glu-B3f(16.2%)组合类型较为普遍;宁南山区存在13种组合类型,以Glu-A3c/Glu-B3i(20.0%)组合类型为主。在参试的宁夏小麦品种中,对同一地区不同来源品种而言,改良品种的LMW-GS遗传多样性明显较引进品种和地方品种更丰富。     

基于TRMM降水产品的近实时旱情监测——以广西为例

[目的]探讨TRMM降水产品近实时监测旱情的可行性,寻求可用于近实时旱情数据监测的计算方法.[方法]利用TRMM产品3B42_daily及近实时产品3B42RT_daily,根据传统的降水量距平百分率计算方法,采取3B42/3B42、3B42RT/3B42和3B42RT/3B42RT 3种组合方式,分别计算广西2011年3月各旬月尺度降水量距平百分率.[结果]计算结果分别与广西全区84个气象观测站点同时期数据进行比较,结果显示,3B42/3B42计算结果与站点观测数据的相关系数最高,其中在2011年3月下旬的相关系数达到0.818; 3B42RT/3B42RT算结果与站点观测数据的相关系数次之,最高相关系数在E2011年3月下旬为0.621;3B42RT/3B42计算结果与站点观测数据的相关系数最低,最高相关系数在2011年3月上旬为0.567.[结论]由于3B42/3B42的计算结果需延后1个月,而3B42RT/3B42RT的计算结果只需延后1d,且与站点观测数据有较高的相关性,因此选用3B42RT/3B42RT计算结果用于近实时旱情监测.     

NaHCO3＋Na2CO3对不同啤酒大麦品种萌发期的胁迫效应

用不同浓度的NaHCO3＋ Na2CO3对3个不同基因型啤酒大麦品种进行萌发期耐碱性比较,以发芽势、发芽率、胚根长和胚芽长等作为指标,分析碱胁迫对不同啤酒大麦品种种子萌发的影响.结果表明,随NaHCO3＋Na2CO3浓度的增加,3个啤酒大麦品种的发芽势减小,发芽率下降,胚根长、胚芽长下降,盐害指数增大,尤其对根长的影响最突出,当NaHCO3＋Na2CO3浓度＞200 mmol· L-1时,完全抑制啤酒大麦根生长.综合各个指标,3个品种在低NaHCO3＋Na2CO3浓度时甘啤5号、甘啤7号耐盐碱性较好,在高NaHCO3＋ Na2CO3浓度时甘啤4号耐盐碱性较好.     

覆土油罐浮起事故原因及防范对策

针对某覆土油罐浮起事故,基于该油罐的基本结构,分析了浮起事故发生的原因,研究了防范对策.根据排空油罐的受力分析,进行了相关计算,结果表明:若使容量分别为1 000 m3、2 000 m3、3 000 m3、5 000 m3、10 000 m3的覆土油罐浮起,罐室集水高度只需达到0.232 m、0.223 m、0.231 m、0.218 m、0.234 m,集水量只需达到3.636 m3、4.367 m3、5.290 m3、6.356 m3、8.921 m3,即使排水阀全开,如果罐室进水量超过30 m3/h,排空油罐就可能浮起.为此,从覆土油罐的全面改造、排水补漏、加强管理及设计建造等方面提出了浮起事故防范对策.     

星星有多重？

水的密度在4℃时为1．0g／cm^3,人体的密度仅有1．07g／cm^3。那么,我们头顶上的星星密度有多少呢？经过天文学家的努力，已经搞清了许多天体的密度：水星的平均密度是546g／cm^3,金星是5．26g／cm^3,火星是3．96g／cm^3,土星是0．70g／cm^3,太阳是1．409g／cm^3，月球是3．341g／cm^3。它都比不上地球,     

小鼠SOCS3基因真核表达载体的构建及其对3T3-L1细胞凋亡的影响

【目的】探讨SOCS3对3T3-L1细胞凋亡的影响。【方法】以小鼠脂肪组织提取的RNA为模板,用RT-PCR扩增SOCS3基因,将其克隆至pMD18-T Simple,构建pMD18-T-SOCS3重组质粒,经测序验证后,以pMD18-T-SOCS3为模板扩增SOCS3基因,将其克隆至pEGFP-N1,构建真核重组质粒pEGFP-N1-SOCS3,测序正确后,将重组质粒pEGFP-N1-SOCS3转染3T3-L1细胞,荧光下观察GFP的表达,RT-PCR和Western blotting检测细胞内SOCS3mRNA和蛋白的表达,观察细胞凋亡的变化。【结果】测序表明,pMD18-T-SOCS3和pEGFP-N1-SOCS3的核苷酸序列正确率为100%;在荧光显微镜下发现,脂质体组和SOCS3组均有GFP的表达;RT-PCR和Westernblotting检测表明,3T3-L1细胞中SOCS3mRNA表达显著提高(P<0.05);Hoechst 33258染色发现,SOCS3组的细胞凋亡显著;Bax和c-myc基因的mRNA表达水平显著升高(P<0.05),bcl-2和mcl-1基因表达水平显著降低(P<0.05)。【结论】SOCS3对脂肪细胞凋亡的发生有促进作用。     

含有α-胰凝乳蛋白酶作用位点的Cry3A突变体的构建、表达、纯化以及杀虫活性分析

[目的]构建含有α-胰凝乳蛋白酶作用位点的Cry3A的突变体Cry3Am,以期提高Cry3A的活化效率,增强杀虫活性.[方法]利用重叠PCR技术,构建Cry3A杀虫蛋白的突变体Cry3Am,使之在原核细胞中表达纯化突变体蛋白;将Cry3Am与饲料混合后饲喂黄粉虫,用以评价Cry3Am的杀虫活性.[结果]成功地在Cry3h杀虫蛋白结构域I的α3和α4之间加上1个α-胰凝乳蛋白酶的作用位点,并提取Cry3Am到杀虫蛋白.体外酶切试验结果表明,Cry3Am很容易地被降解为55 kD的杀虫蛋白.生测分析结果表明,Cry3Am对黄粉虫的毒力是Cry3A的2倍以上.[结论]向Cry3A中插入α-胰凝乳蛋白酶作用位点可以使突变体Cry3Am很容易地被α-胰凝乳蛋白酶降解成55 kD的片段,并能提高Cry3A的杀虫活性.     

沉默SOCS3对TNF-α诱导3T3-L1前体脂肪细胞凋亡的抑制作用

【目的】运用si RNA沉默小鼠前体脂肪细胞3T3-L1的细胞信号负调控因子3基因(SOCS3),探讨SOCS3在肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导3T3-L1细胞凋亡中的作用。【方法】体外培养3T3-L1细胞,用0,20,40,60,80,100,150,200 ng/mL TNF-α处理细胞24 h后,观察细胞凋亡情况。利用脂质体LipofectamineTM2000,用化学合成的SOCS3小干扰RNA(si RNA)转染3T3-L1细胞,用100 ng/mL TNF-α刺激24 h,荧光显微镜下观察细胞凋亡的变化,RT-PCR检测SOCS3、c-myc和survivinmRNA的表达情况。【结果】SOCS3 si RNA抑制了3T3-L1细胞中SOCS3 mRNA的表达(P<0.05)。与空白对照组相比,SOCS3 si RNA组的SOCS3 mRNA表达量极显著减少,c-myc和survivinmRNA的表达水平极显著或显著升高,而脂质体组和阴性对照组无显著差异。【结论】体外试验结果证明,靶向抑制SOCS3基因表达可以有效抑制TNF-α诱导的3T3-L1细胞凋亡。     

花生2-甲基-6-植基-1,4-苯醌甲基转移酶基因VTE3的克隆及多态性分析

【目的】分离花生2-甲基-6-植基-1,4-苯醌甲基转移酶（MPBQ MT）基因VTE3,揭示其分子生物学特征及遗传多态性。【方法】利用EST拼接、RT-PCR以及以DNA为模板的PCR扩增技术,从花生属栽培种中分离VTE3 全长cDNA;从不同类型栽培品种和花生属花生区组二倍体野生种（Arachis duranensis 和A. ipaensis ）中分离VTE3全长DNA,进行VTE3序列多态性分析,并构建VTE3的进化树。【结果】从3个栽培品种中分别克隆得到2条VTE3 cDNA序列（命名为rVTE3-1和rVTE3-2）,rVTE3-1和rVTE3-2的编码区长均为1 059 bp,二者同源性97.8%,存在10个变异位点,其中8个为SNP变异;二者均编码351个氨基酸,氨基酸序列同源性98.6%,存在5个氨基酸差异。从13个栽培品种分别克隆得到2条VTE3 DNA序列（命名为gVTE3-1和gVTE3-2）,13个品种间gVTE3-1的同源性为99.9%,gVTE3-2的同源性为100%。其中丰花2号gVTE3-1序列长2 710 bp,存在3个内含子,分别位于44-163、772-1 295和1 603-2 437 bp处;gVTE3-2序列长2 706 bp,也存在3个内含子,分别位于44-169、778-1 291和1 599-2 433 bp处。丰花2号gVTE3-1和gVTE3-2同源性96.6%,内含子区域存在36个SNP位点和3个限制性内切酶识别的多态性位点。从A. duranensis分离的VTE3 DNA序列命名为gVTE3-A,从A. ipaensis分离的VTE3 DNA序列命名为gVTE3-B。利用栽培种丰花2号gVTE3-1和gVTE3-2以及野生种gVTE3-A和gVTE3-B 4条DNA序列进行进化分析,推测序列gVTE3-1和gVTE3-2分别来自丰花2号的A、B染色体组。花生MPBQ MT氨基酸序列与其它物种的同源性较高,具有很强的保守性。【结论】本研究克隆了花生VTE3的全长cDNA和DNA;推断栽培品种的gVTE3-1和gVTE3-2分别来自A、B染色体组,不同染色体组的VTE3多态性位点丰富;不同栽培品种间等位基因核苷酸序列差异很小,所检测13个栽培品种的gVTE3-1以及野生种的gVTE3-A间存在等位变异,13个栽培品种的gVTE3-2以及野生种gVTE3-B间未发现等位变异。     

短柄草14-3-3基因家族的生物信息学及表达模式研究

在短柄草基因组中共鉴定出7个14-3-3蛋白家族成员,与水稻、拟南芥14-3-3蛋白的系统进化分析发现,7个短柄草14-3-3蛋白中有1个属于ε类蛋白,其他6个属于非ε类蛋白.对短柄草14-3-3蛋白家族的序列相似性、基因结构以及蛋白结构分析发现,短柄草14-3-3蛋白序列及三维结构高度保守.RT-PCR分析显示,7个短柄草14-3-3基因在不同的组织中均表达,预示着它们在植物体内可能都具有生物学功能.